프로그램을 열고 디스펜서 컨트롤을 클릭하여 인젝터 펌프를 초기화하고 펌프 2를 선택한 다음 초기화를 클릭합니다. 이온수로 튜브를 헹구려면 헹굼을 클릭하고 다음을 누릅니다. 펌프 2를 선택하고 팁 마운트를 원하는 팁으로 설정합니다.
그런 다음 다음을 다시 클릭합니다. 시작을 클릭하여 튜브 헹굼을 시작합니다. 메탄올로 헹굼을 반복합니다.
한편, 기판 스톡을 1 내지 100으로 희석하여 작업 기판 용액을 제조한다. 마지막으로 PBS에서 기판 스톡의 작업 희석액으로 튜브를 헹굽니다. 플레이트를 플레이트 리더에 로드합니다.
그런 다음 측정 설정에서 조리개를 384 플레이트 US 발광 조리개로 선택한 다음 플레이트와 검출기 사이의 거리를 0.6mm로, 측정 시간을 0.5초로 선택합니다. 측정 설정이 완료되면 프로토콜-일반 설정 탭에서 플레이트 유형을 384 Nunc로 선택하고 측정 모드로 By columns bi-directional 옵션을 선택합니다. number of assay repeats(분석 반복 횟수) 탭에 1을 입력합니다.
이제 Dispense 탭에서 원하는 투약 측정값을 선택합니다. 그런 다음 각 웰의 측정 시간을 1초로 설정하고 원하는 사용 펌프를 선택합니다. 초당 200마이크로리터의 디스펜싱 속도.
그리고 분배량은 50 마이크로 리터입니다. 펌프 2의 주사기 충전량으로 Dispensing volume(분주량)을 선택합니다. 그런 다음 측정 번호에서 분배 시작을 1로 설정합니다.
웰 선택(Well selection) 탭에서 샘플 추가/제거(Add/remove samples) 드롭다운 메뉴를 사용하여 원하는 샘플 유형을 선택하고 측정할 웰을 선택합니다. 그런 다음 실행을 클릭하여 측정을 시작합니다. DMSO의 기저 발광 신호는 열 1에서 볼 수 있으며 ATG4B 억제제인 FMK-9a의 존재 여부에 대한 발광 신호의 감소는 열 24에서 볼 수 있습니다.
