금 탄소 도트 복합 나노입자를 제조한 후, 멸균된 사파이어 칩을 24-웰 플레이트에 넣고 배지 1밀리리터와 함께 세포를 단일 웰에 시드한다. 습한 환경에서 플레이트를 배양하여 70-80 %의 합류점을 얻습니다. 금 탄소 도트 복합 나노 입자를 단일 웰에 첨가하고 4 내지 6 시간 동안 배양한다.
배양이 끝나면 사파이어 칩에서 배지를 제거합니다. PBS로 칩을 부드럽게 헹구고 SERS 감지를 위해 사파이어 칩을 PBS에 담그십시오. SERS 실험을 수행하려면 컴퓨터, 라만 분광계 및 785나노미터 레이저를 켭니다.
그런 다음 함께 제공되는 소프트웨어를 시작하고 실리콘 웨이퍼를 사용하여 보정을 수행합니다. New measurement(새 측정)를 클릭한 다음 spectral acquisition(스펙트럼 수집)을 클릭하고 스펙트럼 범위를 조정합니다. 그런 다음 획득 탭으로 이동하여 노출 시간과 레이저 파워를 조정하고 확인을 클릭하여 새로운 스펙트럼 획득을 시작합니다.
선명한 세포 이미지를 위해 20X 대물 렌즈를 사용하십시오. 그런 다음 50X 렌즈로 전환하십시오. 측정할 셀의 점을 선택한 후 실행을 클릭하여 프로세스를 시작한 다음 스펙트럼을 저장합니다.
A549 셀의 SERS 이미징을 얻으려면 새로운 유선형 이미지 획득을 클릭하고 촬영할 범위를 선택한 다음 확인을 클릭합니다. 가장자리 유선을 785나노미터 중심에서 1, 200cm 역으로, 노출 시간을 5초로, 레이저 출력을 50%로 설정합니다. 라이브 이미징 새로 만들기를 클릭하고 기준선에 대한 신호를 선택한 다음 첫 번째 제한을 725로, 두 번째 제한을 1, 700으로 설정합니다. 그런 다음 영역 설정으로 이동하여 적절한 단계를 설정하고 확인을 클릭합니다. 마지막으로 실행을 클릭하여 SERS 이미징 수행을 시작합니다.
SERS 스펙트럼은 메틸렌 블루의 농도가 10 내지 마이너스 9 몰로 낮을 때에도, 금 탄소 점 복합 나노 입자가 금 나노 입자에 비해 우수한 SERS 성능을 나타낸다는 것을 밝혀냈다. 20 포인트에서 획득 된 SERS 스펙트럼은 높은 유사성을 나타냈다. 금 탄소 도트 복합 나노 입자를 섭씨 4도에 배치 한 지 1 개월 후, 950, 1, 185 및 1, 620 센티미터 역에서의 평균 SERS 활성은 각각 약 5.43 % 11.44 % 및 13.94 %의 붕괴도를 보였다.
금 탄소 도트 복합 나노 입자는 A549 세포에 세포 독성을 거의 나타내지 않았다. A549 세포의 평균 스펙트럼이 제시된다. 금 탄소 도트 복합 나노입자 응집체는 A549 세포의 SERS 매핑에서 노이즈 배경 없이 명백한 SERS 신호를 나타냅니다.
상이한 세포 지점으로부터의 스펙트럼은 다양한 세포질 영역에서 성분의 이질성을 입증하였다.
