시작하려면 실행 파일 아이콘을 두 번 클릭하여 소프트웨어 응용 프로그램을 엽니다. heavy chain 및 light chain 시퀀스를 공백 없이 1 열 아래의 텍스트 상자에 입력합니다. 이중특이성 항체의 경우 2열 아래의 두 번째 텍스트 상자 세트에 중쇄 또는 경쇄를 추가합니다.
동일한 중쇄 및 경쇄를 가진 단클론 항체의 경우 이 상자를 비워 두십시오. 이러한 무거운 사슬 터미널 변형을 적용할 수 있는 경우 끝 터미널 순환화 및 C 터미널 클리핑 확인란을 선택합니다. 염화칼슘과 같은 원소 조성을 사용하여 항체 약물 접합체용 링커 및 페이로드를 포함한 화학적 변형을 중쇄 및 경쇄 화학 변형 상자에 추가합니다.
이러한 수정은 각 단백질 소단위 또는 사슬에 추가됩니다. total number of disulfides(이황화물의 총 수)라고 표시된 텍스트 상자에 단백질 분자의 이황화물 결합 수를 지정합니다. 환원 정도에 따라 환원되지 않은 중쇄 이황화물 텍스트 상자에 환원되지 않은 중쇄 이황화물 결합의 수를 입력하고 환원되지 않은 경쇄 이황화물 텍스트 상자에 환원되지 않은 경쇄 이황화물 결합의 수를 입력합니다.
단클론 항체 경쇄에 당화(glycosylation)가 존재하는 경우, 경쇄가 당화됨(light chain is glycosylated) 확인란을 선택합니다. 찾아보기 버튼을 클릭하여 출력 폴더 텍스트 상자의 출력 폴더를 선택하고 Excel 파일 확장자 없음 텍스트 상자에 파일 확장자가 없는 출력 파일 이름을 입력합니다. 그런 다음 제출 버튼을 클릭합니다.
질량 계산 보고서 작성 메시지가 화면에 나타나고 출력 파일은 사용자 지정 폴더에서 찾을 수 있습니다. 앱이 자동으로 닫힙니다. 다양한 단클론 항체의 화학 조성, 계산된 질량, 측정된 질량 및 질량 오류가 이 표에 요약되어 있습니다.
상업적으로 입수가능한 단클론 항체 표준물질은 동일한 중쇄, 동일한 경쇄 및 FC 영역에서 하나의 N-결합 당화 부위를 갖는 종래의 단클론 항체를 나타내기 위해 선택되었다. 추가 경쇄 N-결합 당화(light chain N-linked glycosylation)가 있는 단클론 항체, 이중특이성 단일클론 항체 및 항체 약물 접합체 단클론 항체도 애플리케이션 사용을 확대하기 위해 선택되었습니다. 계산된 질량과 측정된 질량 사이의 작은 질량 오차는 정규 질량 오차 허용 기준 내에 있었으며, 이는 계산된 질량이 정확함을 시사합니다.
