Zinc-Specific Staining of Transfected HEK293T Cells

먼저 역형광 현미경을 사용하여 transfection된 HEK293T 세포를 분석합니다. 명시야광을 사용하여 세포의 초점을 맞추면 587나노미터의 형광 mCherry 여기 파장과 610나노미터의 방출 파장으로 전환합니다. 명시야광을 끈 후 세포의 형광을 확인하여 ZnT1 mCherry의 발현을 확인합니다.

염료 로딩 용액을 준비하려면 4 마이크로 리터의 아연 특이 형광 염료 용액을 취하십시오. 그런 다음 4 마이크로 리터의 10 % 플 루 론산을 첨가하십시오. 피펫팅을 위아래로 하여 용액을 혼합하고 1.5밀리리터 튜브로 옮깁니다.

준비된 용액에 750마이크로리터의 세척액을 넣고 튜브를 세게 소용돌이칩니다. 다시 750마이크로리터의 세척액을 추가합니다. 소용돌이가 발생하면 이 용액 750마이크로리터를 새로운 6웰 배양 플레이트의 두 웰에 넣고 알루미늄 호일로 덮습니다.

핀셋을 사용하여 이전에 배양한 HEK293T 세포 플레이트에서 13mm 커버 슬립을 6웰 플레이트로 옮깁니다. 접시를 호일로 덮은 후 15-20분 동안 부드럽게 흔들고 염료 로딩 용액을 준비된 세척액으로 교체합니다. 접시가 덮이면 20분 동안 다시 흔듭니다.