까만 인도 잉크와 글리세롤 체계 완충기의 1개에서 20 희석을 준비해서 시작하고, 그 후에 15에 10 분, 실내 온도에 000g를 위한 분리기. 40마이크로리터의 잉크 용액과 글리세롤 시스템 완충액을 384웰 플레이트의 첫 번째 섹션에 추가합니다. 이제 모든 희석 웰에 25마이크로리터의 글리세롤 시스템 완충액을 추가하고 모든 희석 웰 2, 3 및 4웰에 40마이크로리터를 추가합니다.
추출된 글라이칸 샘플 25마이크로리터를 희석 웰에 추가하여 샘플을 일대일 비율로 희석합니다. 희석 1에서 희석 2로 10 마이크로 리터를 옮겨 각 샘플을 4 번 연속적으로 희석 한 다음 피펫을 사용하여 부드럽게 혼합합니다. 희석 2에서 희석 3 웰로 샘플 10 마이크로 리터를 옮겨 프로세스를 반복합니다.
희석 과정을 4 웰 반복 한 후 모든 웰의 최종 부피가 40 마이크로 리터가 되도록 10 마이크로 리터를 버립니다. 40 마이크로리터의 잉크 용액과 글리세롤 시스템 완충액을 최종 플레이트에 추가합니다. 그런 다음 실온에서 10g에서 3000분 동안 원심분리하기 전에 접착 커버로 플레이트를 덮습니다.
니트로셀룰로오스 멤브레인에 샘플을 인쇄하려면 먼저 글리세롤 시스템 버퍼를 사용하여 프린트 헤드와 모세관을 여러 번 퍼지합니다. 버퍼만 있는 플레이트를 로드하여 테스트 인쇄 실행을 시작합니다. 클린 버퍼 저장소에서 직접 인쇄하도록 계측기를 구성하려면 File(파일)을 클릭한 다음 New(새로 만들기)를 클릭한 다음 Print Run(인쇄 실행)을 선택합니다.
마이크로플레이트 유형을 선택하고 그에 따라 슬라이드 설정을 변경합니다. 다음으로, 스폿 속성 설정을 편집하기 전에 미니 배열 설정을 변경합니다. Overview(개요) 탭을 클릭하여 플레이트를 확인합니다.
마지막으로 옵션 탭에서 버퍼 사용을 선택하고 파일을 저장할 파일 위치를 할당하기 전에 인쇄 시간을 계산합니다. 위치를 저장한 후 인쇄 실행 시작을 눌러 실행을 진행합니다. 추출된 글라이칸 샘플을 인쇄하는 동안 이전과 같이 시스템을 프로그래밍합니다.
Options(옵션) 탭에서 Using source microplates(소스 마이크로플레이트 사용)를 클릭합니다. 마지막으로, 다운스트림 분석을 위해 인쇄된 마이크로어레이에 대해 생성된 고유한 그리드 파일을 저장합니다. 정의된 글라이칸 표준물질은 또한 포지티브 대조군으로 인쇄된 마이크로어레이에 포함되었습니다.
선택된 글라이칸 표준물질에 대해 얻어진 맵 결합 프로파일은 이전에 보고된 에피토프 특이성에 해당합니다.
