니트로셀룰로오스 멤브레인에서 동일한 인쇄된 마이크로어레이를 잘라내고 프로빙을 위해 적절한 용기에 넣는 것으로 시작합니다. 비특이적 결합을 줄이려면 MP-TBST 차단 버퍼를 마이크로어레이에 추가하고 회전하는 shaker에서 1시간 동안 배양합니다. 배양 후 완충액을 새 MP-TBST로 교체합니다.
단클론 항체와 MP-TBST가 있는 어레이를 회전하는 shaker에서 2시간 동안 배양합니다. 배양 후 분자 프로브 용액을 제거합니다. 어레이를 깨끗한 TBST에 완전히 담그십시오.
즉시 버퍼를 새 볼륨으로 교체하여 잔류 프로브 용액을 제거합니다. 회전하는 셰이커에 어레이를 5분 동안 올려 놓습니다. TBST를 새 버퍼 볼륨으로 교체하고 어레이를 Shaker에 5분 더 놓습니다.
다음으로, 회전하는 shaker에서 2시간 동안 알칼리성 인산가수분해효소 접합 항체로 어레이를 배양합니다. 배양이 완료되고 마이크로어레이가 세척되면 니트로 블루 테트라졸리움과 BCIP 색상 개발 용액으로 덮어 발색성으로 항체 결합을 검출합니다. 어레이를 깨끗한 수돗물에 담가 반응을 종료합니다.
그런 다음 어레이를 주변 온도에서 밤새 압지 사이에 건조시킵니다. 비셀룰로오스 식물 세포벽 다당류 진단에 대한 16개의 에피토프의 상대적 풍부도는 인쇄된 추출물에 글리칸 지향 단클론 항체를 부착하여 검출되었습니다. 추출된 글라이칸의 대부분은 알칼리성 수산화나트륨 분획물 내에서 검출되었습니다.
LM-10 및 LM-11에 대해 테스트된 모든 망고 품종의 껍질 내에서 자일란과 아라비녹실란을 나타내는 강력한 결합 신호가 기록되었습니다. LM-10 및 LM-11은 마늘 뿌리 조직 추출물에 우선적인 결합을 나타내고 잎 조직 추출물에 약한 결합을 나타냈습니다. LM-19는 부분적으로 메틸에스테르화 또는 에스테르화되지 않은 호모갈락투로난을 나타내며 일부 망고 품종 추출물과 커피 펄프 분획에만 강하게 결합됩니다.
