호중구 식세포증 분석

칼슘과 마그네슘 이온이 함유된 200마이크로리터의 Hanks'Balanced Salt Solution(HBSS)에 약 0.75mg의 건조 효모를 첨가합니다. 다음으로, 혼합물을 섭씨 100도 및 500rpm의 ThermoMixer에서 최소 15분 동안 배양합니다. 배양 후 5 마이크로 리터의 효모 현탁액을 0.2 % 트리판 블루 염료의 45 마이크로 리터로 옮깁니다.

Neubauer 챔버를 사용하여 효모 세포를 계산합니다. 처음 현탁액의 농도를 33, 칼슘과 마그네슘을 가진 HBSS를 사용하여 마이크로리터 당 000의 효모 세포에 조정하십시오. 다음으로, 이전에 준비한 활성화된 다형핵 호중구 5마이크로리터를 새로운 멸균 미세원심분리 튜브에서 5마이크로리터의 효모세포 현탁액으로 부드럽게 혼합하고 옮깁니다.

즉시 6 마이크로 리터의 다형 핵 호중구와 효모 현탁액을 각각 2 마이크로 리터의 깨끗한 유리 슬라이드의 3 개의 웰로 옮기고 40 분 동안 가습 챔버에서 슬라이드를 배양합니다. 빠른 파놉틱으로 염색한 후 현미경으로 세포를 관찰합니다. 100나노몰 FMLP와 16마이크로몰 항균 펩타이드 모두 효모 삼킴 증가를 유도했지만, 대조군에 비해 식세포작용을 크게 향상시킨 이중 자극 전까지는 그 차이가 통계적으로 유의하지 않았습니다.