Real-Time Polymorphonuclear Neutrophils (PMN) Chemotaxis Assay

임피던스 기반 실시간 세포 분석기 또는 RTCA 플레이트의 하부 챔버에 160마이크로리터의 화학 유인제를 추가하여 화학주성 그래디언트를 준비합니다. 네거티브 컨트롤 및 블랭크의 경우 칼슘 및 마그네슘이 포함된 Hanks'Balanced Salt Solution 또는 HBSS 160마이크로리터를 추가하십시오. 상부 챔버를 부착하고 칼슘과 마그네슘이 함유된 HBSS 25마이크로리터를 추가합니다.

화학주성 구배를 형성하기 위해 실온에서 최소 1시간 동안 배양합니다. 다음으로, 이전에 준비된 활성화된 다형핵 호중구 60마이크로리터를 부드럽게 혼합하여 상부 챔버로 옮깁니다. 그런 다음 칼슘과 마그네슘이 함유된 HBSS 60마이크로리터를 블랭크에 넣습니다.

RTCA 플레이트를 분석기에 놓고 2시간 동안 60초마다 세포 지수를 측정하도록 소프트웨어를 프로그래밍합니다. 구한 데이터로 곡선을 피팅합니다. 실시간 세포 이동은 호중구에 대해 100 나노몰 fMLP의 화학주성 효과를 나타냈습니다.