Confocal Imaging of Vital and Non-Vital Pericytes in Rat Acute Brain Slices

시작하려면 플라스틱 파스퇴르 피펫을 사용하여 형광으로 염색된 뇌 절편을 유리 바닥 공초점 접시로 부드럽게 옮깁니다. 이 접시를 평형 ACSF로 채우십시오. 철망으로 쥐의 뇌 조각을 제자리에 고정합니다.

다음으로, 유리 바닥 컨포칼 접시를 s에 놓습니다.tage 컨포칼 현미경의. 급성 뇌 절편을 접시 바닥에 놓고 이미징 중에 평형 ACSF를 관류합니다. 40X 대물렌즈를 사용하여 대뇌 피질 미세혈관의 벽 세포를 관찰합니다.

그런 다음 호환되는 소프트웨어를 사용하여 이미지 스택을 캡처합니다. 네트워크와 형태를 기반으로 대뇌 미세혈관 및 주위 세포를 식별한 다음 각 뇌 절편에서 대뇌 미세혈관 네트워크를 포함하는 특정 영역을 찾아 이미지를 캡처합니다. 정상적인 생리적 조건에서 뇌 주위세포는 세포 사멸을 경험하지 않습니다.

프로피듐 요오드화물로 염색되지 않은 생존 가능한 주위세포가 검출되었습니다. SAH 모델은 미세혈관 내에서 중요한 주위 세포를 보여주었습니다. 비필수 주위세포(non-vital pericyte)도 검출되었습니다.

프로피듐 요오드화물(Propidium iodide)은 비생명 주위세포(non-vital pericytes)로 분류되어 전체 미세혈관에 분리된 상태로 남아 있었다.