딥 네트를 사용하여 탱크에서 올챙이를 포획하고 0.005 % 벤조카인의 50 밀리리터 용액으로 옮깁니다. 더 이상 자극에 반응하지 않을 때까지 용액에 그대로 두십시오. 숟가락을 사용하여 올챙이를 부드럽게 집어 등쪽이 위로 향하도록 젖은 티슈가 들어 있는 작은 페트리 접시에 놓습니다.
그런 다음 표본을 실체 현미경 아래에 놓습니다. 시작하려면 날카로운 모세관을 가져 와서 마이크로 로더 팁을 사용하여 10 마이크로 리터의 염화 코발트 용액을 로드합니다. 그 후, 채워진 모세관을 마이크로 인젝터 핸들러에 넣어 모세관 팁을 떼어내어 약 30나노리터에서 배출량을 조절합니다.
마이크로 인젝터와 실체 현미경을 사용하여 수정체 위에 염화코발트로 채워진 모세관을 눈에 삽입합니다. 모세혈관 팁으로 눈 안쪽에 도달하면 눈당 약 30나노리터의 두 방울을 배출합니다. 오른쪽 눈을 주입한 후 페트리 접시를 180도 각도로 돌려 왼쪽 눈에 주입합니다.
주입된 올챙이가 들어 있는 페트리 접시를 1리터의 사육수가 들어 있는 큰 탱크로 옮깁니다. 올챙이가 완전히 깨어날 때까지 계속 관찰하십시오. 10 밀리몰의 염화 코발트를 주입하면 원뿔 광수용체의 특정 세포 사멸이 발생하고, 25 밀리몰의 주입은 광범위한 망막 세포 사멸을 유발했습니다.
면역 염색 결과 10밀리몰 염화코발트가 주입된 망막에는 원뿔이 없는 반면 간상체는 대부분 보존되어 있는 것으로 나타났습니다. 25밀리몰 염화코발트를 주입한 후, 광수용체와 양극성 세포 모두 심각한 영향을 받았습니다.
