Arteriovenous Blood Sampling Technique in Mice Using Sulzer's Vein and Left Ventricle for Metabolomic Analysis

시작하려면 마취 전달을 위해 노즈콘이 장착된 해부 트레이에 마우스를 놓습니다. 발 후퇴와 같은 동물의 반사 신경을 확인하여 마취가 적절한 깊이에 도달했는지 확인합니다. 그런 다음 마우스를 배치하여 등쪽 피부를 노출시킵니다.

머리카락이 빠지는 것을 방지하기 위해 70% 에탄올을 충분히 피부에 적십니다. 흉부의 아래쪽에서 시작하여 등을 따라 절개하고 목까지 확장합니다. 구부러진 팁 겸자를 사용하여 견갑골 간 갈색 지방 조직을 부드럽게 들어 올리고 부착된 조직을 조심스럽게 자릅니다.

지방 패드를 머리 쪽으로 들어 올리고 부착된 조직을 계속 절단하여 Sulzer의 정맥이 노출될 때까지 해당 부위를 조심스럽게 엽니다. 이제 슐저의 핏줄을 조심스럽게 잘라내자. 바닥을 자른 200마이크로리터 피펫 팁과 P100 피펫을 사용하여 약 40마이크로리터의 혈액을 채취하고 채취한 혈액을 채혈 튜브에 보관합니다.

혈청 채취가 진행될 때까지 튜브를 얼음 위에 두십시오. 모발이 빠지는 것을 방지하기 위해 70% 에탄올로 복부 피부를 넉넉하게 적십니다. 가위를 사용하여 흉강을 조심스럽게 열어 심장을 노출시킵니다.

29 게이지 하프 인치 바늘이 장착 된 1 밀리리터 주사기를 사용하여 좌심실의 정점 부위를 정확하게 뚫습니다. 바늘의 2/3를 심장 정점의 오른쪽 수평으로 약 3-5mm 정도 삽입하고 주사기를 뒤로 당겨 좌심실에서 혈액을 채취합니다. 그 후에, 4 섭씨 온도에 10 분 동안 10, 000G에 혈액 표본을 분리하십시오.

피펫을 사용하여 상층액을 채취하고 대사 산물 추출 및 분석을 진행합니다.