Bradford 단백질 분석을 위한 샘플 준비를 시작하려면 단백질 샘플을 희석하여 밀리리터당 0.025-1.0밀리그램의 표준 곡선 범위 내에서 단백질 농도를 얻습니다. 이 범위 내에서 샘플당 여러 샘플 희석액을 생성합니다. 제로 단백질 포인트의 경우, 표준 용액을 준비하는 데 사용되는 10 마이크로리터의 완충액 또는 배지를 지정된 웰에 추가합니다.
그런 다음 각 단백질 표준 용액 10마이크로리터를 96웰 마이크로플레이트에서 삼중 역할을 하는 3개의 웰 세트에 추가합니다. 동일한 96웰 마이크로플레이트의 별도 웰 세트에 각 샘플 희석액 10마이크로리터를 삼중으로 추가합니다. 다음으로, 모든 웰에 250마이크로리터의 Bradford 단백질 분석 시약을 추가합니다.
최종 마이크로플레이트 설정의 레이아웃이 화면에 표시됩니다. 분석 시약을 추가한 후 5-15분 이내에 조명이 밝은 방에서 결과를 기록하십시오. 한 손으로 마이크로플레이트를 균일한 흰색 배경에 대고 잡고 작업대와 평행이 되도록 합니다.
다른 손을 사용하는 동안 스마트폰을 벤치 및 마이크로플레이트와 평행하게 잡습니다. 전체 마이크로플레이트의 여러 사진을 캡처합니다. iOS 장치의 경우 카메라 설정에서 그리드 옵션을 활성화하여 카메라 레벨 표시기를 켭니다.
Android 장치의 경우 카메라 설정에서 그리드 선을 활성화하여 동일한 결과를 얻을 수 있습니다. 특별한 조명 장치가 필요하지는 않지만 이미지를 올바르게 캡처할 때 주의하십시오. 플레이트나 배경을 음영 처리하지 말고 과도한 반사를 방지하십시오.
또한 접시가 기울어지지 않도록 하십시오. 사진에 배경, 균일성, 그림자 및 반사가 있는지 검사합니다. 또한 웰의 각도를 확인하십시오.: 각 웰의 중심이 직접 보여야 합니다 원하는 경우 마이크로플레이트 리더에서 마이크로플레이트를 읽어 그림 색상 데이터를 마이크로플레이트 흡광도 판독값과 비교합니다.
