마우스 뇌 농축 면역 펠렛 플레이트 히스톤 정량화를 위한 염색 방법

쥐의 뇌 농축 면역 펠릿을 15밀리리터 튜브에서 둥근 바닥 96웰 플레이트로 옮깁니다. 플레이트를 500G에서 5분 동안 원심분리한 후 튕겨 상층액을 제거합니다. 100 마이크로리터의 FACS 완충액에 세포를 재현탁시킨 다음 각 웰에서 10 마이크로리터를 대조 웰로 옮깁니다.

500G에서 5분 동안 원심분리합니다. 원심분리된 셀에서 상층액을 제거한 후 50마이크로리터의 이중 농축 FC 블록을 추가합니다. 얼음 위에서 10분간 배양합니다.

이제 항체 마스터 믹스 50 마이크로리터를 최종 목표 농도의 두 배로 첨가하고 어두운 얼음 위에서 배양합니다. 그런 다음 각 웰에 200마이크로리터의 FACS 완충액을 추가하고 5분 동안 500G의 속도로 원심분리합니다. 튕겨 상층액을 버린 다음 300마이크로리터의 FACS 완충액으로 세포를 세척합니다.

세포를 원심분리하고 200마이크로리터의 FACS 완충액에 재현탁시킵니다. 마지막으로, 현탁액을 300마이크로리터의 FACS 완충액이 들어 있는 유동 분류 튜브로 옮깁니다.