시작하려면 수술 절차를 위해 마취된 쥐를 준비합니다. 수술용 가위를 사용하여 면도한 머리 부위의 중앙을 따라 피부를 절개하여 두개골을 노출시킵니다. 그런 다음 희석된 과산화수소를 사용하여 멸균 면봉으로 1-3초 동안 두개골을 청소하고 새로운 멸균 면봉으로 두개골을 건조시킵니다.
두개골을 앞쪽과 뒤쪽으로 정렬하려면 브레그마와 람다에서 등쪽 복부 깊이를 측정합니다. bgma를 시작점으로 사용하여 피질에서 원하는 영역을 찾아 표시합니다. 그런 다음 트레핀 드릴 비트와 치과 드릴을 사용하여 피질을 노출시킵니다.
드릴 비트의 각도가 두개골의 곡률에 수직인지 확인하여 균일한 개두술을 달성하고 손상을 방지하십시오. 저항이 감소할 때까지 드릴링한 다음 드릴링 프로세스를 중지합니다. 23 게이지 바늘 끝을 사용하여 분리된 뼛조각을 조심스럽게 제거합니다.
이제 차가운 ACSF에 적신 수술용 폼으로 노출된 피질을 청소하여 이물질을 제거하고 출혈을 멈춥니다. 마이크로 프리즘 삽입을 용이하게 하고 피질의 압력을 완화하기 위해 절개합니다. 수술용 칼을 입체 팔의 홀더에 부착하고 칼날 또는 입체 팔을 향하게 하여 내측 측면 축을 따라 자릅니다.
이제 칼을 원하는 앞쪽 후방 좌표로 이동합니다. 그런 다음 칼을 개두술의 내측 가장자리로 옮기고 뼈에 닿을 때까지 천천히 내립니다. 주어진 방정식을 사용하여 두개골 표면에서 미리 절단된 절개 깊이를 결정합니다.
절개 길이가 1mm 이상인지 확인하십시오. 이상적으로는 약 1.2mm여야 합니다. 칼을 개두술의 내측 가장자리에서 절개의 시작 내측 좌표로 이동하고 칼을 피질로 천천히 내립니다.
경막을 뚫고 피질에 들어간 후 차가운 ACSF 한 방울을 도포하여 조직을 윤활하고 수분을 공급합니다. 최종 깊이에 도달하면 내측 횡축을 따라 칼을 움직입니다. 티슈가 칼로 끌리면 칼을 위아래로 몇 번 움직여 티슈가 잘리는지 확인합니다.
그런 다음 칼을 최종 깊이로 되돌리면서 측면으로 계속 움직입니다. 완료되면 칼을 천천히 들어 올립니다. 피가 나오면 ACSF를 적신 수술용 폼으로 절개 부위를 세척하여 혈액을 희석하고 제거합니다.
마이크로 프리즘을 삽입할 준비가 될 때까지 노출된 피질 위에 포화 폼을 놓습니다. 마이크로프리즘을 임플란트 키트에 부착합니다. 프리즘의 이미징 면이 베이스 플레이트 나사의 반대쪽에 있는지 확인합니다.
마이크로 프리즘을 입체 프레임에 부착하고 절개 부위와 정렬되도록 방향을 맞춥니다. 마이크로 프리즘을 절개 부위에 천천히 내립니다. 처음에는 ACSF를 제거하되 프리즘이 피질에 들어가면 차가운 ACSF로 씻어냅니다.
필요한 경우 ACSF를 추가하고 프리즘을 위아래로 움직여 피질을 교반합니다. 노출된 피질 영역과 수정체를 실리콘 접착제의 보호층으로 덮어 주변 두개골과 더미 스코프의 과도한 접착제를 최소화합니다. 이제 시멘트 적용에 적절한 임플란트 배치를 위해 헤드 플레이트를 뒤쪽으로 배치합니다.
헤드 고정 실험 중에 양쪽이 고정될 수 있도록 제안된 개두술의 약간 오른쪽에 헤드 플레이트의 정중선을 맞춥니다. 그런 다음 불투명 시멘트 분말 1스쿱과 혼합 매체 4방울, 촉매 1방울을 혼합하여 접착성 치과용 시멘트를 준비합니다. 헤드 플레이트와 두개골에 시멘트를 바르고 시멘트가 경화될 때까지 헤드 플레이트를 제자리에 고정합니다.
접착 시멘트를 도포하여 노출된 두개골과 조직을 덮고 안정될 때까지 마이크로 프리즘과 헤드 플레이트를 통합합니다. 입체 암을 위쪽으로 움직이면서 집게로 마이크로 프리즘을 안정화하여 더미 현미경을 분리합니다. 보호 커버를 렌즈에 놓고 나사를 조여 고정합니다.
어둠 속에서 열린 경기장을 탐험하는 동물의 뉴런은 3주 간격으로 진행된 세션에서 비슷한 수준의 형광과 발화율을 보였다.
