LC-TIMS-TOF MS/MS에 의한 안정 동위원소 표지를 통한 지질 스크리닝을 위한 질량분석기 보정

질량 분석기 또는 LC-TIMS-TOF-MS/MS에 대한 MS 보정을 시작하려면 TIMS 제어 소프트웨어를 열고 보정 하위 탭에서 m/z를 클릭하고 Dropbox에서 튜닝 믹스를 선택한 다음 오른쪽 하단 모서리에 있는 보정을 클릭합니다. 100%의 점수가 달성될 때까지 보정을 계속 클릭합니다. 이제 이동성 탭을 선택하고 100% 보정 점수에 도달할 때까지 설명된 것과 동일한 단계를 수행합니다.

보정 곡선에서 각 보정 지점을 생성하려면 지질 내부 표준 혼합물을 10마이크로리터의 중수소화된 내부 표준 혼합물로 스파이크합니다. 원하는 범위의 7개 보정 지점에 대해 7개의 스파이크 샘플을 준비합니다. 데이터 분석 소프트웨어를 사용하여 수동 MS/MS 패턴을 기반으로 지방산 사슬에 수동으로 주석을 달 수 있습니다.

안정 동위원소 표지 또는 SIL 효율을 측정하려면 SIL 함유 동위원소 면적과 비SIL 함유 동위원소 면적의 비율을 계산합니다. 모든 위치에서 라벨링된 원자를 찾을 확률을 결정하여 이론적 패턴을 계산합니다. 데이터 분석 소프트웨어에서 시뮬레이션된 이론적 패턴에 실험 동위원소 프로파일을 맞추어 SIL 농축을 계산합니다.

실행을 시작하려면 온도계 버튼을 클릭하여 컬럼 오븐을 활성화하고 밸브 버튼을 클릭하여 펌프를 활성화하십시오. MS Method를 이전에 저장한 적절한 Method로 설정합니다. 주입 부피가 5마이크로리터인지 확인하고 한 대상의 바이알을 20:1로 라인하고 샘플 목록을 저장합니다.

시퀀스를 시작하고 시스템에 injected, 라는 메시지로 성공적인 주입을 확인합니다. 첫 번째 줄을 복사하여 아래에 붙여 넣어 새 줄 두 번째를 생성하십시오. 실험에 따라 두 번째 라인을 샘플로 채웁니다.

오토샘플러의 올바른 위치가 사용되었는지 확인하십시오. 이동상이 최신 상태인 경우 먼저 제조업체의 지질 혼합물 표준물질로 피크 모양 테스트를 수행하여 이전 결과와 비교합니다. 지질 혼합물과 표준물질이 화면에 표시됩니다.

새 라인에 첫 번째 라인에서 사용된 사전 컨디셔닝 방법이 아닌 올바른 분리 방법이 있는지 확인하십시오. 입력한 MS 방법이 올바른지 확인합니다. 올바른 처리 방법이 로드되고 실행 자동화 프로세스가 활성화되어 있는지 확인합니다.

현재 실행이 완료된 후 샘플이 분석되도록 샘플 목록을 저장합니다.