단일 분자 이미징을 사용한 단백질 응축물 상호 작용 연구를 위한 세포의 Halo-Ligand 염색

1관심 HaloTag 단백질과 Halo-H2B를 발현하는 세포주(2)를 생성한 후, 3 둘 다에 대해 할로 리간드 염색 시약(4)을 별도로 준비합니다. 5 PBS 2ml로 세포를 헹굽니다. 6 할로 리간드 함유 배지 7을 추가하고 섭씨 37도 8에서 5% 이산화탄소와 함께 1시간 동안 배양합니다.

9 염색 배지를 제거한 후, 10 PBS 11로 세포를 4회 헹구고 후광 리간드가 없는 신선한 배지로 배양합니다. 12 이러한 4회의 헹굼 배양 주기 후에, 13은 세포(14)가 있는 커버 슬립을 멸균 겸자를 구비한 현미경 스테이지 호환 챔버(15)로 이송한다. 16 이미징하기 전에 페놀 적색이 없는 매체를 챔버에 추가합니다.