먼저 안락사 용액에 담근 개구리를 1시간 동안 담가 놓고 발을 꼬집어 통증 반응이 없는지 확인합니다. Xenopus의 무게를 측정하고 주둥이에서 통풍구까지의 길이와 같은 추가 측정을 수행합니다. 개구리를 등에 눕히고 팔다리를 몸에 가깝게 고정합니다.
해부 가위를 사용하여 정중선을 따라 피부를 절개한 다음 옆으로 뻗어 두 개의 피부 플랩을 만듭니다. 그런 다음 linea alba를 찾아 집게로 잡습니다. coelomic cavity에서 부드럽게 잡아 당기고 가위를 사용하여 아래의 근육 조직을 자릅니다.
캐비티 벽에서 두 개의 플랩을 만듭니다. 여전히 뛰고 있는 심장을 확인하고 절개 가위를 사용하여 코라코이드 뼈를 다듬어 더 쉽게 접근할 수 있도록 합니다. 이제 조직 집게를 사용하여 얇은 심낭을 식별하고 펴십시오.
홍개 절제술 가위의 끝을 사용하여 심낭을 조심스럽게 천공합니다. 그런 다음 심장의 3개 방에서 심낭을 제거합니다. 이 프로토콜에서는 심실, 간의 좌엽, 췌장, 뚱뚱한 몸, 쌍을 이루는 신장의 샘플링이 표시됩니다.
심실을 채취하려면 집게로 정점의 심실을 잡고 귓바퀴 및 동맥 줄기와의 연결을 찾은 다음 이 지점 아래를 절단합니다. 다음으로, 간의 세 엽을 관찰합니다. 좌엽을 부드럽게 들어 올려 간관과 낭포관을 노출시키고 이 엽의 1/3을 관 아래에 채취합니다.
개구리가 암컷인 경우 생식 상피로 덮인 난소를 찾으십시오. 로브를 양쪽으로 부드럽게 재배치하여 부착 영역이 드러나도록 합니다. 가위를 사용하여 난소를 손상시키지 않고 가능한 한 신장에 가깝게 난소를 절제하십시오.
그런 다음 간의 내엽과 장간막과 간췌관을 통해 위와 십이지장과의 연결을 검사합니다. 홍채 절제술 가위를 사용하여 십이지장 근처의 장간막, 간십이지장 인대, 간췌관을 자릅니다. 췌장과 내측엽을 간의 내측엽에서 분리하고 어두운 간 조직을 붙인 상태로 둡니다.
다음으로, 이빨이 있는 집게를 사용하여 위를 잡은 다음 조직 집게를 사용하여 췌장 위쪽 끝을 잡습니다. 5X 배율로 췌장을 위에서 조심스럽게 분리합니다. 이제 방광을 찾아 절제하고 가능한 한 배설물에 가깝게 자른 다음 조직을 버립니다.
그 후 대장을 확인하고 스트레칭하여 배설물 근처에서 절단합니다. 다음은 뚱뚱한 몸을 양쪽에 나누어 왼쪽 뚱뚱한 몸의 기저부를 잡고 복막에서 잘라냅니다. 암컷 개구리나 눈에 띄는 흔적 난관이 있는 수컷의 경우 난관을 잡고 신장과 배설물에서 분리합니다.
배설물 접합부를 절단하고 신장에서 계속 분리하여 명확한 복막 부착물을 제거합니다. 이제 겸자를 사용하여 신장을 잡고 아래쪽 끝부분의 복막을 자릅니다. 가위를 사용하여 coelomic cavity에서 신장을 들어 올립니다.
해를 끼치지 않도록 복막을 가능한 한 신장에 가깝게 분리하십시오. 5X 확대 이하에서 과도한 복막과 고환, 지방체 또는 비장과 같은 잔류 조직을 제거합니다. 동물을 풀어 준 후 엎드려 놓고 팔다리를 고정하십시오.
샘플링을 위해 뒷다리 하나를 선택하고 발을 고정합니다. 비복근 또는 경골 비골 부위에서 아몬드 모양의 피부 플랩을 절제합니다. 그 후, 모든 s를 헹구십시오.ampPBS에서 여분의 조직이 있는지 확인하고, 필요한 경우 사용하기 전에 다듬습니다.
심실, 간의 좌엽, 췌장, 좌측 지방체, 한 쌍의 신장, 피부 덮개는 안락사 후 한 시간 이내에 깨끗하게 절제되었다.
