Protein G Gel을 사용한 transfection된 HEK293 단백질의 사전 클리어링 및 Epitope tag Affinity Gel을 사용하여 단백질 복합체 포획

먼저 단백질 샘플이 들어 있는 튜브에 40마이크로리터의 일대일 단백질 G 겔 슬러리를 추가합니다. 섭씨 4도에서 약 30초 주기로 로테이터에서 1시간 동안 샘플을 회전시킵니다. 다음으로, 12, 4개의 섭씨 온도에 20 초 동안 000 G에 표본을 분리한다.

구슬이 수평을 이룰 수 있도록 튜브를 얼음 위에 1분 동안 놓습니다. 상층액을 모아 단백질 흡수율이 낮은 새로운 1.5밀리리터 튜브로 옮깁니다. 별도의 1.5밀리리터 튜브에 입력하기 위해 부분 표본을 제거합니다.

농축된 샘플 버퍼의 4배를 투입물에 추가하여 균등하게 희석하고 섭씨 98도에서 10분 동안 가열합니다. 다음으로, 20 내지 30 마이크로리터의 일대일 에피토프 태그 슬러리를 샘플에 첨가한다. 섭씨 4도에서 약 30초 주기로 로테이터에서 2시간 동안 샘플을 회전시킵니다.