광 조절 가역적 단백질 패턴을 제조하기 위한 GUV(Giant Unilamellar Vesicles) 준비

시작하려면 초순수에 5 밀리몰 자당과 100 % 폴리 비닐 알코올 용액을 준비하십시오. 섭씨 80도에서 400RPM으로 흔들면서 밤새 섞는다. 그런 다음 원하는 조성의 클로로포름으로 지질 용액을 준비합니다.

준비하기 위해 GUV는 피펫 팁을 사용하여 준비된 폴리비닐 알코올 용액 40마이크로리터의 얇은 층을 유리 슬라이드에 펴 바릅니다. 이 층을 섭씨 50도에서 30분 동안 건조시킵니다. 그런 다음 바늘을 사용하여 폴리 비닐 알코올 층에 5 마이크로 리터의 지질 용액을 펴 바르고 섭씨 30도에서 1 시간 동안 건조시킵니다.

이제 스페이서와 두 번째 유리 슬라이드를 사용하여 기능성 유리 슬라이드에 챔버를 조립하고 챔버에 1밀리리터의 재수화 완충액을 추가하고 실온에서 1시간 동안 배양하여 GUV를 형성합니다. 그런 다음 챔버를 뒤집고 유리 표면을 부드럽게 두드립니다. 한쪽의 유리 슬라이드를 조심스럽게 제거하여 내장 챔버를 열고 피펫으로 GUV를 수확합니다.

용액을 플라스틱 튜브에 넣고 GUV를 2시간 동안 가라앉힙니다.