식도 생검에서 환자 유래 공기-액체 인터페이스(ALI) 배양 확립

먼저 식도 생검에서 분리한 세포를 10마이크로몰 Y27632가 있는 4밀리리터의 KSFM에 재현탁시킵니다. 세포를 T25 세포 배양 플라스크에 옮깁니다. 각질 형성 세포가 60 %에서 80 % 밀도를 가진 단층을 형성하면 P1 세포를 통과합니다.

그런 다음 공기 액체 계면 배양을 위해 P2 1차 각질세포를 TRANSWELL 인서트에 파종합니다. 7일째에 공수를 수행하려면 하부 챔버의 배지를 고칼슘 KSFM으로 교체하고 상부 챔버에서 배지를 흡인합니다.