시작하려면 DPBS를 사용하여 산화 아연 나노 입자 용액의 밀리리터 당 2 밀리그램을 준비합니다. 서로 다른 농도를 만들기 위해 2중 연속 희석을 수행합니다. 테스트된 각 산화아연 나노입자 농도 100마이크로리터를 96웰 플레이트에 추가합니다.
박테리아 배양액을 트립틱 대두 육수 또는 TSB 배지를 사용하여 밀리리터당 100만 CFU로 희석합니다. 서로 다른 농도의 산화아연 나노입자 용액을 포함하는 각 웰에 100마이크로리터를 추가합니다. 접시를 섭씨 37도에서 24시간 동안 배양합니다.
각 우물에서 박테리아 용액으로 100 마이크로 리터의 산화 아연 나노 입자를 피펫팅하고 10에서 음의 6까지 다양한 10 배 곡물 희석액을 준비합니다. 4개의 희석액에서 50마이크로리터를 트립틱 대두 한천 TSA 미디어 플레이트로 옮깁니다. 한천 플레이트를 섭씨 37도에서 24시간 동안 배양합니다.
각 그룹에 대해 계산 가능한 희석 계수를 선택한 후 계산 가능한 희석 플레이트의 모든 콜로니를 표시하고 농도가 밀리리터당 CFU 수가 되도록 다시 계산합니다. 얻은 데이터를 사용하여 음성 대조군에 있는 박테리아에 대한 살아있는 박테리아의 비율을 나타냅니다. 산화 아연 나노 입자의 항균 특성은 밀리리터 당 50 만 CFU의 Pseudomonas aeruginosa 균주에 대해 테스트되었습니다.
나노 입자의 항균 활성은 농도 의존적 방식으로 증가했습니다. 그러나, 시작되는 희석되지 않은 세균 배양으로부터 세균 군집의 수가 눈에 띄게 감소하는 것은 분명하지 않았다. 밀리리터당 50만 CFU의 MRSA 균주에 대해 테스트했을 때 이러한 나노 입자는 항균 활성이 증가하여 박테리아 콜로니 형성이 크게 감소했습니다.