시작하려면 가위와 뭉툭한 집게를 사용하여 마취된 쥐의 피부를 오른쪽 경정맥 위로 들어 올려 자릅니다. 경정맥과 주변 조직의 일부를 노출시킬 수 있을 만큼 큰 피부의 둥근 창을 자릅니다. 뭉툭한 해부 기법을 사용하여 지방 조직, 림프절 및 결합 조직을 부드럽게 밀어냅니다.
다음으로, 섭씨 37도로 예열된 생리식염수로 20밀리리터 주사기를 채웁니다. 주사기를 주사기 주입 펌프에 넣습니다. 그런 다음 27 게이지 나비 바늘과 관련 튜브를 주사기에 부착합니다.
주사기 펌프를 분당 0.5밀리리터의 유속으로 설정하여 구멍이 뚫린 정맥이나 동맥에서 혈액을 씻어냅니다. 식염수 흐름을 천자 부위 바로 위가 아닌 측면으로 몇 밀리리터 배치하십시오. 경정맥이 청소되면 타이머를 시작합니다.
경정맥과 대퇴 동맥에 대해 각각 30 게이지 및 33 게이지 피하 주사 바늘을 얻습니다. 베벨을 위쪽을 향하도록 돌립니다. 그런 다음 바늘을 경정맥 또는 대퇴 동맥 위로 25도 각도로 놓습니다.
시간을 기록한 후 용기 상단에 빠르게 구멍을 뚫습니다. 출혈이 완전히 멈추는 데 걸리는 시간에 유의하십시오. 관류 고정을 시작하기 전에 혈전이 형성될 때까지 기다립니다.
관류가 완료되면 천자 부위와 혈전이 있는 경정맥 부분을 절개합니다. 날카로운 가위를 사용하여 혈관 세그먼트의 말단 끝을 대각선으로 자르고 혈관 세그먼트의 근위 끝을 가로질러 직선으로 자릅니다. 다음으로, 고정 조직을 섭씨 4도에서 24시간 동안 둡니다.
다음 날, 5mm 두께의 실리콘 매트가 들어있는 35mm 배양 접시에 카코딜레이트 나트륨 완충 용액을 붓습니다. 조직을 완충액에 조심스럽게 옮겨 완충액에 잠기도록 합니다. 스테인레스 스틸 세밀한 핀과 한 쌍의 미세한 집게를 사용하여 용기의 양쪽 끝을 매트에 조심스럽게 고정합니다.
경정맥을 조심스럽게 청소하십시오. 마이크로 가위로 천자 부위 반대쪽 혈관 벽을 세로로 자릅니다. 용기를 부드럽게 연 다음 내강 면이 위를 향하도록 하여 실리콘 매트에 고정합니다.
접시에서 완충 용액을 제거합니다. 그런 다음 1%의 파라포름알데히드를 첨가하여 용기를 담그십시오. 건조를 방지하기 위해 즉시 접시 뚜껑을 덮으십시오.
