살충제 대사 산물의 세포 독성을 평가하기 위해 Triazole 살충제를 사용한 당근 캘러스 처리

채취한 당근 굳은살이를 멸균 상태에서 다양한 트리아졸 살충제로 처리하는 것으로 시작합니다. 이렇게하려면 별도의 유리 플라스크에 당근 굳은살 3g을 MS 배지에서 준비한 각 살충제 용액 10 밀리리터와 섞습니다. 또한 당근 굳은살 3g과 10ml의 무균 MS 배지를 다른 유리 플라스크에 섞습니다.

준비된 당근 굳은살 샘플을 130rpm 및 섭씨 26도의 어두운 곳에서 72시간 동안 배양합니다. 모든 처리를 삼중으로 설정합니다. 배양 후 0.5미크론 유리 섬유 필터를 사용하여 여과를 통해 배지에서 당근 캘러스를 수집합니다.

굳은살은 초순수로 세 번 씻으십시오. 마지막으로 섭씨 55도의 동결 건조기를 사용하여 굳은살을 동결 건조한 다음 70Hz의 고처리량 조직 분쇄기를 사용하여 3분 동안 균질화합니다. 모든 살충제의 농도는 배양 배지에서 기하급수적으로 감소했습니다.

당근 굳은살에 있는 것은 증가하기 시작하여 4시간 또는 8시간에 최고조에 달한 후 점차 감소했습니다. 이러한 결과는 살충제가 당근 굳은살이에 의해 빠르게 흡수되고 변형되었음을 시사합니다. 냉담 배양 시스템에서 살충제의 시간적 회수는 72시간 배양 후 8.3-11%의 농약만 남아있는 것으로 나타났으며, 이는 대부분의 살충제가 대사 산물로 변형되었음을 나타냅니다.