세포 밀도가 80% 이상이 될 때까지 배양 후 세포를 통과시키십시오.배양액을 폐기한 후 PBS로 세포를 세 번 세척합니다. 그런 다음 플라스크에 1m리터의 trypsin-EDTA 용액을 넣고 완전한 세포 접촉을 위해 균일하게 펴 바릅니다. 세포가 부착 모양에서 100X 배율로 현미경으로 관찰된 것처럼 작고 둥근 점으로 바뀌면 소화액을 제거합니다.
플라스크 벽을 가볍게 두드려 세포를 분리합니다. 2ml의 DMEM을 넣고 플라스크 벽을 10번 헹굽니다. 플라스크 벽을 가볍게 두드리고 셀 현탁액 1mL를 다른 유리 플라스크로 옮깁니다.
각 유리 플라스크에 5ml의 DMEM을 추가합니다. 플라스크 벽을 가볍게 두드려 세포를 고르게 분포시킵니다. 섭씨 37도에서 이산화탄소 5%로 세포 밀도가 80% 이상이 될 때까지 세포를 배양합니다.