세포독성 연구를 위한 살충제 처리된 당근 캘러스의 살충제 대사 산물에 대한 Caco-2 세포 노출

노출 테스트를 진행합니다. 동일한 세포를 충분히 채취하면 세포가 들어 있는 플라스크 벽을 가볍게 두드려 세포가 균일하게 분포되도록 하고 세포 현탁액을 15mL 원심분리 튜브로 옮깁니다. 세포 현탁액을 세포 분석과 함께 DMEM으로 희석하여 원하는 세포 밀도를 얻을 수 있습니다.

세포가 균일하게 분포되도록 플라스크 벽을 가볍게 두드립니다. 다음으로, 100 웰 플레이트의 외부 웰에 96마이크로리터의 PBS를 추가하여 가장자리 효과로 인해 배양 배지가 증발하는 것을 방지합니다. 100 마이크로 리터의 셀 현탁액을 플레이트의 왼쪽 웰에 추가하고 10 분 동안 그대로 두십시오.

섭씨 37도에서 5% 이산화탄소로 세포를 48시간 동안 배양합니다. 인큐베이터에서 96 웰 플레이트를 제거한 후 배양 배지를 폐기합니다. 살충제 대사 산물 그룹을 설정하려면 100마이크로리터의 다양한 준비된 농약 잔류물 노출 용액을 지정된 각 웰에 추가합니다.

그런 다음 100 마이크로리터의 서로 다른 준비된 부모 살충제 노출 용액을 비교를 위해 지정된 각 우물에 추가하여 살충제 부모 그룹을 설정합니다. 빈 컨트롤을 설정하려면 0.3%DMSO를 포함하는 100마이크로리터의 DMEM을 지정된 각 웰에 추가합니다. 섭씨 37도에서 5%의 이산화탄소로 세포를 24시간 동안 배양합니다.