시작하려면 메스를 사용하여 4% 파라포름알데히드로 고정된 인간의 심장 조직을 해부하여 컨포칼 현미경 검사를 위한 챔버 내에 맞춥니다. 심장 표본을 등급이 매겨진 메탄올 시리즈로 실온에서 각각 1시간 동안 교반하면서 탈수한 다음 66% 디클로로메탄 및 33% 메탄올 용액에 교반하면서 밤새 담근다. 다음 날, 표시된 단계를 수행하여 샘플을 표백합니다.
그런 다음 등급이 매겨진 메탄올 시리즈로 표본을 각각 1시간 동안 교반하면서 재수화합니다. 면역 라벨링 후 다음 단계를 수행하여 이미징을 위해 조직을 준비합니다. 접착제가 들어있는 챔버를 슬라이드에 부착하고 챔버 둘레에 매니큐어를 바릅니다.
5X 렌즈가 장착된 정립 레이저 스캐닝 컨포칼 현미경을 켭니다. 사용된 형광단의 방출 스펙트럼에 적합한 레이저 라인을 사용하여 1024 x 1024의 해상도로 타일 스캔 및 z-stack 이미지를 획득합니다. 미시적 수준에서 심장 샘플의 조직 투명화를 통해 심장 뉴런을 포함하는 신경절의 시각화와 심근 신경 분포의 신경 패턴을 파악할 수 있습니다.