제한된 충돌 제트 믹서는 더 큰 혼합 챔버 내에서 두 개의 높은 레이놀즈 수 스트림을 서로 향하게 합니다. 각 제트의 선형 운동량은 용매와 반용매 스트림의 빠르고 균일한 혼합을 유발하는 미크론 규모의 난류 소용돌이의 형성으로 소산됩니다. 지질 나노입자 제형을 시작하려면 5밀리리터 주사기 2개에 에탄올을 채우고 각각을 밀폐된 충돌 제트 또는 CIJ 믹서의 입구 포트에 잠급니다.
주사기를 빠르게 누르고 믹서 폐수를 폐기물로 수집합니다. CIJ에서 에탄올 플러시 주사기를 제거합니다. 입구 어댑터를 통해 건조 질소 흐름을 불어 CIJ의 내부 채널을 건조시킵니다.
지질 원액을 혼합하고 1.5밀리리터 마이크로 원심분리기 튜브에 에탄올로 희석합니다. 100 밀리몰 pH 4 아세테이트 버퍼 스톡을 총 4 밀리리터 부피로 10 밀리몰로 희석합니다. 반용매 스트림을 준비하려면 1.5밀리리터 튜브에서 RNA와 아세테이트 완충액을 혼합합니다.
1밀리리터 주사기에 500마이크로리터의 용액을 준비합니다. 주사기를 뒤집고 수성 반용매 스트림에서 공기를 배출합니다. 마찬가지로, 1밀리리터 주사기에 500마이크로리터의 지질 용액을 수집합니다.
그런 다음 주사기를 반전시켜 에탄산 용매 스트림에서 공기를 배출합니다. 깨끗한 CIJ 믹서를 퀜치 수조 바이알 위에 놓습니다. 두 개의 주사기를 CIJ 믹서 입구 포트에 결합합니다.
두 주사기를 빠르게 눌러 용매와 반용매 스트림을 혼합하고 담금질 수조에서 지질 나노입자를 수집합니다. 주사기가 여전히 부착된 상태에서 퀜치 수조에서 CIJ 믹서를 제거합니다. 폐기물 용기 위에 CIJ를 놓고 주사기를 제거하여 잔류 홀드업 부피가 폐기물 용기로 흐르도록 합니다.
이제 지질 나노 입자 분산액이 포함된 퀜치 수조를 닫고 바이알을 부드럽게 휘젓습니다.
