시작하려면 상업용 설치류 식품 제조업체에서 엽산 또는 콜린이 결핍된 사료를 얻으십시오. 이 특별식은 엽산 1kg당 0.3mg, 타르타르산염 기준으로 콜린 1kg당 300mg을 함유하고 있습니다. 암컷 쥐가 이 특별한 식단을 4주에서 6주 동안 유지하도록 하십시오.
나중에 새끼가 어미에게서 젖을 뗄 때, 엽산이나 콜린이 결핍된 식단과 대조 식단을 먹이십시오. 새끼를 안락사시킨 후 생화학적 분석을 위해 혈액 샘플과 간 조직을 채취합니다. EDTA 코팅된 튜브에 혈액을 추가하고 튜브를 원심분리하여 혈액 혈장을 분리하여 1탄소 대사 산물의 농도를 측정합니다.
그런 다음 절단된 간 조직 샘플을 냉동 보관 튜브에 옮겨 담아 급속 냉동합니다. 짝짓기 전 4주 동안 대조군, 콜린 또는 엽산 결핍 식단에 대한 암컷 쥐의 기준선 및 주간 체중은 유의한 차이를 보이지 않았습니다. 엽산이 결핍된 식단을 섭취한 마우스의 혈장에서 모계의 1-탄소 대사산물 농도는 대조군 마우스에 비해 약간 낮았다.