종양 분해를 시작하려면 얼음 위에 놓인 60mm 조직 배양 접시에 샘플을 붓습니다. 접시에서 420 마이크로 리터의 매체를 1.5 밀리리터 마이크로 원심분리기 튜브로 피펫팅합니다. 핀셋을 사용하여 샘플 조직을 배지가 들어 있는 튜브로 옮깁니다.
깨끗한 가위로 샘플을 직경이 2-3mm 인 조각으로 자릅니다. 적절한 양의 분해 효소와 배지를 샘플에 추가합니다. 튜브를 5초 동안 소용돌이치게 하고 옆으로 수직으로 위치한 열 믹서에서 배양합니다.
50마이크로미터 셀 필터를 새로운 15밀리리터 원뿔형 튜브 위에 놓습니다. 그리고 새 RPMI 매체 1밀리리터로 필터를 프라이밍합니다. 1, 000 마이크로 리터 더 낮은 긴장 넓은 피펫 끝을 사용하여, 여과기에 표본을 적재하고 매체를 추가하십시오.
그런 다음 주사기 플런저의 뒷면을 사용하여 비틀는 동작으로 샘플의 필터를 갈아서 밀어 넣습니다. 5ml의 매체와 샘플이 포함된 접시의 나머지 매체로 필터를 세척합니다.