시작하려면 마이크로피펫 풀러에 마이크로피펫을 삽입하고 미세주사 바늘을 당깁니다. 바늘 끝을 s의 부분에 맞춥니다.tage 해부 스코프에서 마이크로미터. 마이크로미터를 측정 가이드로 사용하여 날카로운 집게를 사용하여 바늘을 세포의 직경보다 약간 큰 구멍 크기로 부릅니다.
피펫 필러가 장착된 50밀리리터 주사기를 사용하여 바늘에 미네랄 오일을 완전히 채웁니다. 이식 장치에서 긴 팔이 마이크로 주사기 펌프를 향하도록 3방향 마개를 돌립니다. 저장소 주사기 플런저를 눌러 유압 라인에서 모든 기포를 씻어냅니다.
플런저에 가벼운 압력을 유지하면서 긴 암이 이제 저장소 주사기를 향하도록 3방향 마개를 돌립니다. 그런 다음 기포가 생기지 않도록 바늘을 홀더에 삽입하십시오. 바늘이 수평에서 10-15도 각도로 직접 왼쪽을 향하도록 조정합니다.
거칠고 미세한 미세 조작기를 사용하여 현미경 대물렌즈 아래에서 바늘 끝을 움직여 초점을 맞춥니다. 액체가 바늘 끝으로 흘러 들어가거나 밖으로 흘러 들어가는 경우 오일과 RPT 사이의 안정적인 반월 상 연골이 관찰 될 때까지 주사기 펌프를 사용하여 압력을 조정하십시오. 오일 기포가 남아 있으면 바늘을 오른쪽으로 이동하여 팁을 RPT에서 빼낸 다음 다시 왼쪽으로 이동하여 위치를 변경합니다.
기증 동물이 다시 시야에 들어올 때까지 스테이지를 오른쪽으로 이동합니다. 이식할 세포의 중심을 다시 맞추고 초점을 맞추어 바늘을 동물 바로 바깥쪽의 세포에 맞춥니다. 다음으로, 바늘을 기증 동물에 삽입하고 필요한 경우 마이크로 주사기 펌프로 바늘 끝의 오일 반월상 연골을 재안정화합니다.
바늘 끝을 관심 세포에 대고 마이크로 주사기 펌프로 부드럽게 흡입합니다. 적절한 세포를 채취한 후 공여자에게서 바늘을 제거하고 바늘 끝의 물질을 재안정화합니다. 스테이지를 재배치하여 첫 번째 숙주 동물을 시야/중앙에 가져오고 세포가 배치될 영역에 초점을 맞추고 바늘을 동물 바로 바깥쪽의 이 영역에 맞춥니다.
그런 다음 바늘을 숙주 동물에 삽입하고 바늘 끝의 오일 메니스커스를 다시 안정화시킵니다. 바늘 끝을 증착 부위에 놓고 바늘에서 올바른 수의 공여체 세포가 방출될 때까지 마이크로 주사기 펌프로 부드러운 압력을 가합니다. 마지막으로 호스트에서 바늘을 제거합니다.
이식 후 12시간이 지났을 때, 숙주의 미주신경 운동핵의 전방 영역에서 기증자 뉴런이 성공적으로 관찰되어 건강한 신경돌기 돌출의 징후를 보였습니다. 이식 후 2일이 지났을 때, 이식된 뉴런은 올바른 위치를 유지했을 뿐만 아니라 새로운 축삭돌기를 네 번째 인두궁 쪽으로 확장하기 시작했는데, 이는 숙주 내에서 성공적인 통합을 나타냅니다.
