먼저 장착된 자궁내막 조직 절편을 원하는 항체로 염색합니다. 이미저를 켜고 TSA 염료에 따라 적절한 형광단을 선택합니다. 각 마커의 공정한 노출을 보여주는 슬라이드 영역에 수동으로 초점을 맞추고 자동 노출 기능을 사용하여 해당 형광단의 노출 시간을 설정합니다.
편향되지 않은 샘플링을 보장하려면 발광 상피 경계에 초점을 맞춘 이미지 획득을 위한 초기 영역을 무작위로 선택합니다. 초기 필드를 캡처한 후 하나의 필드를 왼쪽 또는 오른쪽으로 이동하여 후속 영역을 선택하고 캡처된 각 이미지 간에 하나의 필드를 건너뜁니다. 약 10를 포함하기 위하여 적어도 5개의 다른 지역, 000의 기질 세포를 붙잡기 위하여 구조 내의 발광 상피 국경을 유지하십시오.
TSA monoplex 및 multiplex 염색은 NK 세포 마커의 명확한 colocalization을 보여주어 뚜렷한 NK 세포 집단을 식별할 수 있게 해주었습니다. 멀티플렉스 전략은 스펙트럼 중복을 피하고 명확한 배경을 보장하여 신호 특이성을 확인하기 위해 먼 파장의 형광 염료를 사용했습니다.