Botrytis cinerea 를 사용한 소나무 선충의 시험관 내 재배 및 유지 관리

시작하려면 콜로니의 가장 바깥쪽 경계에서 botrytis cinerea의 배양 플러그를 멸균 감자 포도당 오거 플레이트로 옮깁니다. 섭씨 25도에서 7-10일 동안 또는 곰팡이 군집이 접시 가장자리에 도달할 때까지 접시를 배양합니다. Culture B cinerea는 7-10일 동안 증기 멸균되고 수분이 공급된 유기농 인증 보리 곡물로 만듭니다.

또는 시리얼의 표면이 완전히 식민지화될 때까지. 다음으로, B cinerea 배양균에 Pinewood 선충 현탁액을 접종합니다. 7-10일 동안 또는 곰팡이 군집이 완전히 소모되고 선충이 플라스크 벽을 올라갈 때까지 플라스크를 어두운 곳에서 배양합니다.

소나무 선충을 분리하려면 플라스크 벽을 수돗물로 헹굽니다. 그런 다음 내용물을 종이 타월에 붓고 Baermann 깔때기 또는 트레이에 넣고 선충을 물에 담그십시오. 24-48시간 후에 38마이크로미터 메쉬 체를 사용하여 선충을 회수합니다.

축적된 선충을 수돗물이 담긴 용기에 씻으십시오. 이 방법론을 사용하여 소나무 선충 개체수는 8일간의 성장 기간 동안 100배 증가했습니다.