Pinus pinaster 묘목과 Pinewood 선충의 In Vivo 감염 과정

먼저, 생활 단계의 소나무 선충이 혼합된 현탁액을 밀리리터당 1000개의 선충으로 설정합니다. 양안 현미경 아래의 오목한 슬라이드에서 최대 40배 배율로 선충의 수를 세십시오. 선충을 접종하기 전에 소나무 줄기의 위쪽 5cm 아래 부분에서 바늘을 수동으로 제거하고 멸균 메스를 사용하여 표면을 세로로 절개합니다.

상처 부위에 소나무 선충 현탁액 0.5ml를 담을 수 있는 멸균 솜 조각을 놓고 습도를 유지하기 위해 투명 스트립으로 고정합니다. 온실을 습한 조건으로 유지하고 물을 자주 주십시오. 소나무 시들음병의 진행 과정을 정기적으로 추적하고, 변색되고 시든 바늘의 비율을 정량화하여 증상 점수를 매깁니다.

접종 후 20일이 지나면 휘발성 물질 추출을 위해 줄기 밑부분의 묘목을 자릅니다. 모종을 갈색 종이 봉지에 넣고 섭씨 영하 20도에서 얼립니다. 소나무 묘목이 소나무 선충에 성공적으로 감염되면 감염 후 약 20일 후에 소나무 시들음병 증상이 나타났습니다.