마취된 마우스를 입체 프레임에 놓습니다. 브레그마와 람다를 식별하여 두 랜드마크 사이의 높이 차이가 100마이크로미터 이하인지 확인합니다. 멸균 연필로 두개골에서 계산된 좌표를 찾아 표시합니다.
좌표 주위에 2mm x 2mm craniotomy 창의 윤곽을 만듭니다. 마취 깊이를 확인한 후 고속 드릴을 사용하여 2mm x 2mm 개두창을 만듭니다. 0.5-1 밀리리터의 생리식염수를 바르면 뇌 표면이 건조해지는 것을 방지할 수 있습니다.
주사기 바늘과 미세한 집게를 사용하여 경막을 제거합니다. 다음으로, 고속 드릴을 사용하여 일반적으로 두개골 창에서 1-2mm 떨어진 실리콘 프로브 기준 전극을 위한 별도의 버 구멍을 만듭니다. 0.2ml의 저독성 실리콘 접착제를 두개골에 도포하여 개두술을 완전히 밀봉합니다.
헤드 플레이트와 나사를 사용하여 마우스 머리를 전기 생리학 기록 장치에 부착합니다. 그런 다음 실험 후 프로브 궤적을 재구성할 수 있도록 실리콘 프로브 섕크를 형광 염료로 코팅합니다. 그런 다음 매니퓰레이터에 프로브를 장착하고 원하는 각도를 설정합니다.
기록 프로브를 두개골 창 중앙 내의 뇌 표면으로 낮추려면 프로브를 약 300마이크로미터 깊이까지 수동으로 삽입합니다. 이 깊이에 삽입되면 조직 손상을 최소화하기 위해 프로브를 목표 깊이까지 분당 200마이크로미터로 자동으로 천천히 낮춥니다. 마지막으로, 건조를 방지하기 위해 개두창 내의 뇌 표면에 미네랄 오일을 바릅니다.
그런 다음 Intan 기록 컨트롤러를 사용하여 30킬로헤르츠에서 실리콘 프로브와 ECOG의 데이터를 기록합니다. 대부분의 기록된 뉴런은 세보플루란 마취 중에 발화를 감소시켰다. VLPAG 발사는 기준선에서 세보플루란 동안까지 유의하게 감소했습니다.
이러한 감소는 모든 VLPAG 뉴런에서 일관되게 나타났다.
