예쁜꼬마선충(C. elegans)과 예쁜꼬마선충(C. remanei) 암컷의 휘발성 성 페로몬 추출 및 저장

먼저, 페로몬 추출 하루 전에 200 L4 단계, 안개-2 Caenorhabditis elegans 처녀 암컷을 분리하십시오. 암컷을 3개의 개별 6cm OP50 NGM 플레이트에 분배합니다. 추출 당일, 100마리의 처녀 1일 된 fog-2 암컷을 1ml의 M9 완충액이 들어 있는 마이크로 원심분리 튜브에 넣습니다.

마지막 세척 후 페로몬이 생성될 수 있도록 섭씨 20도에서 6시간 동안 100마이크로리터의 M9 완충액에 암컷을 배양합니다. 마찬가지로, 15-20개의 L4기 Caenorhabditis remanei 암컷을 3개의 OP50 NGM 플레이트에 분리합니다. 세척 후 5마리의 처녀 암컷을 100마이크로리터의 M9 완충액에 섭씨 25도에서 6시간 동안 배양합니다.

15, 30에서 60 초 동안 000 G에 벌레를 분리하십시오. 페로몬이 함유된 상청액을 깨끗한 튜브로 조심스럽게 옮깁니다. 웜 펠릿이 들어있는 튜브를 폐기하십시오.

채취한 휘발성 성 페로몬 추출물을 영하 80도에서 보관하십시오.