저자는 이 프로젝트에 대한 종자 문턱을 제공한 지넷 헤이즈-클루그와 켈리 앤더슨, 앨런 영 박사에게 우리를 소개해 준 것에 대해 감사드립니다. 이 작품은 NIH 보조금 R01AI093634에 의해 지원되었다.

1. 절차적 준비
설명된 모든 동물 절차는 콜로라도 주립 대학의 기관 동물 관리 및 사용 위원회, 실험실 동물 관리 (AAALAC), Intl. 공인 기관의 평가 및 인가 협회에 의해 검토되고 승인되었습니다.
<ol><li>검사 전에 적절한 체임증 또는 마취 프로토콜을 사용하여 동물을 고정하여 휴식을 제공하고 적절한 위치를 허용합니다. 한 처리기는 사슴을 제지하고 두 번째 사람은 동물에게 진정을 투여합니다. 참고: 저자는이 종에 효과적인 식착을 제공 하기 위해 다음과 같은 조합을 발견 했습니다:butorphanol (0.45 mg/kg), azaperone (0.035 mg/kg), 그리고 메데토미딘 (0.04 mg/kg), 둔부 근육에 근육내 투여.</li>
	<li>doe가 규정을 준수하는 처리를 허용하는 식기의 비행기에 도달하면 검사 테이블 또는 V-trough 내에서 등쪽 또는 측면 복리전으로 배치하십시오. 머리, 목 및 흉부(약 20-30°)를 약간 상승하여 류류 및 루멘탈 내용의 포부 위험을 줄이고 시술 중에 적절한 환기를 용이하게 합니다. 참고: 대부분의 cervids 또는 다른 반추 종에서, 복부 초음파는 서있는 동물에서 수행됩니다; 그러나, 이 종의 작은 크기 및 행동 고려 사항은 검사및 흉골 포지셔닝을 위한 무거운 착취를 요구합니다 그러므로 더 어렵고 효과적인 화상 진찰 기술을 배제할 수 있습니다. 흉골과 측면 의 변류 사이의 중간 동물을 배치하는 것은 역류및 저환기의 위험을 감소시키기에 이상적 일 수 있으며 가능한 경우 고려해야합니다. 어떤 recumbent 위치에서, 주의 깊게 동물의 호흡을 감시하고 즉시 검사를 중단하고 역류 또는 저환기가 지적되는 경우에 흉골 호흡에 동물을 두는 것이 중요합니다.</li>
	<li>필요한 경우, 트랜스듀서와 피부의 발자국 사이의 적절한 접촉을 달성하기 위해 복부 부위에서 모발을 잘라냅니다. 참고: 초기 임신에서, 임신의 기록은 유방 땀샘 근처 의 caudal 복부에서 검출될 수 있습니다. 문턱의이 영역은 일반적으로 털이 없고, 따라서 면도는이 시간에 표시되지 않을 수 있습니다. 태아가 성장하고 자궁이 복부에 있는 더 두개골 위치를 점유하기 위하여 불경해짐에 따라, 머리의 클리핑은 화상 진찰의 앞에 필요할 것입니다. 면도날의 열상이나 전기 클리퍼의 열 손상을 포함하여 피부에 기계적 외상을 일으키지 않도록 주의해야 합니다.</li>
	<li>초음파 장치를 기술자가 자신의 지배적 인 손으로 검사를 수행하는 동안 모니터를 쉽게 시각화 할 수있는 위치에 배치하십시오. 저장된 이미지와 비디오 루프에 자동으로 레이블을 지정하기 위해 동물 식별 정보(이름, 식별 번호 등)를시스템에 입력합니다.</li>
</ol>2. 복부 생식 초음파 검사
<ol><li>코달 복부에 넉넉한 양의 어쿠스틱 커플링 젤을 발라주세요.</li>
	<li>5-10 MHz 곡선 선형 트랜스듀서를 caudal 복부의 피부에 놓고 즉시 치피로 두개골을 놓고 두개골 방향으로 천천히 이동하여 골반 내의 구조를 평가합니다. 코골 복부의 왼쪽과 오른쪽 사분면을 스캔하여 문턱의 이중 자궁의 뿔을 모두 평가합니다. 참고: 포괄적인 복부 초음파는 간, 신장, 비장, 위장관, 요로 방광 및 생식 기관을 포함하여 모든 복부 내장의 평가를 관련시킵니다. 이 프로토콜의 목적을 위해, 임신의 검사는 상세히 논의 될 것이다; 그러나, 다른 caudal 복부 기관의 일반적인 외관은 이 구조물이 연구 결과의 도중 에 발생할 확률이 있기 때문에 인식되어야 합니다. 이 위치에서 가장 일반적으로 볼 수있는 장기는 위장관의 세그먼트, 요로 방광 및 생식 기관을 포함한다. 크고 작은 내장은 장벽의 특징적으로 층화된 외관에 의해 식별된다. 루멘은 유체, 가스, 점액 또는 식품 입자를 포함할 수 있는 내용물의 종류 및 양에 따라 발음될 수도 있고 발음되지 않을 수도 있다. 오줌 방광은 소변으로 불경하지 않는 한 확인하기 어려울 수 있으며 방광 벽의 층은 장의 층보다 훨씬 덜 구별됩니다. 자궁을 제외하고, 난소는 또한 여성 muntjac의 생식 기관의 초음파에서 발견 될 수있다. 난소는 신장의 caudal 극 의 가까운 난장체로 나타납니다, 그들의 외관은 estrous 주기의 과정을 통해 변경될 수 있습니다. 피질 내의 여러 성숙한, 유체 채워진 여포의 존재는 estrus의 암시이다. 참고: 트랜스듀서의 스캔헤드를 회전 및/또는 "패닝"함으로써 구조물을 횡방향 또는 좌활평면에서 평가할 수 있습니다.<ol>
<li>오줌 방광에서 중력 자궁을 구별하는 데 필요한 경우, 소달 복부에 부드러운 압력을 가하거나 오줌 카테터를 배치하고 스캔을 반복하여 방광을 수동으로 비웁다. 참고: 방광의 수동 표현은 동물이 복부 내장의 더 자연스러운 방향을 용이하게하고 다른 구조물에 외상의 위험을 감소시키는 흉골 또는 똑바로 위치에있을 때만 시도되어야합니다. 자궁은 또한 기관의 벽의 두께를 평가하여 오줌 방광에서 분화될 수 있습니다. 적당히 비하 방광의 전형적인 두께는 약 1.4 mm24이며,저자는 문턱에서 중력 자궁의 근육 벽이 일반적으로 7-8 mm 사이를 측정하는 것을 발견했습니다. 참고: 초기 임신은 식별 가능한 태아 구조의 부족으로 인해 결정적으로 진단하기 어렵고, 실제로 임신의 첫 번째 징후는 단순히 caudal 복부에 있는 작은 액체 주머니일 지도 모릅니다. 이 때 볼 경우, 발전 배아는 자궁 내의 비정질 구조에 대한 고반향, 불변의로 나타날것이다(도 1).</li>
	</ol></li>
	<li>대비 및 이미지 세부 정보를 개선하기 위해 필요에 따라 깊이, 빈도 및 게인을 조정합니다. 참고: 더 높은 주파수는 향상된 이미지 해상도에 필요한 짧은 파장과 관련이 있습니다. 대부분의 트랜스듀서는 주파수 범위(예: 6-10 MHz)24내에서작동할 수 있습니다. 초음파 장치의 스캐너 컨트롤을 사용하여 주파수를 조정할 수 있으며 주파수가 증가하면 이미지가 더 선명하게 됩니다. 주파수를 동시에 증가하면 음파 침투 깊이가 감소합니다. 따라서 더 깊은 구조를 시각화하려면 주파수를 줄여야 할 수 있지만 해상도는24로손상될 수 있습니다. 이러한 이유로 원하는 조직 깊이에 도달할 수 있는 가장 높은 주파수를 선택하는 것이 중요합니다. 게인 컨트롤을 조정하면 조직에서 트랜스듀서로 돌아오는 음파의 증폭을 변경하고이미지(24)의대비 정도에 영향을 미칩니다. 이득은 초반향조직과 저반향 조직 사이의 최적 대비가 달성되는 지점으로 설정되어야 하며, 이러한 설정은 이미지되는 구조에 따라 조정해야 할 수 있습니다.</li>
</ol>3. 태아 측정 받기
참고: 국내 동물 종의 임신 연령은 초음파 검사에서 얻은 태아 측정을 위한 확립된 기준 범위를 사용하여 추정될 수 있습니다. 가장 일반적으로 사용되는 측정에는 직선 크라운 럼프 길이(SCRL), 가슴 깊이(CD), 헤드 길이(HL)17이 포함됩니다. 리브스의 문턱 사슴에서 신뢰할 수 있는 임신 연령 지침을 개발하기 위해 아직 충분한 데이터가 수집되지는 않았지만, 이러한 참조를 확립하기 위해 측정을 수집할 수 있습니다. 태아 심박수(FHR)는 임신이 특정 지점(일반적으로 임신 60일 전후)으로 진행됨에 따라 선형적으로 증가하는 수증명 및 반추제의 다른 종에서 나타났으며, 이 때 심박수는17개감소하기 시작한다. FHR은 다른 초음파 관찰과 함께 임신 연령을 추정하는 데 사용될 수 있지만 태아 생존가능성17,24의척도로 더 일반적으로 사용된다. FHR은 35일 이내에 리브스의 문턱에서 관찰된 짝짓기로 계산되었습니다.
<ol><li>SCRL을 측정하기 위해 모니터에서 자궁을 찾아 전체 태아의 처진 뷰가 얻어질 때까지 트랜스듀서의 위치를 미세하게 조정한다(그림2 및 3). 이미지를 동결하고 두개골의 가장 등쪽 측면과 사통의 기저(그림2 및 3)사이의거리를 측정합니다.</li>
	<li>CD를 측정하기 위해 태아의 적시관측(동일한 이미지가 SCRL을 측정하는 데 사용될 수 있음)을 얻고 흉부(그림2 및 3)의등쪽 및 복부 양상 사이의 거리를 측정한다.</li>
	<li>HL을 측정하기 위해, SCRL 및 CD 측정에 설명된 바와 같이 태아의 동일한 처상 뷰를 사용하여, 후두 문장에서 코의 기저까지의 거리를 측정한다(그림2 및 3).</li>
	<li>태아 심박수를 계산하려면, 그것의 리듬 수축을 시각화해서 태아의 흉부 구멍 내의 심혼을 확인합니다. 1분 이내에 발생하는 수축(심박동)의 수를 계산하여 심박수를 계산합니다. 참고: 사용되는 초음파 단위에 도플러 기능이 있는 경우, 이 기능은 다른 비특이적 태아 운동과 심장을 구별하는 데 추가적인 도움을 주기 위해 사용될 수 있다.</li>
	<li>저장된 모든 이미지 및 비디오 루프에는 동물 이름 이나 번호, 날짜, 측정 및 적절한 구조 라벨을 포함하여 필요한 모든 식별 정보가 포함되어 있는지 확인합니다.</li>
</ol>4. 절차적 결론 과 회복
<ol><li>부드러운 천이나 종이 타월을 사용하여 동물의 복부에서 잔류 초음파 접촉 젤을 모두 제거하십시오. 저장하기 전에 트랜스듀서에서 젤을 청소하십시오.</li>
	<li>1.1 단계에서 설명된 체임션 프로토콜을 사용하는 경우, 메데토미딘의 효과를 반전시키기 위해 0.25 mg/kg의 용량으로 아티파메졸을 피하로 투여한다. 길항제를 사용할 수 있는 다른 진정 프로토콜을 사용 하는 경우, 복구 속도 절차의 결론에 게시 된 복용량에 따라 동물에 이 에이전트를 관리.</li>
	<li>문턱을 부드러운 침수표면에 놓고 머리를 약간 올려 서 류경정내용의 역류 및 포부위험을 줄입니다. 완전히 회복되고 도움없이 인클로저 주위에 앰블 할 수있을 때까지 동물을 면밀히 모니터링하십시오.</li>
</ol>

<ol>
	<li>White, I. R., Russel, A. J., Wright, I. A., Whyte, T. 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이 프로토콜은 리브스의 문턱 사슴에서 임신 진단을 위한 복부 초음파 의 적용을 설명합니다. 다른 초음파 연구와 일치, 적절한 장비 및 기술 능력은 문턱 doe의 성공적인 생식 검사에 필수적이다. 기본적인 포유류 해부학, 진단 초음파의 물리적 원리 및 복부 내장의 전형적인 초음파 출현에 대한 신중한 검토는 잘못된 진단의 감소에 도움이 될 것입니다. 또한, 적절한 트랜스듀서를 선택할 수 있으...

초음파 검사는 가축1,양2,3,염소4,말5,동반 동물6,7및 기타 국내 동물 종에서 임신 진단의 잘 설명 된 방법입니다. 이 영상 양면은 또한 사슴8-11,붉은 사슴12-16,홋카이도 시카 사슴17,순록18,19을포함하여 포로 자궁 어장의 여러 종에서 임신 검출 및 태아 연령 추정을위한 귀중한 도구로 확인되었습니다. 많은 경우에, 초음파는 혈청 프로게스테론 또는 임신 관련 당단백질 분석9,18과같은 임신 검출의 그밖 기계장치 보다는 더 높은 정확도 비율을 생성했습니다. 더욱이, 생식 기관의 초소지질 시각화는 태아 생존가능성, 임신 연령 및 그렇지 않으면 평가하기 어려운 발달 이상 식별에 관한 추가 정보를 제공할 수 있다. 생식 상태를 평가하기위한 초음파 학의 유용성은이 방법론이 활성 번식 프로그램이 사용되는 다른 종에 적응해야한다는 것을 시사한다.
리브스의 문작 사슴(문티쿠스 리브시)은동남 아시아20에원산지 작은 자궁 경작 종이다. 이 동물의 생식 주기는 그들의 모국어에서 잘 특징적이지 않지만, 남부 잉글랜드의 부분에서 야생 인구의 연구 결과는 그들의 번식패턴20의이해를 향상했습니다. 대부분의 의식과는 달리, 리브스의 문턱은 일년 내내 번식하는 것처럼 보이며,20-22의명백한 계절 의 새끼 봉우리가 없습니다. 여성 문턱은 일반적으로 210 일 임신 기간 다음 하나의 새끼 사슴을 낳고, 안정적으로 24 시간20-22이내에 산후 estrus를 입력합니다. 이 산후 기간 동안 임신하지 않는 것은 약 24-25 일 후20에스트러스로 돌아갑니다. 포로 상황에서, 재생은 일반적으로 하나 이상의 그대로 남성과 주택에 의해 달성된다. 이 시스템은 만족스러운 개념비율을 생성하고 인력에 대한 기술적 기술이 거의 필요하지 하지만 정확한 번식 날짜는 불가능하지는 않더라도 결정하기가 어렵습니다.
문턱은 다른 종 들 중 karyotypic 다양화의 넓은 범위와 높은 비율 때문에 세포 유전학 연구에서 일반적으로 사용된다 23. 이 동물은 또한 현재 prion 질병 병인및 전송의 모형으로 조사되고 있습니다, 특히 관심은 자궁 지에서 만성 낭비 질병 (CWD)의 수직 전송의 연구 결과에 두어. 여러 가지 연구 응용 분야에서 문턱의 중요성은 현재의 조사 절차를 보완하기 위해 개선 된 생식 기술을 확립해야한다는 것을 시사합니다. 특히, 임신 기간을 평가하는 비침습적 메커니즘은 잠재적으로 다른 실험 조건하에서 생식 성능과 태아 의 성장 및 개발에 중요한 변이를 해명 할 수 있습니다. 또한, 실시간 태아 측정 참조의 개발은 번식 날짜를 결정할 수 없는 상황에서 임신 연령을 추정하는 데 잠재적으로 유용할 것입니다. 이전 연구는 크라운 럼프 길이 (CRL), 가슴 깊이 (CD), 및 머리 길이 (HL)와 같은 태아 측정을 사용하여 자궁 경부 종11-14, 16,17에서임신의 대략적인 단계를 추정하기 위한 메커니즘을 설명했습니다. 또한, 이러한 연구 중 일부는 또한 골격 광물화 또는 태아 심장 박동과 같은 특정 발달 이정표가8-19로식별 될 수 있을 때를 설명하는 지침을 수립했습니다. 이 데이터는 muntjac에 있는 생식 초음파 분석을 인도하는 것을 돕기 위하여 유용할 지도 모르지만, 연구된 그밖 cervid 종의 대부분은 문턱 응용을 위한 이 연구 결과의 번역 가치를 감소시키는 훨씬 더 큰 바디 규모 및 더 긴 임신 기간을 가지고 있습니다.
여기에 설명된 프로토콜은 임신을 진단하고 감시하기 위한 목적으로 여성 muntjac의 복부 초음파 를 설명합니다. 이 프로토콜의 성공적인 실행은 태아 성장 및 발달의 조기 임신 탐지 그리고 평가를 촉진할 수 있습니다. 이 기술은 작은 자궁 에서 생식, 자궁 발달 또는 전염병의 수직 전염을 조사하는 연구의 수행에 귀중한 응용 프로그램을 가지고 있으며 포로 사육 수술에서 임상 목적을 위해 유용 할 수 있습니다.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="547">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="61">
			<td height="61" style="height:61px;width:187px;">Butorphanol tartrate (Torbugesic) (0.45 mg/kg)</td>
			<td style="width:127px;">Fort Dodge Animal Health, Fort Dodge, Iowa</td>
			<td style="width:64px;">NADA 135-780</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:187px;">Azaperone tartrate (0.035 mg/kg)</td>
			<td style="width:127px;">ZooPharm</td>
			<td style="width:64px;"></td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:187px;">Medetomidine HCl (0.04 mg/kg)</td>
			<td style="width:127px;">ZooPharm</td>
			<td style="width:64px;"></td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:187px;">Ultrasound contact gel</td>
			<td style="width:127px;">Medline, Mundelein, Illinois</td>
			<td style="width:64px;">MDS092005</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:187px;">Atipamezole hydrochloride (Antisedan) (0.25 mg/kg)</td>
			<td style="width:127px;">Orion Corporation, Espoo, Finland</td>
			<td style="width:64px;">NADA 141-033</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Table 2 Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:187px;">Name of Equipment</td>
			<td style="width:127px;">Company</td>
			<td style="width:64px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:171px;">Comments</td>
		</tr>
		<tr height="201">
			<td height="201" style="height:201px;width:187px;">V-trough (optional)</td>
			<td style="width:127px;">N/A</td>
			<td style="width:64px;">N/A</td>
			<td style="width:171px;">Animal may be supported in dorsal recumbency on a standard examination table or other surface without the use of a V-trough</td>
		</tr>
		<tr height="61">
			<td height="61" style="height:61px;width:187px;">Electrical clippers or razor blades for hair removal</td>
			<td style="width:127px;">Oster, McMinnville, Tennessee</td>
			<td style="width:64px;">78005-140</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="61">
			<td height="61" style="height:61px;width:187px;">Ultrasound system: Ibex Pro portable ultrasound</td>
			<td style="width:127px;">E.I. Medical Imaging, Loveland, CO</td>
			<td style="width:64px;">Ibex Pro</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="61">
			<td height="61" style="height:61px;width:187px;">5-10 MHz transducer: CL3.8 5-2.5 MHz 60 mm curved linear array</td>
			<td style="width:127px;">E.I. Medical Imaging, Loveland, CO</td>
			<td align="right" style="width:64px;">290420</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:187px;">3 ml syringes</td>
			<td style="width:127px;">Covidien</td>
			<td align="right" style="width:64px;">1.18E+09</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:187px;">22 G needles</td>
			<td style="width:127px;">Covidien</td>
			<td align="right" style="width:64px;">8.88E+09</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

transabdominal ultrasound for pregnancy diagnosis in reeves' muntjac deer

리브스의 문작사슴(문티쿠스 리브시)은동남아시아가 원산지인 작은 자궁경부종으로, 현재 프리온 질환 전염 및 병증의 잠재적 모델로 조사되고 있다. 수직 전염은 프리온 질병을 포함하여 전염병을 공부하는 연구자들 사이에서 관심의 지역이고, 이 조사는 생식 성과에 대한 모계 감염의 효력을 평가하기 위한 능률적인 방법이 필요합니다. 초음파 검사는 임신을 진단하고 많은 동물 종1-7에서태아 건강을 평가하기위한 잘 확립 된 도구입니다, 농장 cervids의 여러 종을 포함8-19,그러나이 기술은 리브스의 문턱 사슴에 설명되지 않았습니다. 여기서 우리는 문턱에서 임신을 검출하고 임신 기간 내내 태아 성장 및 발달을 평가하기 위하여 복부 초음파의 적용을 기술합니다. 이 절차를 사용하여, 임신 한 동물은 doe-buck 페어링 후 35 일 일찍 확인되었으며 이것은 정기적으로 임신을 안전하게 모니터링하는 효과적인 수단이었습니다. 이 작업의 미래 목표는 임신 연령의 추정을 위한 일반적인 태아 측정 참조를 설치하고, 임신의 각종 단계에서 임신을 진단하기 위한 기술의 감도 그리고 특이성을 결정하고, 다른 실험 조건하에서 태아 성장 및 발달에 있는 변이를 확인하는 것을 포함할 것입니다.

여기에 설명된 프로토콜을 사용하여, 임신은 최소 침습 기술로 리브의 문턱 사슴에서 진단되고 감시될 수 있습니다. 저자에 의해 임신이 검출될 수 있던 초기 시간 점은 관찰된 짝짓기 행동 후에 대략 35 일이었습니다.
임신의 초기 단계에서, 임신은 caudal 복부에 있는 무반향 공간으로 확인된 액체 채워진 자궁을 시각화하여 진단되었습니다. 자궁 내에서, 개발 배아는 몇 식별 ...

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Transabdominal Ultrasound for Pregnancy Diagnosis in Reeves&#039; Muntjac Deer

복부 초음파는 리브스의 문턱 사슴에서 생식 상태를 평가하기위한 효과적이고 비침습적 인 수단으로 설명됩니다. 이 방법은 초기 임신 진단을 달성하고 태아 생존가능성을 평가하기 위하여 이용될 수 있습니다. 이 기술의 미래 응용 프로그램은 임신 연령의 추정과 태아 발달에 모성 질환의 효과를 포함한다.

리브스의 문작 사슴에서 임신 진단을 위한 복부 초음파

Reeves' muntjac deer (Muntiacus reevesi) are a small cervid species native to southeast Asia, and are currently being investigated as a potential model of ...

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Research

JoVE Journal

Medicine

Transabdominal Ultrasound for Pregnancy Diagnosis in Reeves' Muntjac Deer

10.2K 조회수.  Colorado State University. 복부 초음파는 리브스의 문턱 사슴에서 생식 상태를 평가하기위한 효과적이고 비침습적 인 수단으로 설명됩니다. 이 방법은 초기 임신 진단을 달성하고 태아 생존가능성을 평가하기 위하여 이용될 수 있습니다. 이 기술의 미래 응용 프로그램은 임신 연령의 추정과 태아 발달에 모성 질환의 효과를 포함한다.

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FISH for Pre-implantation Genetic Diagnosis

Pre-implantation genetic diagnosis (PGD) is an established alternative to pre-natal diagnosis, and involves selecting pre-implantation embryos from a cohort generated by assisted reproduction technology (ART). This selection may be required because of familial monogenic disease (e.g. cystic fibrosis), or because one partner carries a chromosome rearrangement (e.g. a two-way reciprocal translocation). PGD is available for couples who have had previous affected children, and/or in the case of chromosome rearrangements, recurrent miscarriages, or infertility. Oocytes aspirated following ovarian stimulation are fertilized by in vitro immersion in semen (IVF) or by intracytoplasmic injection of an individual spermatozoon (ICSI). Pre-implantation cleavage-stage embryos are biopsied, usually by the removal of a single cell on day 3 post-fertilization, and the biopsied cell is tested to establish the genetic status of the embryo. Fluorescence in situ hybridization (FISH) on the fixed nuclei of biopsied cells with target-specific DNA probes is the technique of choice to detect chromosome imbalance associated with chromosome rearrangements, and to select female embryos in families with X-linked disease for which there is no mutation-specific test. FISH has also been used to screen embryos for spontaneous chromosome aneuploidy (also known as PGS or PGD-AS) in order to try and improve the efficiency of assisted reproduction; however, the predictive value of this test using the spreading and FISH technique described here is likely to be unacceptably low in most people's hands and it is not recommended for routine clinical use. We describe the selection of suitable probes for single-cell FISH, spreading techniques for blastomere nuclei, and in situ hybridization and signal scoring, applied to PGD in a clinical setting.

This article describes the selection of suitable probes for single-cell FISH, spreading techniques for blastomere nuclei, and in situ hybridization and signal scoring, applied to pre-implantation genetic diagnosis (PGD) in a clinical setting.

사전 이식 유전자 진단 생선

Pre-implantation genetic diagnosis (PGD) is an established alternative to pre-natal diagnosis, and involves selecting pre-implantation embryos from a ...

연구

의학

Hydra, a Computer-Based Platform for Aiding Clinicians in Cardiovascular Analysis and Diagnosis

Cardiovascular diseases (CVDs) are the leading cause of death throughout the world. The total risk of developing CVD is determined by the combined effect of different cardiovascular risk factors (e.g., diabetes, raised blood pressure, unhealthy diet, tobacco use, stress, etc.) that commonly coexist and act multiplicatively. Most CVDs can be prevented by an early identification of the highest risk factors and an appropriate treatment. The stratification of cardiovascular risk factors involves a wide range of parameters and tests that specialists use in their clinical practice. In addition to cardiovascular (CV) risk stratification, ambulatory blood pressure monitoring (ABPM) also provides relevant information for diagnostic and treatment purposes. This work presents a list of protocols based on the Hydra platform, a web-based system for clinical decision support which incorporates a set of functionalities and services that are required for complete cardiovascular analysis, risk assessment, early diagnosis, treatment and monitoring of patients over time. The program includes tools for inputting and managing comprehensive patient data, organized into different checkups to track the evolution over time. It also has a risk stratification tool to compute a CV risk factor based upon several risk stratification tables of reference. Additionally, the program includes a tool that incorporates ABPM analysis and allows the extraction of valuable information by monitoring blood pressure over a specific period of time. Finally, the reporting service summarizes the most relevant information in a set of reports that aid clinicians in their clinical decision-making process.

This article presents a protocol based on Hydra &#8212; a web-based system for clinical decision support that integrates a full and detailed set of functionalities and services required by physicians for complete cardiovascular analysis, risk assessment, early diagnosis, treatment, and monitoring over time.

히드라, 심장 혈관 분석 및 진단에 임상을 방 조에 대 한 컴퓨터 기반 플랫폼

Cardiovascular diseases (CVDs) are the leading cause of death throughout the world. The total risk of developing CVD is determined by the combined effect ...

International Expert Consensus and Recommendations for Neonatal Pneumothorax Ultrasound Diagnosis and Ultrasound-guided Thoracentesis Procedure

Pneumothorax (PTX) represents accumulation of the air in the pleural space. A large or tension pneumothorax can collapse the lung and cause hemodynamic compromise, a life-threatening disorder. Traditionally, neonatal pneumothorax diagnosis has been based on clinical images, auscultation, transillumination, and chest X-ray findings. This approach may potentially lead to a delay in both diagnosis and treatment. The use of lung US in diagnosis of PTX together with US-guided thoracentesis results in earlier and more precise management. The recommendations presented in this publication are aimed at improving the application of lung US in guiding neonatal PTX diagnosis and management.

Pneumothorax is a common emergency and critical disease in newborn infants that needs rapid, clear diagnosis and timely treatment. Diagnosis and treatment based on chest X-rays are associated with delayed management and radiation damage. Lung ultrasound (US) provides useful guidance for rapid, accurate diagnosis and the precise thoracentesis of pneumothorax.

신생아 기흉 초음파 진단 및 초음파 유도 흉부 시술에 대한 국제 전문가 합의 및 권장 사항

Pneumothorax (PTX) represents accumulation of the air in the pleural space. A large or tension pneumothorax can collapse the lung and cause hemodynamic ...

Basophil Activation Test for Allergy Diagnosis

The basophil activation test (BAT) is a complementary in vitro diagnostic test that can be used in addition to clinical history, skin test (ST), and specific IgE (sIgE) determination in the evaluation of IgE-mediated allergic reactions to food, insect venom, drugs, as well as some forms of chronic urticaria. However, the role of this technique in the diagnostic algorithms is highly variable and not well determined.
BAT is based on the determination of basophil response to allergen/drug cross-linking IgE activation through the measurement of activation markers (such as CD63, CD203c) by flow cytometry. This test can be a useful and complementary tool to avoid controlled challenge tests&#160;to confirm allergy diagnosis, especially in subjects experiencing severe life-threatening reactions. In general, the performance of BAT should be considered if i) the allergen/drug produces false positive results in ST; ii) there is no allergen/drug source to use for ST or sIgE determination; iii) there is discordance between patient history and ST or sIgE determination; iv) symptoms suggest that ST may result in systemic response; v) before considering a CCT to confirm the culprit allergen/drug. The main limitations of the test are related to non-optimal sensitivity, especially in drug allergy, the need to perform the test no longer than 24 h after sample extraction, and the lack of standardization between laboratories in terms of procedures, concentrations, and cell markers.

The basophil activation test is a complementary in vitro diagnostic test for the evaluation of IgE-mediated allergic reactions based on the detection of basophil activation in the presence of a specific stimulus through the measure of activation markers by flow cytometry.

알레르기 진단을 위한 호염기구 활성화 검사

The basophil activation test (BAT) is a complementary in vitro diagnostic test that can be used in addition to clinical history, skin test (ST), and ...

Endoscopic Ultrasound-Guided Biliary Drainage: Endoscopic Ultrasound-Guided Hepaticogastrostomy in Malignant Biliary Obstruction

Patients with unresectable malignant biliary obstruction often require biliary drainage to decompress the biliary system. Endoscopic Retrograde Cholangiopancreatography (ERCP) is the primary biliary drainage method whenever possible. Percutaneous Transhepatic Biliary Drainage (PTBD) is used as a salvage method if ERCP fails. Endoscopic Ultrasound-Guided Biliary Drainage (EUS-BD) provides a feasible alternative biliary drainage method where one of the methods is EUS guided Hepaticogastrostomy (EUS-HGS). Here we describe the EUS-HGS technique in a case of unresectable malignant hilar biliary obstruction to achieve biliary drainage.
Presented here is the case of a 71-year-old female with painless jaundice and weight loss for 2 weeks. Computed Tomography (CT) imaging showed a 4 x 5 cm hilar tumor with lymphadenopathy and liver metastasis. EUS fine needle biopsy (FNB) of the lesion was consistent with cholangiocarcinoma. Her bilirubin levels were 212 &#181;mol/L (&lt;15) during presentation.
A linear echoendoscope was used to locate the left dilated intrahepatic ducts (IHD) of the liver. The segment 3 dilated IHD was identified and punctured using a 19 G needle. Contrast was used to opacify the IHDs under fluoroscopic guidance. The IHD was cannulated using a 0.025-inch guidewire. This was followed by the dilation of the fistula tract using a 6 Fr electrocautery dilator along with a 4 mm biliary balloon dilator. A partially covered metallic stent of 10 cm in length was deployed under fluoroscopic guidance. The distal part opens in the IHD and the proximal part was deployed within the working channel of the echoendoscope that subsequently released into the stomach. The patient was discharged three days after the procedure. Follow up performed in the second and fourth weeks showed that the bilirubin levels were 30 &#181;mol/L and 14 &#181;mol/L, respectively. This indicates that EUS-HGS is a safe method for biliary drainage in unresectable malignant biliary obstruction.

Endoscopic Ultrasound-Guided Biliary Drainage (EUS-BD) is an alternative method of biliary decompression in malignant biliary obstruction. Here we describe the technique of EUS guided-Hepaticogastrostomy (EUS-HGS) in a case of unresectable malignant hilar biliary obstruction.

내시경 초음파 유도 담즙 배수: 악성 담즙 방해에 내시경 초음파 유도 간 부간 위증 절제술

Patients with unresectable malignant biliary obstruction often require biliary drainage to decompress the biliary system. Endoscopic Retrograde ...

In Vitro Apical-Out Enteroid Model of Necrotizing Enterocolitis

Necrotizing enterocolitis (NEC) is a devastating disease affecting preterm infants, characterized by intestinal inflammation and necrosis. Enteroids have recently emerged as a promising system to model gastrointestinal pathologies. However, currently utilized methods for enteroid manipulation either lack access to the apical surface of the epithelium (three-dimensional [3D]) or are time-consuming and resource-intensive (two-dimensional [2D] monolayers). These methods often require additional steps, such as microinjection, for the model to become physiologically translatable. Here, we describe a physiologically relevant and inexpensive protocol for studying NEC in vitro by reversing enteroid polarity, resulting in the apical surface facing outward (apical-out). An immunofluorescent staining protocol to examine enteroid barrier integrity and junctional protein expression following exposure to tumor necrosis factor-alpha (TNF-&#945;) or lipopolysaccharide (LPS) under normoxic or hypoxic conditions is also provided. The viability of 3D apical-out enteroids exposed to normoxic or hypoxic LPS or TNF-&#945; for 24 h is also evaluated. Enteroids exposed to either LPS or TNF-&#945;, in combination with hypoxia, exhibited disruption of epithelial architecture, a loss of adherens junction protein expression, and a reduction in cell viability. This protocol describes a new apical-out NEC-in-a-dish model which presents a physiologically relevant and cost-effective platform to identify potential epithelial targets for NEC therapies and study the preterm intestinal response to therapeutics.

In Vitro Apical-Out Enteroid Model of Necrotizing Enterocolitis

This protocol describes an apical-out necrotizing enterocolitis (NEC)-in-a-dish model utilizing small intestinal enteroids with reversed polarity, allowing access to the apical surface. We provide an immunofluorescent staining protocol to detect NEC-related epithelial disruption and a method to determine the viability of apical-out enteroids subjected to the NEC-in-a-dish protocol.

체외 괴사성 장염의 Apical-Out Enteroid 모델

Necrotizing enterocolitis (NEC) is a devastating disease affecting preterm infants, characterized by intestinal inflammation and necrosis. Enteroids have ...

Point-of-Care Ultrasound: A Review of Ultrasound Parameters for Predicting Difficult Airways

Airway management remains a crucial part of perioperative care. The conventional approach to assessing potentially difficult airways emphasizes the LEMON method, which looks for and evaluates the Mallampati classification, signs of obstruction, and neck mobility. Clinical findings help predict a higher likelihood of difficult tracheal intubation, but no clinical result reliably excludes difficult intubation. Ultrasound as an adjunct to clinical examination can provide the clinician with a dynamic anatomical airway assessment, which is impossible with clinical examination alone. In the hands of anesthesiologists, ultrasound is becoming more popular in the perioperative period. This method is particularly applicable for identifying proper endotracheal tube positioning in specific patient populations, such as those who are morbidly obese and patients with head and neck cancer or trauma. The focus is on identifying the normal anatomy, correctly positioning the endotracheal tube, and refining the parameters that predict difficult intubation. Several ultrasound measurements are clinical indicators of difficult direct laryngoscopy in the literature. A meta-analysis revealed that the distance from the skin to the epiglottis (DSE) is most associated with a difficult laryngoscopy. An ultrasound of the airway could be applied in routine practice as an adjunct to the clinical examination. A full stomach, rapid sequence intubation, gross visual anatomical abnormalities, and restricted neck flexibility prevent using ultrasound to assess the airway. The airway evaluation is performed with a linear array transducer of 12-4 MHz, with the patient in the supine position, with no pillow, and with the head and neck in a neutral position. The central axis of the neck is where the ultrasound parameters are measured. These image acquisitions guide the standard ultrasound examination of the airway.

A point-of-care ultrasound (POCUS) is a simple, non-invasive, and portable tool that enables dynamic airway assessment. Several studies have attempted to determine the role of ultrasound parameters as an adjunct to clinical examination in predicting difficult laryngoscopies.

Airway management remains a crucial part of perioperative care. The conventional approach to assessing potentially difficult airways emphasizes the LEMON ...

Managing Gestational Vomiting with Ear Plaster Therapy

Ear Plaster Therapy as a Safe and Effective Treatment for Gestational Vomiting

Nausea and vomiting in pregnancy (NVP) are common symptoms that often complicate early pregnancy for many women. While clinical treatments such as fasting, fluid infusion, and nutritional support are conventionally applied to manage NVP, their effectiveness varies. However, traditional ear plaster therapy offers a promising alternative that effectively relieves symptoms and poses no known risk to the development of embryos or fetuses. This therapy is known for its ease of application, cost-effectiveness, and favorable outcomes. Previous studies have demonstrated the efficacy of combining ear plaster therapy with conventional treatments in alleviating symptoms of nausea and vomiting in pregnant women, surpassing the results achieved with conventional treatment alone. The protocol presented herein describes a method to relieve NVP using round, smooth, and hard cowherb seeds applied to specific ear points. These seeds are gently rubbed onto the surface of the ear, utilizing the principles of acupressure. By stimulating the designated ear points, this procedure aims to regulate the body's energy flow and restore balance, thereby reducing the severity and frequency of NVP. The application of cowherb seeds on specific ear points is a straightforward technique that healthcare professionals can easily implement or self-administered by pregnant women under appropriate guidance. Overall, ear plaster therapy presents a safe, effective, and economical approach for managing gestational vomiting, offering women a potential solution to alleviate their discomfort during pregnancy.

Author Spotlight: Alleviating Nausea and Vomiting in Pregnancy with Safe and Effective Auricular Acupuncture 

The presented protocol describes a traditional Chinese medicine treatment procedure known for its safety and effectiveness in managing gestational vomiting.

Nausea and vomiting in pregnancy (NVP) are common symptoms that often complicate early pregnancy for many women. While clinical treatments such as ...

Preparation for Ear Plaster Therapy to Treat Pregnancy Vomiting

Begin by preparing the ear plasters for ear plaster therapy. To do so, cut a medical adhesive tape into squares, each measuring 0.6 by 0.6 square centimeters. Then position one or two smooth cow herb seeds at the center of each tape square.Next, instruct the patient to assume a comfortable seated position. Examine the skin on the patient's ear to ensure that it is intact and free from any abnormalities before selecting the acupoints. To locate the potential acupoints, stabilize the ear oracle by pinching and lifting the ear helix backward and upward using the thumb and index finger of one hand, making sure the area is fully exposed.Then, using the sterile probe in the other hand, gently examine the patient's ear to identify sensitive pressure points near the six auricular points. The stomach or CO4, cardia or CO3, belly or AH8, shenmen or TF4, subcortex or AT4, and liver or CO12.

임신 구토를 치료하기 위한 귀 석고 요법 준비

Ear Plaster Therapy for Nausea and Vomiting in Pregnancy

To begin, ensure the patient's ear auricle area has dried after disinfecting it with 75%alcohol, Then stabilize the auricle by pinching the ear helix with the thumb and index finger of one hand and lifting it backward and upward. Next, use the forceps to pick up the prepared ear plaster and place it onto the selected acupoint in the patient's ear, such that the cow herb seeds in the center of the plaster touches the selected point. Ask for the patient's assurance that the seed placement aligns with a sensitive or sore spot.Positioning the thumb and index finger in front of and behind the auricle. Apply moderate and tolerable pressure with rhythmic, pressing and relaxing motion to stimulate the cow herb seeds at the auricular site. Continue the rhythmic press and release at each site for three to five minutes, maintaining an even pace.Monitor the patient's overall condition for 15 minutes post-treatment. Instruct the patient or their family to stimulate the seeds by rubbing the concerned area three times a day, in the morning, at midday, and in the evening. After three days, remove the ear plaster and repeat the procedure on the opposite ear, alternating treatment between both ears.Compared to the control group, the experimental group, which received ear plaster therapy, had a significantly shorter average hospital stay and also required a significantly lower time for ketone bodies to turn negative. These suggested that ear plaster therapy can effectively reduce the treatment time for gestational vomiting. Prior to treatment, there were no statistically significant differences in PUQE scores between the experimental and control groups.However, after five days of treatment, both showed a significant reduction in the scores. But the score of the experimental group was significantly lower than that of the control group.