림프부종은 치료법이 없는 만성 질환입니다. 그것은 유방암의 처리에 있는 axillary 림프절 수술 및 방사선이 있던 환자의 1/3에 영향을 미칩니다. 유효한 동물 모형을 갖는 것은 새로운 처리 전략의 기계장치 그리고 발달을 이해하는 것을 용이하게 합니다.
림프부종의 마우스 꼬리 모델은 빠른 발병으로 안정적이고 재현 할 수 있습니다. 그것은 인간 림프부종과 일치하는 조직학적 변화를 나타낸다. 절차를 시연하는 것은 내 실험실에서 박사 후 박사 학위인 Ganesh Mohan 박사가 될 것입니다.
시작하려면 8주 된 세이드 마우스를 엄격하게 배치하고 70 %의 이소 프로필 알코올로 꼬리를 준비하십시오. 캘리퍼를 사용하여 꼬리 기저에서 20mm부터 시작하는 5mm 단위로 꼬리 직경을 측정합니다. 기지에서 20밀리미터 떨어진 꼬리에 3밀리미터 의 할례 절개를 표시합니다.
수술 현미경 배율하에서, 모든 근본적인 혈관을 그대로 남겨 둔 세심한 3밀리미터 전체 두께의 피부 절제를 수행합니다. 첫 번째 절개에 3 밀리미터 단면 에 할례 전체 두께 절개 다음 진피를 통해 먼저 우수한 할례 마크를 절개. 수직 전체 두께의 수직 절개를 사용하여 두 절개를 연결한 다음, 이쑤시개의 미세 픽업을 사용하여 앞가장자리를 파악하고 아바실 평면 내에서 진피와 피상적 인 마이크로 가위가있는 정맥 내림탈에 깊이 해부합니다.
꼬리 끝에 1%이소황판 블루 피하의 0.1 밀리리터를 주입합니다. 측면 꼬리 정맥에 인접한 주입으로 인해 파란색으로 나타나는 두 림프 채널을 식별합니다. 림프액을 조심스럽게 분리하여 측면 정맥과 림프사이의 평면을 직선 미세 수술 가위로 해부합니다.
림프용기와 측면 정맥 사이에 가위 블레이드 한 개 끝을 전달하고 블레이드를 닫아 림프혈관을 변형시합니다. 완료되면, 멸균 부착 투명 주소로 꼬리 상처를 드레스. 팁 근처의 실산 마우스 꼬리에 인도시아닌 녹색 0.1 밀리리터를 피하로 투여하십시오.
실내 조명을 어둡게 한 다음 적외선 레이저 혈관 조영술 근처에 버퍼링 설정에 배치하고 라이브 이미징을 수행합니다. 꼬리 끝에 이소술판 블루를 투여 한 후 림프제는 파란색을 나타냈다. 인접한 측면 정맥이 보존되는 동안 림프제가 중단되었습니다.
림프부종 유도 후 마우스 꼬리에 있는 점진적인 팽윤 및 지속적인 지속적인 림프부종은 여기에서 도시된다. 잘린 콘 방정식에 의해 계산된 마우스 꼬리 부피는 4주차에 정점을 찍은 후 6주차까지 고원화되었고, 그 다음으로 15주차까지 점진적으로 개선되었습니다. 고해상도 레이저 반점 대비 이미징은 꼬리 혈관 의 자식의 평가를 위해 부상당한 측면 정맥과 그대로 측면 정맥을 보여주는 림프부종 꼬리 모델에서 마우스 꼬리 관류를 확인하기 위해 수행되었다.
근적외선 레이저 림프항기그래피는 수술 후 수술 부위를 넘어 수술 전 임파와 ICG 트랜지션을 시연하여 부종이 림프 기능 장애로 인한 것을 확인했습니다. 조직 나노 트랜스펙션 기술을 이용한 유전적 화물 전달의 효율은 뮤린 꼬리에 형광중하중염을 표시한 DNA를 전달함으로써 입증되었다. 마우스 꼬리 림프부종 모델과 ICG 근적외선 레이저 혈관 조영술에 대한 적응을 사용하는 것은 임상적으로 번역 가능하고 치료에 영향을 미치는 흥미로운 동물 모델입니다.
