우리는 긍정적 인 최종 만료 압력과 환기를 포함하는 우리의 오픈 가슴 접근 방식은 생체 내 심장 기능을 평가하고 분석하는 데 중요하며 베타 성기능 자극의 증가. 절차는 부하 독립적 인 심장 기능의 두 기준 매개 변수를 해결하기 위해 사용할 수 있습니다, 유전자 변형 마우스 또는 개입시 베타 아드레너기브 예비. 페달 반사에 대한 반응의 부족을 확인 한 후, 70 %에탄올로 마취 마우스의 왼쪽 뒷다리를 소독하고 왼쪽 대퇴 정맥을 노출하는 절개를합니다.
상복부 동맥과 정맥을 소터리로 폭발시다. 대퇴정맥을 더 잘 보기 위해 시력 분야는 복부를 통한 봉합사에 의해 스며들게 됩니다. 그런 다음 봉합사가 카테터 접근에 단념하여 대퇴 정맥을 장식합니다.
대퇴정맥 아래에 봉합사를 전달하고, 천추 부위에 매듭 두개골을 준비한다. 대퇴정맥을 1밀리리터 주사기에 부착된 제조된 마이크로 튜브로 구멍을 뚫고 매듭된 봉합사로 혈관 내부의 튜브를 고정시합니다. 유체 손실을 상쇄하기 위해 자동 주사기 펌프를 사용하여 0.9% 염화나트륨을 주입하고, 12.5%의 알부민을 15 마이크로리터 주입률로 보충하고, 노출된 조직을 사전 따뜻하게 0.9%의 염화나트륨으로 수화한다.
흉부에 접근하려면 흉부에 70 %에탄올로 헹구고 xiphoid 과정 바로 아래에 피부를 절개하십시오. 가슴 근육과 가슴 벽을 무뚝뚝하게 분리하고 집게를 사용하여 흉벽이 잘 수 있도록 시포이드 과정을 들어 올려 다이어프램이 완전히 보일 때까지 하십시오. 아래에서 다이어프램을 절개하여 심장 정점을 노출하고 집게를 사용하여 심낭을 조심스럽게 제거합니다.
왼쪽에 제한된 코스토절제술을 수행하고, 하류 전하 감소를 허용하기 위해 열등한 카발 정맥 아래에 봉합사를 전달합니다. 25 게이지 캐뉼라를 사용하여 심장 정점을 부드럽게 뚫고 모든 전극이 심실 내에 들어올 때까지 캐뉼라를 압력 볼륨 카테터로 교체하십시오. 그런 다음 직사각형 모양루프가 얻어질 때까지 카테터의 위치를 부드럽게 조정합니다.
압력 볼륨 루프 측정을 획득하려면 관심 있는 심장 기능 매개 변수의 온라인 분석을 수행하고 정상 상태 심장 기능이 얻어지을 때까지 기다립니다. 종료 만료 위치에서 호흡보호구를 중지하고 기준 매개 변수를 기록합니다. 3~5초 후에는 집게를 사용하여 열등한 카발 정맥 아래에 봉합사를 들어 올려 사전 로드 독립적 인 매개 변수를 얻고 인공 호흡기를 켭니다.
혈역학 파라미터가 안정화될 때까지 두 번째 폐색을 위해 30초 이상 기다립니다. 기저 조건에서 측정을 얻은 후, 주사기 펌프에 isoproterenol로드 주사기를 장착합니다. 새로운 정상 상태 심장 기능이 관찰 될 때까지 적어도 2 분 기다립니다.
종료 만료 위치에서 호흡보호구를 중지하고 기준 매개 변수를 기록하기 전에. 3~5초 후에는 열등한 카발 정맥 아래에 봉합사를 들어 올려 독립적인 매개변수를 획득하고 두 번째 폐색을 위해 30초 이상 기다립니다. 그런 다음 다음 isoproterenol 농도를 포함하는 주사기를 장착하고 기준선을 반복하고 독립적 인 매개 변수 기록을 미리 로드합니다.
병렬 전도성 교정을 수행하기 위해, 마지막 isoproterenol 용량 응답 측정 후, 대퇴 수두에 15 %의 염화 나트륨 용액로드 주사기를 연결하고, 조심스럽게 압력 볼륨 루프가 오른쪽으로 약간 이동할 때까지 고독용액의 5 마이크로 리터를 주입한다. 루프가 정상 상태로 돌아올 때까지 기다렸다가 종료 시 호흡보호구를 멈추고 15% 염화 나트륨의 10 마이크로리터 볼러스를 즉시 주입하십시오. 그런 다음 압력 볼륨 루프가 크게 확대되어 오른쪽으로 이동했는지 확인합니다.
전도대 부피를 수행하기 위해, 카테터를 제거하기 전에 고독식식염수 볼루스가 완전히 희석될 때까지 5분간 기다린 후, 21게이지 캐뉼라를 장착한 1밀리리터 주사기를 사용하여 심장 박동의 좌심실에서 적어도 600마이크로리터의 혈액을 제거하십시오. 그런 다음 알려진 볼륨의 실린더와 함께 37도 섭씨 수조에서 미리 따뜻해지는 교정 큐벳으로 혈액을 옮기고 압력 볼륨 카테터를 각 실린더에 중앙에 배치하여 전도도를 기록할 수 있도록 합니다. 이 오픈 가슴 압력 볼륨 루프 측정 방법을 사용하여 카테터가 심실 내에 올바르게 배치되면 전체 심장 주기가 직사각형 모양의 압력 볼륨 루프로 표시됩니다.
그림과 같이, systole는 두 심장 판막이 닫히는 동안 등소 수축의 단계로 시작됩니다. 심실 압력이 대동맥 압력을 초과하면 대동맥 판막이 열리고 혈액이 배출 단계에서 대동맥으로 펌핑됩니다. 그 후 대동맥 압력이 심실 압력을 초과하면 대동맥 판막이 닫히고 디아스톨이 시작됩니다.
동위 부피 완화 중에 심실 압력이 심실 압력을 초과할 때까지 심실 압력이 떨어지고 승모 판막이 열립니다. 수동 확장기 충진, 최종 확장기 압력-볼륨 관계 특징 다음 심장 주기 시작 될 때까지 일어난다. 그것은 사전 부하와 무관 한 심장 기능을 결정할 수 있기 때문에, 압력 볼륨 분석 심장 기능에 대 한 자세한 통찰력을 제공할 수 있습니다., 심장 수축.
예를 들어, 이 분석에서 이소프로테레놀은 각 측정된 심장 기능 및 심장 수축 파라미터에 상당한 영향을 미쳤다. 대조적으로, 이소프로테레놀 농도가 증가하는 반응으로 확장기 파라미터의 감소가 관찰되었다. 좌심실 내의 정확한 카테터 배치는 아티팩트 없이 재현 가능한 루프를 얻는 데 매우 중요합니다.
카테터 배치를 최적화하기 위해, 우리는 열린 가슴 접근 방식을 선호합니다. PV 루프 측정에 이어, 동칭 성 결핍증을 결정할 수 있고, 조직을 분리하여 분자 및 조직 병리학적 변화를 식별하여 치료 및 유전적 변형에 의한 것입니다. 이 기술은 정상 및 병리학 적 조건하에서 마우스 모델에서 베타-adrenergic 예비를 분석하는 방법을 포장하고 다른 자극을 테스트하기위한 템플릿으로 사용될 수있다.
