안녕하세요 여러분. 저는 칭다오대학교 공중보건학부 독물학과 부교수인 치샤오 장(Qixiao Jiang)입니다. 연구 그룹을 대신하여 심장 독성 평가 의 개발에 닭 배아를 사용하는 자산을 제시 할 것입니다.
치킨 배아는 쉬운 조작, 높은 접근성, 폐쇄 된 독립적 인 시스템, 등 세테라와 같은 여러 가지 장점을 갖는 고전적인 발달 모델입니다. 페놀 탄닌산과 같은 여러 환경 오염 물질과 협력합니다. 디젤 배기, 특히 탄소 나노 튜브의 문제.
우리는 실험실에 여러 노출 방법을 설치하지만, 더 큰 원인에 대한, 기능 평가도 일상적으로 수행됩니다. 이 비디오에서는 노출 방법 및 형태학적 기능 평가 방법에 대한 세부 사항을 보여 드리겠습니다. 관심이 있으시면 저희에게 연락주시기 바랍니다.
감사합니다. 제가 소개할 수 있는 노출 방법은 다음과 같습니다. 이제 내가 소개할 첫 번째 방법은 공기 세포 주입이며, 공기 세포에 직접 주입할 것입니다.
폴리 요오드 용액으로 계란표면을 청소하십시오. 이것은 시판되는 폴리 요오드 용액으로, 1/5 의 탈온화물로 희석됩니다. 그리고 나서, 나는 문지르지 않고 티슈 페이퍼로 달걀 껍질을 건조시다.
스크러빙은 쉘 바깥쪽에 보호층 코팅을 깨뜨리기 때문에 중요합니다. 어두운 방에있는 모든 계란을 청소하고 연필로 공기 셀을 표시합니다. 껍질에 균열이 있는 계란을 제외합니다.
또한 측면에 공기 세포와 계란을 제외. 무딘 팁이 있는 경우 정상적으로 부화할 가능성이 매우 낮습니다. 공기 세포 영역뿐만 아니라 금속 프로브를 75 % 알코올로 소독합니다.
말리기 닦은 다음 프로브로 공기 셀 영역의 중앙에 작은 구멍을 뚫습니다. 프로브를 공기 셀 깊숙이 고정시키지 마십시오. 대신 프로브 끝만 으로 쉘을 끊습니다.
구멍이 아직 충분히 크지 않은 경우 팁을 삽입할 수 있을 만큼 충분히 커질 때까지 기존 구멍 부근에서 셸을 다시 끊습니다. 내부 멤브레인에 닿는 팁으로 파이펫 팁을 구멍에 삽입합니다. 천천히, 혼합물을 주입하고 적어도 10 초 동안 거기에 누를.
이것은 분배된 기름이 완전히 분배될 수 있도록 하기 위한 것입니다. 그런 다음 팁을 제거합니다. 이제 브러시와 녹은 파라핀 한 방울로 구멍을 밀봉하십시오.
녹인 파라핀을 내부 메모리에 떨어뜨리지 않도록 주의하십시오. 일단 밀봉되면, 그들이 원하는 배아 단계에 도달 할 때까지 인큐베이터에 계란을 배치합니다. 둘째, 내가 소개하려고하는 방법은 마이크로 주입입니다.
우선, 계란은 공기 주입 섹션에 설명된 대로 세척하고 처리되어야 합니다. 이 절차는 멸균 된 후드에서 수행해야합니다. 에어 셀 영역과 아세톤으로 계측기 살균.
금속 프로브와 함께 공기 전지 영역의 중심에 작은 구멍을 드릴. 프로브를 공기 셀에 깊이 고정시키지 마십시오, 또는 내부 메모리가 손상될 수 있습니다. 그런 다음 동일한 프로세스를 사용하여 직경이 약 2밀리미터가 될 때까지 구멍을 조심스럽게 확대합니다.
이렇게 하면 내부 메모리의 비율 확인을 허용할 수 있습니다. 그런 다음 용액을 마이크로 인젝터에 적재하고 구멍을 통해 바늘을 내부 막에 조심스럽게 삽입하여 약 3 밀리미터를 합니다. 용액을 부드럽게 분배한 다음 바늘을 제거합니다.
바늘을 가능한 한 수직으로 유지하십시오. 작은 테이프조각으로 구멍을 감습니다. 구멍은 구멍을 완전히 덮어 후속 배양 중에 배아 탈수와 사망을 방지합니다.
내가 소개할 세 번째 방법은 공기 세포 주입입니다. 공기 셀에 가스 오염 물질을 주입하는 곳. 공기 세포 주입 섹션에 설명 된 대로 계란을 청소 하 고 처리 합니다.
그리고 배아 일 17까지 계란을 읽을 수 있습니다. 17일 배아일에 계란을 처리하여 공기 세포 영역을 표시합니다. 배아 일 18, 인큐베이터에서 계란을 꺼내, 아세톤으로 공기 세포 영역과 악기를 살균.
그리고 조심스럽게 공기 셀의 양면에 두 개의 작은 구멍을 드릴. 하나는 가스 또는 에어로졸의 주입입니다. 다른 하나는 공기를 확장하는 것입니다.
구멍의 크기를 주의 깊게 제어하여 주입 구멍의 측면이 카테터 바늘을 삽입하기에 충분하도록, 팽창 구멍의 직경은 조금 커야한다. 직경약 1mm. 이제 이것은 우리가 대상 가스 또는 에어로졸을 보유하는 데 사용하는 샘플 가방입니다.
당신은 당신이 사용하는 모든 장치로 대체 할 수 있습니다. 가스 또는 에어로졸 10mL를 주사기에 부드럽게 붓습니다. 그리고, 주사기를 카테터 바늘에 조심스럽게 부착하여 내부 바늘리모컨을 리모컨으로 부착하여 부드러워집니다.
이 카테터 바늘을 주입 구멍에 부드럽게 삽입합니다. 일단 거기에, 카테터 바늘에 대 한 압력을 적용. 이것은 사출 부위에서 누출을 최소화하기 위한 것이다.
또 다른 손가락은 주입 확인을 위해 추방 구멍으로 주위에 넣을 수 있습니다. 주입을 부드럽게 하면 추방 구멍에서 공기 흐름을 쉽게 느낄 수 있어야 합니다. 즉, 추방되는 공기 셀의 원래 공기입니다.
주입이 완료되면 즉시 두 구멍을 밀봉하십시오. 이 테이프와 인큐베이터에 계란을 반환합니다. 엔드포인트 평가 프로세스를 소개할 수 있습니다.
완전히 펜토바르비탈 33 mg / kg으로 동물을 마취. 오픈에 의해 테스트 된 IP 사사. 그런 다음 수술 테이블에 닭을 놓습니다.
복부 부위와 에탄올로 전극을 살균합니다. 그런 다음 복부 서브의 양면에서 2개의 바늘 전극을 지속적으로 삽입합니다. 바늘이 피부를 조금 들어 올려 복부 구멍에 들어가지 않도록하십시오.
그리고 거기에서 바늘을 삽입합니다. 삽입되면 가슴 구멍의 측면에 도달 할 때까지 조심스럽게 바늘을 앞으로 밀어 넣습니다. 바늘이 몸 깊숙이 들어가거나 피부에서 튀어 나오지 않도록 하십시오.
그런 다음 심전도 기기로 측정합니다. EKG가 가능한 다른 세미나리 악기도 사용할 수 있습니다. 이것은 우리의 두 번째 엔드 포인트 평가 방법은 Motrin에 대 한 지도.
이것은 HME의 방법으로 마음의 단면입니다. 이것은 우리가 측정 할 수있는 올바른 심실입니다. 이를 위해 우리는 두 명의 통치자를 사용합니다.
통치자 1, 그리고 통치자 2. 이제 눈금자를 화면에 복사한 다음 적절한 크기로 크기를 조정한 다음 회전합니다. 그리고 우리는 수평 선의 두 끝이 3 오른쪽 심실 벽의 2 끝에 놓여 있도록 이동합니다.
그리고 이제 우리는 우리의 세 개의 오른쪽 심실 벽을 가로 질러 가는 일곱 측정 라인을 가지고있다. 이제 보조 눈금자를 그림에 복사합니다. 우리는 또한 그것을 조금 크기를 조정하 고 회전 하 고 모두 배치 될 수 있도록 교체.
이 수평 선은 오른쪽 심실의 외벽과 평행하게 이동합니다. 그리고 수직은 통치자의 흰색 물질 선이 내부 벽이나 오른쪽 심실을 만나는 지점을 가로 질러 갈 것입니다. 그리고 나서 J.We가 시료당 7회 반복하여 오른쪽 심실을 대표할 수 있도록 나중에 측정 점을 측정할 수 있습니다.
나는 당신에게 현재 결과의 요약을 보여 줄 것이다. 이것은 인큐베이션 전에 계란에 PFOA 주입, 그리고 주사의 그 증가와 함께 혈청에서 혈청 농도 LPF 효과적으로 증가 볼 수 있습니다. 데모에 따라, 마이크로 주입의 효과.
A가 제어되고 B가 큰 형광 q 단백질로 발현되는 곳을 볼 수 있습니다. 당신은 강한 형광을 볼 수 있습니다. 그리고 이것은 상피 주입의 효과에 대한 데모입니다.
당신은 주입과 함께, 극적인 광섬유 변화가 심근 조직에서 관찰된 것을 볼 수 있습니다. 그래. 또한 부화 닭의 R-R 간격0, 1, 2 주 것을 볼 수 있습니다. 또한 디젤 배기가스주입 후 크게 변경되었습니다.
이 메서드를 고려했음을 나타냅니다. 여기서, 당신은 또한이 예에서 상피 주입의 효과를 볼 수 있습니다. 디젤 배기가스가 주입된 에어로졸이후에 심장의 오른쪽 심실이 효과적으로 증가한다는 것을 알 수 있습니다.
그리고 물론, 여기에 우리는 조직 학적 방법을 사용하고 있습니다. 우리는 단지 당신에게 보여줍니다. 이것은 매우 효과적입니다. 그래.
이것은 내가 당신에게 제시 할 모든 방법입니다. 나는 이것이 발달 독성학에 있는 강력한 연구 공구로 닭 배아를 가진 그밖 사람들의 일을 촉진할 수 있기를 바랍니다. 즐거운 하루 보내세요.
