심장 판막 이식은 항응고에 대한 필요없이 체세포 성장이 가능한 내구성있는 심장 판막을 제공 할 수있는 잠재력을 지닌 새로운 유형의 이식으로 제안됩니다. 이 기술은 심장 판막 이식 면역 생물학을 연구하기위한 이전 방법보다 실용적이고 간단합니다. 쥐를 마취 한 후 해부 가위를 사용하여 xiphoid에서 흉골 노치까지 피부를 절개하십시오.
그리고 심장에 대한 최적의 접근이 달성 될 때까지 흉골에 측면으로 양쪽의 갈비뼈를 절단하여 흉골 절제술을 수행하십시오. 왼쪽 아트리움에 헤파린을 주입하십시오. 절제 후 흉선을 소비하여 위대한 혈관의 시각화를 향상시킵니다.
그런 다음 상승하는 대동맥으로 블록에있는 심장을 무명근 동맥의 수준까지 제거하십시오. 기증자 심장을 cardiectomy 직후 멸균 된 Petri 접시에 넣은 후 얼음처럼 차가운 냉장 저장 버퍼에서 포셉과 Vannas Spring 가위를 사용하여 대동맥 뿌리 만 대동맥 판막에 근접한 한 밀리미터 심실 커프가있는 상태로 남아있을 때까지 심장을 해부하십시오. 대동맥 밸브를 열려면 왼쪽과 비 관상 동맥 부비동 사이의 Valsalva의 부비동을 열어 세 개의 전단지를 모두 시각화하기 위해 세로 컷을 만듭니다.
각 대동맥 판막 전단지를 개별적으로 소비하려면 무딘 포셉을 사용하여 전단지의 가장자리를 잡고 Vannas Spring 가위를 사용하여 한 컴미스에서 환부로 자른 다음 컴펌으로 잘라 전단지를 소비하십시오. 적출된 전단지를 수용자 쥐에게 이식할 준비가 될 때까지 얼음처럼 차가운 저장 완충용액에 보관하되, 냉장 보관 후 네 시간 이내에 모든 전단지를 이식한다. 수용자 쥐가 완전히 마취되면 가열 패드로 수술 내내 체온을 섭씨 36 ~ 38도까지 유지하십시오.
다음으로, 쥐를 왼쪽 신장에 접근하기 위해 오른쪽 측면 재사용 위치에 놓습니다. 수술 전에 수혜자 쥐에게 부프레노르핀을 피하로 투여하십시오. 그리고 가위를 사용하여 옆구리의 피부를 세로 방향으로 한 인치 동안 절개하십시오.
마찬가지로, 근본적인 복벽을 절개하십시오. 엄지와 검지를 사용하여 곡선 포셉을 사용하는 동안 등받이와 심실로 가벼운 압력을 가하십시오. 복부와 피부 절개를 통해 신장의 꼬리 기둥을 들어 올립니다.
유사하게 신장의 두개골 끝을 외부화하십시오. 대안으로, 신장은 주변 신장 지방을 파악하고 가벼운 긴장으로 위쪽으로 당겨서 외부화 될 수 있습니다. 일단 외부화되면, 신장에 면봉 된 따뜻한 식염수로 신장을 촉촉하게 유지하십시오.
피막 하 포켓을 만들려면 한 세트의 무딘 포셉을 사용하여 신장 캡슐에 가벼운 압력을 가하여 신장 캡슐을 기본 실질과 명확하게 구별 할 수 있도록하십시오. 동시에 다른 무딘 포셉 세트를 사용하여 캡슐을 조심스럽게 잡고 부드럽게 위쪽으로 당겨 캡슐에 구멍을 만듭니다. 무딘 포셉으로 대동맥 판막 전단지를 수용하기 위해 약 두 밀리미터의 공간이 생성 될 때까지 절개를 연장하십시오.
밸브 전단지보다 약간 큰 얕은 피막 하부 포켓을 개발하면서 한 세트의 포셉으로 절개 가장자리를 들어 올리고 신장 캡슐 아래에서 무딘 프로브를 전진시킵니다. 가장자리 섬유질 캡슐을 들어 올려 대동맥 전단지를 무딘 포셉으로 피막 하부 주머니로 들어올려 회수 된 대동맥 판막의 이식을 시작하십시오. 절개와 신장 캡슐을 열어 둘 수 있습니다.
절개 가장자리에 적용된 역견인을 사용하여 신장을 해부학 적 위치로 부드럽게 밀어 넣으십시오. 실행 멸균 수술 봉합사로 복부 절개를 닫고 스테이플로 피부를 닫습니다. 수술 후, 쥐를 음식과 물에 접근 할 수있는 가열 패드의 깨끗한 케이지에 넣으십시오.
필요한 경우, 통증을 완화하기 위해 여섯 시간에서 열두 시간마다 수혜자 쥐에게 부프레노르핀을 투여한다. 일상적인 상처 치유와 통증이나 고통의 징후를 평가하기 위해 동물을 매일 모니터링하십시오. 그리고 수술 후 칠일에서 열흘 후에 스테이플을 제거한다.
대표적인 이미지는 구현을 위한 신장 캡슐 아래의 대동맥 판막 전단지의 위치를 보여준다. 그리고 수용자 랫트 내에서 삼일, 일곱, 이십팔일 후, 이식된 조직의 위치 확인 및 회수가 쉬워졌다. 대동맥 판막 전단지는 syngeneic 동물에서 이종 주제 이식 후 그들의 기본 아키텍처를 유지했습니다.
알레르기성 이식에서의 면역 반응을 비교하기 위한 기준선으로서 이 모델의 유용성을 입증한다. 헤마톡실린과 에오신 염색을 이용한 조직학은 칠일 후 합성이식의 판막 전단지가 부종성 부종의 징후 없이 구조적으로 손상되지 않았음을 밝혀냈다. 이식 후 밸브 전단지의 구조적 완전성은 평활근 액틴 및 CD31에 대한 면역조직화학에 의해 추가로 확인되었다.
대동맥 판막 전단지는 매우 섬세합니다. 밸브를 손상시키지 않고 매우 조심스럽게 처리하는 것이 중요합니다. 신장 피막 하, 심장 판막 이식은 이종 토픽 심장 판막 이식을 단순화합니다.
이것은 제한된 미세 수술 능력을 가진 연구자들이 심장 판막 이식의 면역 생물학을 탐구 할 수있게 해줄 것입니다.
