Efficient Gene Transfer in Chick Retinas for Primary Cell Culture Studies: An <em>Ex-ovo</em> Electroporation Approach

The cone photoreceptor-enriched cultures derived from embryonic chick retinas have become an indispensable tool for researchers around the world studying ...

The Johns Hopkins University School of Medicine

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Lens regeneration in the adult newt is a classic example of replacing a lost organ by the process of transdifferentiation. After lens removal, the pigmented epithelial cells of the dorsal iris proliferate and dedifferentiate to form a lens vesicle, which subsequently differentiates to form a new lens. In searching for factors that control this remarkable process, we investigated the expression and role of hedgehog pathway members. These molecules are known to affect retina and pigment epithelium morphogenesis and have been recently shown to be involved in repair processes. Here we show that Shh, Ihh, ptc-1, and ptc-2 are expressed during lens regeneration. The expression of Shh and Ihh is quite unique since these genes have never been detected in lens. Interestingly, both Shh and Ihh are only expressed in the regenerating and developing lens, but not in the intact lens. Interfering with the hedgehog pathway results in considerable inhibition of the process of lens regeneration, including decreased cell proliferation as well as interference with lens fiber differentiation in the regenerating lens vesicle. Down-regulation of ptc-1 was also observed when inhibiting the pathway. These results provide the first evidence of a novel role for the hedgehog pathway in specific regulation of the regenerating lens.

A novel role of the hedgehog pathway in lens regeneration.

La r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration de Lens, en le triton adulte est un exemple classique de remplacer un organe perdu par le processus de transdiff&#xE9;renciation. Apr&#xE8;s enl&#xE8;vement lentille, les cellules &#xE9;pith&#xE9;liales pigment&#xE9;es de l&#x26;#39;iris dorsale prolif&#xE9;rer et d&#xE9;diff&#xE9;rencient pour former une v&#xE9;sicule lentille, qui diff&#xE9;rencie la suite pour former une nouvelle lentille. Dans la recherche de facteurs qui contr&#xF4;lent ce processus remarquable, nous avons &#xE9;tudi&#xE9; l&#x26;#39;expression et le r&#xF4;le des membres de la voie hedgehog. Ces mol&#xE9;cules sont connues pour affecter la r&#xE9;tine et de la morphogen&#xE8;se et de l&#x26;#39;&#xE9;pith&#xE9;lium pigmentaire ont &#xE9;t&#xE9; r&#xE9;cemment montr&#xE9; d&#x26;#39;&#xEA;tre impliqu&#xE9;s dans les processus de r&#xE9;paration. Ici, nous montrons que Shh, Ihh, ptc-1, et PTC-2 sont exprim&#xE9;s lors de la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration de l&#x26;#39;objectif. L&#x26;#39;expression de Shh et Ihh est tout &#xE0; fait unique, car ces g&#xE8;nes n&#x26;#39;ont jamais &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;tect&#xE9; dans la lentille. Int&#xE9;ressant, &#xE0; la fois Shh et Ihh ne sont exprim&#xE9;s dans la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration et le d&#xE9;veloppement lentille, mais pas dans la lentille intacte. Interf&#xE9;rer avec les r&#xE9;sultats de l&#x26;#39;inhibition de la voie hedgehog consid&#xE9;rable du processus de r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration objectif, y compris la prolif&#xE9;ration des cellules a diminu&#xE9; ainsi que les interf&#xE9;rences avec diff&#xE9;renciation des fibres optique dans la v&#xE9;sicule cristallinienne r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration. Down-r&#xE9;gulation de ptc-1 a &#xE9;galement &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;e lors de l&#x26;#39;inhibition de la voie. Ces r&#xE9;sultats fournissent la premi&#xE8;re preuve d&#x26;#39;un nouveau r&#xF4;le pour la voie hedgehog d&#x26;#39;une r&#xE9;glementation sp&#xE9;cifique de la lentille de r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration.

Un nouveau r&#xF4;le de la voie Hedgehog &#xE0; Lens R&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration

Eine neuartige Rolle der Hedgehog-Signalweg in Lens Regeneration.

Rigenerazione lente nel Tritone adulto &egrave; un classico esempio di sostituzione di un organo perduto dal processo di transdifferenziazione. Dopo la rimozione della lente, le cellule epiteliali pigmentate dell&#39;iride dorsale proliferano e dedifferentiate per formare una vescicola lente, che successivamente si differenzia per formare un nuovo obiettivo. Nella ricerca di fattori che controllano questo processo straordinario, abbiamo studiato l&#39;espressione e il ruolo dei membri del pathway hedgehog. Queste molecole sono noti per influire sulla retina e pigmento morfogenesi dell&#39;epitelio e hanno recentemente dimostrato di essere coinvolti nei processi di riparazione. Qui vi mostriamo che Shh, Ihh, ptc-1, e 2 ptc sono espressi durante la rigenerazione lente. L&#39;espressione di Shh e Ihh &egrave; abbastanza unica poich&eacute; questi geni non sono stati mai rilevati nella lente. &Egrave; interessante notare che, sia Shh e Ihh solo sono espressi nella lente rigenerante e in via di sviluppo, ma non nella lente intatta. Interferire con i risultati del pathway hedgehog in considerevole inibizione del processo di rigenerazione lente, tra cui la proliferazione cellulare &egrave; diminuito cos&igrave; come interferenza con la differenziazione di fibra ottica nella vescicola lente rigenerante. Down-regulation di ptc-1 &egrave; stato osservato anche quando inibendo il pathway. Questi risultati forniscono la prima prova di un nuovo ruolo per il pathway hedgehog nel regolamento specifico della lente rigenerante.

Un romanzo ruolo del percorso hedgehog in rigenerazione lente.

&#x5927;&#x4EBA;&#x306E;&#x30A4;&#x30E2;&#x30EA;&#x306E;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x518D;&#x751F;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x904E;&#x7A0B;&#x3067;&#x5931;&#x308F;&#x308C;&#x305F;&#x81D3;&#x5668;&#x3092;&#x4EA4;&#x63DB;&#x3059;&#x308B;&#x5178;&#x578B;&#x7684;&#x306A;&#x4F8B;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x3092;&#x9664;&#x53BB;&#x3057;&#x305F;&#x5F8C;&#x3001;&#x80CC;&#x5074;&#x306E;&#x8679;&#x5F69;&#x306E;&#x8272;&#x7D20;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x5897;&#x6B96;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x3001;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x533A;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x5C0F;&#x80DE;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3057;&#x3001;&#x8131;&#x5206;&#x5316;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x9A5A;&#x304F;&#x3079;&#x304D;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x63A2;&#x7D22;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30D8;&#x30C3;&#x30B8;&#x30DB;&#x30C3;&#x30B0;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3068;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x306F;&#x7DB2;&#x819C;&#x3068;&#x8272;&#x7D20;&#x4E0A;&#x76AE;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30FC;&#x30C3;&#x3001;IHH&#x3001;PTC-1&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;PTC-2&#x306F;&#x3001;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x4E2D;&#x306B;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x3067;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x306E;&#x3067;&#x3001;Shh&#x306E;&#x3068;IHH&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x8208;&#x5473;&#x6DF1;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;SHH&#x3068;IHH&#x4E21;&#x65B9;&#x304C;&#x552F;&#x4E00;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x3068;&#x958B;&#x767A;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x7121;&#x50B7;&#x306E;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x3067;&#x8868;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x518D;&#x751F;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6C34;&#x6676;&#x4F53;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x3068;&#x306E;&#x5E72;&#x6E09;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x518D;&#x751F;&#x904E;&#x7A0B;&#x306E;&#x304B;&#x306A;&#x308A;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30D8;&#x30C3;&#x30B8;&#x30DB;&#x30C3;&#x30B0;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306B;&#x5E72;&#x6E09;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x6642;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x7D4C;&#x8DEF;PTC-1&#x306E;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x304C;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x518D;&#x751F;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x306E;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x306A;&#x898F;&#x5236;&#x306E;&#x30D8;&#x30C3;&#x30B8;&#x30DB;&#x30C3;&#x30B0;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

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&#xC131;&#xC778; &#xB274; &#xD2B8;&#xC5D0; &#xB80C;&#xC988; &#xC7AC;&#xC0DD; transdifferentiation &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC190;&#xC2E4; &#xB41C; &#xC624;&#xB974;&#xAC04;&#xC744; &#xAD50;&#xCCB4;&#xC758; &#xC804;&#xD615;&#xC801;&#xC778; &#xC608;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB80C;&#xC988; &#xC81C;&#xAC70; &#xD6C4; &#xB4F1; &#xD64D; &#xCC44; &#xC548;&#xB8CC; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD; &#xBC0F; &#xD615;&#xC131; &#xC774;&#xD6C4;&#xC5D0; &#xC0C8; &#xB80C;&#xC988;&#xB97C; &#xD615;&#xC131; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD558;&#xC5EC; &#xBD84;&#xD654; &#xB80C;&#xC988; &#xAE30; dedifferentiate. &#xC774; &#xB180;&#xB77C;&#xC6B4; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xAC80;&#xC0C9;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC2DD;&#xACFC; &#xACE0;&#xC2B4;&#xB3C4;&#xCE58; &#xACBD;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560; &#xC870;&#xC0AC;. &#xC774; &#xBD84;&#xC790;&#xB294; &#xB9DD;&#xB9C9; &#xBC0F; &#xC548;&#xB8CC; &#xC0C1;&#xD53C; morphogenesis &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xCD5C;&#xADFC; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC26C;&#xC774; &#xC787;, Ihh, ptc-1, &#xD45C;&#xC2DC; &#xBC0F; ptc 2 &#xB80C;&#xC988; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC26C;&#xC774; &#xC787; &#xACE0; Ihh &#xD45C;&#xD604; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0;&#xC774; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xB80C;&#xC988;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB41C; &#xC801;&#xC774; &#xAF64; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD765;&#xBBF8;&#xB86D;&#xAC8C;&#xB3C4;, &#xC26C;&#xC774; &#xC787; &#xACE0; Ihh &#xADF8;&#xB300;&#xB85C; &#xB80C;&#xC988;&#xC5D0;&#xB9CC; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xBC0F; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB80C;&#xC988; &#xD45C;&#xC2DC;&#xB9CC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC7AC;&#xC0DD; &#xB80C;&#xC988; &#xAE30;&#xC5D0; &#xAC10;&#xC18C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC04;&#xC12D; &#xB80C;&#xC988; &#xC12C;&#xC720; &#xAC10; &#xBCC4; &#xBC95;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD55C; &#xB80C;&#xC988; &#xC911;&#xC0DD;&#xC758; &#xACFC;&#xC815;&#xC758; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xACE0;&#xC2B4;&#xB3C4;&#xCE58; &#xD1B5;&#xB85C; &#xACB0;&#xACFC; &#xBC29;&#xD574;. Ptc 1 &#xB2E4;&#xC6B4; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158; &#xACBD;&#xB85C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xB80C;&#xC988;&#xC758; &#xD2B9;&#xC815; &#xADDC;&#xC815;&#xC5D0; &#xACE0;&#xC2B4;&#xB3C4;&#xCE58; &#xD1B5;&#xB85C; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC5ED;&#xD560;&#xC758; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB80C;&#xC988; &#xC911;&#xC0DD;&#xC5D0; &#xACE0;&#xC2B4;&#xB3C4;&#xCE58; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC5ED;&#xD560;.

La regeneraci&#xF3;n de la lente en el trit&#xF3;n adulto es un ejemplo cl&#xE1;sico de la sustituci&#xF3;n de un &#xF3;rgano perdido por el proceso de transdiferenciaci&#xF3;n. Despu&#xE9;s de retirar la lente, las c&#xE9;lulas epiteliales pigmentadas del iris dorsal proliferar y dedifferentiate para formar una ves&#xED;cula del cristalino, que posteriormente se diferencia para formar una nueva lente. En la b&#xFA;squeda de factores que controlan este proceso extraordinario, se determin&#xF3; la expresi&#xF3;n y el papel de miembros de la v&#xED;a Hedgehog. Estas mol&#xE9;culas se sabe que afectan a la retina y el epitelio pigmentario de la morfog&#xE9;nesis y se han demostrado recientemente para participar en los procesos de reparaci&#xF3;n. Aqu&#xED; nos muestran que Shh, Ihh, PTC-1, y 2-PTC se expresan durante la regeneraci&#xF3;n de la lente. La expresi&#xF3;n de Shh y Ihh es &#xFA;nico ya que estos genes no se han detectado en la lente. Curiosamente, tanto Shh y Ihh s&#xF3;lo se expresan en la regeneraci&#xF3;n y el desarrollo de la lente, pero no en la lente intacta. Interferir con los resultados v&#xED;a Hedgehog en inhibici&#xF3;n considerable del proceso de regeneraci&#xF3;n lente, incluyendo la proliferaci&#xF3;n celular disminuy&#xF3; as&#xED; como la interferencia con la diferenciaci&#xF3;n lente de fibra en la ves&#xED;cula lente regeneraci&#xF3;n. Down-regulaci&#xF3;n de PTC-1 tambi&#xE9;n se observ&#xF3; cuando la inhibici&#xF3;n de la v&#xED;a. Estos resultados proporcionan la primera evidencia de un nuevo papel para la v&#xED;a de Hedgehog en la regulaci&#xF3;n espec&#xED;fica de la lente de la regeneraci&#xF3;n.

Un nuevo papel de la v&#xED;a Hedgehog en Lens Regeneraci&#xF3;n

Tissue regeneration will soon become an avenue for repair of damaged or diseased tissues as stem cell niches have been found in almost every organ of the vertebrate body including the CNS. In addition, different animals display an array of regenerative capabilities that are currently being researched to dissect the molecular mechanisms involved. This review concentrates on the different ways in which CNS tissues such as brain, spinal cord and retina can regenerate or display neurogenic potential and how these abilities are modulated by morphogens.

CNS regeneration: a morphogen's tale.

&#x6210;&#x4EBA;&#x877E;&#x955C;&#x5934;&#x518D;&#x751F;&#x662F;&#x5982;&#x4F55;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5FE0;&#x5B9E;&#x5730;&#x91CD;&#x65B0;&#x751F;&#x6210;&#x5B8C;&#x6574;&#x7684;&#x5668;&#x5B98;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5178;&#x578B;&#x7684;&#x4F8B;&#x5B50;&#x3002;&#x6676;&#x72B6;&#x4F53;&#x6458;&#x9664;&#x540E;&#x7684;&#x80CC;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x7684;&#x8179;&#x4FA7;&#x3001; &#x8679;&#x819C;&#x8272;&#x7D20;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE; dedifferentiate&#xFF0C;&#x7136;&#x540E;&#x533A;&#x5206;&#x5F00;&#x6765;&#xFF0C;&#x5F62;&#x6210;&#x4E00;&#x4E2A;&#x65B0;&#x7684;&#x955C;&#x5934;&#x3002;&#x4E86;&#x89E3;&#x8FD9;&#x4E00;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x5982;&#x4F55;&#x89C4;&#x7BA1;&#x53EF;&#x80FD;&#x63D0;&#x4F9B;&#x6709;&#x5173;&#x9AD8;&#x7B49;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x4E2D;&#x4E3A;&#x4EC0;&#x4E48;&#x6CA1;&#x6709;&#x51FA;&#x73B0;&#x955C;&#x5934;&#x518D;&#x751F;&#x7EBF;&#x7D22;&#x3002;&#x516D; 3 &#x57FA;&#x56E0;&#x548C;&#x5927;&#x540C; 6 &#x79F0;&#x4E3A;&#x80DA;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5F02;&#x4F4D;&#x7684;&#x955C;&#x5934;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x4E86;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x9AA8;&#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x751F;&#x86CB;&#x767D; (BMP) &#x901A;&#x8DEF;&#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#x80CC;&#x8179;&#x4FA7;&#x80DA;&#x80CE;&#xFF0C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#xFF0C;&#x4FC3;&#x4F7F;&#x6676;&#x72B6;&#x4F53;&#x518D;&#x751F;&#x4E3A;&#x4E2D;&#x8F74;&#x7684;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x7684;&#x6210;&#x5458;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A;&#x955C;&#x5934;&#x53EF;&#x4EE5;&#x518D;&#x751F;&#x4ECE;&#x8179;&#x4FA7;&#x8679;&#x819C;&#xFF0C;BMP &#x901A;&#x8DEF;&#x6291;&#x5236;&#x548C;&#x8679;&#x819C;&#x662F;&#x516D; 3 &#x8F6C;&#x67D3;&#x548C;&#x7EF4;&#x7532;&#x9178;&#x6CBB;&#x7597;&#x65F6;&#x3002;&#x5728;&#x5B8C;&#x597D;&#x7684;&#x9E22;&#x5C3E;&#x82B1;&#xFF0C;&#x516D; 3 &#x8868;&#x793A;&#x5728;&#x80CC;&#x8679;&#x819C;&#x6BD4;&#x8179;&#x4FA7;&#x4E2D;&#x8F83;&#x9AD8;&#x7684;&#x7EA7;&#x522B;&#x3002;&#x5728;&#x518D;&#x751F;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x53EA;&#x6709;&#x5728;&#x80CC;&#x8679;&#x819C;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x4F1A;&#x663E;&#x8457;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x589E;&#x52A0;&#x770B;&#x5230;&#x5728;&#x8179;&#x4FA7;&#x9E22;&#x5C3E;&#x82B1;&#x53EA;&#x5F53;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x88AB;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5230; transdifferentiate &#x7531;&#x516D;&#x4E2A; 3 &#x548C;&#x7EF4;&#x7532;&#x9178;&#x6216;&#x9AA8;&#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x751F;&#x86CB;&#x767D;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E; noncompetent &#x6210;&#x4EBA;&#x4F53;&#x5185;&#xFF0C;&#x624D;&#x80FD;&#x5B9E;&#x73B0;&#x955C;&#x5934;&#x518D;&#x751F;&#x548C;&#x6B64;&#x518D;&#x751F;&#x53D1;&#x751F;&#x901A;&#x8FC7;&#x6BD4;&#x80CC;&#x955C;&#x5934;&#x518D;&#x751F;&#x7279;&#x5B9A;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x66F4;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8C03;&#x63A7;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

&#x9AA8;&#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x751F;&#x86CB;&#x767D;&#x6291;&#x5236;&#x9A71;&#x52A8;&#x8C03;&#x8282;&#x516D;-3 &#x662F;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x877E;&#x8788;&#x955C;&#x5934;&#x518D;&#x751F;&#x7684;&#x57FA;&#x7840;&#x3002;

Lens regeneration in adult newts is a classic example of how cells can faithfully regenerate a complete organ through the process of transdifferentiation. After lens removal, the pigment epithelial cells of the dorsal, but not the ventral, iris dedifferentiate and then differentiate to form a new lens. Understanding how this process is regulated might provide clues about why lens regeneration does not occur in higher vertebrates. The genes six-3 and pax-6 are known to induce ectopic lenses during embryogenesis. Here we tested these genes, as well as members of the bone morphogenetic protein (BMP) pathway that regulate establishment of the dorsal-ventral axis in embryos, for their ability to induce lens regeneration. We show that the lens can be regenerated from the ventral iris when the BMP pathway is inhibited and when the iris is transfected with six-3 and treated with retinoic acid. In intact irises, six-3 is expressed at higher levels in the ventral than in the dorsal iris. During regeneration, however, only expression in the dorsal iris is significantly increased. Such an increase is seen in ventral irises only when they are induced to transdifferentiate by six-3 and retinoic acid or by BMP inhibitors. These data suggest that lens regeneration can be achieved in noncompetent adult tissues and that this regeneration occurs through a gene regulatory mechanism that is more complex than the dorsal expression of lens regeneration-specific genes.

BMP inhibition-driven regulation of six-3 underlies induction of newt lens regeneration.

La r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration de Lens, en tritons adultes est un exemple classique de la fa&#xE7;on dont les cellules peuvent se r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;rer un organe fid&#xE8;lement compl&#xE8;te par l&#x26;#39;interm&#xE9;diaire du processus de transdiff&#xE9;renciation. Apr&#xE8;s le retrait lentille, les cellules de l&#x26;#39;&#xE9;pith&#xE9;lium pigmentaire de la dorsale, mais pas la face ventrale, de l&#x26;#39;iris d&#xE9;diff&#xE9;rencier puis se diff&#xE9;rencient pour former un nouvel objectif. Comprendre comment ce processus est r&#xE9;gul&#xE9; pourrait fournir des indices sur les raisons de la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration lentille ne se produit pas chez les vert&#xE9;br&#xE9;s sup&#xE9;rieurs. Les g&#xE8;nes de six 3 et Pax-6 sont connus pour induire des lentilles ectopiques cours de l&#x26;#39;embryogen&#xE8;se. Ici, nous avons test&#xE9; ces g&#xE8;nes, ainsi que les membres de la prot&#xE9;ine morphog&#xE9;n&#xE9;tique osseuse (BMP) qui r&#xE9;gulent la voie mise en place de l&#x26;#39;axe dorso-ventral chez les embryons, pour leur capacit&#xE9; &#xE0; induire la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration de l&#x26;#39;objectif. Nous montrons que la lentille peut &#xEA;tre r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9; &#xE0; partir de l&#x26;#39;iris ventrale lorsque la voie BMP est inhib&#xE9;e et lorsque l&#x26;#39;iris est transfect&#xE9;e avec six-3 et trait&#xE9;e avec de l&#x26;#39;acide r&#xE9;tino&#xEF;que. En iris intactes, six-3 est exprim&#xE9; &#xE0; des niveaux sup&#xE9;rieurs &#xE0; la face ventrale que dans l&#x26;#39;iris dorsale. Lors de la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration, cependant, que l&#x26;#39;expression dans l&#x26;#39;iris dorsale est significativement augment&#xE9;e. Une telle augmentation est vu dans les iris ventrales seulement quand ils sont amen&#xE9;s &#xE0; transdiff&#xE9;rencier par six-3 et l&#x26;#39;acide r&#xE9;tino&#xEF;que ou par des inhibiteurs de BMP. Ces donn&#xE9;es sugg&#xE8;rent que la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration objectif peut &#xEA;tre atteint dans les tissus adultes noncompetent et que cette r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration se produit &#xE0; travers un m&#xE9;canisme de r&#xE9;gulation g&#xE9;nique qui est plus complexe que l&#x26;#39;expression dorsale de lentilles de r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration des g&#xE8;nes sp&#xE9;cifiques.

BMP inhibition ax&#xE9;e sur le r&#xE8;glement des Six-3 sous-tend induction de Newt objectif de r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration

Objektiv-Regeneration in Erwachsenen Molche ist ein klassisches Beispiel daf&uuml;r, wie Zellen treu ein Orgelwerke durch den Prozess des Transdifferenzierung regenerieren k&ouml;nnen. Nach Entfernung der Linse die Pigment-Epithelzellen von dorsal, aber nicht die Ventral, Iris dedifferentiate und dann zu unterscheiden, um ein neues Objektiv zu bilden. Verstehen, wie dieser Prozess geregelt ist m&ouml;glicherweise Hinweise auf warum Objektiv Regenerierung bei h&ouml;heren Wirbeltieren tritt nicht bereit. Die Gene sechs-3 und Pax-6 sind bekannterma&szlig;en ektopische Linsen w&auml;hrend der Embryogenese induzieren. Hier haben wir getestet, diese Gene, sowie Mitglieder des Signalweges Bone morphogenetic Proteins (BMP), die Einrichtung der dorsal-Ventral Achse in Embryonen, f&uuml;r ihre F&auml;higkeit zu Objektiv Regenerierung zu regulieren. Wir zeigen, dass das Objektiv von der ventralen Iris regeneriert werden kann, wenn der BMP-Stoffwechselweg gehemmt und die Iris ist die transfected mit sechs-3 und mit Retinoic S&auml;ure behandelt. In intakten Irises wird sechs-3 auf h&ouml;heren Ebenen der Ventral als im dorsalen Iris ausgedr&uuml;ckt. W&auml;hrend der Regenerierung weist jedoch nur Ausdruck im dorsalen Iris deutlich erh&ouml;ht. Eine derartige Zunahme wird im ventralen Schwertlilien gesehen nur wenn sie zu Transdifferentiate durch sechs-3 und Retinoic S&auml;ure oder BMP-Inhibitoren umweltbedingt sind. Diese Daten legen nahe, dass Objektiv Regenerierung im noncompetent Gewebe Erwachsener erreicht werden kann und dass diese Erneuerung durch eine gen-Regulierungsmechanismus auftritt, komplexer als der dorsalen Ausdruck der Linse Regenerierung-spezifische Gene ist.

BMP Hemmung-gesteuerte Verordnung &uuml;ber sechs-3 zugrunde liegt, Induktion der Molch Objektiv Regeneration.

Rigenerazione lente in tritoni adulti &egrave; un classico esempio di come le cellule possono rigenerarsi fedelmente un organo completo attraverso il processo di transdifferenziazione. Dopo la rimozione della lente, le cellule epiteliali del pigmento della dorsale, ma non il ventrale, iris dedifferentiate e allora differenziano per formare un nuovo obiettivo. Capire come &egrave; regolato questo processo potrebbe fornire indizi su perch&eacute; rigenerazione lente non si verifica nei vertebrati superiori. I geni 6-3 e 6 pax sono noti per indurre ectopiche lenti durante l&#39;embriogenesi. Qui abbiamo testato questi geni, come pure membri del percorso bone morphogenetic protein (BMP) che regolano la creazione dell&#39;asse dorso-ventrale in embrioni, per la loro capacit&agrave; di indurre la rigenerazione lente. Mostriamo che la lente pu&ograve; essere rigenerata da iride ventrale &egrave; inibito il pathway BMP e quando l&#39;iride &egrave; transfected con 6-3 e trattato con acido retinoico. In iride intatti, 6-3 &egrave; espressa a livelli superiori nel ventrale rispetto nell&#39;iride dorsale. Durante la rigenerazione, tuttavia, &egrave; solo espressione nell&#39;iride dorsale &egrave; aumentata significativamente. Tale aumento &egrave; visto in iridi ventrale solo quando essi sono indotti a transdifferentiate dall&#39;acido 6-3 e retinoico o da inibitori BMP. Questi dati suggeriscono che rigenerazione obiettivo pu&ograve; essere raggiunto in tessuti adulti noncompetent e che questa rigenerazione avviene attraverso un meccanismo di regolazione genica che &egrave; pi&ugrave; complesso di quanto l&#39;espressione di geni specifici per rigenerazione lente dorsale.

Regolamento BMP, basate sull&#39;inibizione del sei-3 sottende ad induzione di rigenerazione lente newt.

&#x5927;&#x4EBA;&#x306E;&#x30A4;&#x30E2;&#x30EA;&#x306E;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x518D;&#x751F;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x5FE0;&#x5B9F;&#x306B;&#x5206;&#x5316;&#x8EE2;&#x63DB;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x5B8C;&#x5168;&#x306A;&#x81D3;&#x5668;&#x3092;&#x518D;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306E;&#x5178;&#x578B;&#x7684;&#x306A;&#x4F8B;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x306E;&#x53D6;&#x308A;&#x5916;&#x3057;&#x3001;&#x80CC;&#x306E;&#x8272;&#x7D20;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x3001;&#x8179;&#x5074;&#x5F8C;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x8679;&#x5F69;&#x306F;&#x8131;&#x5206;&#x5316;&#x3057;&#x3001;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x533A;&#x5225;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x304C;&#x898F;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3069;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x306F;&#x3001;&#x9AD8;&#x7B49;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x3067;&#x306F;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x7406;&#x7531;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x306E;&#x624B;&#x304C;&#x304B;&#x308A;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;6-3&#x304A;&#x3088;&#x3073;pax-6&#x306F;&#x80DA;&#x767A;&#x751F;&#x6642;&#x306E;&#x7570;&#x6240;&#x6027;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3001;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x80DA;&#x306E;&#x80CC;&#x8179;&#x8EF8;&#x306E;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x9AA8;&#x5F62;&#x6210;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;BMP&#xFF09;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x304C;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30A4;&#x30EA;&#x30B9;&#x306F;6-3&#x3067;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30C8;&#x3057;&#x3001;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30A4;&#x30F3;&#x9178;&#x3067;&#x51E6;&#x7406;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x306B;BMP&#x7D4C;&#x8DEF;&#x304C;&#x963B;&#x200B;&#x200B;&#x5BB3;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x304C;&#x8179;&#x30A2;&#x30A4;&#x30EA;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x518D;&#x751F;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x7121;&#x50B7;&#x306E;&#x83D6;&#x84B2;&#x3067;&#x306F;&#x3001;6&#x3064;&#x306E;-3&#x306F;&#x80CC;&#x8679;&#x5F69;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x8179;&#x5074;&#x306B;&#x9AD8;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x518D;&#x751F;&#x4E2D;&#x306B;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x80CC;&#x30A2;&#x30A4;&#x30EA;&#x30B9;&#x3067;&#x306E;&#x307F;&#x767A;&#x73FE;&#x304C;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;6-3&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30A4;&#x30F3;&#x9178;&#x307E;&#x305F;&#x306F;BMP&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5206;&#x5316;&#x5F62;&#x8CEA;&#x8EE2;&#x63DB;&#x3059;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5834;&#x5408;&#x306B;&#x306E;&#x307F;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x5897;&#x52A0;&#x306F;&#x3001;&#x8179;&#x83D6;&#x84B2;&#x3067;&#x898B;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x304C;noncompetent&#x6210;&#x4EBA;&#x7D44;&#x7E54;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x306F;&#x3001;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x518D;&#x751F;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x80CC;&#x5074;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x884C;&#x308F;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x9054;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x30B7;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;-3&#x306E;&#x57FA;&#x790E;&#x3068;&#x306A;&#x308B;&#x306E;BMP&#x963B;&#x5BB3;&#x4E3B;&#x5C0E;&#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x518D;&#x751F;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;

&#xC131;&#xC778; newts&#xC5D0; &#xB80C;&#xC988; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; &#xC140; &#xCDA9;&#xC2E4; &#xD558; &#xAC8C; transdifferentiation&#xC758; &#xACFC;&#xC815;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC644;&#xBCBD; &#xD55C; &#xC7A5;&#xAE30;&#xB97C; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC131;&#xC758; &#xC804;&#xD615;&#xC801;&#xC778; &#xC608;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB80C;&#xC988; &#xC81C;&#xAC70; &#xD6C4; &#xB4F1;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; &#xBCF5;, &#xD64D; &#xCC44; &#xC548;&#xB8CC; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; dedifferentiate &#xBC0F; &#xB2E4;&#xC74C; &#xC0C8; &#xB80C;&#xC988;&#xB97C; &#xD615;&#xC131; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;. &#xC774; &#xACFC;&#xC815;&#xC740; &#xADDC;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC774;&#xD574; &#xB80C;&#xC988; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC131; &#xB192;&#xC740; &#xCC99;&#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB2E8;&#xC11C;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC720;&#xC804;&#xC790; 6-3 &#xBC0F; &#xC778;&#xC6D0;-6 embryogenesis &#xB3D9;&#xC548; &#xC18C;&#xC131; &#xB80C;&#xC988; &#xC720;&#xB3C4; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC758; &#xB80C;&#xC988; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC131;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xB294; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBC30;&#xC544;&#xC758; &#xC9C0; &#xBCF5; &#xCD95; &#xC124;&#xB9BD; &#xADDC;&#xC81C; &#xBF08; &#xC804;&#xCCB4;&#xC801; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (BMP) &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xD68C;&#xC6D0; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;, &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB80C;&#xC988; BMP &#xD1B5;&#xB85C; &#xC800;&#xD574; &#xBC0F; &#xD64D; &#xCC44; 6-3 &#xD398; &#xB54C; retinoic &#xC0B0;&#xC744; &#xB2E4;&#xB8F0; &#xB54C;&#xB294; &#xBCF5; &#xBD80; &#xD64D; &#xCC44;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC131; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB300;&#xB85C; &#xD64D; &#xCC44;&#xC5D0; 6-3&#xC740; &#xB4F1; &#xD64D; &#xCC44;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xBCF5;&#xC758; &#xB354; &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548;, &#xB4F1; &#xD64D; &#xCC44;&#xC5D0; &#xC2DD;&#xB9CC; &#xD06C;&#xAC8C; &#xC99D;&#xAC00;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC99D;&#xAC00; &#xBCF5; &#xBD80;&#xC758; &#xD64D; &#xCC44;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCFC;&#xB9CC; &#xB54C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xC720;&#xB3C4; transdifferentiate&#xB97C; 6-3, retinoic &#xC0B0; &#xC131; &#xB610;&#xB294; BMP &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xC81C;&#xC548; &#xB80C;&#xC988; &#xC7AC;&#xC0DD; noncompetent &#xC131;&#xC778; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2EC;&#xC131; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xACE0;&#xC774; &#xC911;&#xC0DD; &#xB80C;&#xC988; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xAD00;&#xB828; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC9C0; &#xD45C;&#xD604; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB354; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xADDC;&#xC81C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

6-3&#xC758; BMP &#xC5B5;&#xC81C; &#xC81C;&#xC5B4; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158; &#xAE30;&#xCD08;&#xAC00; &#xB274; &#xD2B8; &#xB80C;&#xC988; &#xC911;&#xC0DD;&#xC758; &#xC720;&#xB3C4;.

La regeneraci&#xF3;n de la lente de tritones adultos es un ejemplo cl&#xE1;sico de c&#xF3;mo las c&#xE9;lulas pueden regenerar fielmente un &#xF3;rgano completo a trav&#xE9;s del proceso de transdiferenciaci&#xF3;n. Despu&#xE9;s de retirar la lente, las c&#xE9;lulas del epitelio pigmentario de la dorsal, ventral, pero no el, el iris se diferencian y luego se diferencian para formar un nuevo objetivo. La comprensi&#xF3;n de c&#xF3;mo este proceso est&#xE1; regulado podr&#xED;a proporcionar pistas acerca de por qu&#xE9; la regeneraci&#xF3;n de la lente no se da en los vertebrados superiores. Los genes seis-3 y 6 personas-se sabe que inducen lentes ect&#xF3;picos durante la embriog&#xE9;nesis. Aqu&#xED; hemos probado estos genes, as&#xED; como miembros de la prote&#xED;na morfogen&#xE9;tica &#xF3;sea (BMP) que regulan la v&#xED;a de establecimiento del eje dorsal-ventral en embriones, por su capacidad para inducir la regeneraci&#xF3;n de la lente. Se demuestra que la lente se puede regenerarse a partir del iris ventral cuando la v&#xED;a de BMP se inhibe y cuando el diafragma se transfectaron con seis-3 y se trat&#xF3; con &#xE1;cido retinoico. En iris intactos, seis-3 se expresa en niveles m&#xE1;s altos en la ventral que en el iris dorsal. Durante la regeneraci&#xF3;n, sin embargo, s&#xF3;lo la expresi&#xF3;n en el iris dorsal se incrementa significativamente. Tal incremento se ve en lirios ventrales s&#xF3;lo cuando son inducidos a transdiferenciarse por seis-3 y &#xE1;cido retinoico o por los inhibidores de BMP. Estos datos sugieren que la regeneraci&#xF3;n lente se puede lograr en los tejidos adultos noncompetent y que esta regeneraci&#xF3;n se produce a trav&#xE9;s de un mecanismo de regulaci&#xF3;n de genes que es m&#xE1;s compleja que la expresi&#xF3;n dorsal de lentes espec&#xED;ficas regeneraci&#xF3;n de los genes.

La inhibici&#xF3;n de BMP-impulsada por el Reglamento de los Seis-3 subyacen a la inducci&#xF3;n de Newt objetivo la regeneraci&#xF3;n

&#x6210;&#x4EBA;&#x877E;&#x5F97;&#x4EE5;&#x635F;&#x4F24;&#x6216;&#x8272;&#x7D20;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x773C;&#x775B;&#x901A;&#x8FC7;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5206;&#x5316;&#x5B8C;&#x5168;&#x5220;&#x9664;&#x540E;&#x91CD;&#x65B0;&#x751F;&#x6210;&#x5176;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x548C;&#x955C;&#x5934;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E00;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x9700;&#x8981;&#x4E25;&#x683C;&#x63A7;&#x5236;&#xFF0C;&#x548C;&#x51E0;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x62DB;&#x8058;&#x6B64;&#x51FD;&#x6570;&#x3002;Na(+)/K(+) ATPase &#x662F;&#x8DE8;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x786E;&#x7ACB;&#x4E86;&#x7535;&#x5316;&#x5B66;&#x68AF;&#x5EA6;&#x901A;&#x8FC7; Na(+) &#x548C; K(+) &#x7684;&#x8FD0;&#x8F93;&#x548C;&#x6709;&#x7275;&#x8FDE;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x3001; &#x8FC1;&#x79FB;&#x548C;&#x7C98;&#x8FDE;&#x7B49;&#x8C03;&#x5236;&#x3002;&#x5373;&#x4F7F;&#x5B83;&#x8868;&#x793A;&#x4E2D;&#x7684;&#x6240;&#x6709;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x5176;&#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#x7EC4;&#x6210;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#x800C;&#x5F02;&#xFF0C;&#x5728;&#x5F00;&#x53D1;&#x548C;&#x518D;&#x751F;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x53D7;&#x5230;&#x4E25;&#x683C;&#x7684;&#x63A7;&#x5236;&#x3002;&#x5728;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x662F; Na(+)/K(+) ATPase 1 &#x53D7;&#x4F53;&#x53CA;&#x5176;&#x5728;&#x6210;&#x4EBA;&#x877E;&#x8788;&#x773C;&#x548C;&#x6676;&#x72B6;&#x4F53;&#x548C;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x518D;&#x751F;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x6A21;&#x5F0F;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E;&#x6B64;&#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#x662F;&#x4E0A;&#x8C03;&#x5728;&#x672A;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x5206;&#x5316;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x6784;&#x6210;&#x8FD9;&#x79CD;&#x53D8;&#x5316;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x877E;&#x8788;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5229;&#x7528;&#x8C03;&#x8282;&#x8FD9;&#x4E00;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x4E4B;&#x4E00;&#x3002;

1 &#x53D7;&#x4F53;&#x53CA;&#x5176;&#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#x7684; Na + / K + ATPase &#x662F;&#x4E0A;&#x8C03;&#x5728;&#x8C03;&#x89E3;&#x4E2D;&#x6210;&#x4EBA;&#x877E;&#x6676;&#x72B6;&#x4F53;&#x548C;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x518D;&#x751F;&#x7684;&#x53BB;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;

Adult newts are able to regenerate their retina and lens after injury or complete removal through transdifferentiation of the pigmented epithelial tissues of the eye. This process needs to be tightly controlled, and several different mechanisms are likely to be recruited for this function. The Na(+)/K(+) ATPase is a transmembrane protein that establishes electrochemical gradients through the transport of Na(+) and K(+) and has been implicated in the modulation of key cellular processes such as cell division, migration and adhesion. Even though it is expressed in all cells, its isoform composition varies with cell type and is tightly controlled during development and regeneration. In the present study we characterize the expression pattern of Na(+)/K(+) ATPase alpha1 in the adult newt eye and during the process of lens and retina regeneration. We show that this isoform is up-regulated in undifferentiated cells during transdifferentiation. Such change in composition could be one of the mechanisms that newt cells utilize to modulate this process.

The alpha1 isoform of the Na+/K+ ATPase is up-regulated in dedifferentiated progenitor cells that mediate lens and retina regeneration in adult newts.

Tritons adultes sont capables de r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;rer leur r&#xE9;tine et le cristallin apr&#xE8;s une blessure ou l&#x26;#39;&#xE9;limination compl&#xE8;te par le biais transdiff&#xE9;renciation des tissus &#xE9;pith&#xE9;lium pigmentaire de l&#x26;#39;&#x153;il. Ce processus doit &#xEA;tre &#xE9;troitement contr&#xF4;l&#xE9;e, et plusieurs m&#xE9;canismes diff&#xE9;rents sont susceptibles d&#x26;#39;&#xEA;tre recrut&#xE9;s pour cette fonction. Le Na (+) / K (+) ATPase est une prot&#xE9;ine transmembranaire qui &#xE9;tablit des gradients &#xE9;lectrochimiques par le transport de Na (+) et K (+) et a &#xE9;t&#xE9; impliqu&#xE9; dans la modulation des principaux processus cellulaires comme la division cellulaire, la migration et adh&#xE9;rence. M&#xEA;me si elle est exprim&#xE9;e dans toutes les cellules, sa composition varie en fonction de l&#x26;#39;isoforme de type cellulaire et est &#xE9;troitement contr&#xF4;l&#xE9;e pendant le d&#xE9;veloppement et la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration. Dans la pr&#xE9;sente &#xE9;tude nous caract&#xE9;risons le mod&#xE8;le d&#x26;#39;expression de Na (+) / K (+) ATPase alpha1 dans l&#x26;#39;oeil triton adulte et au cours du processus de la lentille et la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration r&#xE9;tine. Nous montrons que cette isoforme est r&#xE9;gul&#xE9;e &#xE0; la hausse dans les cellules indiff&#xE9;renci&#xE9;es pendant transdiff&#xE9;renciation. Un tel changement dans la composition pourrait &#xEA;tre l&#x26;#39;un des m&#xE9;canismes que les cellules utilisent triton de moduler ce processus.

L&#x26;#39;isoforme alpha1 de la Na + / K + ATPase est r&#xE9;gul&#xE9;e &#xE0; la hausse dans les cellules prog&#xE9;nitrices d&#xE9;diff&#xE9;renci&#xE9;es qui interviennent Lens et de r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration chez les tritons adultes Retina

Erwachsene Molche sind in der Lage, ihre Netzhaut und Linse nach Verletzungen oder komplette Entfernung durch Transdifferenzierung der pigmentierte epitheliale Gewebe des Auges zu regenerieren. Dieser Prozess muss streng kontrolliert werden, und mehrere verschiedene Mechanismen d&uuml;rften sich f&uuml;r diese Funktion eingestellt werden. Die Na(+)/K(+)-ATPase ist ein Transmembranprotein, das elektrochemische Gradienten durch den Transport von Na(+) und K(+) gr&uuml;ndet und hat verwickelt gewesen, die Modulation des wichtige zellul&auml;re Prozesse wie Zellteilung, Migration und Haftung. Obwohl es in allen Zellen ausgedr&uuml;ckt wird, seine Isoform-Zusammensetzung variiert je nach Zelltyp und ist streng kontrolliert, w&auml;hrend Entwicklung und Regeneration. In der vorliegenden Studie pr&auml;gen wir die Muster des Ausdrucks der Na(+)/K(+) ATPase alpha1 in den Augen der Erwachsenen Molch und w&auml;hrend des Prozesses der Linse und der Netzhaut Regeneration. Wir zeigen, dass diese Isoform oben-geregelt in undifferenzierten Zellen w&auml;hrend Transdifferenzierung. Diese &Auml;nderung der Zusammensetzung k&ouml;nnte einer der Mechanismen, die Molch-Zellen zu nutzen, um diesen Prozess zu modulieren.

Die alpha1-Isoform der Na + / K + ATPase ist oben-geregelt in Liposarkom Vorl&auml;uferzellen, die Linse und der Netzhaut Regeneration im Erwachsenen Molche zu vermitteln.

Tritoni adulti sono in grado di rigenerare la retina e la lente dopo lesioni o rimozione completa attraverso transdifferenziazione dei tessuti epiteliali pigmentati dell&#39;occhio. Questo processo deve essere strettamente controllato, e diversi meccanismi differenti sono probabili essere reclutati per questa funzione. Le atpasi di Na(+)/K(+) &egrave; una proteina transmembrana che stabilisce il gradiente elettrochimici attraverso il trasporto di Na(+) e K(+) ed &egrave; stata implicata nella modulazione dei processi cellulari fondamentali come la divisione cellulare, migrazione ed adesione. Anche se &egrave; espressa in tutte le cellule, la sua composizione isoforma varia con il tipo di cella ed &egrave; strettamente controllato durante lo sviluppo e la rigenerazione. Nel presente studio abbiamo caratterizzano il modello di espressione del Na(+)/K(+) dell&#39;ATPasi alfa1 nell&#39;occhio adulto newt e durante il processo di rigenerazione lente e la retina. Dimostriamo che questa isoforma &egrave; up-regolato nelle cellule indifferenziate durante transdifferenziazione. Tale cambiamento nella composizione potrebbe essere uno dei meccanismi che utilizzano cellule Tritone di modulare questo processo.

L&#39;isoforma alpha1 del Na + K + ATPasi &egrave; up-regolato nelle cellule progenitrici dedifferentiated che mediano la rigenerazione lente e la retina in tritoni adulti.

&#x5927;&#x4EBA;&#x306E;&#x30A4;&#x30E2;&#x30EA;&#x306F;&#x3001;&#x602A;&#x6211;&#x3084;&#x76EE;&#x306E;&#x8272;&#x7D20;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x9664;&#x53BB;&#x3057;&#x305F;&#x5F8C;&#x306B;&#x7DB2;&#x819C;&#x3001;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x3092;&#x518D;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x53B3;&#x5BC6;&#x306B;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x52DF;&#x96C6;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x306E;Na&#xFF08;+&#xFF09;/ K&#xFF08;+&#xFF09;ATP&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F;&#x3001;Na&#xFF08;+&#xFF09;&#x3068;K&#xFF08;+&#xFF09;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x96FB;&#x6C17;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x52FE;&#x914D;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x3001;&#x79FB;&#x884C;&#x3001;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x63A5;&#x7740;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x7D44;&#x6210;&#x7269;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7A2E;&#x985E;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x3001;&#x3057;&#x3063;&#x304B;&#x308A;&#x3068;&#x958B;&#x767A;&#x3068;&#x518D;&#x751F;&#x6642;&#x306B;&#x5236;&#x5FA1;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5927;&#x4EBA;&#x306E;&#x30A4;&#x30E2;&#x30EA;&#x306E;&#x76EE;&#x3067;&#x3001;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x3068;&#x7DB2;&#x819C;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x306E;&#x904E;&#x7A0B;&#x3067;&#x306E;Na&#xFF08;+&#xFF09;/ K&#xFF08;+&#xFF09;ATP&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x3001;&#x3B1;1&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x5206;&#x5316;&#x4E2D;&#x306E;&#x672A;&#x5206;&#x5316;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D44;&#x6210;&#x7269;&#x4E2D;&#x3067;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x5909;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x30A4;&#x30E2;&#x30EA;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5229;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306E;&#x4E00;&#x3064;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Na&#x306E;&#x3B1;1&#x3001;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;+ / K + ATPase&#x306F;&#x5927;&#x4EBA;&#x30A4;&#x30E2;&#x30EA;&#x306B;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x3068;&#x7DB2;&#x819C;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x8131;&#x5206;&#x5316;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;

&#xC131;&#xC778; newts &#xBD80;&#xC0C1; &#xB610;&#xB294; transdifferentiation &#xD1B5;&#xD574; &#xB208;&#xC758; &#xC0C9;&#xC18C; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC870;&#xC9C1;&#xC758; &#xC644;&#xC804; &#xD55C; &#xC81C;&#xAC70; &#xD6C4; &#xB9DD;&#xB9C9;&#xACFC; &#xB80C;&#xC988;&#xB97C; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xC0DD;&#xC131;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xB97C; &#xAE34;&#xBC00; &#xD558; &#xAC8C; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD574;&#xC57C; &#xD558; &#xACE0; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC740;&#xC774; &#xD568;&#xC218;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCC44;&#xC6A9; &#xB420; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774;. Na(+)/K(+) ATPase na(+)&#xC640; K(+)&#xC758; &#xC804;&#xC1A1;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC804;&#xAE30; &#xADF8;&#xB77C;&#xB514;&#xC5B8;&#xD2B8;&#xB97C; &#xC124;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xC5F4;, &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xBC0F; &#xC811;&#xCC29; &#xB825; &#xB4F1; &#xC8FC;&#xC694; &#xC138;&#xD3EC; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC758; &#xBCC0;&#xC870;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xB418;&#xC5B4; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC774;&#xB2E4;. &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC140;&#xC5D0; &#xD45C;&#xD604; &#xB41C;, &#xBE44;&#xB85D; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; isoform &#xC140; &#xD615;&#xC2DD;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2E4;&#xB985;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAD6C;&#xC131;&#xACFC; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xBC0F; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC5C4;&#xACA9; &#xD558; &#xAC8C; &#xC81C;&#xC5B4;. &#xD604;&#xC7AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Na(+)/K(+) ATPase alpha1 &#xC131;&#xC778; &#xB274; &#xD2B8; &#xB208;&#xACFC; &#xB80C;&#xC988;&#xC640; &#xB9DD;&#xB9C9; &#xC911;&#xC0DD;&#xC758; &#xACFC;&#xC815;&#xC758; &#xC2DD; &#xD328;&#xD134; &#xD2B9;&#xC9D5;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD45C;&#xC2DC;&#xC774; isoform &#xC704;&#xB85C; undifferentiated &#xC140;&#xC5D0; transdifferentiation &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548;. &#xAD6C;&#xC131;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBCC0;&#xD654; &#xB274; &#xD2B8; &#xC140;&#xC774;&#xC774; &#xACFC;&#xC815;&#xC744; &#xBCC0;&#xC870;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xC77C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB098;&#xC758; alpha1 isoform + K + ATPase &#xC131;&#xC778; newts&#xC5D0; &#xB80C;&#xC988;&#xC640; &#xB9DD;&#xB9C9; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC131; &#xC911;&#xC7AC; dedifferentiated &#xC870;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC704;&#xB85C; &#xC774;&#xB2E4;.

Tritones adultos son capaces de regenerar su retina y el cristalino despu&#xE9;s de la lesi&#xF3;n o la retirada completa a trav&#xE9;s de la transdiferenciaci&#xF3;n de los tejidos epiteliales pigmentadas del ojo. Este proceso debe ser estrictamente controlado, y varios mecanismos diferentes probabilidades de ser reclutados para esta funci&#xF3;n. El Na (+) / K (+) ATPasa es una prote&#xED;na de transmembrana que establece gradientes electroqu&#xED;micos a trav&#xE9;s del transporte de Na (+) y K (+) y ha sido implicada en la modulaci&#xF3;n de los principales procesos celulares tales como la divisi&#xF3;n celular, la migraci&#xF3;n y adherencia. A pesar de que se expresa en todas las c&#xE9;lulas, su composici&#xF3;n isoforma var&#xED;a con el tipo de c&#xE9;lula y est&#xE1; estrechamente controlado durante el desarrollo y la regeneraci&#xF3;n. En el presente estudio hemos caracterizar el patr&#xF3;n de expresi&#xF3;n de Na (+) / K (+) ATPasa alfa1 en el ojo trit&#xF3;n adulto y durante el proceso de la lente y la regeneraci&#xF3;n retina. Se demuestra que esta isoforma est&#xE1; regulado en las c&#xE9;lulas no diferenciadas durante la transdiferenciaci&#xF3;n. Tal cambio en la composici&#xF3;n podr&#xED;a ser uno de los mecanismos que las c&#xE9;lulas trit&#xF3;n utilizan para modular este proceso.

La isoforma alfa 1 de la Na + / K + ATPasa est&#xE1; regulado en las c&#xE9;lulas progenitoras dediferenciado que median en la lente y la retina en la regeneraci&#xF3;n de las salamandras adultas

Retinal regeneration research holds potential for providing new avenues for the treatment of degenerative diseases of the retina. Various animal models have been used to study retinal regeneration over the years, providing insights into different aspects of this process. However the mechanisms that drive this important phenomenon remain to be fully elucidated. In the present study, we introduce and characterize a new model system for retinal regeneration research that uses the tadpole of the African clawed frog, Xenopus laevis.

Retinal regeneration in the Xenopus laevis tadpole: a new model system.

Focus on molecules: proinsulin in the eye: precursor or pioneer?

The embryonic chick occupies a privileged place among animal models used in developmental studies. Its rapid development and accessibility for visualization and experimental manipulation are just some of the characteristics that have made it a vertebrate model of choice for more than two millennia. Until a few years ago, the inability to perform genetic manipulations constituted a major drawback of this system. However, the completion of the chicken genome project and the development of techniques to manipulate gene expression have allowed this classic animal model to enter the molecular age. Such techniques, combined with the embryological manipulations that this system is well known for, provide a unique toolkit to study the genetic basis of neural development. A major advantage of these approaches is that they permit targeted gene misexpression with extremely high spatiotemporal resolution and over a large range of developmental stages, allowing functional analysis at a level, speed and ease that is difficult to achieve in other systems. This article provides a general overview of the chick as a developmental model focusing more specifically on its application to the study of eye development. Special emphasis is given to the state of the art of the techniques that have made gene gain- and loss-of-function studies in this model a reality. In addition, we discuss some methodological considerations derived from our own experience that we believe will be beneficial to researchers working with this system.

Rediscovering the chick embryo as a model to study retinal development.

Primary retinal cultures constitute valuable tools not only for basic research on retinal cell development and physiology, but also for the identification of factors or drugs that promote cell survival and differentiation. In order to take full advantage of the benefits of this system it is imperative to develop efficient and reliable techniques for the manipulation of gene expression. However, achieving appropriate transfection efficiencies in these cultures has remained challenging. The purpose of this work was to develop and optimize a technique that would allow the transfection of chick retinal cells with high efficiency and reproducibility for multiple applications. We developed an ex vivo electroporation method applied to dissociated retinal cell cultures that offers a significant improvement over other currently available transfection techniques, increasing efficiency by five-fold. In this method, eyes were enucleated, devoid of RPE, and electroporated with GFP-encoding plasmids using custom-made electrodes. Electroporated retinas were then dissociated into single cells and plated in low density conditions, to be analyzed after 4 days of incubation. Parameters such as voltage and number of electric pulses, as well as plasmid concentration and developmental stage of the animal were optimized for efficiency. The characteristics of the cultures were assessed by morphology and immunocytochemistry, and cell viability was determined by ethidium homodimer staining. Cell imaging and counting was performed using an automated high-throughput system. This procedure resulted in transfection efficiencies in the order of 22-25% of cultured cells, encompassing both photoreceptors and non-photoreceptor neurons, and without affecting normal cell survival and differentiation. Finally, the feasibility of the technique for cell-autonomous studies of gene function in a biologically relevant context was tested by carrying out gain and loss-of-function experiments for the transcription factor PAX6. Electroporation of a plasmid construct expressing PAX6 resulted in a marked upregulation in the expression levels of this protein that could be measured in the whole culture as well as cell-intrinsically. This was accompanied by a significant decrease in the percentage of cells differentiating as photoreceptors among the transfected population. Conversely, electroporation of an RNAi construct targeting PAX6 resulted in a significant decrease in the levels of this protein, with a concomitant increase in the proportion of photoreceptors. Taken together these results provide strong proof-of-principle of the suitability of this technique for genetic studies in retinal cultures. The combination of the high transfection efficiency obtained by this method with automated high-throughput cell analysis supplies the scientific community with a powerful system for performing functional studies in a cell-autonomous manner.

Ex vivo electroporation of retinal cells: a novel, high efficiency method for functional studies in primary retinal cultures.

Many forms of blindness result from the dysfunction or loss of retinal photoreceptors. Induced pluripotent stem cells (iPSCs) hold great potential for the modelling of these diseases or as potential therapeutic agents. However, to fulfill this promise, a remaining challenge is to induce human iPSC to recreate in vitro key structural and functional features of the native retina, in particular the presence of photoreceptors with outer-segment discs and light sensitivity. Here we report that hiPSC can, in a highly autonomous manner, recapitulate spatiotemporally each of the main steps of retinal development observed in vivo and form three-dimensional retinal cups that contain all major retinal cell types arranged in their proper layers. Moreover, the photoreceptors in our hiPSC-derived retinal tissue achieve advanced maturation, showing the beginning of outer-segment disc formation and photosensitivity. This success brings us one step closer to the anticipated use of hiPSC for disease modelling and open possibilities for future therapies.

M. Natalia Vergara

Wilmer Eye Institute

The Johns Hopkins University School of Medicine

Efficient Gene Transfer in Chick Retinas for Primary Cell Culture Studies: An Ex-ovo Electroporation Approach

M. Natalia Vergara

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The Johns Hopkins University School of Medicine

Efficient Gene Transfer in Chick Retinas for Primary Cell Culture Studies: An Ex-ovo Electroporation Approach

Wilmer Eye Institute