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The Use of Flow Cytometry to Assess the State of Chromatin in T Cells

During a proper immune response, quiescent T cells become activated upon antigen presentation to their antigen-specific T cell receptor. This leads to ...

Furman University

The JAK/STAT signaling pathway.

The Janus kinase (JAK) cascade is an essential and well-conserved pathway required to transduce signals for a variety of ligands in both vertebrates and invertebrates. While activation of the pathway is essential to many processes, mutations from mammals and Drosophila demonstrate that regulation is also critical. The SOCS (Suppressor Of Cytokine Signaling) proteins in mammals are regulators of the JAK pathway that participate in a negative feedback loop, as they are transcriptionally activated by JAK signaling. Examination of one Drosophila SOCS homologue, Socs36E, demonstrated that its expression is responsive to JAK pathway activity and it is capable of downregulating JAK signaling, similar to the well characterized mammalian SOCS.

Two Drosophila suppressors of cytokine signaling (SOCS) differentially regulate JAK and EGFR pathway activities.

Naive T cells encountering their cognate antigen become activated and acquire the ability to proliferate in response to cytokines. Stat5 is an essential component in this response. We demonstrate that Stat5 cannot access DNA in naive T cells and acquires this ability only after T-cell receptor (TCR) engagement. The transition is not associated with changes in DNA methylation or global histone modification but rather chromatin decondensation. Condensation occurs during thymocyte development and proper condensation is dependent on kleisin-β of the condensin II complex. Our findings suggest that this unique chromatin condensation, which can affect interpretations of chromatin accessibility assays, is required for proper T-cell development and maintenance of the quiescent state. This mechanism ensures that cytokine driven proliferation can only occur in the context of TCR stimulation.

Chromatin condensation via the condensin II complex is required for peripheral T-cell quiescence.

REM2 &#x662F; RAS &#x8D85;&#x5BB6;&#x65CF;&#x86CB;&#x767D;&#x7684; REM&#x3001; RAD &#x548C;&#x5B9D;&#x77F3;/&#x57FA;&#x91CC;&#x5DF4;&#x65AF; (RGK) &#x4E9A;&#x79D1;&#x7684;&#x6210;&#x5458;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5728;&#x5927;&#x8111;&#x53D1;&#x80B2;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x5177;&#x6709;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x4E24;&#x4E2A; Rem2 &#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#x88AB;&#x9694;&#x7EDD;&#x8679;&#x9CDF; ()&#x3002;&#x4E24;&#x4E2A;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x6307;&#x5B9A; O.&#x9CDF; rem2a &#x548C; rem2b&#xFF0C;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7F16;&#x7801; 304 &#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684; 61%&#x548C; 62%&#x7684;&#x8EAB;&#x4EFD;&#x5BF9;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C; (&#x8868;&#x8FBE;&#x5E8F;&#x5217;&#x6807;&#x7B7E;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#xFF09; Rem2&#xFF0C;&#x5206;&#x522B;&#x4E0E;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x90FD;&#x6709; 43%&#x8EAB;&#x4EFD;&#x5230;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269; (&#x4EBA;&#x7C7B;) REM2&#x3002;&#x5C31;&#x6211;&#x4EEC;&#x6240;&#x77E5;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x662F;&#x9996;&#x6B21;&#x53D1;&#x75C5;&#x7387;&#x5728;&#x7269;&#x79CD;&#x4E2D;&#x7684; Rem2 &#x4E9A;&#x578B;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x91CD;&#x590D;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#x62E5;&#x6709;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x8868;&#x8FBE;&#x8C31;&#x4E0E;&#x5927;&#x8111;&#x4E2D;&#x7684;&#x6700;&#x9AD8;&#x6C34;&#x5E73;&#x3002;Rem2a &#x57FA;&#x56E0;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x8868;&#x8FBE;&#x6C34;&#x5E73;&#x5927;&#x5927;&#x9AD8;&#x4E8E; rem2b &#x6D4B;&#x5B9A;&#x8111;&#x548C;&#x5934;&#x80BE;&#x9664;&#x5916;&#x7684;&#x6240;&#x6709;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x3002;&#x5728;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#x8868;&#x660E;&#x53D1;&#x751F;&#x5728;&#x55C5;&#x7403;&#x3001; &#x5927;&#x8111;&#x548C;&#x4E2D;&#x8111;&#x3001; &#x6C34;&#x5E73;&#x6700;&#x9AD8;&#x7684;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x8868;&#x8FBE;&#x6C34;&#x5E73;&#x867D;&#x7136; rem2a &#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x662F;&#x5728;&#x810A;&#x9AD3;&#x660E;&#x663E;&#x9AD8;&#x4E8E;&#x3002;&#x57FA;&#x4E8E; Rem2 &#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x53D1;&#x5C55;&#x548C;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x7684;&#x5DF2;&#x77E5;&#x529F;&#x80FD;&#x89D2;&#x8272;&#xFF0C;&#x8679;&#x9CDF;&#x7684; Rem2 &#x7279;&#x6027;&#x53EF;&#x4EE5;&#x63ED;&#x793A;&#x5176;&#x6210;&#x4EBA;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x795E;&#x7ECF;&#x548C;&#x5927;&#x8111;&#x518D;&#x751F;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x5206;&#x79BB;&#x548C;&#x5206;&#x5B50;&#x9274;&#x5B9A; Rem2 &#x4E9A;&#x578B;&#x5728;&#x8679;&#x9CDF; &#xFF08;&#xFF09;&#xFF1A; &#x7EC4;&#x7EC7;&#x548C;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

REM2 is a member of the REM, RAD, and GEM/KIR (RGK) subfamily of RAS superfamily proteins and plays an important role in brain development and function. In this study, two Rem2 isoforms were isolated from the rainbow trout (Oncorhynchus mykiss). The two genes, designated O. mykiss rem2a and rem2b, both encode 304 amino acid proteins with 61% and 62% identities to zebrafish (Danio rerio) Rem2, respectively, and each with 43% identity to mammalian (human) REM2. To our knowledge, this is the first incidence of Rem2 isoforms in a species that are the result of gene duplication. Both isoforms possessed similar tissue expression profiles with the highest levels in the brain. The rem2a gene has significantly higher expression levels than rem2b in all tissues assayed except the brain and head kidney. In the central nervous system, both isoforms showed similar expression levels with the highest levels occurring in the olfactory bulb, cerebrum, and midbrain, though rem2a expression is significantly higher in the spinal cord. Based on known functional roles of Rem2 in synapse development and stem cell proliferation, the characterization of Rem2 in rainbow trout could shed light on its role in adult vertebrate neurogenesis and brain regeneration.

Isolation and molecular characterization of Rem2 isoforms in the rainbow trout (Oncorhynchus mykiss): Tissue and central nervous system expression.

REM2 est membre de la sous-famille REM, RAD et GEM/KIR (RGK) des prot&eacute;ines superfamille RAS et joue un r&ocirc;le important dans le d&eacute;veloppement du cerveau et de la fonction. Dans cette &eacute;tude, deux isoformes Rem2 ont &eacute;t&eacute; isol&eacute;es de la truite arc-en-ciel (Oncorhynchus mykiss). Les deux g&egrave;nes, d&eacute;sign&eacute;s o. mykiss rem2a et rem2b, tous deux codent pour des prot&eacute;ines d&#39;acides amin&eacute;s 304 avec les identit&eacute;s de 61 % et 62 % pour le poisson z&egrave;bre (Danio rerio) Rem2, respectivement et chacune avec 43 % d&#39;identit&eacute; aux mammif&egrave;res REM2 (humaine). &Agrave; notre connaissance, c&#39;est la premi&egrave;re incidence des isoformes de la Rem2 chez une esp&egrave;ce qui r&eacute;sultent de la duplication de g&egrave;nes. Les deux isoformes ont poss&eacute;d&eacute; des profils d&#39;expression tissus similaires avec les plus hauts niveaux dans le cerveau. Le g&egrave;ne rem2a a des niveaux d&#39;expression significativement plus &eacute;lev&eacute;s que rem2b dans tous les tissus analys&eacute;s sauf le rein du cerveau et de la t&ecirc;te. Dans le syst&egrave;me nerveux central, les deux isoformes ont montr&eacute; des niveaux d&#39;expression similaire avec les niveaux les plus &eacute;lev&eacute;s qui se produisent dans le bulbe olfactif, cerveau et m&eacute;senc&eacute;phale, bien que l&#39;expression rem2a est significativement plus &eacute;lev&eacute;e dans la moelle &eacute;pini&egrave;re. Bas&eacute; sur des r&ocirc;les fonctionnels connus de Rem2 synapse d&eacute;veloppement et de la prolif&eacute;ration des cellules souches, la caract&eacute;risation des Rem2 chez la truite arc-en-ciel pourrait faire la lumi&egrave;re sur son r&ocirc;le dans la neurogen&egrave;se adulte de vert&eacute;br&eacute;s et de r&eacute;g&eacute;n&eacute;ration du cerveau.

Isolement et caract&eacute;risation mol&eacute;culaire des isoformes Rem2 chez la truite arc-en-ciel (Oncorhynchus mykiss): expression des tissus et du syst&egrave;me nerveux central.

REM2 geh&ouml;rt zur Unterfamilie der REM, RAD und GEM/KIR-(RGK) von RAS &Uuml;berfamilie Proteinen und spielt eine wichtige Rolle bei der Entwicklung des Gehirns und Funktion. In dieser Studie wurden zwei Rem2 Isoformen von der Regenbogenforelle (Oncorhynchus Mykiss) isoliert. Die beiden Gene, O. Mykiss rem2a und rem2b, beide kodieren 304 Aminos&auml;ure-Proteine mit 61 % und 62 % Identit&auml;ten Zebrab&auml;rbling (Danio Rerio) Rem2 bzw. und jeweils mit 43 % zu S&auml;ugetieren (menschlichen) REM2 Identit&auml;t. Unseres Wissens ist dies das erste Auftreten von Rem2-Isoformen in einer Spezies, die das Ergebnis der Genduplikation. Beide Isoformen besa&szlig; &auml;hnliche Gewebe Ausdruck Profile mit dem h&ouml;chsten im Gehirn. Das rem2a-gen hat deutlich h&ouml;here Stufen als rem2b in allen Geweben normalisiert au&szlig;er der Niere Gehirn und Kopf. In das zentrale Nervensystem zeigten beide Isoformen &auml;hnliche Stufen mit dem h&ouml;chsten auftreten in den Riechkolben, Gro&szlig;hirn und Mittelhirn, obwohl rem2a Ausdruck im R&uuml;ckenmark deutlich h&ouml;her ist. Auf der Grundlage bekannter Funktionsrollen der Rem2 in Synapse Entwicklung und Proliferation der Stammzellen, konnte die Charakterisierung der Rem2 in Regenbogenforelle ihre Rolle bei der adulten Neurogenese der Wirbeltiere und Gehirn Regeneration beleuchten.

Isolation und molekulare Charakterisierung von Rem2 Isoformen in die Regenbogenforelle (Oncorhynchus Mykiss): Gewebe und Zentralnervensystem Ausdruck.

REM2 &egrave; un membro della sottofamiglia delle proteine Superfamiglia RAS REM, RAD e GEM/KIR (RGK) e svolge un ruolo importante nello sviluppo del cervello e funzione. In questo studio, due isoforme Rem2 sono stati isolati dalla trota iridea (Oncorhynchus mykiss). I due geni, designati o. mykiss rem2a e rem2b, entrambi codificare proteine amminoacidi 304 con identit&agrave; del 61% e il 62% di zebrafish (Danio rerio) Rem2, rispettivamente e ciascuno con identit&agrave; di 43% di mammiferi REM2 (umano). A nostra conoscenza, questa &egrave; la prima incidenza di isoforme Rem2 in una specie che sono il risultato di duplicazione genica. Entrambe le isoforme possedevano simili profili di espressione del tessuto con i pi&ugrave; alti livelli nel cervello. Il gene rem2a ha significativamente pi&ugrave; elevati livelli di espressione di rem2b in tutti i tessuti analizzati tranne il rene cervello e la testa. Nel sistema nervoso centrale, entrambi isoforme hanno mostrato simili livelli di espressione con i pi&ugrave; alti livelli che si verificano nel bulbo olfattivo, il telencefalo e il mesencefalo, sebbene rem2a espressione &egrave; significativamente pi&ugrave; alta del midollo spinale. Basato sul noti ruoli funzionali di Rem2 in sinapsi lo sviluppo e la proliferazione delle cellule staminali, la caratterizzazione di Rem2 nella trota iridea potrebbe capannone luce sul suo ruolo nella neurogenesi adulta Vertebrata e rigenerazione del cervello.

Isolamento e caratterizzazione molecolare di isoforme Rem2 nella trota iridea (Oncorhynchus mykiss): espressione dei tessuti e del sistema nervoso centrale.

Rem2-RAS &#x69D8;&#x30B9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x86CB;&#x767D;&#x306E;&#x30EC;&#x30E0;&#x3001;RAD&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5B9D;&#x77F3;/KIR (RGK) &#x4E9C;&#x79D1;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x8133;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;, &#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;: rem2-2 &#x306F;&#x3001;&#x30CB;&#x30B8;&#x30DE;&#x30B9;&#x304B;&#x3089; () &#x5206;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6307;&#x5B9A;&#x30CB;&#x30B8;&#x30DE;&#x30B9; rem2a &#x3068; rem2b&#x3001;2 &#x3064;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x4E21;&#x65B9; 304 &#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; 61%, 62% &#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30C7;&#x30F3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C6;&#x30A3;&#x306B;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;) &#x3068;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;: rem2-&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3068;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x304C; 43 &#xFF05; id (&#x4EBA;&#x9593;): rem2-&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306B;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x77E5;&#x8B58;&#x306B;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x91CD;&#x8907;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3067;&#x3042;&#x308B;: rem2-&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x7A2E;&#x5185;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x767A;&#x751F;&#x7387;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x767A;&#x73FE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x8133;&#x5185;&#x306E;&#x6700;&#x9AD8;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x6240;&#x6709;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;Rem2a &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50; rem2b &#x8133;&#x3068;&#x982D;&#x306E;&#x814E;&#x81D3;&#x3092;&#x9664;&#x304F;&#x8A66;&#x91D1;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x3088;&#x308A;&#x6709;&#x610F;&#x306B;&#x9AD8;&#x3044;&#x767A;&#x73FE;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Rem2a &#x5F0F;&#x306F;&#x810A;&#x9AC4;&#x306E;&#x6709;&#x610F;&#x306B;&#x9AD8;&#x3044;&#x3067;&#x3059;&#x304C;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x55C5;&#x7403;, &#x5927;&#x8133;, &#x3068;&#x4E2D;&#x8133;&#x306E;&#x767A;&#x751F;&#x3001;&#x6700;&#x9AD8;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x985E;&#x4F3C;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Rem2-&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x958B;&#x767A;&#x3068;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x65E2;&#x77E5;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x5F79;&#x5272;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3001;Rem2 &#x306E;&#x30AD;&#x30E3;&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; &#x30CB;&#x30B8;&#x30DE;&#x30B9;&#x306E;&#x6210;&#x4F53;&#x306E;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x3068;&#x8133;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x305D;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306B;&#x5149;&#x3092;&#x5F53;&#x3066;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5206;&#x96E2;&#x3068; Rem2 &#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0; &#xFF08;&#x30CB;&#x30B8;&#x30DE;&#x30B9;&#xFF09; &#x3067;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x30AD;&#x30E3;&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;: &#x7D44;&#x7E54;&#x3068;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306E;&#x5F0F;&#x3002;

Rem2&#xB294; RAS superfamily &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; REM, RAD, &#xBC0F; &#xBCF4;&#xC11D;/&#xD0A4; &#xB974; (RGK) &#xC544; &#xC704;&#xC6D0; &#xBC0F; &#xB450;&#xB1CC; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xBC0F; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; &#xB450; Rem2 isoforms &#xBB34;&#xC9C0;&#xAC1C; &#xC1A1;&#xC5B4; (Oncorhynchus mykiss)&#xC5D0;&#xC11C; &#xACE0;&#xB9BD; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC624; mykiss rem2a&#xACFC; rem2b, &#xB450; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBAA8;&#xB450; &#xC778;&#xCF54;&#xB529; zebrafish (Danio rerio) id, 61%&#xC640; 62%&#xC640; 304 &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; Rem2, &#xAC01;&#xAC01;, &#xAC01;&#xAC01; 43 %id &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; (&#xC778;&#xAC04;) REM2. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC9C0;&#xC2DD;, &#xC774;&#xAC83;&#xC774; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC885;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC911;&#xBCF5;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; Rem2 isoforms &#xBC1C;&#xC0DD;&#xB960;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB450; isoforms &#xB1CC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0C1;&#xBD80;&#xC640; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xC870;&#xC9C1; &#xC2DD; &#xD504;&#xB85C;&#xD544; &#xD640;&#xB9AC; &#xACE0;. Rem2a &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB294; &#xB1CC; &#xBC0F; &#xBA38;&#xB9AC; &#xC2E0;&#xC7A5; &#xC81C;&#xC678; &#xD558; &#xACE0; &#xBD84;&#xC11D; &#xD558;&#xB294; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0;&#xC11C; rem2b &#xBCF4;&#xB2E4; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD788; &#xB192;&#xC740; &#xC2DD; &#xC218;&#xC900;&#xC774; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC911;&#xC559; &#xC2E0; &#xACBD;&#xACC4; &#xB450; isoforms rem2a &#xC2DD;&#xC740; &#xCC99;&#xC218;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD788; &#xB192;&#xC740; &#x55C5;, &#xB1CC;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; midbrain&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xC0C1;&#xBD80;&#xC640; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xC2DD; &#xB808;&#xBCA8;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB0C5; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xBC0F; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD;&#xC5D0; rem2&#xC758; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4;&#xB41C; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xBC14;&#xD0D5;&#xC73C;&#xB85C;, &#xBB34;&#xC9C0;&#xAC1C; &#xC1A1;&#xC5B4;&#xC5D0; rem2&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;&#xD654; &#xCC99;&#xCD94; &#xC131;&#xCCB4;&#xC640; &#xB450;&#xB1CC; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC5D0; &#xBE5B;&#xC744; &#xBC1C;&#xC0B0; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC808;&#xC5F0; &#xBC0F; &#xBB34;&#xC9C0;&#xAC1C; &#xC1A1;&#xC5B4; (Oncorhynchus mykiss)&#xC5D0;&#xC11C; Rem2 isoforms&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xD2B9;&#xC131; &#xBD84;&#xC11D;: &#xC870;&#xC9C1; &#xBC0F; &#xC911;&#xCD94; &#xC2DD;.

REM2 es miembro de la subfamilia REM, RAD y GEM/KIR (RGK) de prote&iacute;nas de la Superfamilia RAS y desempe&ntilde;a un papel importante en el desarrollo del cerebro y la funci&oacute;n. En este estudio, dos isoformas Rem2 fueron aislados de la trucha arco iris (Oncorhynchus mykiss). Los dos genes, o. mykiss rem2a y rem2b, ambos codifican 304 prote&iacute;nas amino&aacute;cido con identidades 61% y 62% a pez cebra (Danio rerio) Rem2, respectivamente y cada uno con identidad de 43% a mam&iacute;feros REM2 (humana). A nuestro conocimiento, &eacute;ste es la primera incidencia de isoformas Rem2 en una especie que son el resultado de la duplicaci&oacute;n del gene. Ambas isoformas poseyeron perfiles de expresi&oacute;n de tejido similar con los m&aacute;s altos niveles en el cerebro. El gen rem2a tiene niveles significativamente m&aacute;s elevados de la expresi&oacute;n que rem2b en todos los tejidos ensayadas excepto el cerebro y cabeza del ri&ntilde;&oacute;n. En el sistema nervioso central, ambas isoformas mostraron niveles similares de expresi&oacute;n con los niveles m&aacute;s altos que ocurren en el bulbo olfativo, el cerebro y el mesenc&eacute;falo, aunque rem2a expresi&oacute;n es significativamente mayor en la m&eacute;dula espinal. Basado en roles funcionales conocidas de Rem2 en desarrollo de la sinapsis y la proliferaci&oacute;n de c&eacute;lulas madre, la caracterizaci&oacute;n de Rem2 en trucha arco iris podr&iacute;a arrojar luz sobre su papel en la neurog&eacute;nesis adulta de vertebrados y regeneraci&oacute;n del cerebro.

Aislamiento y caracterizaci&oacute;n molecular de isoformas Rem2 en la trucha arco iris (Oncorhynchus mykiss): expresi&oacute;n de tejido y sistema nervioso central.

Antigen engagement of the T-cell receptor (TCR) induces a rapid and dramatic decondensation of chromatin that is necessary for T-cell activation. This decondensation makes T-cells competent to respond to interleukin-2 providing a mechanism to ensure clonotypic proliferation during an immune response. Using murine T-cells, we investigated the mechanism by which TCR signaling can initiate chromatin decondensation, focusing on the role of calcium mobilization. During T-cell activation, calcium is first released from intracellular stores, followed by influx of extracellular calcium via store operated calcium entry. We show that mobilization of intracellular calcium is required for TCR-induced chromatin decondensation. However, the decondensation is not dependent on the activity of the downstream transcription factor NFAT. Furthermore, we show that the influx of extracellular calcium is dispensable for initiating chromatin decondensation. Finally, we show that mobilization of calcium from intracellular stores is sufficient to induce decondensation, independent of TCR engagement. Collectively, our data suggest that chromatin decondensation in peripheral T-cells is controlled by modulating intracellular calcium levels.

Jason S. Rawlings

Department of Biology

Furman University

The Use of Flow Cytometry to Assess the State of Chromatin in T Cells

Jason S. Rawlings

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Furman University

The Use of Flow Cytometry to Assess the State of Chromatin in T Cells

Department of Biology