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Optimized Transfection Strategy for Expression and Electrophysiological Recording of Recombinant Voltage-Gated Ion Channels in HEK-293T Cells

The in vitro expression and electrophysiological recording of recombinant voltage-gated ion channels in cultured human embryonic kidney cells (HEK-293T) ...

University of Waterloo

&#x6FC0;&#x6D3B;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; C (PKC) &#x589E;&#x5F3A;&#x5206;&#x6CCC;&#x80BD;&#x80FD;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x6D77;&#x5154;&#xFF0C;&#x90E8;&#x5206;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x7801;&#x5934;&#x80BD;&#x91CA;&#x653E;&#x7684;&#x65B0;&#x5730;&#x70B9;&#x3002;&#x54EA;&#x4E9B;&#x79BB;&#x5B50;&#x901A;&#x9053;&#x88AB;&#x8D29;&#x8FD0;&#x5230;&#x8FD9;&#x7C7B;&#x7F51;&#x7AD9;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x597D;&#x7406;&#x89E3;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x73B0;&#x5728;&#x663E;&#x793A; PKC &#x6FC0;&#x6D3B;&#x5FEB;&#x901F;&#x62DB;&#x52DF;&#x65B0; Ca (V) 2 &#x4E9A;&#x57FA;&#x5BF9;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#xFF0C;&#x548C; latrunculin B&#x3001; &#x6291;&#x5236;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x805A;&#x5408;&#x5242;&#x88AB;&#x963B;&#x6B62;&#xFF0C;&#x62DB;&#x52DF;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x6291;&#x5236;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x805A;&#x5408;&#x6709;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x5730;&#x963B;&#x6B62; Ca (V) 2 &#x4E9A;&#x57FA;&#x53EA;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x7684;&#x8FDC;&#x7AEF;&#x8FB9;&#x7F18;&#x7684;&#x5916;&#x89C2;&#x3002;&#x5728;&#x9759;&#x606F;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#xFF0C;Ca (V) 2 &#x542B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5668;&#x9A7B;&#x7559;&#x5728;&#x4E2D;&#x90E8;&#x5730;&#x533A;&#x7684;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x3001; &#x4F46;&#x5747;&#x7F3A;&#x5E2D;&#x4ECE;&#x8FDC;&#x7AEF;&#x7684;&#x5E72;&#x9884;&#x3002;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x540E;&#x7684; PKC&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5668;&#x88AB;&#x8FD0;&#x9001;&#x5230; lamellipodium &#x7684;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x3002;Lamellipodium &#x5185;&#x90E8;&#x901A;&#x9053;&#x63D2;&#x5165;&#x6700;&#x8FDC;&#x7AEF;&#x7AD9;&#x70B9;&#x7684;&#x901A;&#x8BAF;&#x91CF;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x4E0D;&#x4F1A;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x9700;&#x8981;&#x5B8C;&#x6574;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x4F46;&#x9700;&#x8981;&#x5B8C;&#x6574;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x3002;PKC &#x6FC0;&#x6D3B;&#x540E;&#x624D;&#x505A; Ca (V) 2 &#x6E20;&#x9053;&#x4E0E;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x5173;&#x8054;&#x548C;&#x63A5;&#x53D7;&#x63D2;&#x5165;&#x5230;&#x8D28;&#x819C;&#x3002;

Pkc &#x80DE;&#x5185;&#x8D29;&#x5356;&#x7684; Ca (V) 2 &#x4E4B;&#x524D;&#xFF0C;&#x5176;&#x5FEB;&#x901F;&#x62DB;&#x8058;&#x5230;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x819C;&#x3002;

Activation of protein kinase C (PKC) potentiates secretion in Aplysia peptidergic neurons, in part by inducing new sites for peptide release at growth cone terminals. The mechanisms by which ion channels are trafficked to such sites are, however, not well understood. We now show that PKC activation rapidly recruits new Ca(V)2 subunits to the plasma membrane, and that recruitment is blocked by latrunculin B, an inhibitor of actin polymerization. In contrast, inhibition of microtubule polymerization selectively prevents the appearance of Ca(V)2 subunits only at the distal edge of the growth cone. In resting neurons, Ca(V)2-containing organelles reside in the central region of growth cones, but are absent from distal lamellipodia. After activation of PKC, these organelles are transported on microtubules to the lamellipodium. The ability to traffic to the most distal sites of channel insertion inside the lamellipodium does, therefore, not require intact actin but requires intact microtubules. Only after activation of PKC do Ca(V)2 channels associate with actin and undergo insertion into the plasma membrane.

PKC-induced intracellular trafficking of Ca(V)2 precedes its rapid recruitment to the plasma membrane.

L&#x26;#39;activation de la prot&#xE9;ine kinase C (PKC) potentialise la s&#xE9;cr&#xE9;tion dans les neurones peptidergiques aplysie, en partie en induisant de nouveaux sites pour la production de peptide dans les terminaux c&#xF4;ne de croissance. Les m&#xE9;canismes par lesquels les canaux ioniques sont victimes de la traite &#xE0; de tels sites sont cependant pas bien compris. Nous allons maintenant montrer que l&#x26;#39;activation PKC recrute rapidement de nouvelles Ca (V) 2 sous-unit&#xE9;s &#xE0; la membrane plasmique, et que le recrutement est bloqu&#xE9; par latrunculine B, un inhibiteur de polym&#xE9;risation de l&#x26;#39;actine. Par contre, l&#x26;#39;inhibition de la polym&#xE9;risation des microtubules emp&#xEA;che s&#xE9;lectivement l&#x26;#39;apparition de Ca (V) 2 sous-unit&#xE9;s seulement &#xE0; la bordure distale du c&#xF4;ne de croissance. Dans les neurones de repos, Ca (V) 2 contenant organites r&#xE9;sident dans la r&#xE9;gion centrale de c&#xF4;nes de croissance, mais sont absentes de distale lamellipodes. Apr&#xE8;s activation de la PKC, ces organites sont transport&#xE9;s sur les microtubules &#xE0; la lamellipode. La capacit&#xE9; de trafic vers les sites les plus distales de l&#x26;#39;insertion &#xE0; l&#x26;#39;int&#xE9;rieur du canal lamellipode ne, par cons&#xE9;quent, pas besoin d&#x26;#39;actine intacte, mais il faut microtubules intactes. C&#x26;#39;est seulement apr&#xE8;s activation de la PKC faire Ca (V) 2 canaux associ&#xE9;s avec l&#x26;#39;actine et subissent l&#x26;#39;insertion dans la membrane plasmique.

PKC induite par le trafic intracellulaire de Ca (V) 2 pr&#xE9;c&#xE8;de son recrutement rapide de la membrane plasmique

Aktivierung der Proteinkinase C (PKC) Spurenelement Sekretion in Aplysia peptiderge Neuronen, teilweise durch neue Standorte f&uuml;r Peptid-Release am Wachstum-Kegel-Terminals zu induzieren. Die Mechanismen, durch welche, die Ionen Kan&auml;le zu solchen Websites verschleppt werden, jedoch nicht gut verstehen. Wir zeigen nun, dass PKC Aktivierung schnell neue Ca (V) 2-Untereinheiten an der Plasmamembran Rekruten und die Rekrutierung Latrunculin B, ein Inhibitor der Aktin-Polymerisation geblockt wird. Hemmung der Microtubule Polymerisierung verhindert dagegen selektiv die Darstellung der Ca (V) 2 Untereinheiten nur am distalen Rand der Wachstumskegel. In Ruhe Neuronen, Ca (V) 2-haltigen Organellen befinden sich in der Region Zapfen mit Wachstum aber Fehlen von distale Lamellipodium. Nach Aktivierung des PKC werden diese Organellen auf Mikrotubuli zu den Lamellipodium transportiert. Die M&ouml;glichkeit, den Datenverkehr zu den distalen Seiten Kanal einf&uuml;gen innerhalb der Lamellipodium, daher erfordert keine intakten Aktin aber intakt Mikrotubuli erfordert. Erst nach Aktivierung des PKC Ca (V) 2 Kan&auml;le ordnen Aktin und Einf&uuml;gen in die Plasmamembran zu unterziehen.

PKC-induzierte intrazellul&auml;re Menschenhandel von Ca (V) 2, ist seine schnelle Rekrutierung durch die Plasmamembran vorangestellt.

Attivazione della protein chinasi C (PKC) potenzia la secrezione in Aplysia peptidergic neuroni, in parte inducendo nuovi siti per il rilascio del peptide a terminali del cono di crescita. I meccanismi di cui ione canali sono trafficate a tali siti sono, tuttavia, non ben compreso. Mostriamo ora attivazione PKC reclute rapidamente nuove subunit&agrave; Ca (V) 2 per la membrana plasmatica, che tale assunzione &egrave; bloccato da latrunculin B, un inibitore della polimerizzazione dell&#39;actina. In contrasto, inibizione della polimerizzazione dei microtubuli selettivamente previene la comparsa delle subunit&agrave; Ca (V) 2 soltanto al bordo distale del cono di crescita. In neuroni, Ca (V) 2-contenente organuli risiedono nella regione centrale dei coni di crescita, di riposo, ma sono assenti da lamellipodia distale. Dopo l&#39;attivazione della PKC, questi organelli sono trasportati su microtubuli alla lamellipodium. La capacit&agrave; di traffico verso i siti pi&ugrave; distali d&#39;inserzione del canale all&#39;interno del lamellipodium, pertanto, non necessitano di actina intatto ma richiede microtubuli intatti. Solo dopo l&#39;attivazione della PKC Ca (V) 2 canali associare all&#39;actina e sottoporsi ad inserimento nella membrana del plasma.

PKC indotta intracellulare traffico di Ca (V) 2 precede il suo rapido reclutamento alla membrana del plasma.

&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;C&#xFF08;PKC&#xFF09;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x306E;&#x7AEF;&#x5B50;&#x306E;&#x3068;&#x3053;&#x308D;&#x3067;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30E1;&#x30D5;&#x30E9;&#x30B7;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x6027;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x6CCC;&#x3092;&#x5897;&#x5F37;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306B;&#x4EBA;&#x8EAB;&#x58F2;&#x8CB7;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x969B;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x3001;&#x3088;&#x304F;&#x7406;&#x89E3;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x4ECA;&#x3001;&#x305D;&#x306E;PKC&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;&#x6025;&#x901F;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x306B;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;CA&#xFF08;V&#xFF09;2&#x3064;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x52DF;&#x96C6;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x63A1;&#x7528;&#x304C;latrunculin B&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x91CD;&#x5408;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x91CD;&#x5408;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x304C;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x306B;&#x306E;&#x307F;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x306E;&#x9060;&#x4F4D;&#x7AEF;&#x3067;&#x306E;Ca&#xFF08;V&#xFF09;2&#x3064;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x5916;&#x89B3;&#x3092;&#x9632;&#x304E;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5B89;&#x9759;&#x6642;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;&#x3001;Ca&#xFF08;V&#xFF09;2&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x7D30;&#x80DE;&#x5C0F;&#x5668;&#x5B98;&#x306F;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x306E;&#x4E2D;&#x592E;&#x90E8;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x9060;&#x4F4D;&#x306E;&#x8449;&#x72B6;&#x4EEE;&#x8DB3;&#x3092;&#x6B20;&#x5E2D;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; PKC&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x5F8C;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5C0F;&#x5668;&#x5B98;&#x306F;&#x3001;&#x8449;&#x72B6;&#x4EEE;&#x8DB3;&#x306E;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x4E0A;&#x3092;&#x642C;&#x9001;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8449;&#x72B6;&#x4EEE;&#x8DB3;&#x5185;&#x306E;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x633F;&#x5165;&#x306E;&#x6700;&#x3082;&#x9060;&#x4F4D;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3078;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x7121;&#x50B7;&#x306E;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002; PKC&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x308B;&#x306E;Ca&#xFF08;V&#xFF09;2&#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3092;&#x884C;&#x3044;&#x3001;&#x5F62;&#x8CEA;&#x819C;&#x3078;&#x306E;&#x633F;&#x5165;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x305F;&#x5F8C;&#x306B;&#x306E;&#x307F;&#x3002;

Ca&#x306E;PKC&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x8F38;&#x9001;&#xFF08;V&#xFF09;2&#x306F;&#x3001;&#x5F62;&#x8CEA;&#x819C;&#x3078;&#x306E;&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x63A1;&#x7528;&#x306E;&#x524D;&#x306B;&#x7F6E;&#x304D;&#x307E;&#x3059;

&#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; C (PKC)&#xC758; &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xBFD4; &#xB2E8;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558; &#xC5EC; &#xC77C;&#xBD80; Aplysia peptidergic &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84; &#xBE44; potentiates. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xC774;&#xC628;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCC44;&#xB110;&#xC740; &#xADF8;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xB97C; &#xC778;&#xC2E0; &#xB9E4;&#xB9E4; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;,, &#xC774;&#xD574; &#xC798; &#xD558;&#xC9C0;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC9C0;&#xAE08; PKC &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xAC8C; &#xC0C8; Ca (V) 2 subunits &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xC2E0;&#xBCD1; &#xBC0F; &#xADF8; &#xBAA8;&#xC9D1; latrunculin B&#xC758; &#xB9D0;&#xB77C; &#xC911; &#xD569; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCC28;&#xB2E8; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC18;&#xBA74;, microtubule &#xC911; &#xD569; &#xC800;&#xD574;&#xB294; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xBFD4;&#xC758; &#xC6D0;&#xC2EC; &#xAC00;&#xC7A5;&#xC790;&#xB9AC;&#xC5D0;&#xB9CC; Ca (V) 2 subunits&#xC758; &#xBAA8;&#xC591;&#xC744; &#xBC29;&#xC9C0;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB274;&#xB7F0;, Ca (V) organelles 2 &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xC131;&#xC7A5; &#xCF58;&#xC758; &#xC911;&#xC559; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xD734;&#xC2DD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xACB0; &#xC11D; &#xD558;&#xB2E4; &#xC6D0;&#xC2EC; lamellipodia&#xC5D0;&#xC11C;. PKC&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD6C4; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; organelles microtubules&#xB294; lamellipodium &#xD558;&#xC5D0; &#xC6B4;&#xC1A1; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB0B4;&#xBD80;&#xB294; lamellipodium &#xCC44;&#xB110; &#xC0BD;&#xC785;&#xC758; &#xAC00;&#xC7A5; &#xB9D0; &#xCD08; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xD2B8;&#xB798;&#xD53D; &#xD558;&#xB294; &#xB2A5;&#xB825;, &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD544;&#xC694; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xADF8;&#xB300;&#xB85C; &#xB9D0;&#xB77C; &#xADF8;&#xB300;&#xB85C; microtubules &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. PKC&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD6C4;&#xC5D0; &#xD560; Ca (V) 2 &#xCC44;&#xB110; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB9D0;&#xB77C; &#xD558; &#xACE0; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0BD;&#xC785;&#xC744; &#xBC1B; &#xB2E4;.

PKC &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; Ca (V) 2&#xC758; &#xBC00;&#xB9E4; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778;&#xC758; &#xAE09;&#xC18D; &#xD55C; &#xCC44;&#xC6A9; &#xC55E;.

La activaci&#xF3;n de la prote&#xED;na quinasa C (PKC) potencia la secreci&#xF3;n de las neuronas en Aplysia peptid&#xE9;rgicas, en parte, mediante la inducci&#xF3;n de nuevos sitios para la liberaci&#xF3;n de p&#xE9;ptidos en los terminales del cono de crecimiento. Los mecanismos por los cuales los canales i&#xF3;nicos se trata a dichos sitios son, sin embargo, no entiende bien. Vamos a demostrar que la activaci&#xF3;n de la PKC con rapidez los nuevos reclutas de Ca (V) 2 subunidades en la membrana plasm&#xE1;tica, y que el reclutamiento est&#xE1; bloqueada por latrunculin B, un inhibidor de la polimerizaci&#xF3;n de la actina. En contraste, la inhibici&#xF3;n de la polimerizaci&#xF3;n de microt&#xFA;bulos selectivamente previene la aparici&#xF3;n de Ca (V) 2 subunidades s&#xF3;lo en el borde distal del cono de crecimiento. En las neuronas en reposo, Ca (V) 2-contienen org&#xE1;nulos residen en la regi&#xF3;n central de los conos de crecimiento, pero est&#xE1;n ausentes de distal lamellipodia. Despu&#xE9;s de la activaci&#xF3;n de la PKC, estos org&#xE1;nulos son transportados en microt&#xFA;bulos a la lamellipodium. La capacidad de tr&#xE1;fico a los sitios m&#xE1;s distales de la inserci&#xF3;n en el interior del canal lamellipodium hace, por tanto, no requieren actina intacta pero requiere microt&#xFA;bulos intactos. S&#xF3;lo despu&#xE9;s de la activaci&#xF3;n de la PKC DO Ca. (V) 2 canales asociados con la actina y se someten a la inserci&#xF3;n en la membrana plasm&#xE1;tica.

PKC inducida por el tr&#xE1;fico intracelular de Ca (V) 2 precede a su r&#xE1;pido reclutamiento a la membrana plasm&#xE1;tica

&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x6027;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1; (PCD) &#x7ED2;&#x6BE1;&#x5C42;&#x548C;&#x5176;&#x4ED6;&#x5B62;&#x5B50;&#x4F53;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x6210;&#x529F;&#x53D1;&#x5C55;&#x548C;&#x88C2;&#x5F00;&#x7684;&#x82B1;&#x836F;&#x548C;&#x82B1;&#x7C89;&#x7684;&#x91CA;&#x653E;&#x3002;&#x756A;&#x8304; (&#x767D;&#x6BDB; lycopersicum) &#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5BB6;&#x548C; dehiscing &#x82B1;&#x836F;&#x8D85;&#x5FAE;&#x7ED3;&#x6784;&#x7814;&#x7A76;&#x663E;&#x793A;&#x5468;&#x56F4;&#x6240;&#x6709; stomium &#x7684;&#x8868;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE; interlocular &#x9F3B;&#x4E2D;&#x9694;&#x3001; &#x7ED3;&#x7F14;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x3001; &#x4E2D;&#x95F4;&#x5C42;/&#x5269;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x5C42;&#xFF0C;&#x5C55;&#x793A;&#x529F;&#x80FD;&#x7B26;&#x5408;&#x901A;&#x8FC7; PCD &#x7684;&#x8FDB;&#x5C55;&#x3002;&#x5728;&#x6240;&#x6709;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#xFF0C;Ricinosomes&#xFF0C;&#x524D;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x56CA;&#x6CE1;&#x6240;&#x7279;&#x6709;&#x7684;&#x690D;&#x7269; PCD&#xFF0C;&#x53D1;&#x751F;&#x4E86;&#x4E00;&#x4E9B;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x7684;&#x5B50;&#x96C6;&#x4E5F;&#x5728;&#x573A;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x65B0;&#x578B;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5668;&#x662F;&#x5DF2;&#x77E5;&#x6E2F;&#x6E7E;&#x884C;&#x4E8B;&#x7684;&#x5C38;&#x4F53;&#x5904;&#x7406;&#x540E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7684;&#x6700;&#x540E;&#x9636;&#x6BB5;&#x7684; KDEL &#x5C3E;&#x534A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x3002;&#x4E8B;&#x5B9E;&#x4E0A;&#xFF0C;&#x756A;&#x8304; KDEL &#x5C3E;&#x534A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#xFF0C;SlCysEP&#xFF0C;&#x88AB;&#x786E;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x5176;&#x57FA;&#x56E0;&#x88AB;&#x514B;&#x9686;&#x3001; &#x6D4B;&#x5E8F;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x7279;&#x70B9;&#x3002;SlCysEP &#x8A8A;&#x672C;&#x53CA;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x88AB;&#x5C40;&#x9650;&#x4E8E;&#x8870;&#x8001;&#x756A;&#x8304;&#x82B1;&#x82B1;&#x836F;&#x3002;&#x76EE;&#x524D; interlocular &#x9F3B;&#x4E2D;&#x9694;&#x548C;&#x5728;&#x665A;&#x4E9B;&#x65F6;&#x5019;&#x5728;&#x56F4;&#x7ED5;&#x5B50;&#x623F;&#x5F00;&#x88C2;&#x968F;&#x4E4B;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x5B62;&#x5B50;&#x4F53;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x79EF;&#x7D2F;&#x4E86;&#x5468;&#x56F4; stomium &#x8F83;&#x65E9;&#x5728;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#xFF0C;SlCysEP &#x7684;&#x8868;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x5728;&#x5927;&#x767D;&#x9F20;&#x4E00;&#x7EA7;&#xFF0C;&#x514D;&#x75AB;&#x80F6;&#x4F53;&#x91D1;&#x6807;&#x8BB0;&#x672C;&#x5730;&#x5316; SlCysEP &#x5230; ricinosomes &#x7684;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EC4;&#x7EC7;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x5728;&#x7ED2;&#x6BE1;&#x5C42;&#x4E2D;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x5185;&#x3002;&#x5B83;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x79EF;&#x7D2F;&#x7684; SlCysEP &#x548C; ricinosomes &#x7684;&#x5916;&#x89C2;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x975E;&#x5E38;&#x65E9;&#x671F;&#x9884;&#x6D4B;&#x7684;&#x756A;&#x8304;&#x82B1;&#x836F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x3002;

Ricinosomes &#x9884;&#x6D4B;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x756A;&#x8304;&#x82B1;&#x836F;&#x5F00;&#x88C2;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x6027;&#x7684;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x3002;

Successful development and dehiscence of the anther and release of pollen are dependent upon the programmed cell death (PCD) of the tapetum and other sporophytic tissues. Ultrastructural examination of the developing and dehiscing anther of tomato (Solanum lycopersicum) revealed that cells of the interlocular septum, the connective tissue, the middle layer/endothecium, and the epidermal cells surrounding the stomium all exhibit features consistent with progression through PCD. Ricinosomes, a subset of precursor protease vesicles that are unique to some incidents of plant PCD, were also present in all of these cell types. These novel organelles are known to harbor KDEL-tailed cysteine proteinases that act in the final stages of corpse processing following cell death. Indeed, a tomato KDEL-tailed cysteine proteinase, SlCysEP, was identified and its gene was cloned, sequenced, and characterized. SlCysEP transcript and protein were restricted to the anthers of the senescing tomato flower. Present in the interlocular septum and in the epidermal cells surrounding the stomium relatively early in development, SlCysEP accumulates later in the sporophytic tissues surrounding the locules as dehiscence ensues. At the ultrastuctural level, immunogold labeling localized SlCysEP to the ricinosomes within the cells of these tissues, but not in the tapetum. It is suggested that the accumulation of SlCysEP and the appearance of ricinosomes act as very early predictors of cell death in the tomato anther.

Ricinosomes predict programmed cell death leading to anther dehiscence in tomato.

Mise au point et la d&eacute;hiscence de l&#39;anth&egrave;re et lib&eacute;ration du pollen d&eacute;pendent de la mort cellulaire programm&eacute;e (PCD) du tapetum et autres tissus sporophytiques. L&#39;&eacute;tude ultrastructurale de l&#39;anth&egrave;re de pays en d&eacute;veloppement et dehiscing de la tomate (Solanum lycopersicum) a r&eacute;v&eacute;l&eacute; que les cellules de la cloison interlocular, le tissu conjonctif, la couche interm&eacute;diaire/endoth&egrave;ce et les cellules &eacute;pidermiques entourant le stomium tous pr&eacute;sentent des caract&eacute;ristiques compatibles avec progression en PCD. Ricinosomes, un sous-ensemble des v&eacute;sicules de prot&eacute;ase pr&eacute;curseur qui sont propres &agrave; certains incidents de plante PCD, &eacute;taient &eacute;galement pr&eacute;sents dans l&#39;ensemble de ces types de cellules. Ces nouveaux organites sont connus pour h&eacute;berger des prot&eacute;ases de cyst&eacute;ine KDEL &agrave; queue qui agissent dans les derni&egrave;res &eacute;tapes de la transformation de cadavre apr&egrave;s la mort des cellules. En effet, une prot&eacute;ase de cyst&eacute;ine &agrave; queue KDEL tomate, SlCysEP, a &eacute;t&eacute; identifi&eacute;e et son g&egrave;ne a &eacute;t&eacute; clon&eacute;, s&eacute;quenc&eacute; et caract&eacute;ris&eacute;. Prot&eacute;ine et SlCysEP transcription sont limitaient aux anth&egrave;res de la fleur de tomate s&eacute;nescents. Pr&eacute;sent dans le septum interlocular et dans les cellules &eacute;pidermiques entourant la stomium relativement t&ocirc;t dans le d&eacute;veloppement, SlCysEP s&#39;accumule plus tard dans les tissus sporophytiques entourant les loges comme la d&eacute;hiscence s&#39;ensuit. &Agrave; l&#39;&eacute;chelle ultrastructurale, immunomarquage localis&eacute; SlCysEP &agrave; la ricinosomes dans les cellules de ces tissus, mais pas dans le tapetum. Il est sugg&eacute;r&eacute; que l&#39;accumulation de SlCysEP et l&#39;apparition de ricinosomes agissent comme pr&eacute;dicteurs tr&egrave;s t&ocirc;t de la mort cellulaire dans l&#39;anth&egrave;re de la tomate.

Ricinosomes pr&eacute;disent la mort programm&eacute;e des cellules conduisant &agrave; la d&eacute;hiscence des anth&egrave;res chez la tomate.

Erfolgreiche Entwicklung und Dehiszenz von der Anthere und Freigabe von Pollen sind abh&auml;ngig von den programmierten Zelltod (PCD) das Tapetum und anderen sporophytic Geweben. Ultrastrukturelle Untersuchung der Entwicklung und dehiscing Anthere Tomate (Solanum Lycopersicum) ergab, dass die Zellen der interlocular Septum, das Bindegewebe, die mittlere Schicht/Endothecium und der Epidermiszellen, die rund um die Stomium alle Eigenschaften mit Fortschreiten durch PCD aufweisen. Ricinosomes, eine Teilmenge der Vorl&auml;ufer Protease Bl&auml;schen, die nur auf einige Vorf&auml;lle Pflanze PCD, waren ebenfalls anwesend in allen diesen Zelltypen. Diese neuartigen Organellen sind bekannterma&szlig;en KDEL-beschattete Cystein Proteinasen beherbergen, die in der Endphase der Leiche Verarbeitung nach Zelltod dienen. Tats&auml;chlich wurde eine Tomate KDEL-beschattete Cystein Proteinase, SlCysEP, identifiziert und sein gen geklont, sequenziert und gepr&auml;gt wurde. SlCysEP Abschrift und Protein waren auf die Antheren der altert Tomate Bl&uuml;te beschr&auml;nkt. Gegenwart in der interlocular Septum und die Epidermiszellen, die rund um die Stomium relativ fr&uuml;h in der Entwicklung, SlCysEP sammelt sich sp&auml;ter im sporophytic Gewebe rund um die Kammern, wie Dehiszenz erfolgt. Auf Ultrastuctural Ebene lokalisiert Immunogold Kennzeichnung SlCysEP, die Ricinosomes innerhalb der Zellen, Gewebe, aber nicht in das Tapetum. Es wird vorgeschlagen, dass die Anh&auml;ufung von SlCysEP und die Darstellung des Ricinosomes als sehr fr&uuml;he Pr&auml;diktoren f&uuml;r Zelltod in der Tomaten-Anthere fungieren.

Ricinosomes Vorhersagen programmierten Zelltod f&uuml;hrt zu Pollenst&auml;ubens erfolgen in Tomaten.

Successo sviluppo e deiscenza dell&#39;Antera e rilascio di polline dipendono la morte programmata delle cellule (PCD) il tapetum e altri tessuti sporophytic. Esame ultrastrutturale dell&#39;antera in via di sviluppo e dehiscing di pomodoro (Solanum lycopersicum) ha rivelato che le cellule del setto del interlocular, del tessuto connettivo, il livello medio/endothecium e le cellule epidermiche che circonda lo stome tutti esibiscono caratteristiche coerenti con la progressione attraverso PCD. Ricinosomes, un sottoinsieme delle vescicole di proteasi precursore che sono unici per alcuni episodi di pianta PCD, erano anche presenti in tutti questi tipi di cellule. Questi organelli romanzo sono conosciuti a Porto proteinases KDEL-tailed cisteina che agiscono nelle fasi finali della lavorazione del cadavere dopo la morte della cellula. Infatti, &egrave; stata identificata una proteinasi KDEL-tailed cisteina pomodoro, SlCysEP, e il gene &egrave; stato clonato, sequenziato e caratterizzata. Proteina e trascrizione SlCysEP erano limitate alle antere del fiore di pomodoro senescenti. Presente nel setto interlocular e in cellule epidermiche che circonda lo stome relativamente presto nello sviluppo, SlCysEP si accumula pi&ugrave; tardi nei tessuti sporophytic che circondano i loculi come deiscenza ensues. A livello ultrastuctural, immunogold etichettatura localizzato SlCysEP per la ricinosomes all&#39;interno delle cellule di questi tessuti, ma non il tapetum. &Egrave; suggerito che l&#39;accumulo di SlCysEP e la comparsa di ricinosomes agire come predittori molto precoce della morte delle cellule in antera pomodoro.

Ricinosomes predire morte programmata delle cellule, che porta a deiscenza antera in pomodoro.

&#x6B63;&#x5E38;&#x306A;&#x958B;&#x767A;&#x305D;&#x3057;&#x3066;&#x846F;&#x306E;&#x88C2;&#x958B;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x82B1;&#x7C89;&#x306E;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9; &#x30BF;&#x30DA;&#x30FC;&#x30C8;&#x7D44;&#x7E54;&#x3068;&#x4ED6;&#x306E;&#x80DE;&#x5B50;&#x4F53;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B; (PCD) &#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30C8;&#x30DE;&#x30C8; (&#x30C8;&#x30DE;) &#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3068; dehiscing &#x306E;&#x846F;&#x306E;&#x96FB;&#x9855;&#x7684;&#x691C;&#x8A0E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E; interlocular &#x4E2D;&#x9694;, &#x7D50;&#x5408;&#x7D44;&#x7E54;, &#x4E2D;&#x9593;&#x5C64;/&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30C6;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E; stomium &#x3092;&#x53D6;&#x308A;&#x5DFB;&#x304F;&#x8868;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x6A5F;&#x80FD; PCD &#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x9032;&#x884C;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Ricinosomes&#x3001;PCD&#x3001;&#x690D;&#x7269;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x306B;&#x4E00;&#x610F;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x524D;&#x99C6;&#x4F53;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC; &#x30D9;&#x30B7;&#x30AF;&#x30EB;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3082;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB; &#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x3067;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x65B0;&#x898F;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5C0F;&#x5668;&#x5B98;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x306B;&#x7D9A;&#x304F;&#x6B7B;&#x4F53;&#x51E6;&#x7406;&#x306E;&#x6700;&#x7D42;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x306E;&#x884C;&#x52D5; KDEL &#x5C3E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x52D5;&#x614B;&#x3092;&#x6E2F;&#x306B;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x78BA;&#x304B;&#x306B;&#x3001;&#x30C8;&#x30DE;&#x30C8; KDEL &#x5C3E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x3001;SlCysEP&#x3001;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x5316;&#x3001;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x3001;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;SlCysEP &#x8EE2;&#x5199;&#x4F53;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x6642;&#x30C8;&#x30DE;&#x30C8;&#x306E;&#x82B1;&#x306E;&#x846F;&#x306B;&#x5236;&#x9650;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x73FE;&#x5728; interlocular &#x4E2D;&#x9694;&#x3068;&#x3067;&#x3001;stomium &#x306F;&#x6BD4;&#x8F03;&#x7684;&#x958B;&#x767A;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x521D;&#x671F;&#x306E; SlCysEP &#x3092;&#x53D6;&#x308A;&#x5DFB;&#x304F;&#x8868;&#x76AE;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x84C4;&#x7A4D;&#x88C2;&#x958B;&#x3092; ensues&#x3001;locules &#x3092;&#x53D6;&#x308A;&#x5DFB;&#x304F;&#x80DE;&#x5B50;&#x4F53;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x306B;&#x5F8C;&#x3067;&#x3002;Ultrastuctural &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6A19;&#x8B58;&#x3068; SlCysEP &#x306F; ricinosomes &#x30BF;&#x30DA;&#x30FC;&#x30C8;&#x7D44;&#x7E54;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x304C;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306B;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3002;SlCysEP &#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3068; ricinosomes &#x306E;&#x5916;&#x89B3;&#x30C8;&#x30DE;&#x30C8;&#x846F;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x306E;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x4E88;&#x6E2C;&#x56E0;&#x5B50;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x884C;&#x52D5;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Ricinosomes &#x30C8;&#x30DE;&#x30C8;&#x846F;&#x306E;&#x88C2;&#x958B;&#x3059;&#x308B;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C9; &#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x3092;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC131;&#xACF5;&#xC801;&#xC778; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xBC0F; dehiscence&#xB294; &#xAF43; &#xBC25;&#xC758; &#xAF43;&#xAC00;&#xB8E8;&#xC758; &#xCD9C;&#xC2DC;&#xB294; tapetum &#xBC0F; &#xB2E4;&#xB978; sporophytic &#xC870;&#xC9C1; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C; (PCD)&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xACB0;&#xC815; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD1A0;&#xB9C8;&#xD1A0; (&#xAE4C; lycopersicum)&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xBC0F; dehiscing &#xAF43; &#xBC25;&#xC758; ultrastructural &#xC2DC;&#xD5D8; interlocular &#xC2EC;&#xC7A5;, &#xACB0;&#xD569; &#xC870;&#xC9C1;, &#xC911;&#xAC04; &#xB808;&#xC774;&#xC5B4;/endothecium&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC0F; &#xBAA8;&#xB4E0; stomium&#xC744; &#xB458;&#xB7EC;&#xC2FC; &#xD45C; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC77C;&#xAD00; PCD &#xD1B5;&#xD574; &#xC9C4;&#xD589; &#xB41C; &#xC804;&#xC2DC; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. Ricinosomes, PCD, &#xACF5;&#xC7A5;&#xC758; &#xC77C;&#xBD80; &#xC0AC;&#xAC74;&#xC5D0; &#xACE0;&#xC720;&#xD55C; &#xC804;&#xC870; protease vesicles&#xC758; &#xD558;&#xC704; &#xC9D1;&#xD569;&#xC774; &#xC140; &#xC720;&#xD615; &#xBAA8;&#xB450;&#xC5D0; &#xB610;&#xD55C; &#xC774;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC18C;&#xC124; organelles KDEL &#xAF2C;&#xB9AC; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD14C;&#xC778; proteinases &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC2DC;&#xCCB4; &#xCC98;&#xB9AC;&#xC758; &#xCD5C;&#xC885; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3D9;&#xC791; &#xD558;&#xB294; &#xD56D;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2E4;&#xC81C;&#xB85C;, &#xD1A0;&#xB9C8;&#xD1A0; KDEL &#xAF2C;&#xB9AC; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD14C;&#xC778; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574;, SlCysEP, &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588; &#xACE0; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCF5;&#xC81C;, &#xC2DC;&#xD000;&#xC2F1;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. SlCysEP &#xC0AC;&#xBCF8; &#xBC0F; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; senescing &#xD1A0;&#xB9C8;&#xD1A0; &#xAF43; anthers &#xC81C;&#xD55C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD604;&#xC7AC; interlocular &#xC2EC;&#xC7A5; &#xBC0F;&#xC5D0; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xCD08;&#xAE30; &#xAC1C;&#xBC1C;, Slcysep&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; stomium&#xC744; &#xB458;&#xB7EC;&#xC2FC; &#xD45C; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB098;&#xC911; dehiscence ensues&#xB85C; locules&#xC744; &#xB458;&#xB7EC;&#xC2FC; sporophytic &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD95;&#xC801; &#xB418;&#xC5B4;. Ultrastuctural &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC870;&#xC9C1; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; tapetum &#xC140; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; ricinosomes&#xB97C; SlCysEP &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; immunogold &#xB77C;&#xBCA8;. Slcysep&#xC758; &#xCD95;&#xC801;&#xACFC; ricinosomes&#xC758; &#xBAA8;&#xC591; &#xD1A0;&#xB9C8;&#xD1A0; &#xAF43; &#xBC25;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC758; &#xC544;&#xC8FC; &#xCD08;&#xAE30; &#xC608;&#xC5B8;&#xC790;&#xB85C; &#xC11C; &#xD589;&#xB3D9; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Ricinosomes &#xAF43; &#xBC25; dehiscence &#xD1A0;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB85C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9C0;&#xB294; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC744; &#xC608;&#xCE21;.

Desarrollo exitoso y dehiscencia de la antera y liberaci&oacute;n de polen dependen la muerte celular programada (PCD) del tapetum y otros tejidos esporof&iacute;ticas. La examinaci&oacute;n ultraestructural de la antera en desarrollo y dehiscing de tomate (Solanum lycopersicum) revel&oacute; que las c&eacute;lulas del septo interlocular, el tejido conectivo, el capa medio/endothecium y las c&eacute;lulas epid&eacute;rmicas que rodean el stomium todos exhiben caracter&iacute;sticas constantes con la progresi&oacute;n a trav&eacute;s de PCD. Ricinosomes, un subconjunto de las ves&iacute;culas de la proteasa precursor que son exclusivas de algunos incidentes de planta PCD, tambi&eacute;n estaban presentes en todos estos tipos celulares. Estos organelos novela son conocidos por albergar Proteinasas de ciste&iacute;na KDEL cola que act&uacute;an en las etapas finales del proceso del cad&aacute;ver despu&eacute;s de la muerte celular. De hecho, una proteinasa de ciste&iacute;na KDEL cola de tomate, SlCysEP, fue identificado y su gen clonado, secuenciado y caracterizado. Prote&iacute;na y transcripci&oacute;n de SlCysEP fueron restringidos a las anteras de la flor de tomate senescentes. Presente en el septo interlocular y en las c&eacute;lulas epid&eacute;rmicas que rodean el stomium relativamente temprano en el desarrollo, SlCysEP se acumula en los tejidos esporof&iacute;ticas que rodean los l&oacute;culos como dehiscencia sobreviene. En el nivel de ultrastuctural, el etiquetado de immunogold localizados SlCysEP a la ricinosomes dentro de las c&eacute;lulas de estos tejidos, pero no en el tapetum. Se sugiere que la acumulaci&oacute;n de SlCysEP y la aparici&oacute;n de ricinosomes act&uacute;an como predictores muy tempranos de la muerte celular en la antera de tomate.

Ricinosomes predecir muerte celular programada conduce a dehiscencia de las anteras en tomate.

&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x63CF;&#x8FF0;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x975E;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269; T &#x578B;&#x9499;&#x901A;&#x9053; (LCa(v)3) &#x8868;&#x793A;&#x4F53;&#x5916;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x8F6F;&#x4F53;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x901A;&#x9053;&#x62E5;&#x6709;&#x8BA9;&#x4EBA;&#x8054;&#x60F3;&#x8D77;&#x6240;&#x6709;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269; T &#x578B;&#x901A;&#x9053;&#x7684;&#x7EC4;&#x5408;&#x751F;&#x7269;&#x7269;&#x7406;&#x5C5E;&#x6027;&#x3002;&#x5B83;&#x5C55;&#x793A; T &#x578B;&#x529F;&#x80FD;&#xFF0C;&#x5982;&quot;&#x77AC;&#x53D8;&quot;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#xFF0C;&#x4F46;&#x662F;&quot;&#x5C0F;&#x5C0F;&quot;&#x7684;&#x6807;&#x7B7E;&#xFF0C;&#x901A;&#x5E38;&#x4E0E; Ba(2+) &#x7535;&#x5BFC;&#x5173;&#x8054;&#x5F88;&#x96BE;&#x8C03;&#x548C;&#x4E0E;&#x6B64;&#x901A;&#x9053;&#x5728;&#x5F88;&#x591A;&#x65B9;&#x9762;&#x7684;&quot;&#x5927;&quot;&#x3002;LCa (v) 3 &#x662F;&#x5927;&#x4E8E;&#x8868;&#x793A;&#x5230;&#x76EE;&#x524D;&#x4E3A;&#x6B62;&#x4EFB;&#x4F55;&#x7535;&#x538B;&#x95E8;&#x63A7;&#x79BB;&#x5B50;&#x901A;&#x9053;&#x7684; 25%&#x3002;&#x5B83;&#x7F16;&#x7801;&#x8FDB;&#x884C;&#x5927;&#x5B8F;&#x89C2;&#x7535;&#x6D41;&#x4F53;&#x5916;&#x5927;&#x89C4;&#x6A21;&#x3001; 322 kDa &#x86CB;&#x767D;&#x3002;(V) 3 LCa &#x4E5F;&#x662F;&#x8717;&#x725B;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#x6700;&#x4E30;&#x5BCC;&#x7684;&#x7ECF;&#x901A;&#x9053;&#x6210;&#x7EE9;&#x5355;&#x3002;&#x5728;&#x5178;&#x578B;&#x7684;&#x9759;&#x606F;&#x7535;&#x4F4D;&#x5F53;&#x524D;&#x7A97;&#x53E3;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x81F3;&#x5C11;&#x4E00;&#x6837;&#x5927;&#x7684;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x9891;&#x9053;&#x62A5;&#x9053;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x9065;&#x8FDC;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x4E00;&#x4E2A;&#x72EC;&#x7279;&#x7684;&#x89C6;&#x89D2;&#x6765;&#x5206;&#x6790;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x3001; &#x529F;&#x80FD;&#x3001; &#x836F;&#x7269;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x548C;&#x8FDB;&#x5316;&#x65B9;&#x9762;&#x7684; T &#x578B;&#x901A;&#x9053;&#x3002;

&#x77AC;&#x53D8;&#x548C;&#x5927;&#x4ECE;&#x7A3B;&#x7530;&#x690E;&#x5B9E; stagnalis &#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x662F;&#x65E0;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x7684; T &#x578B;&#x901A;&#x9053; (LCav3) &#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x7279;&#x70B9;&#x3002;

Here we describe features of the first non-mammalian T-type calcium channel (LCa(v)3) expressed in vitro. This molluscan channel possesses combined biophysical properties that are reminiscent of all mammalian T-type channels. It exhibits T-type features such as "transient" kinetics, but the "tiny" label, usually associated with Ba(2+) conductance, is hard to reconcile with the "bigness" of this channel in many respects. LCa(v)3 is 25% larger than any voltage-gated ion channel expressed to date. It codes for a massive, 322-kDa protein that conducts large macroscopic currents in vitro. LCa(v)3 is also the most abundant Ca(2+) channel transcript in the snail nervous system. A window current at typical resting potentials appears to be at least as large as that reported for mammalian channels. This distant gene provides a unique perspective to analyze the structural, functional, drug binding, and evolutionary aspects of T-type channels.

Transient and big are key features of an invertebrate T-type channel (LCav3) from the central nervous system of Lymnaea stagnalis.

Nous d&#xE9;crivons ici les caract&#xE9;ristiques de la premi&#xE8;re non-mammif&#xE8;re canaux calciques de type T (LCA (v) 3) exprim&#xE9;es in vitro. Cette cha&#xEE;ne poss&#xE8;de mollusques combin&#xE9;s propri&#xE9;t&#xE9;s biophysiques qui rappellent de tous les mammif&#xE8;res canaux de type T. Il pr&#xE9;sente de type T des fonctionnalit&#xE9;s telles que &#x26;quot;transitoire&#x26;quot; cin&#xE9;tique, mais la &#x26;quot;petite&#x26;quot; &#xE9;tiquette, g&#xE9;n&#xE9;ralement associ&#xE9;e &#xE0; Ba (2 +) de la conductance, est difficile &#xE0; concilier avec la &#xAB;grandeur&#xBB; de ce canal &#xE0; bien des &#xE9;gards. LCA (v) 3 est 25% plus grande que n&#x26;#39;importe quel canal ionique voltage-d&#xE9;pendant exprim&#xE9; &#xE0; ce jour. Il code pour une massive, 322-kDa qui m&#xE8;ne de grands courants macroscopiques in vitro. LCA (v) 3 est aussi le plus abondant Ca (2 +) la transcription de canal dans le syst&#xE8;me nerveux d&#x26;#39;escargot. Une fen&#xEA;tre en cours au typiques potentiels de repos semble &#xEA;tre au moins aussi grande que celle rapport&#xE9;e pour les canaux de mammif&#xE8;res. Ce g&#xE8;ne lointain offre une perspective unique pour analyser la structure, la liaison fonctionnelle de drogue, et les aspects &#xE9;volutifs de canaux de type T.

Transitoire et Big sont des &#xE9;l&#xE9;ments cl&#xE9;s d&#x26;#39;un invert&#xE9;br&#xE9; T-Type de la Manche (LCav3) &#xE0; partir du syst&#xE8;me nerveux central de Lymnaea stagnalis

Hier beschreiben wir die Funktionen von den ersten nicht-S&auml;uger T-Typ Kalzium-Kanal (LCa(v)3) ausgedr&uuml;ckt in-vitro. Diese Weichtiererzeugnisse Kanal besitzt kombinierte biophysikalische Eigenschaften, erinnert an alle S&auml;ugetier-T-Typ-Kan&auml;le sind. Es stellt T-Typ Funktionen wie &quot;transient&quot; Kinetik, aber das &quot;kleine&quot; Label, gew&ouml;hnlich verbunden mit Ba(2+) Leitwert, ist schwer mit dem &quot;verwunschen&quot; dieses Kanals in vielerlei Hinsicht zu vereinbaren. LCa (V) 3 ist 25 % gr&ouml;&szlig;er als jede Spannung-gated Ion Channel bisher ausgedr&uuml;ckt. Es kodiert f&uuml;r ein massiv, 322-kDa-Protein, das gro&szlig;e makroskopische Str&ouml;me, die in-vitro f&uuml;hrt. LCa (V) 3 ist auch die h&auml;ufigste Ca(2+)-Kanal-Abschrift im Nervensystem Schnecke. Es erscheint ein Fenster am typischen ruhenden Potenziale mindestens so gro&szlig; sein wie die f&uuml;r S&auml;ugetier-Kan&auml;le gemeldet. Dieses ferne gen bietet eine einzigartige Perspektive, um die strukturelle, funktionelle, Droge-Bindung und evolution&auml;re Aspekte der T-Typ-Kan&auml;le zu analysieren.

Transienten und gro&szlig; sind Hauptmerkmale eines wirbellosen T-Typ-Kanals (LCav3) von zentralen Nervensystems der Spitzschlammschnecke.

Qui descriviamo le caratteristiche del primo canale del calcio T-tipo di mammiferi (LCa(v)3) espresso in vitro. Questo canale cotti possiede propriet&agrave; biofisiche combinato che ricordano tutti i canali di tipo T dei mammiferi. Esibisce le caratteristiche di tipo T come cinetica &quot;transitoria&quot;, ma l&#39;etichetta &quot;tiny&quot;, solitamente associata a Ba(2+) conduttanza, &egrave; difficilmente conciliabile con la &quot;grandezza&quot; di questo canale in molti aspetti. LCa (v) 3 &egrave; del 25% pi&ugrave; grande di qualsiasi canale di tensione-gated dello ione espresso fino ad oggi. Codici per una massiccia, 322-kDa proteina che conduce grandi correnti macroscopiche in vitro. LCa (v) 3 &egrave; anche la trascrizione di canale Ca(2+) pi&ugrave; abbondante nel sistema nervoso lumaca. Viene visualizzata una finestra corrente a potenziali di riposo tipici di essere almeno grande come quello segnalato per i canali dei mammiferi. Questo gene lontano fornisce una prospettiva unica per analizzare la strutturale, funzionale, l&#39;associazione di droga e aspetti evolutivi dei canali di tipo T.

Transitori e grandi sono le caratteristiche principali di un canale di tipo T degli invertebrati (LCav3) dal sistema nervoso centrale di Lymnaea stagnalis.

&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;in vitro&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x975E;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;T-&#x578B;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#xFF08;LCA&#xFF08;V&#xFF09;3&#xFF09;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x8EDF;&#x4F53;&#x52D5;&#x7269;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;T&#x578B;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3092;&#x9023;&#x60F3;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x305F;&#x751F;&#x7269;&#x7269;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x7279;&#x6027;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A; &#x26;quot;&#x4E00;&#x6642;&#x7684;&#x306A;&#x26;quot;&#x52D5;&#x614B;&#x3068;&#x3057;&#x3066;T&#x578B;&#x306E;&#x7279;&#x5FB4;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;Ba&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C0;&#x30AF;&#x30BF;&#x30F3;&#x30B9;&#x3001;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F; &#x26;quot;&#x5C0F;&#x3055;&#x306A;&#x26;quot;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x70B9;&#x3067;&#x3053;&#x306E;&#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E; &#x26;quot;&#x5927;&#x304D;&#x3055;&#x26;quot;&#x3067;&#x8ABF;&#x6574;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x56F0;&#x96E3;&#x3067;&#x3059;&#x3002; LCA&#xFF08;v&#xFF09;&#x306E;3&#x65E5;&#x306B;&#x8868;&#x660E;&#x3057;&#x3001;&#x4EFB;&#x610F;&#x306E;&#x96FB;&#x4F4D;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3088;&#x308A;&#x3082;25&#xFF05;&#x5927;&#x304D;&#x304F;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002; in vitro&#x3067;&#x306E;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x5DE8;&#x8996;&#x7684;&#x306A;&#x96FB;&#x6D41;&#x3092;&#x884C;&#x3063;&#x3066;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x3001;322-kDa&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; LCA&#xFF08;V&#xFF09;3&#x306F;&#x3001;&#x30AB;&#x30BF;&#x30C4;&#x30E0;&#x30EA;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306E;&#x4E2D;&#x3067;&#x6700;&#x3082;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A;&#x306E;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x7523;&#x7269;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x5178;&#x578B;&#x7684;&#x306A;&#x5B89;&#x9759;&#x6642;&#x306E;&#x96FB;&#x4F4D;&#x3067;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x30A6;&#x30A3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30A6;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;&#x540C;&#x3058;&#x5927;&#x304D;&#x3055;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x898B;&#x3048;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x9060;&#x3044;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x3001;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3001;&#x85AC;&#x7269;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x3001;T&#x578B;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x9032;&#x5316;&#x7684;&#x5074;&#x9762;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x8996;&#x70B9;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x904E;&#x6E21;&#x7684;&#x306A;&#x30D3;&#x30C3;&#x30B0;Lymnaea Stagnalis&#x306E;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x304B;&#x3089;&#x7121;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x3001;T&#x578B;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#xFF08;LCav3&#xFF09;&#x306E;&#x4E3B;&#x306A;&#x7279;&#x5FB4;&#x306F;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x306E;&#x901A;&#x308A;

&#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; (LCa(v)3) &#xD45C;&#xD604; &#xCCB4; &#xC678; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xBE44; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; T-&#xD0C0;&#xC785; &#xCE7C;&#xC298; &#xCC44;&#xB110;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC124;&#xBA85;. &#xC774; molluscan &#xCC44;&#xB110; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; T-&#xD0C0;&#xC785; &#xCC44;&#xB110;&#xC758; &#xC5F0;&#xC0C1; &#xACB0;&#xD569;&#xB41C; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xB9AC; &#xC18D;&#xC131;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xC788;&#xB2E4;. T &#xD615; &#xAE30;&#xB2A5; &quot;&#xACFC;&#xB3C4;&quot; &#xC18D;&#xB3C4; &#xB860; &#xB4F1;&#xC744; &#xC804;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; Ba(2+) &#xC804;&#xB3C4;&#xB3C4;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &quot;&#xC791;&#xC740;&quot; &#xB808;&#xC774;&#xBE14; &quot;bigness&quot; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xCE21;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC774; &#xCC44;&#xB110;&#xC758;&#xC640; &#xD654;&#xD574; &#xD558;&#xAE30; &#xC5B4;&#xB835;&#xB2E4;. LCa (v) 3 &#xB0A0;&#xC9DC;&#xC5D0; &#xD45C;&#xD604; &#xB41C; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC804;&#xC555; &#xAC1C;&#xD3D0; &#xC774;&#xC628; &#xCC44;&#xB110; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xD070; 25% &#xC774;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xD070; &#xAC70;&#xC2DC;&#xC801;&#xC778; &#xC804;&#xB958; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E4;&#xC2DC; &#xD558;&#xB294; &#xB300;&#xADDC;&#xBAA8;, 322-kDa &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCF54;&#xB4DC;. LCa (v) 3 &#xB2EC;&#xD33D;&#xC774; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xAC00;&#xC7A5; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; Ca(2+) &#xCC44;&#xB110; &#xB300;&#xD654; &#xAE30;&#xB85D; &#xC774;&#xAE30;&#xB3C4;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC804;&#xD615;&#xC801;&#xC778; &#xD734;&#xC2DD; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD604;&#xC7AC; &#xCC3D; &#xD06C;&#xAE30; &#xC774;&#xC0C1; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0A9;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xCC44;&#xB110;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCF4;&#xACE0;&#xB85C; &#xC11C;. &#xC774; &#xBA3C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870;, &#xAE30;&#xB2A5;, &#xB9C8;&#xC57D; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xBC0F; T-&#xD0C0;&#xC785; &#xCC44;&#xB110;&#xC758; &#xC9C4;&#xD654; &#xCE21;&#xBA74; &#xBD84;&#xC11D; &#xD558; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; &#xAD00;&#xC810;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xACFC;&#xB3C4; &#xD558; &#xACE0; &#xD070;&#xC740; Lymnaea stagnalis&#xC758; &#xC911;&#xC559; &#xC2E0; &#xACBD;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBB34;&#xCC99; &#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C; T-&#xD0C0;&#xC785; &#xCC44;&#xB110; (LCav3)&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

A continuaci&#xF3;n se describen las caracter&#xED;sticas de los primeros animales no mam&#xED;feros del canal de calcio tipo T (LCA (v) 3) se expresa in vitro. Este canal posee moluscos combinados propiedades biof&#xED;sicas que son una reminiscencia de todos los mam&#xED;feros de tipo T-canales. Presenta caracter&#xED;sticas de tipo T, tales como &#x26;quot;transitorios&#x26;quot; cin&#xE9;tica, pero la &#x26;quot;peque&#xF1;a&#x26;quot; etiqueta, generalmente asociada con Ba (2 +) de la conductancia, es dif&#xED;cil de conciliar con la &#x26;quot;grandeza&#x26;quot; de este canal, en muchos aspectos. LCA (v) 3 es un 25% m&#xE1;s grande que cualquier canal i&#xF3;nico dependiente de voltaje expresado hasta la fecha. Codifica para una masiva, 322-kDa prote&#xED;na que lleva a cabo grandes corrientes macrosc&#xF3;picas in vitro. LCA (v) 3 es tambi&#xE9;n el m&#xE1;s abundante de Ca (2 +) transcripci&#xF3;n canal en el sistema nervioso caracol. Una ventana actual en t&#xED;picos potenciales de reposo parece ser al menos tan grande como la descrita para los canales de mam&#xED;feros. Este gen distante proporciona una perspectiva &#xFA;nica para analizar los aspectos estructurales, funcionales vinculante, de drogas, y los aspectos evolutivos de tipo T canales.

Transitoria y Big son caracter&#xED;sticas clave de un invertebrado de tipo T Canal (LCav3) del sistema nervioso central de la Lymnaea stagnalis

&#x7535;&#x538B;&#x95E8;&#x63A7;&#x6027;&#x9499;&#x901A;&#x9053;&#x4E2D;&#x7684; Ca (v) 2 &#x901A;&#x9053;&#x7C7B;&#x662F;&#x76D1;&#x7BA1;&#x673A;&#x6784;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x4F20;&#x9012;&#x548C;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x6539;&#x6027;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7A81;&#x89E6; G &#x86CB;&#x767D;&#x5076;&#x8054;&#x53D7;&#x4F53; (GPCRs) &#x7684;&#x53D1;&#x5C04;&#x673A;&#x6295;&#x5165;&#x3002;&#x4E00;&#x79CD;&#x65E0;&#x5904;&#x4E0D;&#x5728;&#x7684; G &#x86CB;&#x767D;&#x8C03;&#x5236;&#x5F62;&#x5F0F;&#x6D89;&#x53CA;&#x6291;&#x5236;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269; Ca (v) 2.1 &#x548C; Ca (v) 2.2 &#x6E20;&#x9053;&#x7531; Gbetagamma &#x4E8C;&#x805A;&#x4F53;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x901A;&#x8FC7;&#x9AD8;&#x9891;&#x7387;&#x7684;&#x52A8;&#x4F5C;&#x7535;&#x4F4D;&#x7684;&#x5217;&#x8F66;&#x6765;&#x7F13;&#x89E3;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5904;&#x7406;&#x662F;&#x5426;&#x5728;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x4E2D;&#x7684; G &#x86CB;&#x767D;&#x8C03;&#x8282;&#x7684;&#x65E0;&#x5904;&#x4E0D;&#x5728;&#x548C;&#x591A;&#x624D;&#x591A;&#x827A;&#x5F62;&#x5F0F;&#x4E5F;&#x89C1;&#x4E8E;&#x66F4;&#x7B80;&#x5355;&#x65E0;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x3002;&#x5F15;&#x4EBA;&#x6CE8;&#x76EE;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x65E0;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x7684; LCa (v) 2 &#x4ECE;&#x6C60;&#x5858;&#x8717;&#x725B;&#xFF0C;&#x7A3B;&#x7530;&#x690E;&#x5B9E; stagnalis &#x9891;&#x9053;&#x4E0D;&#x627F;&#x62C5;&#x4EFB;&#x4F55; Ca (v) 2.2 G &#x86CB;&#x767D;&#x6291;&#x5236;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x3001; &#x7535;&#x538B;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x3002;&#x6362;&#x7528;&#x7684;-&#x4E8C;&#x94FE;&#x63A5;&#x5668;&#x6216; N &#x603B;&#x7AD9; Ca (v) 2.2 G &#x86CB;&#x767D;&#x6291;&#x5236;&#x7684;&#x952E;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x57DF;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E0D;&#x8D4B;&#x4E88;&#x65E0;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x7684; LCa (v) 2 &#x9891;&#x9053;&#x4E0E;&#x7535;&#x538B;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027; G &#x86CB;&#x767D;&#x8C03;&#x8282;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x76F8;&#x53CD;&#xFF0C;&#x5728;&#x4F53;&#x5916;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E86; LCa (v) 2 &#x6E20;&#x9053;&#x5747;&#x6709;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x7F13;&#x6162;&#x7684;&#x8425;&#x5730;&#xFF0C;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E; G &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4F46;&#x4E0D;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E; Gbetagamma &#x4E9A;&#x57FA;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x785D;&#x82EF;&#x5730;&#x5E73;&#x4E0D;&#x533A;&#x5206; LCa (v) 2 &#x7C7B;&#x4F3C; G &#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x8425;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6291;&#x5236;&#x7535;&#x6D41;&#x4E5F;&#x662F;&#x672C;&#x673A;&#x548C;&#x786E;&#x5B9A;&#x7A3B;&#x7530;&#x690E;&#x5B9E; VD4 &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x76F8;&#x4E00;&#x81F4;&#x3002;&#x6162;&#x6291;&#x5236;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4FE1;&#x4F7F;&#x5982;&#x8425;&#x53EF;&#x80FD;&#x6EE1;&#x8DB3;&#x8C03;&#x8282;&#x9700;&#x8981;&#x5728;&#x65E0;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x4E2D;&#x7684;&#xFF0C;&#x800C;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7684;&#x76D1;&#x7BA1;&#xFF0C;&#x5728;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x8FDB;&#x5316;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x66F4;&#x591A;&#x7684;&#x52A8;&#x6001;&#xFF0C;&#x5BF9; neurosecretion &#x8FDB;&#x884C;&#x5FAE;&#x8C03;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x8C03;&#x8282;&#x795E;&#x7ECF;&#x9012;&#x8D28;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x901A;&#x8FC7;&#x7A81;&#x89E6;&#x524D; GPCRs &#x6295;&#x5165;&#x3002;

G &#x86CB;&#x767D;&#x8C03;&#x8282;&#x65E0;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x9499;&#x901A;&#x9053; &#xFF08;&#x4E0D;&#x540C;&#x4E8E;&#x53E4;&#x5178;&#x7535;&#x538B;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x89C4;&#x4F8B;&#x7684;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269; (v) 2.1 Ca &#x548C; Ca (v) 2.2 LCa(v)2) &#x9891;&#x9053;&#x3002;

Voltage-gated calcium channels in the Ca(v)2 channel class are regulators of synaptic transmission and are highly modified by transmitter inputs that activate synaptic G-protein-coupled receptors (GPCRs). A ubiquitous form of G-protein modulation involves an inhibition of mammalian Ca(v)2.1 and Ca(v)2.2 channels by Gbetagamma dimers that can be relieved by high-frequency trains of action potentials. Here, we address whether the ubiquitous and versatile form of G-protein regulation in mammals is also found in simpler invertebrate nervous systems. Remarkably, the invertebrate LCa(v)2 channel from the pond snail, Lymnaea stagnalis, does not bear any of the hallmarks of mammalian, voltage-dependent G-protein inhibition of Ca(v)2.2. Swapping either the I-II linker or N-terminus of Ca(v)2.2, which serve as key binding domains for G-protein inhibition, does not endow invertebrate LCa(v)2 channels with voltage-dependent G-protein modulatory capacity. Instead, in vitro expressed LCa(v)2 channels are inhibited slowly by the activation of cAMP, in a manner that depends on G-proteins but does not depend on Gbetagamma subunits. A similar G-protein and cAMP-dependent inhibition of nifedipine-insensitive LCa(v)2 currents is also consistent in native and identified Lymnaea VD4 neurons. The slower inhibition using a cellular messenger such as cAMP may meet the modulatory needs in invertebrates while an activity-dependent regulation, evolving in vertebrates, provides a more dynamic, fine-tuning of neurosecretion by regulating the influence of neurotransmitter inputs through presynaptic GPCRs.

G-proteins modulate invertebrate synaptic calcium channel (LCa(v)2) differently from the classical voltage-dependent regulation of mammalian Ca(v)2.1 and Ca(v)2.2 channels.

Canaux calciques voltage-d&eacute;pendants dans la classe de 2 canaux Ca (v) sont responsables de la r&eacute;glementation de la transmission synaptique et sont fortement modifi&eacute;s par des apports d&#39;&eacute;metteur qui activent les r&eacute;cepteurs coupl&eacute;s aux prot&eacute;ines G (RCPG) synaptiques. Ca (v) 2.2 canaux par les dim&egrave;res de Gbetagamma qui peuvent &ecirc;tre soulag&eacute;s par des trains de haute fr&eacute;quence de potentiels d&#39;action et une forme omnipr&eacute;sente de la modulation de la prot&eacute;ine G implique une inhibition de Ca chez les mammif&egrave;res (v) 2.1. Ici, nous abordons si la forme omnipr&eacute;sente et polyvalente de la r&eacute;glementation G-prot&eacute;ine chez les mammif&egrave;res se retrouve &eacute;galement dans des syst&egrave;mes nerveux d&#39;invert&eacute;br&eacute;s plus simples. Fait remarquable, l&#39;ACV d&#39;invert&eacute;br&eacute;s (v) 2 canal de l&#39;escargot, Lymnaea stagnalis, ne porte aucune des caract&eacute;ristiques d&#39;inhibition de G-prot&eacute;ine chez les mammif&egrave;res, voltage-d&eacute;pendants de Ca (v) 2.2. &Eacute;changeant le linker I et II ou N-terminale de Ca (v) 2.2, qui servent de domaines cl&eacute;s pour l&#39;inhibition de la prot&eacute;ine G, ne pas doter invert&eacute;br&eacute; LCa (v) 2 canaux avec capacit&eacute;s modulatrices de G-prot&eacute;ine voltage-d&eacute;pendants. Au lieu de cela, in vitro exprim&eacute; LCa (v) 2 canaux est inhib&eacute;es lentement par l&#39;activation du cAMP, d&#39;une mani&egrave;re qui d&eacute;pend des prot&eacute;ines G, mais ne d&eacute;pend pas des sous-unit&eacute;s de la Gbetagamma. Une inhibition de prot&eacute;ine G et d&eacute;pendante de l&#39;AMPc similaire de l&#39;&Eacute;CV insensible &agrave; la nif&eacute;dipine (v) 2 courants est &eacute;galement compatible dans les neurones Lymnaea VD4 natives et identifi&eacute;s. L&#39;inhibition plus lente en utilisant un messager cellulaire, tels que le cAMP peut r&eacute;pondre aux besoins modulatrices chez les invert&eacute;br&eacute;s, alors qu&#39;une r&eacute;glementation de l&#39;activit&eacute; d&eacute;pendante, &eacute;volution chez les vert&eacute;br&eacute;s, fournit une dynamique plus, affinement des neuros&eacute;cr&eacute;tions en r&eacute;gulant l&#39;influence du neurotransmetteur entr&eacute;es par le biais des RCPG pr&eacute;synaptiques.

G-prot&eacute;ines modulent des canaux calciques synaptique d&#39;invert&eacute;br&eacute;s (LCa(v)2) diff&eacute;remment de la r&eacute;glementation classique de voltage-d&eacute;pendants des mammif&egrave;res (v) 2.1 et Ca (v) 2.2 canaux.

Spannung-Gating Kalzium-Kan&auml;le in der Ca (V) 2-Kanal-Klasse sind Regulatoren der synaptischen &Uuml;bertragung und hoch ge&auml;ndert von Sender-Eing&auml;nge, die synaptische G-Protein-gekoppelter Rezeptoren (GPCRs) aktivieren. Eine allgegenw&auml;rtige Form der G-Protein-Modulation betrifft eine Hemmung der S&auml;ugetier-Ca (V) 2.1 und Ca (V) 2.2 Kan&auml;le durch Gbetagamma-Dimere, die durch Hochfrequenz-Z&uuml;ge der Aktionspotentiale gelindert werden k&ouml;nnen. Hier wenden wir uns ob allgegenw&auml;rtige und vielseitige Form der G-Protein-Verordnung bei S&auml;ugetieren auch in einfacheren Wirbellosen Nervensysteme gefunden wird. Bemerkenswert ist, die Wirbellosen LCa (V) 2 Kanal aus dem Teich-Schnecke, Spitzschlammschnecke, diese nicht tr&auml;gt alle Kennzeichen der S&auml;ugetier-, Spannung-abh&auml;ngigen G-Protein-Hemmung der Ca (V) 2.2. Tauschen-II-Linker oder N-Terminus von Ca (V) 2.2, welche dienen als Tastenzuordnung Domains f&uuml;r G-Protein-Hemmung, nicht verleihen, Wirbellose Kan&auml;le LCa (V) 2 mit Spannung-abh&auml;ngigen G-Protein-rische Kapazit&auml;t. Stattdessen in Vitro ausgedr&uuml;ckt LCa (V) 2 Kan&auml;le werden langsam durch die Aktivierung des Lagers, in einer Weise, die G-Proteine h&auml;ngt aber h&auml;ngt nicht Gbetagamma Untereinheiten gehemmt. Eine &auml;hnliche G-Protein- und Lager-abh&auml;ngige Hemmung der Nifedipin-unempfindliche LCa (V) 2 Str&ouml;mungen ist auch konsistent in native und identifizierten Lymnaea VD4 Neuronen. Die langsameren Hemmung mit zellul&auml;ren boten, wie Lager kann die Bed&uuml;rfnisse modulierende bei Wirbellosen w&auml;hrend eine leistungsabh&auml;ngige Regelung, entwickelt sich bei Wirbeltieren, eine weitere Dynamik bietet, durch pr&auml;synaptische GPCRs Eing&auml;nge Feinabstimmung des Neurosecretion durch die Regulierung des Einfluss der Neurotransmitter.

G-Proteine modulieren Wirbellosen synaptische Kalzium-Kanal (LCa(v)2) anders als die klassischen Spannung-abh&auml;ngige Regelung der S&auml;ugetier-Ca (V) 2.1 und Ca (V) 2.2 Kan&auml;le.

Canali del calcio voltaggio-dipendenti nella classe 2 canali Ca (v) sono dei regolatori della trasmissione sinaptica e sono altamente modificati dagli ingressi del trasmettitore che attivano sinaptici recettori accoppiati a proteine G (GPCR). Una forma onnipresente di modulazione G-proteina comporta un&#39;inibizione di mammiferi Ca (v) 2.1 e Ca (v) 2.2 canali da dimeri di Gbetagamma che possono essere alleviati dai treni ad alta frequenza di potenziali d&#39;azione. Qui, ci rivolgiamo sia onnipresente e versatile forma di regolamento G-proteina nei mammiferi &egrave; presente anche in semplici sistemi nervosi degli invertebrati. Notevolmente, gli invertebrati LCa (v) 2 canale dalla lumaca di stagno, Lymnaea stagnalis, non riportano i tratti distintivi di inibizione G-proteina dei mammiferi, voltaggio-dipendenti del Ca (v) 2.2. Scambiando il linker II o N-terminus di Ca (v) 2.2, che servono come domini di associazione chiave per inibizione della proteina G, non dotare invertebrato LCa (v) 2 canali con capacit&agrave; modulante G-proteina di voltaggio-dipendenti. Invece, in vitro espresso LCa (v) 2 canali sono inibiti lentamente dall&#39;attivazione dell&#39;accampamento, in un modo che dipende dalla G-proteine, ma non dipende da subunit&agrave; Gbetagamma. Una simile inibizione G-proteina e cAMP-dipendente di Nifedipina-insensibile LCa (v) 2 correnti &egrave; anche coerente nei neuroni Lymnaea VD4 nativi e identificati. L&#39;inibizione pi&ugrave; lento usando un messaggero cellulare come accampamento pu&ograve; soddisfare le esigenze schematizzate in invertebrati mentre un regolamento attivit&agrave;-dipendente, in continua evoluzione nei vertebrati, fornisce una pi&ugrave; dinamica, messa a punto di neurosecretion regolando l&#39;influenza del neurotrasmettitore ingressi attraverso GPCR presinaptica.

G-proteine modulano canale calcio sinaptica invertebrati (LCa(v)2) diversamente dal classico regolamento voltaggio-dipendenti dei mammiferi (v) 2.1 Ca e Ca (v) 2.2 canali.

&#x96FB;&#x5727;&#x96FB;&#x4F4D;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB; Ca (v) 2 &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB; &#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x3067;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E; G &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5171;&#x5F79;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; &#xFF08;Gpcr&#xFF09; &#x3092;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C3;&#x30BF;&#x5165;&#x529B;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5909;&#x66F4;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Ca (v) 2.2 &#x6D3B;&#x52D5;&#x96FB;&#x4F4D;&#x306E;&#x9AD8;&#x5468;&#x6CE2;&#x5217;&#x8ECA;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x53D6;&#x308A;&#x9664;&#x304F;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B; Gbetagamma &#x30C0;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3001;G &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5909;&#x8ABF;&#x306E;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30BF;&#x30B9;&#x5F62;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E; Ca (v) 2.1 &#x306E;&#x963B;&#x6B62;&#x3092;&#x4F34;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; G &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5236;&#x5FA1;&#x306E;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30BF;&#x30B9;&#x3068;&#x591A;&#x5F69;&#x306A;&#x5F62;&#x3082;&#x3088;&#x308A;&#x5358;&#x7D14;&#x306A;&#x7121;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x795E;&#x7D4C;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3067;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x3089;&#x306A;&#x3044;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x30A2;&#x30C9;&#x30EC;&#x30B9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8457;&#x3057;&#x304F;&#x3001;&#x7121;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269; LCa (v) 2 &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3001;&#x30AB;&#x30BF;&#x30C4;&#x30E0;&#x30EA;&#x304B;&#x3089;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;, &#x96FB;&#x4F4D;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027; Ca (v) 2.2 G &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x963B;&#x5BB3;&#x306E;&#x7279;&#x5FB4;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x3092;&#x8CA0;&#x62C5;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;LCa (v) 2 &#x96FB;&#x5727;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x305F; G &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x97F3;&#x5BB9;&#x91CF;&#x3068;&#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30CD;&#x30EB;-II &#x30EA;&#x30F3;&#x30AB;&#x30FC;&#x307E;&#x305F;&#x306F; Ca (v) &#x30AD;&#x30FC; &#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0; &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E; G &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x963B;&#x5BB3;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5F79;&#x7ACB;&#x3064;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x7121;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x3092;&#x6388;&#x3051;&#x308B; 2.2 &#x306E; N &#x672B;&#x7AEF;&#x306E;&#x30B9;&#x30EF;&#x30C3;&#x30D7;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4EE3;&#x308F;&#x308A;&#x306B;&#x3001;in vitro &#x3067; LCa (v) 2 &#x8868;&#x73FE;&#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3092;&#x3086;&#x3063;&#x304F;&#x308A;&#x3068; G &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x4E0A;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x4E0A;&#x306E; Gbetagamma &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x306E;&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D7;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x963B;&#x5BB3;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3088;&#x3046;&#x306A; G &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D7;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x305F;&#x6291;&#x5236;&#x30CB;&#x30D5;&#x30A7;&#x30B8;&#x30D4;&#x30F3;&#x7121;&#x4F9D;&#x5B58; LCa (v) 2 &#x306E;&#x96FB;&#x6D41;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x3068;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30E8;&#x30FC;&#x30ED;&#x30C3;&#x30D1;&#x30E2;&#x30CE;&#x30A2;&#x30E9;&#x30AC;&#x30A4; VD4 &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x4E00;&#x8CAB;&#x6027;&#x3002;&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D7;&#x306F;&#x3001;&#x7121;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x97F3;&#x306E;&#x30CB;&#x30FC;&#x30BA;&#x3092;&#x6E80;&#x305F;&#x3059;&#x305F;&#x3081;&#x3088;&#x308A;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30C3;&#x30AF;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x9032;&#x5316;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x305F;&#x898F;&#x5236;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x306A;&#x3069;&#x643A;&#x5E2F;&#x96FB;&#x8A71;&#x306E;&#x30E1;&#x30C3;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B8;&#x30E3;&#x30FC;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x4F4E;&#x901F;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x795E;&#x7D4C;&#x5206;&#x6CCC;&#x50CF;&#x306B;&#x5C31;&#x3044;&#x3066;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x4F1D;&#x9054;&#x7269;&#x8CEA;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5FAE;&#x8ABF;&#x6574;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x524D;&#x306E; Gpcr &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x5165;&#x529B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

G &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x7121;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9; &#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB; (LCa(v)2) &#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E; Ca (v) 2.1 &#x3068; Ca (v) 2.2 &#x306E;&#x53E4;&#x5178;&#x306E;&#x96FB;&#x4F4D;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x898F;&#x5236;&#x306E;&#x3068;&#x306F;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3002;

&#xC804;&#xC555; &#xAC1C;&#xD3D0; &#xCE7C;&#xC298; Ca (v) 2 &#xCC44;&#xB110; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xC804;&#xC1A1;&#xC758; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;&#xB294; &#xCC44;&#xB110;&#xACFC; &#xB192;&#xC740; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; G-&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xACB0;&#xD569; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (GPCRs)&#xB97C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xC1A1;&#xC2E0;&#xAE30; &#xC785;&#xB825; &#xC218;&#xC815;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC720;&#xBE44; &#xCFFC;&#xD130; &#xC2A4; &#xD615;&#xD0DC;&#xC758; G-&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBCC0;&#xC870; &#xD3EC;&#xD568; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; Ca (v) 2.1&#xC758; &#xC800;&#xD574; &#xBC0F; &#xD589;&#xB3D9; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC758; &#xACE0;&#xC8FC;&#xD30C; &#xC5F4;&#xCC28;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC548;&#xC2EC; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; Gbetagamma &#xC774;&#xD569;&#xCCB4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; Ca (v) 2.2 &#xCC44;&#xB110;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0;&#xC11C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC720;&#xBE44; &#xCFFC;&#xD130; &#xC2A4; &#xBC0F; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xD615;&#xD0DC;&#xC758; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958;&#xC5D0;&#xC11C; G-&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xADDC;&#xC81C; &#xB610;&#xD55C; &#xAC04;&#xB2E8; &#xD558; &#xAC8C; &#xBB34;&#xCC99; &#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xC5EC;&#xBD80; &#xC8FC;&#xC18C;. &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4;, &#xBB34;&#xCC99; &#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C; LCa (v) 2 &#xCC44;&#xB110;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5F0;&#xBABB; &#xB2EC;&#xD33D;&#xC774;, Lymnaea stagnalis, Ca (v) 2.2&#xC758; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958;, &#xC804;&#xC555; &#xC885;&#xC18D; G-&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC800;&#xD574;&#xC758; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xB97C; &#xBD80;&#xB2F4; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2A4;&#xC640;&#xD551;-II &#xB9C1;&#xCEE4; &#xB610;&#xB294; Ca (v) 2.2, G-&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC800;&#xD574;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD0A4; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC73C;&#xB85C;&#xB294; &#xC11C;&#xBE0C; &#xBB34;&#xCC99;&#xCD94;&#xB3D9;&#xBB3C;&#xC744; &#xBD80;&#xC5EC; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;&#xC758; N-&#xB9D0;&#xB2E8; &#xC804;&#xC555; &#xC885;&#xC18D; G-&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; modulatory &#xC6A9;&#xB7C9; LCa (v) 2 &#xCC44;&#xB110;&#xC744;. &#xB300;&#xC2E0;, &#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C;&#xD604; &#xB41C; LCa (v) 2 &#xCC44;&#xB110; G-&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xC758;&#xC874; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; Gbetagamma subunits&#xC5D0; &#xC758;&#xC874; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xCEA0;&#xD504;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCC9C;&#xCC9C;&#xD788; &#xC800;&#xD574; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; G-&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xACFC; &#xCEA0;&#xD504; &#xC885;&#xC18D; &#xC5B5;&#xC81C; nifedipine&#xC744; &#xAD6C;&#xBD84; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; LCa (v) 2&#xC758; &#xC804;&#xB958;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xB124;&#xC774;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xC2DD;&#xBCC4;&#xB41C; Lymnaea VD4 &#xC2E0;&#xACBD;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC77C;&#xAD00; &#xB41C;. &#xCC99;&#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C4;&#xD654; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xC885;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xADDC;&#xC81C; &#xB354; &#xB9CE;&#xC740; &#xB3D9;&#xB825;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xCEA0;&#xD504; &#xBB34;&#xCC99; &#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0; modulatory &#xC694;&#xAD6C;&#xB97C; &#xCDA9;&#xC871; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;&#xC640; &#xAC19;&#xC740; &#xD734;&#xB300; &#xC804;&#xD654; &#xBA54;&#xC2E0;&#xC800;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB290;&#xB9B0; &#xC5B5;&#xC81C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC804;&#xB2EC; &#xBB3C;&#xC9C8;&#xC758; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558; &#xC5EC; neurosecretion&#xC758; &#xBBF8;&#xC138; &#xC870;&#xC815; presynaptic GPCRs &#xD1B5;&#xD574; &#xC785;&#xB825;&#xC774; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBB34;&#xCC99; &#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xCE7C;&#xC298; &#xCC44;&#xB110;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; G-&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (LCa(v)2) &#xB2E4;&#xB974;&#xAC8C; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; (v) 2.1 Ca &#xBC0F; Ca (v) 2.2 &#xACE0;&#xC804; &#xC804;&#xC555; &#xC885;&#xC18D; &#xADDC;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCC44;&#xB110;.

Canales de calcio voltaje-bloqueados en la clase de 2 canales de Ca (v) son reguladores de la transmisi&oacute;n sin&aacute;ptica y son altamente modificados por entradas de transmisor que activan los receptores g-prote&iacute;na-juntados sin&aacute;pticos (GPCRs). Una forma ubicua de modulaci&oacute;n de la prote&iacute;na G consiste en una inhibici&oacute;n de mam&iacute;fero Ca (v) 2.1 y Ca (v) 2.2 canales por d&iacute;meros de Gbetagamma que pueden aliviarse con trenes de alta frecuencia de potenciales de acci&oacute;n. Aqu&iacute;, nos dirigimos a si la forma ubicua y vers&aacute;til de la regulaci&oacute;n de la prote&iacute;na G en mam&iacute;feros se encuentra tambi&eacute;n en los sistemas nervioso invertebrados m&aacute;s simples. Notablemente, el ACV invertebrado (v) 2 canal del caracol de la charca, Lymnaea stagnalis, no lleva ninguna de las caracter&iacute;sticas distintivas de la inhibici&oacute;n de la prote&iacute;na G mam&iacute;fera, dependientes de voltaje de Ca (v) 2.2. Intercambio el vinculador II o el N-terminal de Ca (v) 2.2, que sirven como dominios de Uni&oacute;n clave para la inhibici&oacute;n de la prote&iacute;na G, no dotar a invertebrados LCa (v) 2 canales con capacidad modulador de la prote&iacute;na G de dependientes de voltaje. En cambio, en vitro expres&oacute; LCa (v) 2 canales son inhibidos lentamente por la activaci&oacute;n del campo, de manera que depende de las prote&iacute;nas G, pero no depende de subunidades Gbetagamma. Una inhibici&oacute;n de prote&iacute;na G y dependiente de campo similar de LCa nifedipina-insensible (v) 2 corrientes tambi&eacute;n concuerda en neuronas de Lymnaea VD4 nativas e identificadas. La inhibici&oacute;n m&aacute;s lenta utilizando a un mensajero celular como campamento puede satisfacer las necesidades moduladores en invertebrados, mientras que una regulaci&oacute;n de la actividad dependiente, evolucionando en vertebrados, proporciona una din&aacute;mica m&aacute;s, puesta a punto de neurosecretion regulando la influencia del neurotransmisor entradas a trav&eacute;s de GPCRs presin&aacute;pticas.

G-prote&iacute;nas modulan canales de calcio sin&aacute;ptica invertebrados (LCa(v)2) diferencia de la regulaci&oacute;n de voltaje dependientes cl&aacute;sica de mam&iacute;feros Ca (v) 2.1 y Ca (v) 2.2 canales.

&#x65E0;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269; L-&#x578B;&#x9499;&#x901A;&#x9053;&#xFF0C;LCa(v) 1&#xFF0C;&#x4ECE;&#x6C60;&#x5858;&#x8717;&#x725B;&#x7A3B;&#x7530;&#x690E;&#x5B9E; stagnalis &#x5206;&#x79BB;&#x662F;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269; Ca(v) 1.2 (&alpha;1C) &#x9499;&#x901A;&#x9053;&#x4E2D;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x4F53;&#x5916;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x7269;&#x7406;&#x7279;&#x6027;&#x51E0;&#x4E4E;&#x6CA1;&#x6709;&#x533A;&#x522B;&#x3002;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B; L &#x578B;&#x901A;&#x9053;&#x88AB;&#x9650;&#x5236;&#x751F;&#x7269;&#x7269;&#x7406;&#x53C2;&#x6570;&#x7684;&#x72ED;&#x7A84;&#x8303;&#x56F4;&#x5185;&#x4EE5;&#x8717;&#x725B;&#x548C;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x5FC3;&#x8840;&#x7BA1;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#x6267;&#x884C;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x8717;&#x725B;&#x548C;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7684; L &#x578B;&#x901A;&#x9053;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x533A;&#x522B;&#x662F;&#x4E8C;&#x6C22;&#x5421;&#x5576;&#x7C7B;&#x654F;&#x611F;&#x6027;&#x7684;&#x5DEE;&#x5F02;&#xFF1A; 100 nM &#x4F0A;&#x62C9;&#x5730;&#x5E73;&#x5C55;&#x54C1;&#x7684;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269; Ca(v) 1.2 &#x7535;&#x6D41;&#x4E0D;&#x5F71;&#x54CD;&#x8717;&#x725B; LCa (v) 1 &#x5927;&#x5757;&#x7535;&#x6D41;&#x3002;&#x672C;&#x673A;&#x8717;&#x725B;&#x901A;&#x9053;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5B9D;&#x8D35;&#x7684;&#x4EE3;&#x7406;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x4ECE;&#x5148;&#x524D;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x6B8B;&#x7559;&#x5DEE;&#x5F02;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x548C;&#x5206;&#x5B50;&#x5EFA;&#x6A21;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x3002;&#x6B63;&#x5982;&#x9884;&#x6599;&#xFF0C;LCa (v) 1 &#xFF08;N_3o18&#xFF0C;F_3i10 &#x548C; I_4i12&#xFF09; &#x66FF;&#x6362; DHP &#x9065;&#x611F;&#x6B8B;&#x7559;&#x7684;&#x4E09;&#x4E2A;&#x6B8B;&#x7559;&#x53D8;&#x5316;&#x5728;&#x5404;&#x81EA;&#x7684;&#x7ACB;&#x573A;&#xFF0C;&#x4F0A;&#x62C9;&#x5730;&#x5E73;&#x5757;&#x7684; LCa (v) 1 &#x6548;&#x4EF7;&#x6E20;&#x9053;&#x7684;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269; Ca(v) 1.2 Ca(v) 1.2&#x3001; &#xFF08;Q_3o18&#xFF0C;Y_3i10 &#x548C; M_4i12&#xFF09; &#x5F15;&#x53D1;&#x3002;&#x6709;&#x8DA3;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;LCa(v) 1 &#x901A;&#x9053;&#x4E2D;&#x7684;&#x5355;&#x4E2A; N_3o18_Q &#x7A81;&#x53D8;&#x964D;&#x4F4E;&#x751A;&#x81F3;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65; DHP &#x654F;&#x611F;&#x6027;&#x548C;&#x4E09;&#x91CD;&#x7A81;&#x53D8;&#x8F74;&#x627F;&#x52A0;&#x5F3A;&#x4F0A;&#x62C9;&#x5730;&#x5E73;&#x7684;&#x654F;&#x611F;&#x6027;&#xFF0C;&#x4ECD;&#x4FDD;&#x7559;&#x7740;&#x964D;&#x4F4E;&#x7684;&#x6BD2;&#x6027;&#x7684;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#xFF0C;(S)-&#x6E7E; K8644&#x3002;

&#x4E8C;&#x6C22;&#x5421;&#x5576;&#x7C7B;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x4E2D;&#x6B8B;&#x7559;&#x91CF;&#x4E0D;&#x592A;&#x654F;&#x611F;&#x65E0;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269; L-&#x578B;&#x9499;&#x901A;&#x9053; (LCa v 1&#xFF09; &#x7684;&#x6620;&#x5C04;&#x3002;

Invertebrate L-type calcium channel, LCa(v) 1, isolated from the pond snail Lymnaea stagnalis is nearly indistinguishable from mammalian Ca(v) 1.2 (Î±1C) calcium channel in biophysical characteristics observed in vitro. These L-type channels are likely constrained within a narrow range of biophysical parameters to perform similar functions in the snail and mammalian cardiovascular systems. What distinguishes snail and mammalian L-type channels is a difference in dihydropyridine sensitivity: 100 nM isradipine exhibits a significant block of mammalian Ca(v) 1.2 currents without effect on snail LCa(v)1 currents. The native snail channel serves as a valuable surrogate for validating key residue differences identified from previous experimental and molecular modeling work. As predicted, three residue changes in LCa(v)1 (N_3o18, F_3i10, and I_4i12) replaced with DHP-sensing residues in respective positions of Ca(v) 1.2, (Q_3o18, Y_3i10, and M_4i12) raises the potency of isradipine block of LCa(v)1 channels to that of mammalian Ca(v) 1.2. Interestingly, the single N_3o18_Q mutation in LCa(v) 1 channels lowers DHP sensitivity even further and the triple mutation bearing enhanced isradipine sensitivity, still retains a reduced potency of agonist, (S)-Bay K8644.

Mapping of dihydropyridine binding residues in a less sensitive invertebrate L-type calcium channel (LCa v 1).

Invert&#xE9;br&#xE9;s des canaux calciques de type L, LCA (v) 1, isol&#xE9; de l&#x26;#39;&#xE9;tang d&#x26;#39;escargot Lymnaea stagnalis est presque impossible &#xE0; distinguer de mammif&#xE8;res Ca (v) 1,2 canaux calciques (&#x3B1;1C) dans les caract&#xE9;ristiques biophysiques observ&#xE9;s in vitro. Ces canaux de type L sont susceptibles limit&#xE9;e dans une fourchette &#xE9;troite de param&#xE8;tres biophysiques &#xE0; exercer des fonctions similaires dans l&#x26;#39;escargot et de mammif&#xE8;res syst&#xE8;mes cardio-vasculaire. Ce qui distingue d&#x26;#39;escargots et de mammif&#xE8;res canaux de type L est une diff&#xE9;rence de sensibilit&#xE9; dihydropyridine: 100 nM isradipine pr&#xE9;sente un bloc important de mammif&#xE8;res Ca (v) 1,2 courants sans effet sur escargot LCA (v) 1 courants. Le canal d&#x26;#39;escargot natif sert comme un substitut pr&#xE9;cieux pour la validation des diff&#xE9;rences de r&#xE9;sidus cl&#xE9;s identifi&#xE9;s &#xE0; partir des travaux de mod&#xE9;lisation pr&#xE9;c&#xE9;dente exp&#xE9;rimentale et mol&#xE9;culaire. Comme pr&#xE9;vu, trois changements de r&#xE9;sidus dans l&#x26;#39;ACV (V) 1 (N_3o18, F_3i10, et I_4i12) remplac&#xE9;s par des DHP-d&#xE9;tection de r&#xE9;sidus dans les positions respectives de Ca (v) 1.2, (Q_3o18, Y_3i10, et M_4i12) soul&#xE8;ve la puissance du bloc isradipine de LCA (v) 1 canaux &#xE0; celle de mammif&#xE8;re Ca (v) 1,2. Fait int&#xE9;ressant, la mutation N_3o18_Q unique dans l&#x26;#39;ACV (v) 1 canaux abaisse la sensibilit&#xE9; DHP encore plus loin et la mutation triple tenant am&#xE9;lior&#xE9; la sensibilit&#xE9; isradipine, conserve encore une puissance r&#xE9;duite de l&#x26;#39;agoniste, (S)-Bay K8644.

Cartographie des dihydropyridines r&#xE9;sidus de liaison dans un canal calcique invert&#xE9;br&#xE9;s Moins sensible de type L (LCA V 1)

Wirbellosen L-f&ouml;rmige Kalzium-Kanal, LCa(v) 1, isoliert aus dem Teich-Schnecke Spitzschlammschnecke ist fast von S&auml;ugetier-Ca(v) 1.2 (&alpha;1C)-Kalzium-Kanal im biophysikalischen Eigenschaften beobachtet in-vitro unterscheiden. Diese L-Typ-Kan&auml;le werden wahrscheinlich in einem engen Bereich von biophysikalischen Parameter eingeschr&auml;nkt, in der Schnecke und S&auml;ugetier-Herz-Kreislauf-Systeme &auml;hnliche Aufgaben erf&uuml;llen. Was unterscheidet Schnecke und S&auml;ugetier-L-Typ-Kan&auml;le ist ein Unterschied in Dihydropyridin-Empfindlichkeit: 100 nM Isradipin weist einen erheblichen Block S&auml;ugetier-Ca(v) 1.2 Str&ouml;mungen ohne Auswirkung auf Schnecke LCa (V) 1 Str&ouml;mungen. Der native Schnecke-Kanal dient als einen wertvollen Ersatz f&uuml;r die &Uuml;berpr&uuml;fung der wichtigsten R&uuml;ckstand Unterschiede identifiziert aus fr&uuml;heren experimentelle und Molekulare Modellierung Arbeit. Wie vorausgesagt, drei R&uuml;ckstand &Auml;nderungen in LCa (V) 1 (N_3o18, F_3i10 und I_4i12) ersetzt mit DHP-Sensorik R&uuml;ckst&auml;nde in den jeweiligen Positionen Ca(v) 1.2 (Q_3o18, Y_3i10 und M_4i12) erh&ouml;ht die Wirksamkeit von Isradipin Block von LCa (V) 1-der S&auml;ugetier-Ca(v) 1.2 Kan&auml;le. Interessant ist, die einzelne N_3o18_Q-Mutation in LCa(v) 1 Kan&auml;le senkt DHP Empfindlichkeit noch weiter und dreifach Mutation Lagers enhanced Isradipin Empfindlichkeit, beh&auml;lt noch eine geringere Wirksamkeit von Agonist, (S)-Bay K8644.

Zuordnung von Dihydropyridin Bindung R&uuml;ckst&auml;nde in einem weniger empfindlichen Wirbellosen L-Typ-Kalzium-Kanal (LCa V 1).

Invertebrati canale del calcio tipo L, LCa(v) 1, isolato dalla lumaca di stagno Lymnaea stagnalis &egrave; quasi indistinguibile dal canale di calcio Ca(v) 1.2 (&alpha;1C) dei mammiferi in biofisiche caratteristiche osservate in vitro. Questi canali di tipo L probabilmente sono vincolati all&#39;interno di una ristretta gamma di parametri biofisici per svolgere funzioni simili nella lumaca e sistemi cardiovascolari dei mammiferi. Ci&ograve; che distingue la lumaca e mammiferi canali L-type &egrave; una differenza di sensibilit&agrave; diidropiridinico: 100 nM Isradipina esibisce un significativo blocco di mammiferi Ca(v) 1.2 correnti senza effetto sulla lumaca LCa (v) 1 correnti. Il canale nativo lumaca serve come un surrogato prezioso per la convalida di differenze residui chiave identificate dalla precedente sperimentale e lavoro di modellazione molecolare. Come previsto, tre cambiamenti di residui in LCa (v) 1 (N_3o18, F_3i10 e I_4i12) sostituito con DHP-sensing residui nelle rispettive posizioni di Ca(v) 1.2, (Q_3o18, Y_3i10 e M_4i12) genera la potenza di Isradipina blocco di LCa (v) 1 canali a quella dei mammiferi Ca(v) 1.2. &Egrave; interessante notare che, la singola mutazione N_3o18_Q in LCa(v) 1 canali abbassa la sensibilit&agrave; DHP ulteriormente e il cuscinetto di mutazione triple migliorata la sensibilit&agrave; Isradipina, conserva ancora una potenza ridotta di agonista, (S)-Bay K8644.

Mappatura dei residui associazione diidropiridinico in un meno sensibile degli invertebrati canale calcio di tipo L (LCa v 1).

&#x6C60;&#x30AB;&#x30BF;&#x30C4;&#x30E0;&#x30EA;Lymnaea stagnalis&#x304B;&#x3089;&#x9694;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7121;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;L&#x578B;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3001;LCA&#xFF08;v&#xFF09;&#x3092;&#x200B;&#x200B;&#x56F3;1&#x306B;&#x793A;&#x3059;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;in vitro&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x751F;&#x7269;&#x7269;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x7279;&#x6027;&#x306E;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;Ca&#xFF08;V&#xFF09;1.2&#xFF08;&#x3B1;1C&#xFF09;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30CD;&#x30EB;&#x304B;&#x3089;&#x307B;&#x307C;&#x533A;&#x5225;&#x304C;&#x3064;&#x304B;&#x306A;&#x3044;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;L-&#x578B;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F;&#x30AB;&#x30BF;&#x30C4;&#x30E0;&#x30EA;&#x3068;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;&#x5FC3;&#x81D3;&#x8840;&#x7BA1;&#x7CFB;&#x306B;&#x985E;&#x4F3C;&#x3057;&#x305F;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x5B9F;&#x884C;&#x3059;&#x308B;&#x751F;&#x7269;&#x7269;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x306E;&#x72ED;&#x3044;&#x7BC4;&#x56F2;&#x5185;&#x306B;&#x5236;&#x9650;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3069;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30AB;&#x30BF;&#x30C4;&#x30E0;&#x30EA;&#x3068;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;L-&#x578B;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3092;&#x533A;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x30B8;&#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x30D4;&#x30EA;&#x30B8;&#x30F3;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x306E;&#x5DEE;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#xFF1A;100 nM&#x306E;&#x30A4;&#x30B9;&#x30E9;&#x30B8;&#x30D4;&#x30F3;&#x306F;&#x30AB;&#x30BF;&#x30C4;&#x30E0;&#x30EA;LCA&#xFF08;V&#xFF09;1&#x306E;&#x96FB;&#x6D41;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;Ca&#xFF08;V&#xFF09;1.2&#x96FB;&#x6D41;&#x306E;&#x5927;&#x5E45;&#x306A;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3002;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x30AB;&#x30BF;&#x30C4;&#x30E0;&#x30EA;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x524D;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3068;&#x5206;&#x5B50;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x4F5C;&#x696D;&#x304B;&#x3089;&#x8B58;&#x5225;&#x30AD;&#x30FC;&#x6B8B;&#x57FA;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x3092;&#x691C;&#x8A3C;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8CB4;&#x91CD;&#x306A;&#x30B5;&#x30ED;&#x30B2;&#x30FC;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3068;&#x3057;&#x3066;Ca&#x306E;&#x5404;&#x4F4D;&#x7F6E;&#xFF08;V&#xFF09;1.2&#x3001;&#xFF08;Q_3o18&#x3001;Y_3i10&#x3001;&#x3068;M_4i12&#xFF09;&#x306E;DHP&#x30BB;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x6B8B;&#x57FA;&#x306B;&#x7F6E;&#x63DB;LCA&#x306E;3&#x6B8B;&#x57FA;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#xFF08;V&#xFF09;1&#xFF08;N_3o18&#x3001;F_3i10&#x3001;&#x3068;I_4i12&#xFF09;&#x30A4;&#x30B9;&#x30E9;&#x30B8;&#x30D4;&#x30F3;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x306E;&#x52B9;&#x529B;&#x3092;&#x767A;&#x751F;&#x3055;&#x305B;&#x3001;&#x4E88;&#x6E2C;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#xFF08;V&#xFF09;1.2&#x301C;LCA&#xFF08;v&#xFF09;&#x306E;1&#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3002;&#x8208;&#x5473;&#x6DF1;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;LCA&#x306E;&#x5358;&#x4E00;N_3o18_Q&#x5909;&#x7570;&#xFF08;V&#xFF09;1&#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30CD;&#x30EB;&#x304C;&#x3055;&#x3089;&#x306B;DHP&#x611F;&#x5EA6;&#x3068;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30A4;&#x30B9;&#x30E9;&#x30B8;&#x30D4;&#x30F3;&#x611F;&#x5EA6;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x4E09;&#x91CD;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x4E0B;&#x3052;&#x3001;&#x307E;&#x3060;&#x3001;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306E;&#x52B9;&#x529B;&#x3092;&#x4FDD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#xFF08;S&#xFF09;&#x30D9;&#x30A4;K8644&#x3002;

&#x6A5F;&#x5BC6;&#x6027;&#x306E;&#x4F4E;&#x3044;&#x7121;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;L&#x578B;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x30B8;&#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x30D4;&#x30EA;&#x30B8;&#x30F3;&#x7D50;&#x5408;&#x6B8B;&#x57FA;&#x306E;&#x30DE;&#x30C3;&#x30D4;&#x30F3;&#x30B0;&#xFF08;LCA V 1&#xFF09;

&#xBB34;&#xCC99; &#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C; L &#xD0C0;&#xC785; &#xCE7C;&#xC298; &#xCC44;&#xB110;, LCa(v) 1, Lymnaea stagnalis &#xC5F0;&#xBABB; &#xB2EC;&#xD33D;&#xC774;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xB41C; &#xCCB4; &#xC678; &#xAD00;&#xCC30; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xB9AC; &#xD2B9;&#xC131;&#xC5D0; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; Ca(v) 1.2 (&alpha;1C) &#xCE7C;&#xC298; &#xCC44;&#xB110;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC70;&#xC758; &#xAD6C;&#xBCC4;&#xD560; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0; &#xC774; L &#xD615; &#xC218;&#xB85C; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xB2EC;&#xD33D;&#xC774; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC2EC;&#xC7A5; &#xD608;&#xAD00; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC218;&#xD589; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xB9AC; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218;&#xC758; &#xC881;&#xC740; &#xBC94;&#xC704; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC81C;&#xD55C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Dihydropyridine &#xAC10;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xCC28;&#xC774;&#xAC00; &#xBB34;&#xC2A8; &#xB2EC;&#xD33D;&#xC774; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; L &#xD615; &#xCC44;&#xB110; &#xAD6C;&#xBD84;: 100 nM isradipine &#xC804;&#xC2DC; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBE14;&#xB85D; &#xB2EC;&#xD33D;&#xC774; LCa (v) 1&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC8FC;&#xC9C0; &#xC54A;&#xACE0; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; Ca(v) 1.2 &#xC804;&#xB958; &#xC804;&#xB958;. &#xB124;&#xC774;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xB2EC;&#xD33D;&#xC774; &#xCC44;&#xB110; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xB41C; &#xC8FC;&#xC694; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C; &#xCC28;&#xC774; &#xAC80;&#xC99D;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xBC0F; &#xBD84;&#xC790; &#xBAA8;&#xB378;&#xB9C1; &#xC791;&#xC5C5; &#xADC0;&#xC911; &#xD55C; &#xB300;&#xB9AC;&#xB85C; &#xC11C; &#xC5ED;&#xD560;. &#xC608;&#xCE21;, LCa (v) 1 (N_3o18, F_3i10, &#xBC0F; I_4i12) DHP &#xAC10;&#xC9C0; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC73C;&#xB85C; &#xB300;&#xCCB4; &#xC138; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C; &#xBCC0;&#xD654; Ca(v) 1.2, (Q_3o18, Y_3i10, &#xBC0F; M_4i12) &#xC81C;&#xAE30; LCa (v) 1&#xC758; isradipine &#xBE14;&#xB85D;&#xC758; &#xD798;&#xC744; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; Ca(v) 1.2&#xC758; &#xCC44;&#xB110;&#xC758; &#xAC01;&#xAC01;&#xC758; &#xC704;&#xCE58;&#xC5D0;&#xC11C;. &#xD765;&#xBBF8;&#xB86D;&#xAC8C;&#xB3C4;, LCa(v) 1 &#xCC44;&#xB110;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E8;&#xC77C; N_3o18_Q &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; DHP &#xAC10;&#xB3C4; &#xB354;&#xC6B1; &#xC808;&#xAC10; &#xD558; &#xACE0; &#xD2B8;&#xB9AC;&#xD50C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBCA0;&#xC5B4;&#xB9C1; isradipine &#xAC10;&#xB3C4; &#xD5A5;&#xC0C1;, &#xC5EC;&#xC804;&#xD788; &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C; (S)&#xC758; &#xAC10;&#xC18C; &#xD6A8;&#xB2A5;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0;-&#xBCA0;&#xC774; K8644.

&#xB35C; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xBB34;&#xCC99; &#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C; L &#xD0C0;&#xC785; &#xCE7C;&#xC298; &#xCC44;&#xB110; (LCa v 1) dihydropyridine &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC758; &#xB9E4;&#xD551;.

Invertebrados tipo L del canal de calcio, LCA (v) 1, aislado del estanque caracol Lymnaea stagnalis es casi indistinguible de mam&#xED;feros Ca (v) 1,2 canal de calcio (&#x3B1;1C) en caracter&#xED;sticas biof&#xED;sicas observados in vitro. Estos canales de tipo L es probable limitado dentro de un estrecho rango de par&#xE1;metros biof&#xED;sicos para llevar a cabo funciones similares en el caracol y los mam&#xED;feros sistemas cardiovascular. Lo que distingue caracoles y mam&#xED;feros canales tipo L es una diferencia en la sensibilidad dihidropiridina: 100 nM isradipina exhibe un bloque significativo de mam&#xED;feros Ca v) 1,2 corrientes sin efecto sobre caracol LCA (v) 1 corrientes. El canal caracol nativa sirve como un sustituto valioso para la validaci&#xF3;n de las diferencias principales residuos identificados a partir de trabajos anteriores de modelado experimental y molecular. Como se predijo, tres cambios de residuos en los ACV (V) 1 (N_3o18, F_3i10 y I_4i12) sustituido por DHP-detecci&#xF3;n de residuos en las posiciones respectivas de Ca (v) 1.2, (Q_3o18, Y_3i10 y M_4i12) aumenta la potencia del bloque de isradipina del LCA (v) los canales 1 a la de los mam&#xED;feros Ca (v) 1.2. Curiosamente, la mutaci&#xF3;n N_3o18_Q solo en ACV (V) 1 canales disminuye la sensibilidad DHP a&#xFA;n m&#xE1;s y la mutaci&#xF3;n triples teniendo una mayor sensibilidad isradipina, a&#xFA;n conserva una potencia reducida de agonista, (S)-Bay K8644.

Adriano Senatore

Department of Biology

University of Waterloo

Optimized Transfection Strategy for Expression and Electrophysiological Recording of Recombinant Voltage-Gated Ion Channels in HEK-293T Cells

Adriano Senatore

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University of Waterloo

Optimized Transfection Strategy for Expression and Electrophysiological Recording of Recombinant Voltage-Gated Ion Channels in HEK-293T Cells

Department of Biology