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Fabrication of the Thermoplastic Microfluidic Channels

In our lab, we have successfully isolated nucleic acids directly from microliter and submicroliter volumes of human blood, urine and stool using ...

Boston University

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A polymeric microfluidic device for solid-phase extraction (SPE)-based isolation of nucleic acids is demonstrated. The plastic chip can function as a disposable sample preparation system for different biological and diagnostic applications. The chip was fabricated in a cyclic polyolefin by hot-embossing with a master mold. The solid phase consisted of a porous monolithic polymer column impregnated with silica particles. The extraction was achieved due to the binding of nucleic acids to the silica particles in the monolith. The solid phase was formed within the channels of the device by in situ photoinitiated polymerization of a mixture of methacrylate and dimethacrylate monomers, UV-sensitive free-radical initiator, and porogenic solvents. The channel surfaces were pretreated via photografting to covalently attach the monolith to the channel walls. The solid phase prepared by this method allowed for successful extraction and elution of nucleic acids in the polymeric microchip.

Thermoplastic microfluidic device for on-chip purification of nucleic acids for disposable diagnostics.

Dispositif microfluidique polym&#xE8;re pour extraction en phase solide (SPE) &#xE0; base d&#x26;#39;isolement d&#x26;#39;acides nucl&#xE9;iques est d&#xE9;montr&#xE9;. La puce en plastique peut fonctionner comme un syst&#xE8;me de pr&#xE9;paration de l&#x26;#39;&#xE9;chantillon jetable pour diff&#xE9;rentes applications biologiques et de diagnostic. La puce a &#xE9;t&#xE9; fabriqu&#xE9; dans une polyol&#xE9;fine cyclique par gaufrage &#xE0; chaud avec un moule ma&#xEE;tre. La phase solide compos&#xE9;e d&#x26;#39;une colonne de polym&#xE8;re monolithique poreuse impr&#xE9;gn&#xE9;e de particules de silice. L&#x26;#39;extraction a &#xE9;t&#xE9; obtenue gr&#xE2;ce &#xE0; la liaison des acides nucl&#xE9;iques &#xE0; des particules de silice dans le monolithe. La phase solide a &#xE9;t&#xE9; form&#xE9;e &#xE0; l&#x26;#39;int&#xE9;rieur des canaux de l&#x26;#39;appareil par au polym&#xE9;risation photoiniti&#xE9;e d&#x26;#39;un m&#xE9;lange in situ de monom&#xE8;res m&#xE9;thacrylate et de dim&#xE9;thacrylate, les sensible aux UV initiateur de radicaux libres et des solvants porog&#xE8;nes. Les surfaces des canaux ont &#xE9;t&#xE9; pr&#xE9;trait&#xE9;s par l&#x26;#39;interm&#xE9;diaire de photogreffe fixer de fa&#xE7;on covalente le monolithe aux parois du canal. La phase solide pr&#xE9;par&#xE9; par ce proc&#xE9;d&#xE9; a permis pour l&#x26;#39;extraction r&#xE9;ussie et &#xE9;lution des acides nucl&#xE9;iques dans la micropuce polym&#xE8;re.

Thermoplastique dispositif microfluidique pour sur puce purification des acides nucl&#xE9;iques pour le diagnostic &#xE0; usage unique

Ein Polymeres Microfluidic-Ger&auml;t f&uuml;r Festphasen-Extraktion (SPE)-basierte Isolierung von Nukleins&auml;uren wird demonstriert. Der Kunststoff-Chip kann als ein Einweg-Beispiel-Vorbereitung-System f&uuml;r verschiedene biologische und diagnostische Anwendungen fungieren. Der Chip wurde in eine zyklische Polyolefin von hei&szlig;-Pr&auml;gung mit einem master-Form angefertigt. Die feste Phase bestand aus eine por&ouml;se monolithische Polymer-Spalte mit Kiesels&auml;ure Teilchen impr&auml;gniert. Die Extraktion wurde durch die Bindung von Nukleins&auml;uren, die Kiesels&auml;ure-Teilchen in der Monolith erreicht. Die feste Phase entstand innerhalb der Kan&auml;le des Ger&auml;ts durch in-situ Photoinitiated Polymerisation einer Mischung aus Methacrylat und Dimethacrylat Monomere, UV-Sensitive-freie Radikale-Initiator und Porogenic L&ouml;sungsmittel. Die Kanal-Fl&auml;chen wurden &uuml;ber Photografting den Monolith kovalent an die Kanal-W&auml;nde anf&uuml;gen vorbehandelt. Die feste Phase, die von dieser Methode erlaubt f&uuml;r erfolgreiche Extraktion und Elution von Nukleins&auml;uren in den Polymeren Mikrochip vorbereitet.

Thermoplastische mikrofluidische Ger&auml;t f&uuml;r on-Chip-Aufreinigung von Nukleins&auml;uren f&uuml;r Einweg-Diagnose.

Un dispositivo microfluidico polimerici per l&#39;estrazione di fase solida (SPE)-basata di isolamento degli acidi nucleici &egrave; dimostrato. Il chip di plastica pu&ograve; funzionare come un sistema di preparazione del campione USA e getta per diverse applicazioni diagnostiche e biologici. Il chip &egrave; stato fabbricato in un ciclico poliolefina di goffratura a caldo con uno stampo master. La fase solida &egrave; composta da una colonna di polimero monolitico poroso impregnata di particelle di silice. L&#39;estrazione &egrave; stato raggiunto a causa del legame degli acidi nucleici per le particelle di silice il monolito. La fase solida si form&ograve; all&#39;interno i canali del dispositivo per polimerizzazione in situ fotoiniziata di una miscela di monomeri di metacrilato e dimetacrilato, iniziatore di radicali liberi sensibili UV e solventi porogenic. Le superfici del canale sono state pretrattate via photografting di legame covalente allegare il monolito per le pareti del canale. La fase solida preparata da questo metodo ha permesso per successo estrazione ed eluizione degli acidi nucleici in polimerico microchip.

Dispositivo microfluidico termoplastico per on-chip purificazione degli acidi nucleici per diagnostica monouso.

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Un dispositivo polim&#xE9;rico microfluidos para extracci&#xF3;n en fase s&#xF3;lida (SPE)-basado en el aislamiento de &#xE1;cidos nucleicos se demuestra. El chip de pl&#xE1;stico puede funcionar como un sistema de preparaci&#xF3;n de muestras desechable para diferentes aplicaciones biol&#xF3;gicas y de diagn&#xF3;stico. El chip se fabric&#xF3; en una poliolefina c&#xED;clica por caliente-gofrado con un molde maestro. La fase s&#xF3;lida consisti&#xF3; en una columna de pol&#xED;mero poroso monol&#xED;tico impregnado con part&#xED;culas de s&#xED;lice. La extracci&#xF3;n se consigue debido a la uni&#xF3;n de &#xE1;cidos nucleicos a las part&#xED;culas de s&#xED;lice en el monolito. La fase s&#xF3;lida se form&#xF3; dentro de los canales del dispositivo por polimerizaci&#xF3;n in situ fotoiniciada de una mezcla de mon&#xF3;meros de metacrilato y dimetacrilato, UV-sensible iniciador de radicales libres, y solventes porogenic. Las superficies de los canales se pretrataron a trav&#xE9;s photografting para unir covalentemente el monolito a las paredes del canal. La fase s&#xF3;lida preparada por este m&#xE9;todo permite la extracci&#xF3;n de &#xE9;xito y la eluci&#xF3;n de los &#xE1;cidos nucleicos en el microchip polim&#xE9;rico.

Dispositivo de microfluidos para termopl&#xE1;sticos on-chip de purificaci&#xF3;n de &#xE1;cidos nucleicos para el diagn&#xF3;stico desechables

&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x4E86;&#x6709;&#x6548;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x805A;&#x5408;&#x7269;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x82AF;&#x7247;&#x6E29;&#x5EA6;&#x4F4E;&#x4E8E; T(g) (&#x73BB;&#x7483;&#x8F6C;&#x53D8;&#x6E29;&#x5EA6;) &#x7684;&#x805A;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x70ED;&#x7C98;&#x5408;&#x7684;&#x5C04;&#x9891;&#x7B49;&#x79BB;&#x5B50;&#x4F53;&#x548C;&#x7D2B;&#x5916;&#x7EBF;&#x81ED;&#x6C27; (&#x9898;) &#x8868;&#x9762;&#x8FDB;&#x884C;&#x4FEE;&#x6539;&#x3002;&#x4E0E; x &#x5C04;&#x7EBF;&#x5149;&#x7535;&#x5B50;&#x80FD;&#x8C31; (XPS)&#x3001; &#x63A5;&#x89E6;&#x89D2;&#x6D4B;&#x91CF;&#x3001; &#x539F;&#x5B50;&#x529B;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C; &#xFF08;AFM&#xFF09; &#x8868;&#x9762;&#x7C97;&#x7CD9;&#x5EA6;&#x6D4B;&#x91CF;&#x548C;&#x8868;&#x9762;&#x9644;&#x7740;&#x529B;&#x6D4B;&#x91CF;&#x7684; AFM &#x529B;-&#x8DDD;&#x79BB;&#x6570;&#x636E;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E86;&#x9898;&#x548C;&#x7B49;&#x79BB;&#x5B50;&#x4F53;&#x5904;&#x7406;&#x5BF9;&#x5FAA;&#x73AF;&#x805A;&#x70EF;&#x70C3;&#x548C;&#x805A;&#x82EF;&#x4E59;&#x70EF;&#x8868;&#x9762;&#x6027;&#x8D28;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x4E09;&#x70B9;&#x5F2F;&#x66F2;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x4F7F;&#x7528;&#x52A8;&#x6001;&#x673A;&#x68B0;&#x5206;&#x6790;&#x4EEA; (DMA) &#x88AB;&#x7528;&#x6765;&#x63CF;&#x7ED8;&#x7C98;&#x7ED3;&#x5F3A;&#x5EA6;&#x7684;&#x70ED;&#x5BC6;&#x5C01;&#x7684;&#x805A;&#x5408;&#x7269;&#x90E8;&#x4EF6;&#x548C;&#x4FDD;&#x7A0E;&#x5FAE;&#x901A;&#x9053;&#x622A;&#x9762;&#x626B;&#x63CF;&#x7535;&#x955C; &#xFF08;SEM&#xFF09; &#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x3002;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x8840;&#x6D46;&#x548C;&#x9898;&#x8868;&#x9762;&#x5904;&#x7406;&#x5BFC;&#x81F4;&#x805A;&#x5408;&#x7269;&#x8868;&#x9762;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x51CF;&#x5C11;&#x5728;&#x8868;&#x9762;&#xFF0C;&#x5728; T(g) &#x4E2D;&#x7684;&#x5316;&#x5B66;&#x548C;&#x7269;&#x7406;&#x7279;&#x6027;&#x53D1;&#x751F;&#x53D8;&#x5316;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x4F7F;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x82AF;&#x7247;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x4E22;&#x5931;&#x7684;&#x9884;&#x5B9A;&#x7684;&#x901A;&#x9053;&#x51E0;&#x4F55;&#x5728;&#x6E29;&#x5EA6;&#x4F4E;&#x4E8E; T(g) &#x7684;&#x5927;&#x5BB9;&#x91CF;&#x805A;&#x5408;&#x7269;&#x6709;&#x6548;&#x5730;&#x7C98;&#x5408;&#x3002;

&#x673A;&#x68B0;&#x548C;&#x5316;&#x5B66;&#x5206;&#x6790;&#x7684;&#x70ED;&#x7C98;&#x5408;&#x7684;&#x805A;&#x5408;&#x7269;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x8BBE;&#x5907;&#x7B49;&#x79BB;&#x5B50;&#x548C;&#x7D2B;&#x5916;&#x7EBF;&#x81ED;&#x6C27;&#x8868;&#x9762;&#x5904;&#x7406;&#x3002;

Here we have demonstrated that radio frequency plasma and ultraviolet-ozone (UVO) surface modifications are effective treatments for enabling the thermal bonding of polymeric microfluidic chips at temperatures below the T(g) (glass transition temperature) of the polymer. The effects of UVO and plasma treatments on the surface properties of a cyclic polyolefin and polystyrene were examined with X-ray photoelectron spectroscopy (XPS), contact angle measurements, atomic force microscopy (AFM) surface roughness measurements and surface adhesion measurements with AFM force-distance data. Three-point bending tests using a dynamic mechanical analyzer (DMA) were used to characterize the bond strength of thermally sealed polymer parts and the cross-sections of the bonded microchannels were evaluated with scanning electron microscopy (SEM). The experimental results demonstrated that plasma and UVO surface treatments cause changes in the chemical and physical characteristics of the polymer surfaces, resulting in a decrease in T(g) at the surface, and thus allowing the microfluidic chips to be effectively bonded at temperatures lower than the T(g) of the bulk polymer without losing the intended channel geometry.

Mechanical and chemical analysis of plasma and ultraviolet-ozone surface treatments for thermal bonding of polymeric microfluidic devices.

Ici, nous avons d&#xE9;montr&#xE9; que le plasma de fr&#xE9;quence radio et l&#x26;#39;ultraviolet-ozone (UVO) modifications de la surface sont des traitements efficaces pour permettre le collage thermique de puces microfluidiques polym&#xE8;res &#xE0; des temp&#xE9;ratures en dessous de la T (g) (temp&#xE9;rature de transition vitreuse) du polym&#xE8;re. Les effets des traitements UVO et de plasma sur les propri&#xE9;t&#xE9;s de surface d&#x26;#39;une polyol&#xE9;fine cyclique et le polystyr&#xE8;ne ont &#xE9;t&#xE9; examin&#xE9;s avec X-spectroscopie de photo&#xE9;lectrons (XPS), les mesures d&#x26;#39;angle de contact, la microscopie &#xE0; force atomique (AFM) des mesures de rugosit&#xE9; de surface et des mesures d&#x26;#39;adh&#xE9;rence de surface avec l&#x26;#39;AFM de force des donn&#xE9;es de distance. Trois tests du point de flexion en utilisant un analyseur m&#xE9;canique dynamique (DMA) ont &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;s pour caract&#xE9;riser la force de liaison de pi&#xE8;ces en polym&#xE8;re thermiquement scell&#xE9;s et les sections transversales des microcanaux en servitude ont &#xE9;t&#xE9; &#xE9;valu&#xE9;s avec microscopie &#xE9;lectronique &#xE0; balayage (MEB). Les r&#xE9;sultats exp&#xE9;rimentaux ont d&#xE9;montr&#xE9; que le plasma et traitements de surface UVO causer des changements dans les caract&#xE9;ristiques chimiques et physiques des surfaces de polym&#xE8;res, ce qui entra&#xEE;ne une diminution de T (g) &#xE0; la surface, et permettant ainsi aux puces microfluidiques pour &#xEA;tre effectivement li&#xE9;e &#xE0; des temp&#xE9;ratures inf&#xE9;rieures T (g) du polym&#xE8;re en vrac, sans perdre la g&#xE9;om&#xE9;trie du canal pr&#xE9;vue.

Analyse m&#xE9;canique et chimique du plasma et de Traitements de Surface ultraviolet-la couche d&#x26;#39;ozone pour le collage thermique des polym&#xE8;res dispositifs microfluidiques

Hier haben wir bewiesen, dass Radio-Frequenz-Plasma und UV-Ozon (UVO) Oberfl&auml;che Modifikationen wirksame Behandlungen sind f&uuml;r die thermische Bindung von Polymeren mikrofluidische Chips bei Temperaturen unterhalb der T(g) (Glas&uuml;bergangstemperatur) des Polymers zu aktivieren. Die Auswirkungen der UVO und Plasma-Behandlungen auf die Oberfl&auml;cheneigenschaften eines zyklischen Polyolefin und Polystyrol wurden mit x-ray Photoelektronenspektroskopie Spektroskopie (XPS), Kontakt Winkelmessungen, Rasterkraft Mikroskopie (AFM) Oberfl&auml;chenrauheit Messungen und Oberfl&auml;che Adh&auml;sion Messungen mit AFM-Kraft-Abstands-Daten untersucht. Drei-Punkt-Biegung-Tests mit einen dynamischen mechanischen Analyzer (DMA) wurden verwendet, um die Haftfestigkeit thermisch versiegelte Polymer Teile zu charakterisieren und die Querschnitte der geklebten Mikrokan&auml;len mit Rasterelektronenmikroskopie (SEM) bewertet wurden. Die experimentellen Ergebnisse gezeigt, dass Plasma und UVO Oberfl&auml;chenbehandlungen &Auml;nderungen bei den chemischen und physikalischen Eigenschaften der Polymer-Oberfl&auml;chen bewirken, was zu einem R&uuml;ckgang der T(g) an der Oberfl&auml;che, und wodurch der Microfluidic chips um effektiv bei Temperaturen niedriger als die T(g) des Polymers Massen verklebt werden, ohne dass die beabsichtigte Kanal-Geometrie.

Mechanische und chemische Analyse von Plasma und UV-Ozon Oberfl&auml;chenbehandlungen f&uuml;r thermische Bindung polymerer Microfluidic Vorrichtungen.

Qui abbiamo dimostrato che plasma radio frequenza e ultravioletto-ozono (UVO) modifiche superficiali sono trattamenti efficaci per permettere l&#39;incollaggio termico di chip microfluidici polimerici a temperature di sotto del T(g) (temperatura di transizione vetrosa) del polimero. Con raggi x spettroscopia fotoelettronica (XPS), misure di angolo di contatto, atomic force microscopy (AFM) misure di rugosit&agrave; superficiale e misure di adesione superficiale con dati forza-distanza AFM sono stati esaminati gli effetti dei trattamenti UVO e plasma su propriet&agrave; superficiali di un ciclico poliolefina e polistirolo. Test di flessione tre punti utilizzando un analizzatore dinamico meccanico (DMA) sono stati utilizzati per caratterizzare la forza di legame delle parti del polimero sigillata termicamente e le sezioni dei microcanali bonded sono state valutate con scansione microscopia elettronica (SEM). I risultati sperimentali hanno dimostrato che plasma e trattamenti superficiali UVO causano cambiamenti nelle caratteristiche chimiche e fisiche delle superfici polimeriche, causando una diminuzione della T(g) alla superficie, e permettendo cos&igrave; la microfluidic chip da unire in modo efficace a temperature inferiori a T(g) del polimero alla rinfusa senza perdere la geometria previsti canale.

Analisi chimiche e meccaniche dei trattamenti superficiali al plasma e ultravioletto-ozono per incollaggio termico di dispositivi microfluidici polimerici.

&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30E9;&#x30B8;&#x30AA;&#x5468;&#x6CE2;&#x6570;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x3001;&#x7D2B;&#x5916;&#x7DDA;&#x30AA;&#x30BE;&#x30F3;&#xFF08;UVO&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x8868;&#x9762;&#x6539;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x30DD;&#x30EA;&#x30DE;&#x30FC;&#x306E;T&#xFF08;G&#xFF09;&#xFF08;&#x30AC;&#x30E9;&#x30B9;&#x8EE2;&#x79FB;&#x6E29;&#x5EA6;&#xFF09;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x306E;&#x6E29;&#x5EA6;&#x3067;&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x306E;&#x71B1;&#x63A5;&#x5408;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306A;&#x6CBB;&#x7642;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x74B0;&#x72B6;&#x30DD;&#x30EA;&#x30AA;&#x30EC;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x3068;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B9;&#x30C1;&#x30EC;&#x30F3;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x7279;&#x6027;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;UVO&#x3068;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x51E6;&#x7406;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x306F;&#x3001;X&#x7DDA;&#x5149;&#x96FB;&#x5B50;&#x5206;&#x5149;&#x6CD5;&#xFF08;XPS&#xFF09;&#x3001;&#x63A5;&#x89E6;&#x89D2;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3001;&#x539F;&#x5B50;&#x9593;&#x529B;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#xFF08;AFM&#xFF09;&#x3001;&#x8868;&#x9762;&#x7C97;&#x3055;&#x306E;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3068;AFM&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8868;&#x9762;&#x5BC6;&#x7740;&#x6027;&#x306E;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3068;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x529B;&#x8DDD;&#x96E2;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x3002;&#x52D5;&#x7684;&#x6A5F;&#x68B0;&#x5206;&#x6790;&#xFF08;DMA&#xFF09;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x4E09;&#x70B9;&#x66F2;&#x3052;&#x8A66;&#x9A13;&#x306F;&#x3001;&#x71B1;&#x7684;&#x306B;&#x5BC6;&#x5C01;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30DD;&#x30EA;&#x30DE;&#x30FC;&#x306E;&#x90E8;&#x5206;&#x3068;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x305F;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9;&#x30BB;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x5F37;&#x5EA6;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x96FB;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#xFF08;SEM&#xFF09;&#x3092;&#x30B9;&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x3057;&#x3066;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5B9F;&#x9A13;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x3068;UVO&#x8868;&#x9762;&#x51E6;&#x7406;&#x306F;&#x3001;&#x8868;&#x9762;&#x306B;T&#xFF08;G&#xFF09;&#x304C;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3057;&#x3001;&#x30DD;&#x30EA;&#x30DE;&#x30FC;&#x8868;&#x9762;&#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7269;&#x7406;&#x7684;&#x7279;&#x6027;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x3092;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x4F4E;&#x3044;&#x6E29;&#x5EA6;&#x3067;&#x63A5;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x610F;&#x56F3;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x5F62;&#x72B6;&#x3092;&#x5931;&#x3046;&#x3053;&#x3068;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x30D0;&#x30EB;&#x30AF;&#x30DD;&#x30EA;&#x30DE;&#x30FC;&#x306E;T&#xFF08;G&#xFF09;&#x3002;

&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x306E;&#x71B1;&#x63A5;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x3001;&#x7D2B;&#x5916;&#x7DDA;&#x30AA;&#x30BE;&#x30F3;&#x8868;&#x9762;&#x51E6;&#x7406;&#x306E;&#x6A5F;&#x68B0;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5316;&#x5B66;&#x5206;&#x6790;

&#xC5EC;&#xAE30;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB77C;&#xB514;&#xC624; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xBC0F; &#xC790;&#xC678;&#xC120; &#xC624;&#xC874; (UVO) &#xD45C;&#xBA74; &#xC218;&#xC815; &#xC5F4; &#xACB0;&#xD569; &#xD3F4;&#xB9AC;&#xBA38; T(g) (&#xC720;&#xB9AC; &#xC804;&#xC774; &#xC628;&#xB3C4;) &#xC774;&#xD558;&#xC758; &#xC628;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACE0;&#xBD84;&#xC790; &#xBBF8;&#xC138; &#xCE69;&#xC758; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC778; &#xCE58;&#xB8CC;&#xBC95;&#xC740; &#xC99D;&#xBA85; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xC8FC;&#xAE30;&#xC801; &#xD3F4;&#xB9AC;&#xC62C; &#xBC0F; &#xD3F4;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xD2F0; &#xB80C;&#xC758; &#xD45C;&#xBA74; &#xD2B9;&#xC131;&#xC5D0; UVO &#xBC0F; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xCC98;&#xB9AC;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; x-&#xC120; &#xAD11;&#xC804;&#xC790; &#xBD84; &#xAD11; &#xBC95; (XPS), &#xC811;&#xCD09; &#xAC01; &#xCE21;&#xC815;, &#xC6D0;&#xC790; &#xD798; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; (AFM) &#xD45C;&#xBA74; &#xAC70;&#xCE60;&#xAE30; &#xCE21;&#xC815; &#xBC0F; AFM &#xD798; &#xAC70;&#xB9AC; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xD45C;&#xBA74; &#xC811;&#xCC29; &#xB825; &#xCE21;&#xC815; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB3D9;&#xC801; &#xAE30;&#xACC4; &#xBD84;&#xC11D;&#xAE30; (DMA)&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; 3-&#xD3EC;&#xC778;&#xD2B8; &#xBCA4;&#xB529; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB294; &#xBC29;&#xC5F4; &#xD6A8;&#xACFC;&#xAC00; &#xC99D;&#xB300; &#xB41C; &#xACE0;&#xBD84;&#xC790; &#xBD80;&#xD488;&#xC758; &#xACB0;&#xD569; &#xAC15;&#xB3C4; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xC9D3;&#xB294; &#xB370; &#xD558; &#xACE0; &#xBCF4; &#xC138; microchannels &#xD6A1;&#xB2E8;&#xBA74; &#xC2A4;&#xCE90;&#xB2DD; &#xC804;&#xC790; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; (SEM)&#xC73C;&#xB85C; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC2E4;&#xD5D8; &#xACB0;&#xACFC; &#xC785;&#xC99D; UVO &#xD45C;&#xBA74; &#xCC98;&#xB9AC; &#xBC0F; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; t(g)&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xAC10;&#xC18C;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;&#xB85C;, &#xD3F4;&#xB9AC;&#xBA38; &#xD45C;&#xBA74;&#xC758; &#xD654;&#xD559;&#xC801;, &#xBB3C;&#xB9AC;&#xC801; &#xD2B9;&#xC131;&#xC5D0; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xC77C;&#xC73C;&#xD0AC; &#xD558; &#xACE0; &#xC6D0;&#xD558;&#xB294; &#xCC44;&#xB110; &#xD615;&#xC0C1;&#xC744; &#xC783;&#xC9C0; &#xC54A;&#xACE0; &#xB300;&#xB7C9; &#xD3F4;&#xB9AC;&#xBA38;&#xC758; T(g) &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB0AE;&#xC740; &#xC628;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF4; &#xC138; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC218;&#xB97C; &#xCE69;&#xC5D0; &#xACB0;&#xD569; &#xB418;&#xBBC0;&#xB85C;.

&#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xBC0F; &#xC790;&#xC678;&#xC120; &#xC624;&#xC874; &#xD45C;&#xBA74; &#xCC98;&#xB9AC; &#xC5F4; &#xACB0;&#xD569;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xACE0;&#xBD84;&#xC790; &#xBBF8;&#xC138; &#xC18C;&#xC790;&#xC758; &#xAE30;&#xACC4;&#xC801; &#xBC0F; &#xD654;&#xD559;&#xC801; &#xBD84;&#xC11D;.

Aqu&#xED; hemos demostrado que el plasma de radiofrecuencia y ultravioleta-ozono (UVO) modificaciones de la superficie son tratamientos efectivos para permitir la uni&#xF3;n t&#xE9;rmica de pol&#xED;meros chips microflu&#xED;dicos a temperaturas por debajo de la T (g) (temperatura de transici&#xF3;n v&#xED;trea) del pol&#xED;mero. Los efectos de la UVO y plasma tratamientos sobre las propiedades de la superficie de una poliolefina c&#xED;clica y poliestireno se examinaron con espectroscop&#xED;a de rayos X (XPS), las mediciones de &#xE1;ngulo de contacto, la microscop&#xED;a de fuerza at&#xF3;mica (AFM) las mediciones de rugosidad de la superficie y las mediciones de la superficie de adhesi&#xF3;n con AFM fuerza datos de distancia. Ensayos de flexi&#xF3;n de tres puntos usando un analizador mec&#xE1;nico din&#xE1;mico (DMA) se utiliza para caracterizar la resistencia de la uni&#xF3;n de las piezas de pol&#xED;mero t&#xE9;rmicamente selladas y las secciones transversales de los microcanales unidos fueron evaluados con microscop&#xED;a electr&#xF3;nica de barrido (SEM). Los resultados experimentales demuestran que el plasma y tratamientos superficiales UVO causar cambios en las caracter&#xED;sticas qu&#xED;micas y f&#xED;sicas de las superficies de pol&#xED;meros, lo que resulta en una disminuci&#xF3;n de T (g) a la superficie, y permitiendo as&#xED; que los chips de microfluidos para ser efectivamente unida a temperaturas inferiores a el T (g) de la masa del pol&#xED;mero sin perder la geometr&#xED;a del canal deseado.

An&#xE1;lisis mec&#xE1;nico y qu&#xED;mico de plasma y de ozono ultravioleta-Tratamientos de Superficie para la uni&#xF3;n t&#xE9;rmica de los pol&#xED;meros de dispositivos de microflu&#xED;dica

&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x6F14;&#x793A;&#x6267;&#x884C;&#x4F7F;&#x7528;&#x4FE1;&#x4F7F;&#x6838;&#x7CD6;&#x6838;&#x9178; (mRNA) &#x4ECE;&#x4F7F;&#x7528;&#x5851;&#x6599;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x56FA;&#x76F8;&#x63D0;&#x53D6;&#x5217;&#x539F;&#x6CB9;&#x7EC6;&#x80DE;&#x88C2;&#x89E3;&#x5206;&#x79BB;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x5DEE;&#x5F02;&#x8868;&#x8FBE;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x5217; (&#x7531; 1.5 &#x5398;&#x7C73; 100microm 100microm) &#x634F;&#x9020;&#x5FAA;&#x73AF;&#x805A;&#x70EF;&#x70C3;&#x4E2D;&#x7684;&#x70ED;&#x538B;&#x6210;&#x5F62;&#x7535;&#x94F8;&#x7684;&#x4E3B;&#x6A21;&#x3002;&#x56FA;&#x76F8;&#x6CD5;&#x5305;&#x62EC; photopolymerized &#x5FAE;&#x5B54;&#x5DE8;&#x77F3;&#x5D4C;&#x6709;&#x529F;&#x80FD;&#x6027;&#x5FAE;&#x7C92;&#x548C;&#x5171;&#x4EF7;&#x952E;&#x7ED3;&#x6784;&#x4E0E;&#x5149;&#x5F15;&#x53D1;&#x5AC1;&#x63A5;&#x901A;&#x9053;&#x5899;&#x58C1;&#x3002;&#x4ECE;&#x603B; RNA mRNA &#x5206;&#x79BB;&#x548C;&#x76F4;&#x63A5;&#x4ECE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x88C2;&#x89E3;&#x7684; mRNA &#x5206;&#x79BB;&#xFF0C;oligo(dT) &#x73E0;&#x88AB;&#x5D4C;&#x5165;&#x5728;&#x94C1;&#x677F;&#x4E00;&#x5757;&#x7684;&#x89C2;&#x5FF5;&#x3002;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x63D0;&#x53D6;&#x6548;&#x7387;&#x5927;&#x7EA6;&#x662F; 80%&#x548C;&#x4E8C;&#x6C27;&#x5316;&#x7845;&#x56FA;&#x76F8;&#x6CD5;&#x5728;&#x6B64;&#x914D;&#x7F6E;&#x4E2D;&#x7684;&#x6838;&#x9178;&#x7ED3;&#x5408;&#x5BB9;&#x91CF;&#x662F;&#x5927;&#x7EA6; 3.5 &#x5434;&#x3002;&#x5FAE;&#x578B;&#x56FA;&#x76F8;&#x7533;&#x8BF7;&#x7684;&#x63D0;&#x53D6;&#x548C;&#x7EAF;&#x5316; mRNA &#x4ECE;&#x4EBA;&#x4F53;&#x809D;&#x810F;&#x603B; RNA &#x548C; mRNA &#x4ECE;&#x65B0;&#x751F;&#x513F;&#x4EBA;&#x76AE;&#x80A4;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE; (NHDF) &#x548C; MCF7 &#x4E73;&#x817A;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x7684;&#x5206;&#x79BB;&#x3002;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x884C;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x5DEE;&#x5F02;&#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x8BC1;&#x660E;&#x3002;

&#x4F7F;&#x7528;&#x5851;&#x6599;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x82AF;&#x7247;&#x4E0A;&#x5B64;&#x7ACB;&#x7684; mRNA &#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x5DEE;&#x5F02;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

Here we demonstrate the ability to perform differential gene expression experiments using messenger RNA (mRNA) isolated from crude cell lysates using a plastic microfluidic solid phase extraction column. The microfluidic columns (100microm by 100microm by 1.5 cm) were fabricated in a cyclic polyolefin by hot-embossing with an electroformed master-mold. The solid-phase consisted of a photopolymerized microporous monolith embedded with functional microparticles and covalently attached to the channel walls via photoinitiated grafting. For mRNA isolation from total RNA and direct mRNA isolation from cell lysates, oligo(dT) beads were embedded in the monolith. The extraction efficiency of the system is approximately 80% and the nucleic acid binding capacity of the silica solid-phase in this configuration is approximately 3.5 ng. The micro solid-phase was applied for the extraction and purification of mRNA from human liver total RNA and the isolation of mRNA from neonatal human dermal fibroblast cells (NHDF) and MCF7 breast cancer cell lysates. Differential gene expression between the two cell lines is demonstrated.

Differential gene expression using mRNA isolated on plastic microfluidic chips.

Ici, nous d&#xE9;montrons la capacit&#xE9; de r&#xE9;aliser des exp&#xE9;riences expression diff&#xE9;rentielle de g&#xE8;nes en utilisant l&#x26;#39;ARN messager (ARNm) isol&#xE9;s &#xE0; partir de cellules brut lysats l&#x26;#39;aide d&#x26;#39;un plastique microfluidique colonne extraction en phase solide. Les colonnes microfluidiques 100microm par 100microm de 1,5 cm) ont &#xE9;t&#xE9; fabriqu&#xE9;es dans une polyol&#xE9;fine cyclique par gaufrage &#xE0; chaud avec un ma&#xEE;tre-&#xE9;lectroform&#xE9; moule. La phase solide-compos&#xE9; d&#x26;#39;un monolithe photopolym&#xE9;ris&#xE9;e microporeuse incorpor&#xE9; avec des microparticules fonctionnels et attach&#xE9; de mani&#xE8;re covalente aux parois des canaux par l&#x26;#39;interm&#xE9;diaire photoiniti&#xE9;e greffage. Pour l&#x26;#39;isolement d&#x26;#39;ARNm de l&#x26;#39;ARN total et l&#x26;#39;isolement d&#x26;#39;ARNm directe de lysats cellulaires, oligo (dT) perles ont &#xE9;t&#xE9; int&#xE9;gr&#xE9;s dans le monolithe. L&#x26;#39;efficacit&#xE9; de l&#x26;#39;extraction du syst&#xE8;me est approximativement 80% et la capacit&#xE9; de liaison d&#x26;#39;acide nucl&#xE9;ique de la silice en phase solide dans cette configuration est d&#x26;#39;environ 3,5 ng. Le micro phase solide a &#xE9;t&#xE9; appliqu&#xE9; &#xE0; l&#x26;#39;extraction et la purification de l&#x26;#39;ARNm &#xE0; partir du foie humain total de l&#x26;#39;ARN et l&#x26;#39;isolement d&#x26;#39;ARNm &#xE0; partir des cellules n&#xE9;onatales fibroblastes dermiques (NHDF) et MCF7 lysats cellulaires de cancer du sein. Expression diff&#xE9;rentielle des g&#xE8;nes entre les deux lign&#xE9;es de cellules est d&#xE9;montr&#xE9;e.

Expression diff&#xE9;rentielle des g&#xE8;nes en utilisant l&#x26;#39;ARNm isol&#xE9; sur les puces microfluidiques en plastique

Hier zeigen wir: differenzielle Gen-Ausdruck-Experimente mit Boten-RNA (mRNA) aus Roh&ouml;l Zelllysate mithilfe einer Kunststoff mikrofluidische Festphasen-Extraktion-Spalte isoliert ausf&uuml;hren. Mikrofluidische Spalten (100microm von 100microm von 1,5 cm) wurden hergestellt in eine zyklische Polyolefin von hei&szlig;-Pr&auml;gung mit einem electroformed Meister-Schimmel. Die Festphasen-bestand aus einer Photopolymerized mikropor&ouml;ser Monolith mit funktionalen Mikropartikel eingebettet und an den W&auml;nden der Kanal &uuml;ber Photoinitiated Pfropfen kovalent gebunden. MRNA Isolierung von Gesamt-RNA und direkte mRNA-Isolierung aus Zelllysate wurden oligo(dT) Perlen in der Monolith eingebettet. Die Extraktionseffizienz des Systems betr&auml;gt ca. 80 % und die Nukleins&auml;ure-Bindungskapazit&auml;t der Kiesels&auml;ure Solid-Phase in dieser Konfiguration ist ungef&auml;hr 3,5 ng. Das Mikro Festphasen-wurde f&uuml;r die Extraktion und Reinigung von mRNA aus menschlichen Leber angewendet total RNA und die Isolierung von mRNA von Neugeborenen menschlichen dermalen Fibroblasten-Zellen (NHDF) und MCF7-Brust-Krebs-Zelllysate. Differenzielle Genexpression zwischen den beiden Zelllinien wird demonstriert.

Differenzielle Genexpression mit mRNA isoliert auf Kunststoff mikrofluidische Chips.

Qui noi dimostrare la capacit&agrave; di effettuare esperimenti di espressione genica differenziale usando RNA messaggero (mRNA) isolato da lisati cellulari grezzo utilizzando una colonna di estrazione in fase solida plastica microfluidica. Le colonne di microfluidica (100microm da 100microm da 1,5 cm) erano fabbricate in un ciclico poliolefina di goffratura a caldo con un maestro-stampo galvanici. La fase solida &egrave; composta da un monolito di microporosa photopolymerized incorporato con microparticelle funzionali e legame covalente attaccato alle pareti canale via fotoiniziata innesto. Per l&#39;isolamento di mRNA da RNA totale e diretto isolamento di mRNA da lisati cellulari, oligo perline furono incorporati nel monolito. L&#39;efficienza di estrazione dell&#39;impianto &egrave; di circa l&#39;80% e la capacit&agrave; di associazione dell&#39;acido nucleico della fase solida del silice in questa configurazione &egrave; di circa 3.5 ng. La fase solida micro &egrave; stata applicata per l&#39;estrazione e purificazione di mRNA da fegato umano totale RNA e l&#39;isolamento di mRNA da cellule neonatale umana dei fibroblasti dermici (NHDF) e MCF7 al seno cancro lisati cellulari. Espressione genica differenziale tra i due cell lines &egrave; dimostrato.

Espressione genica differenziale usando mRNA isolato su chip microfluidici in plastica.

&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30C1;&#x30C3;&#x30AF;&#x88FD;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x56FA;&#x76F8;&#x62BD;&#x51FA;&#x30AB;&#x30E9;&#x30E0;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x7C97;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x5358;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30E1;&#x30C3;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B8;&#x30E3;&#x30FC;RNA&#xFF08;mRNA&#xFF09;&#x3092;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BB;&#x30FC;&#x30C8;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x5DEE;&#x52D5;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3092;&#x5B9F;&#x884C;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30AB;&#x30E9;&#x30E0;&#xFF08;1.5 cm&#x3067;100microm&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;100microm&#xFF09;&#x30DE;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x30E2;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C9;&#x96FB;&#x92F3;&#x3067;&#x30DB;&#x30C3;&#x30C8;&#x30A8;&#x30F3;&#x30DC;&#x30B9;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x74B0;&#x72B6;&#x30DD;&#x30EA;&#x30AA;&#x30EC;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x3067;&#x4F5C;&#x88FD;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x56FA;&#x76F8;&#x306F;&#x3001;&#x5149;&#x958B;&#x59CB;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30C8;&#x91CD;&#x5408;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x58C1;&#x306B;&#x53D6;&#x308A;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x5FAE;&#x7C92;&#x5B50;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5171;&#x6709;&#x304C;&#x57CB;&#x3081;&#x8FBC;&#x307E;&#x308C;&#x305F;&#x5149;&#x91CD;&#x5408;&#x591A;&#x5B54;&#x8CEA;&#x30E2;&#x30CE;&#x30EA;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x6210;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002; total RNA&#x304B;&#x3089;mRNA&#x5358;&#x96E2;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BB;&#x30FC;&#x30C8;&#x304B;&#x3089;&#x76F4;&#x63A5;mRNA&#x3092;&#x5358;&#x96E2;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#xFF08;dT&#xFF09;&#x30D3;&#x30FC;&#x30BA;&#x304C;&#x30E2;&#x30CE;&#x30EA;&#x30B9;&#x306B;&#x57CB;&#x3081;&#x8FBC;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306E;&#x62BD;&#x51FA;&#x52B9;&#x7387;&#x306F;&#x7D04;80&#xFF05;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x69CB;&#x6210;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30EA;&#x30AB;&#x306E;&#x56FA;&#x76F8;&#x306E;&#x6838;&#x9178;&#x7D50;&#x5408;&#x5BB9;&#x91CF;&#x306F;&#x7D04;3.5 ng&#x306E;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x56FA;&#x76F8;&#x306F;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;&#x809D;&#x81D3;&#x306E;&#x30C8;&#x30FC;&#x30BF;&#x30EB;RNA&#x304B;&#x3089;&#x306E;mRNA&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x65B0;&#x751F;&#x5150;&#x306E;&#x30D2;&#x30C8;&#x76AE;&#x819A;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;NHDF&#xFF09;&#x3068;MCF7&#x4E73;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BB;&#x30FC;&#x30C8;&#x304B;&#x3089;&#x306E;mRNA&#x306E;&#x5358;&#x96E2;&#x306E;&#x62BD;&#x51FA;&#x3068;&#x7CBE;&#x88FD;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x9069;&#x7528;&#x3057;&#x305F;&#x3002; 2&#x3064;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x5DEE;&#x52D5;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30C1;&#x30C3;&#x30AF;&#x88FD;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x4E0A;&#x3067;&#x5358;&#x96E2;&#x3057;&#x305F;mRNA&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x305F;&#x5DEE;&#x52D5;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;

&#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBA54;&#xC2E0;&#xC800; RNA (mRNA)&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6D0;&#xC720; &#xC140; lysates &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4;&#xD2F1; &#xBBF8;&#xC138; &#xACE0;&#xCCB4; &#xB2E8;&#xACC4; &#xCD94;&#xCD9C; &#xC5F4;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xACA9;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xCC28;&#xB3D9; &#xC9C4; &#xC2DD; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC744; &#xC218;&#xD589; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBBF8;&#xC138; &#xC5F4; (1.5 c m 100microm &#xC5EC; 100microm) &#xC21C;&#xD658; &#xD3F4;&#xB9AC;&#xC62C; electroformed &#xB9C8;&#xC2A4;&#xD130; &#xBAB0;&#xB4DC;&#xB85C; &#xD56B; &#xC5E0;&#xBCF4;&#xC2F1;&#xC73C;&#xB85C; &#xC870;&#xC791; &#xD588;&#xB2E4;. &#xACE0;&#xCCB4; &#xC0C1; photopolymerized &#xBBF8;&#xC18C; &#xBAA8;&#xB178; &#xB9AC;&#xC2A4; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBBF8;&#xC640; &#xC784;&#xBCA0;&#xB514;&#xB4DC; &#xBC0F; photoinitiated &#xC811;&#xBAA9;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xCC44;&#xB110; &#xBCBD;&#xC5D0; &#xBD99;&#xC5B4; &#x70AD; &#xC774;&#xB8E8;&#xC5B4;&#xC838; &#xC788;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xCD1D; RNA&#xC5D0;&#xC11C; mRNA &#xC808;&#xC5F0; &#xBC0F; &#xC140; lysates&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C1;&#xC811; mRNA &#xC808;&#xC5F0;, oligo(dT) &#xBE44;&#xC988;&#xB294; &#xBAA8;&#xB178; &#xB9AC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xD3EC;&#xD568; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xCD94;&#xCD9C; &#xD6A8;&#xC728;&#xC740; &#xC57D; 80% &#xC774;&#xBA70;&#xC774; &#xAD6C;&#xC131;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E4;&#xB9AC; &#xCE74; &#xACE0;&#xCCB4; &#xC0C1; &#xD575; &#xC0B0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC6A9;&#xB7C9;&#xC758; &#xC57D; 3.5 ng. &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; &#xACE0;&#xCCB4; &#xC0C1; &#xCD94;&#xCD9C; &#xBC0F; Mrna&#xC758; &#xC815;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xAC04;&#xC744;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC801;&#xC6A9; &#xB41C; &#xCD1D; RNA&#xC640; mRNA &#xC2E0;&#xC0DD;&#xC544; &#xC778;&#xAC04; &#xD53C;&#xBD80; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC; &#xC138;&#xD3EC; (NHDF)&#xC640; MCF7 &#xC720; &#xBC29; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC; lysates&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xACA9;&#xB9AC;. &#xB450; &#xC140; &#xB77C;&#xC778; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xCC28;&#xB3D9; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4;&#xD2F1; &#xBBF8;&#xC138; &#xCE69;&#xC5D0; &#xACE0;&#xB9BD; &#xB41C; Mrna&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xCC28;&#xB3D9; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;.

Aqu&#xED; se demuestra la capacidad de realizar experimentos de expresi&#xF3;n g&#xE9;nica diferencial utilizando ARN mensajero (ARNm) aislado de crudo de c&#xE9;lulas lisados &#x200B;&#x200B;utilizando un pl&#xE1;stico de microfluidos columna de extracci&#xF3;n en fase s&#xF3;lida. Las columnas de microfluidos (100microm por 100microm por 1,5 cm) fueron fabricados en una poliolefina c&#xED;clica por el estampado en caliente con un electroformada maestro molde. La fase s&#xF3;lida-consisti&#xF3; en un monolito fotopolimerizada microporosa incrustado con micropart&#xED;culas funcionales y unido covalentemente a trav&#xE9;s de las paredes del canal fotoiniciada injerto. Para el aislamiento del ARNm a partir de ARN total y el aislamiento del ARNm directa a partir de lisados &#x200B;&#x200B;celulares, oligo (dT) las perlas fueron incorporados en el monolito. La eficacia de la extracci&#xF3;n del sistema es aproximadamente 80% y la capacidad de uni&#xF3;n de &#xE1;cidos nucleicos de la s&#xED;lice en fase s&#xF3;lida en esta configuraci&#xF3;n es de aproximadamente 3,5 ng. El micro en fase s&#xF3;lida se aplic&#xF3; para la extracci&#xF3;n y purificaci&#xF3;n de ARNm de h&#xED;gado humano ARN total y el aislamiento de ARNm a partir de c&#xE9;lulas humanas neonatales fibroblastos d&#xE9;rmicos (NHDF) y MCF7 lisados &#x200B;&#x200B;de c&#xE9;lulas de c&#xE1;ncer de mama. La expresi&#xF3;n diferencial de genes entre las dos l&#xED;neas celulares se ha demostrado.

Arpita Bhattacharyya

Department of Biomedical Engineering

Boston University

Fabrication of the Thermoplastic Microfluidic Channels

Arpita Bhattacharyya

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Boston University

Fabrication of the Thermoplastic Microfluidic Channels

Department of Biomedical Engineering