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Preparation of Living Isolated Vertebrate Photoreceptor Cells for Fluorescence Imaging

In the vertebrate retina, phototransduction, the conversion of light to an electrical signal, is carried out by the rod and cone photoreceptor cells1-4.  ...

Medical University of South Carolina

&#x9499; &#xFF08;Ca(2+)) &#x8C03;&#x5236;&#x7684;&#x9176;&#x901A;&#x8DEF;&#x7684;&#x51E0;&#x4E2A;&#x5728;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x6746;&#x611F;&#x5149;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x6BB5;&#x4E2D;&#x7684;&#x8C03;&#x89E3; phototransduction&#x3002;&#x7ECF;&#x8FDB;&#x5165;&#x6746;&#x5916;&#x7684;&#x90E8;&#x5206;&#x901A;&#x8FC7;&#x9633;&#x79BB;&#x5B50;&#x901A;&#x9053;&#x6253;&#x5F00;&#x5907;&#x73AF;&#x9E1F; (cGMP)&#xFF0C;&#x7531; Na(+)/Ca(2+),K(+) &#x6362;&#x70ED;&#x5668;&#x62BD;&#x8D70;&#x3002;&#x5149;&#x542F;&#x52A8;&#x751F;&#x5316;&#x7684;&#x7EA7;&#x8054;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5173;&#x95ED;&#x7684; cGMP &#x5C01;&#x95ED;&#x7684;&#x6E20;&#x9053;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x7ECF;&#x7684;&#x6D53;&#x5EA6;&#x968F;&#x4E4B;&#x4E0B;&#x964D;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E00;&#x4E0B;&#x964D;&#x8D8B;&#x52BF;&#x7531;&#x5149;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x4ECE;&#x523A;&#x6FC0;&#x590D;&#x82CF;&#x548C;&#x57FA;&#x7840;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x80CC;&#x666F;&#x5149;&#x9002;&#x5E94;&#x3002;&#x4E0E;&#x7ECF;&#x6D53;&#x5EA6;&#x4E0B;&#x964D;&#x901A;&#x8FC7;&#x6746;&#x5916;&#x90E8;&#x5206;&#x4F20;&#x64AD;&#x7684;&#x901F;&#x5EA6;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x7ECF;&#x6269;&#x6563;&#x7CFB;&#x6570;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7528;&#x8367;&#x5149;&#x7ECF;&#x6307;&#x6807;&#x8367;&#x5149; 3 &#x548C;&#x5171;&#x805A;&#x7126;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x7684;&#x5149;&#x6D4B;&#x91CF;&#x6746;&#x5149;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x523A;&#x6FC0;&#x540E;&#x7ECF;&#x6D53;&#x5EA6;&#x7684;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x3002;&#x4ECE;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6D4B;&#x91CF;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x83B7;&#x5F97;&#x4E86; 15 + /-1 microm(2)s(-1) &#x5F84;&#x5411;&#x7ECF;&#x6269;&#x6563;&#x7CFB;&#x6570;&#x7684;&#x503C;&#x3002;&#x6B64;&#x503C;&#x662F;&#x7B26;&#x5408;&#x7684;&#x4F4E;&#x4EB2;&#x548C;&#x529B;&#xFF0C;&#x5F71;&#x54CD;&#x56FA;&#x5B9A;&#x7F13;&#x51B2;&#x533A;&#x62A5;&#x9053;&#x5B58;&#x5728;&#x4E8E;&#x6746;&#x5916;&#x6BB5; &#xFF08;L.Lagnado&#x3001; Cervetto L.&#x548C;&#x6BCF;&#x5E74; McNaughton&#xFF0C;1992 &#x5E74;&#xFF0C;J.&#x7A81;&#x53D8; 455:111-142&#xFF09; &#x548C;&#x5927;&#x7EA6; 20 &#x6746;&#x5728;&#x9ED1;&#x6697;&#x4E2D;&#x7684;&#x7F13;&#x51B2;&#x80FD;&#x529B; (S.&#x79D1;&#x8BFA;&#x592B;&#x3001; N.Engheta &#x548C; E.N.&#x666E;&#x683C;&#xFF0C;Jr.&#xFF0C;1998 &#x5E74;&#xFF0C;J.&#x5C06;&#x519B;&#x7A81;&#x53D8; 111:7-37)&#x3002;&#x6B64;&#x503C;&#x8868;&#x660E;&#x6269;&#x6563;&#x4E3A;&#x7ECF;&#x7684;&#x6D53;&#x5EA6;&#x4E0B;&#x964D;&#x7684;&#x5F84;&#x5411;&#x7E41;&#x6B96;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x8F83;&#x957F;&#x7684;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x7531;&#x4E8E;&#x83AB;&#x540D;&#x5176;&#x5999;&#x7684;&#x78C1;&#x76D8;&#xFF0C;&#x7EB5;&#x7ECF;&#x6269;&#x6563;&#x7CFB;&#x6570;&#x5C06;&#x7EA6; 2 microm(2)s(-1)&#xFF0C;&#x662F;&#x8FDC;&#x8FDC;&#x5C0F;&#x4E8E;&#x7EB5;&#x5411; cGMP &#x6269;&#x6563;&#x7CFB;&#x6570; &#xFF08;30-60 microm(2)s(-1)&#xFF09; &#xFF1B;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x7ECF;&#x7684;&#x7EB5;&#x5411;&#x8870;&#x843D;&#x7684; cGMP &#x843D;&#x540E;&#x7EB5;&#x5411;&#x4F20;&#x64AD;&#x7684;&#x6FC0;&#x52B1;&#x3002;

&#x6746;&#x611F;&#x5149;&#x5668;&#x5916;&#x90E8;&#x7F51;&#x6BB5;&#x4E2D;&#x7684;&#x9499;&#x6269;&#x6563;&#x7CFB;&#x6570;&#x3002;

Calcium (Ca(2+)) modulates several of the enzymatic pathways that mediate phototransduction in the outer segments of vertebrate rod photoreceptors. Ca(2+) enters the rod outer segment through cationic channels kept open by cyclic GMP (cGMP) and is pumped out by a Na(+)/Ca(2+),K(+) exchanger. Light initiates a biochemical cascade, which leads to closure of the cGMP-gated channels, and a concomitant decline in the concentration of Ca(2+). This decline mediates the recovery from stimulation by light and underlies the adaptation of the cell to background light. The speed with which the decline in the Ca(2+) concentration propagates through the rod outer segment depends on the Ca(2+) diffusion coefficient. We have used the fluorescent Ca(2+) indicator fluo-3 and confocal microscopy to measure the profile of the Ca(2+) concentration after stimulation of the rod photoreceptor by light. From these measurements, we have obtained a value of 15 +/- 1 microm(2)s(-1) for the radial Ca(2+) diffusion coefficient. This value is consistent with the effect of a low-affinity, immobile buffer reported to be present in the rod outer segment (L.Lagnado, L. Cervetto, and P.A. McNaughton, 1992, J. Physiol. 455:111-142) and with a buffering capacity of approximately 20 for rods in darkness(S. Nikonov, N. Engheta, and E.N. Pugh, Jr., 1998, J. Gen. Physiol. 111:7-37). This value suggests that diffusion provides a significant delay for the radial propagation of the decline in the concentration of Ca(2+). Also, because of baffling by the disks, the longitudinal Ca(2+) diffusion coefficient will be in the order of 2 microm(2)s(-1), which is much smaller than the longitudinal cGMP diffusion coefficient (30-60 microm(2)s(-1); ). Therefore, the longitudinal decline of Ca(2+) lags behind the longitudinal spread of excitation by cGMP.

Calcium diffusion coefficient in rod photoreceptor outer segments.

Le calcium (Ca (2 +)) module plusieurs des voies enzymatiques qui interviennent dans phototransduction dans les segments externes des photor&#xE9;cepteurs tige vert&#xE9;br&#xE9;s. Ca (2 +) p&#xE9;n&#xE8;tre dans le segment de tige ext&#xE9;rieure par des canaux cationiques maintenues ouvertes par GMP cyclique (GMPc) et est pomp&#xE9;e par une Na (+) / Ca (2 +), K (+) &#xE9;changeur. Lumi&#xE8;re initie une cascade biochimique, ce qui conduit &#xE0; la fermeture des canaux GMPc-d&#xE9;pendants, et une baisse concomitante de la concentration de Ca (2 +). Cette baisse intervient dans la r&#xE9;cup&#xE9;ration de la stimulation par la lumi&#xE8;re et sous-tend l&#x26;#39;adaptation de la cellule &#xE0; la lumi&#xE8;re de fond. La rapidit&#xE9; avec laquelle la baisse du Ca (2 +) se propage &#xE0; travers la concentration du segment de tige externe d&#xE9;pend de la Ca (2 +) coefficient de diffusion. Nous avons utilis&#xE9; la fluorescence Ca (2 +) indicateur de fluo-3 et la microscopie confocale &#xE0; mesurer le profil de la Ca (2 +) de concentration apr&#xE8;s stimulation du photor&#xE9;cepteur de tige par la lumi&#xE8;re. A partir de ces mesures, nous avons obtenu une valeur de 15 + / - 1 microm&#xE8;tre (2) s (-1) pour le Ca radiale (2 +) le coefficient de diffusion. Cette valeur correspond &#xE0; l&#x26;#39;effet d&#x26;#39;une faible affinit&#xE9;-, un tampon immobiles rapport&#xE9; d&#x26;#39;&#xEA;tre pr&#xE9;sent dans le segment de tige ext&#xE9;rieure (L.Lagnado, L. Cervetto, et PA McNaughton, 1992, J. Physiol. 455:111-142) et avec une capacit&#xE9; tampon d&#x26;#39;environ 20 pour les tiges dans l&#x26;#39;obscurit&#xE9; (S. Nikonov, N. Engheta, et EN Pugh, Jr., 1998, J. Gen Physiol. 111:7-37). Cette valeur indique que la diffusion fournit un retard important pour la propagation radiale de la baisse de la concentration de Ca (2 +). En outre, en raison de d&#xE9;routant par les disques, le Ca longitudinale (2 +) coefficient de diffusion sera de l&#x26;#39;ordre de 2 microm (2) s (-1), ce qui est beaucoup plus petit que le coefficient de diffusion longitudinale cGMP (30-60 microm (2) s (-1);). Par cons&#xE9;quent, le d&#xE9;clin longitudinal de Ca (2 +) est &#xE0; la tra&#xEE;ne de la propagation longitudinale de l&#x26;#39;excitation par les normes cGMP.

Coefficient de diffusion du calcium dans les segments Photor&#xE9;cepteur tige ext&#xE9;rieure

Calcium Diffusionskoeffizienten im Stab Photorezeptor &#xE4;u&#xDF;eren Segmente.

Calcio (Ca(2+)) modula molte delle vie enzimatiche che phototransduction mediare nei segmenti esterni dei fotorecettori dei vertebrati rod. CA(2+) entra nel segmento esterno del rod attraverso canali cationici mantenuto aperto da GMP ciclico (cGMP) e viene pompata fuori da uno scambiatore di Na(+)/Ca(2+),K(+). Luce avvia una cascata biochimica che porta alla chiusura dei canali cGMP-dipendente e un concomitante declino della concentrazione di Ca(2+). Questo declino da intermediario il recupero dalla stimolazione di luce e sottende l&#39;adattamento della cella alla luce di sfondo. La velocit&agrave; con cui il declino della concentrazione di Ca(2+) si propaga attraverso il segmento esterno asta dipende il coefficiente di diffusione Ca(2+). Abbiamo usato fluorescente Ca(2+) indicatore fluo-3 e confocale microscopia per misurare il profilo della concentrazione Ca(2+) dopo stimolazione dei fotorecettori asta dalla luce. Da queste misurazioni, abbiamo ottenuto un valore di 15 + /-1 microm(2)s(-1) per il coefficiente di diffusione radiale Ca(2+). Questo valore &egrave; coerenza con l&#39;effetto di una bassa affinit&agrave;, buffer immobile ha riferito di essere presenti nel segmento esterno asta (L.Lagnado, L. Cervetto e P.A. McNaughton, 1992, 455:111 J. Pneumologia-142) e con una capacit&agrave; di buffering di circa 20 per canne nel buio (S. Nikonov, N. Engheta ed E.N. Pugh, Jr., 1998, 111:7 J. Gen. Pneumologia-37). Questo valore suggerisce che diffusione fornisce un notevole ritardo della propagazione radiale del declino della concentrazione di Ca(2+). Inoltre, a causa della sconcertante dai dischi, il coefficiente di diffusione longitudinale Ca(2+) sar&agrave; nell&#39;ordine di 2 microm(2)s(-1), che &egrave; molto pi&ugrave; piccolo rispetto il coefficiente di diffusione longitudinale cGMP (30-60 microm(2)s(-1);). Pertanto, il declino longitudinale di Ca(2+) in ritardo rispetto la diffusione longitudinale dell&#39;eccitazione di cGMP.

Coefficiente di diffusione del calcio in segmenti esterni asta fotorecettore.

&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#xFF08;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x687F;&#x4F53;&#x306E;&#x5916;&#x7BC0;&#x3067;&#x306E;&#x5149;&#x4F1D;&#x9054;&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x9175;&#x7D20;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x306E;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;GMP&#xFF08;cGMP&#xFF09;&#x306E;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x958B;&#x3044;&#x305F;&#x307E;&#x307E;&#x3068;Na&#xFF08;+&#xFF09;/&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x3001;K&#xFF08;+&#xFF09;&#x4EA4;&#x63DB;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x52B1;&#x8D77;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30AB;&#x30C1;&#x30AA;&#x30F3;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x5165;&#x529B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5149;&#x306F;cGMP&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x9589;&#x9396;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x751F;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x30AB;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30C9;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;Ca&#x306E;&#x6FC3;&#x5EA6;&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x306E;&#x540C;&#x6642;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3092;&#x958B;&#x59CB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306F;&#x3001;&#x5149;&#x3068;&#x57FA;&#x790E;&#x3068;&#x306A;&#x308B;&#x80CC;&#x666F;&#x5149;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x9069;&#x5FDC;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x523A;&#x6FC0;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x56DE;&#x5FA9;&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x306E;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306F;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x4F1D;&#x64AD;&#x3059;&#x308B;&#x901F;&#x5EA6;&#x306F;&#x3001;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x62E1;&#x6563;&#x4FC2;&#x6570;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x86CD;&#x5149;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x306E;&#x6307;&#x6A19;&#x3067;&#x3042;&#x308B;Fluo-3&#x3068;&#x5149;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#x611F;&#x5149;&#x4F53;&#x523A;&#x6FC0;&#x5F8C;&#x306E;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x5171;&#x7126;&#x70B9;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30E9;&#x30B8;&#x30A2;&#x30EB;&#x306E;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x306E;&#x62E1;&#x6563;&#x4FC2;&#x6570;&#x306F;1&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#xFF08;2&#xFF09;S&#xFF08;-1&#xFF09; - &#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x5024;&#x304B;&#x3089;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;15&#x306E;&#x5024;+ /&#x3092;&#x53D6;&#x5F97;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x5024;&#x306F;&#x3001;&#x4F4E;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3068;&#x4E00;&#x8CAB;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x4E0D;&#x52D5;&#x306E;&#x30D0;&#x30C3;&#x30D5;&#x30A1;&#xFF08;L.Lagnado&#x3001;L. Cervetto&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;PA&#x30DE;&#x30AF;&#x30CE;&#x30FC;&#x30C8;&#x30F3;&#x3001;1992&#x3001;J.&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x3002;455:111-142&#xFF09;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x5185;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x5831;&#x544A;&#x6697;&#x95C7;&#x306E;&#x4E2D;&#x3067;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#xFF08;S.&#x30CB;&#x30B3;&#x30CE;&#x30D5;&#x3001;N. Engheta&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;EN&#x30D4;&#x30E5;&#x30FC;&#xB7;&#x30B8;&#x30E5;&#x30CB;&#x30A2;&#x3001;1998&#x3001;J. Gen&#x3002;&#x3068;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x3002;111:7-37&#xFF09;&#x306E;&#x7D04;20&#x306E;&#x7DE9;&#x885D;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x5024;&#x306F;&#x3001;&#x62E1;&#x6563;&#x306F;&#x3001;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306E;&#x534A;&#x5F84;&#x65B9;&#x5411;&#x306E;&#x4F1D;&#x64AD;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5927;&#x5E45;&#x306A;&#x9045;&#x5EF6;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30C7;&#x30A3;&#x30B9;&#x30AF;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4E0D;&#x53EF;&#x89E3;&#x306A;&#x3001;&#x7E26;&#x306E;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x306E;&#x62E1;&#x6563;&#x4FC2;&#x6570;&#x306F;&#xFF08;30&#x301C;60&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#x7E26;cGMP&#x306E;&#x62E1;&#x6563;&#x4FC2;&#x6570;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x306F;&#x308B;&#x304B;&#x306B;&#x5C0F;&#x3055;&#x3044;2&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#xFF08;2&#xFF09;&#x306E;&#xFF08;-1&#xFF09;&#x3001;&#x306E;&#x9806;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#xFF08;2&#xFF09;&#x306E;&#xFF08;-1&#xFF09;;&#xFF09;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;CA&#x306E;&#x9577;&#x624B;&#x65B9;&#x5411;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x306F;&#x3001;cGMP&#x306E;&#x52B1;&#x8D77;&#x306E;&#x7E26;&#x65B9;&#x5411;&#x306E;&#x5E83;&#x304C;&#x308A;&#x306B;&#x5F8C;&#x308C;&#x3092;&#x3068;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x687F;&#x4F53;&#x5916;&#x7BC0;&#x306E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x62E1;&#x6563;&#x4FC2;&#x6570;

&#xCE7C;&#xC298; (Ca(2+)) &#xD6A8;&#xC18C; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xCC99;&#xCD94; &#xB85C;&#xB4DC; &#xB300;&#xB1CC;&#xC758; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xD574;&#xB2F9; &#xC911;&#xC7AC; phototransduction&#xC744; &#xBCC0;&#xC870; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Ca(2+) &#xC21C;&#xD658; GMP (cGMP)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC5F4;&#xB9B0; &#xC720;&#xC9C0; &#xC591;&#xC774;&#xC628; &#xCC44;&#xB110;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC678;&#xBD80; &#xB85C;&#xB4DC; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xB97C; &#xC785;&#xB825; &#xD558; &#xACE0; Na(+)/Ca(2+),K(+) &#xAD50;&#xD658;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC16;&#xC73C;&#xB85C; &#xD38C;&#xD551;. &#xBE5B; cGMP &#xBB38;&#xC774; &#xCC44;&#xB110; &#xBC0F; ca(2+)&#xC758; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xC218; &#xBC18;&#xD558;&#xB294; &#xC1E0;&#xD1F4;&#xC758; &#xD3D0;&#xC1C4;&#xC5D0; &#xC774;&#xB974;&#xAC8C; &#xC0DD; &#xD654; &#xD655; &#xC801;&#xC778; &#xD3ED;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC2DC;&#xC791; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xAC10;&#xC18C; &#xBE5B;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC790;&#xADF9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xC911;&#xC7AC; &#xBC0F; &#xBC30;&#xACBD; &#xBE5B;&#xC744; &#xC140;&#xC758; &#xC801;&#xC751;&#xC758; &#xAE30;&#xCD08;&#xAC00; &#xB418;. Ca(2+) &#xB18D;&#xB3C4; &#xAC10;&#xC18C; &#xB9C9;&#xB300; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC804;&#xD30C; &#xC18D;&#xB3C4; Ca(2+) &#xD655;&#xC0B0; &#xACC4;&#xC218;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBE5B;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB85C;&#xB4DC; &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; &#xC790;&#xADF9; &#xD6C4; Ca(2+) &#xB18D;&#xB3C4;&#xC758; &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C;&#xC744; &#xCE21;&#xC815; &#xD558; &#xD615;&#xAD11; Ca(2+) &#xD45C;&#xC2DC;&#xAE30; fluo-3, confocal &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;&#xC744; &#xC774;&#xC6A9; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xCE21;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBC29;&#xC0AC;&#xD615; Ca(2+) &#xD655;&#xC0B0; &#xACC4;&#xC218; 1 microm(2)s(-1) + 15&#xC758; &#xAC12;&#xC744; &#xAC00;&#xC838;&#xC62C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xAC12;&#xC740; &#xB0AE;&#xC740; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58; &#xC6C0;&#xC9C1;&#xC774;&#xAE30; &#xD798; &#xB4DC;&#xB294; &#xBC84;&#xD37C; &#xBCF4;&#xACE0; &#xB9C9;&#xB300; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xC874;&#xC7AC; (L.Lagnado, L. Cervetto, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xD39C; &#xC2E4;&#xBC14; &#xB2C8; &#xC544; McNaughton, 1992, &#xC81C;&#xC774; &#xB144; 455:111-142)&#xACFC; &#xC5B4;&#xB460; &#xC18D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9C9;&#xB300; &#xD55C; &#xC57D; 20&#xC758; &#xBC84;&#xD37C;&#xB9C1; &#xC6A9;&#xB7C9; (S. Nikonov, &#xBD81; &#xC544; &#xC77C; Engheta &#xBC0F; E.N. Pugh, &#xC8FC;&#xB2C8;&#xC5B4;, 1998, &#xC81C;&#xC774; &#xC911;&#xC7A5; &#xB144; 111:7-37). &#xC774; &#xAC12;&#xC744; &#xD655;&#xC0B0; ca(2+)&#xC758; &#xB18D;&#xB3C4; &#xAC10;&#xC18C;&#xC758; &#xBC29;&#xC0AC;&#xD615; &#xC804;&#xD30C;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC9C0;&#xC5F0; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xB514;&#xC2A4;&#xD06C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB2F9;&#xD639; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xACBD;&#xB3C4; Ca(2+) &#xD655;&#xC0B0; &#xACC4;&#xC218; (30-60 microm(2)s(-1);) &#xACBD;&#xB3C4; cGMP &#xD655;&#xC0B0; &#xACC4;&#xC218; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xD6E8;&#xC52C; &#xC791;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; 2 microm(2)s(-1) &#xC21C; &#xC788;&#xC744; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, ca(2+)&#xC758; &#xACBD;&#xB3C4; &#xAC10;&#xC18C; Cgmp&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC5EC;&#xAE30;&#xC758; &#xACBD;&#xB3C4; &#xD655;&#xC0B0; &#xB4A4;&#xC5D0; lags.

&#xCE7C;&#xC298; &#xB85C;&#xB4DC; &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD655;&#xC0B0; &#xACC4;&#xC218;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El calcio (Ca (2 +)) modula varios de los caminos enzim&#xE1;ticos que median fototransducci&#xF3;n en los segmentos externos de fotorreceptores vertebrados. Ca (2 +) entra en el segmento externo varilla a trav&#xE9;s de canales cati&#xF3;nicos se mantiene abierta con el GMP c&#xED;clico (cGMP) y se bombea a cabo por un Na (+) / Ca (2 +), K (+) intercambiador. Luz inicia una cascada bioqu&#xED;mica, lo que conduce al cierre de los canales de GMPc-dependientes, y una disminuci&#xF3;n concomitante en la concentraci&#xF3;n de Ca (2 +). Esta disminuci&#xF3;n media en la recuperaci&#xF3;n de la estimulaci&#xF3;n por la luz y ha inspirado la adaptaci&#xF3;n de la c&#xE9;lula a la luz de fondo. La velocidad con que la disminuci&#xF3;n en el Ca (2 +) concentraci&#xF3;n propaga a trav&#xE9;s del segmento de v&#xE1;stago exterior depende del Ca (2 +) coeficiente de difusi&#xF3;n. Hemos utilizado el fluorescente de Ca (2 +) indicador fluo-3 y microscop&#xED;a confocal para medir el perfil de la Ca (2 +) concentraci&#xF3;n despu&#xE9;s de la estimulaci&#xF3;n de la varilla de fotorreceptores por la luz. A partir de estas mediciones, se ha obtenido un valor de 15 + / - 1 micras (2) s (-1) para el Ca radial (2 +) el coeficiente de difusi&#xF3;n. Este valor es consistente con el efecto de una baja afinidad, tamp&#xF3;n inm&#xF3;vil inform&#xF3; a estar presente en el segmento de v&#xE1;stago exterior (L.Lagnado, Cervetto L., y PA McNaughton, 1992, J. Physiol. 455:111-142) y con una capacidad de amortiguamiento de aproximadamente 20 para las barras en la oscuridad (S. Nikonov, Engheta N., y EN Pugh, Jr., 1998, J. Gen. Physiol. 111:7-37). Este valor sugiere que la difusi&#xF3;n proporciona un retraso significativo para la propagaci&#xF3;n radial de la disminuci&#xF3;n en la concentraci&#xF3;n de Ca (2 +). Tambi&#xE9;n, debido a desconcertante por los discos, el Ca longitudinal (2 +) coeficiente de difusi&#xF3;n ser&#xE1; del orden de 2 micras (2) s (-1), que es mucho menor que el coeficiente de difusi&#xF3;n GMPc longitudinal (30-60 micras (2) s (-1);). Por lo tanto, la disminuci&#xF3;n longitudinal de Ca (2 +) est&#xE1; por detr&#xE1;s de la propagaci&#xF3;n longitudinal de excitaci&#xF3;n por cGMP.

El calcio coeficiente de difusi&#xF3;n en los segmentos externos de los fotorreceptores de varilla

&#x771F;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5229;&#x7528;&#x819C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5668;&#xFF0C;&#x5982;&#x5185;&#x8D28;&#x7F51;&#x6216;&#x9AD8;&#x5C14;&#x57FA;&#xFF0C;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x6746;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x5149;&#x68C0;&#x6D4B;&#x4F7F;&#x7528;&#x6570;&#x4EE5;&#x767E;&#x8BA1;&#x7684;&#x819C;&#x56CA; &#xFF08;&#x78C1;&#x76D8;&#xFF09;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x7528;&#x8367;&#x5149;&#x793A;&#x8E2A;&#x7269;&#x548C;&#x5F71;&#x50CF;&#x5B66;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x6746;&#x611F;&#x5149;&#x5668;&#x78C1;&#x76D8;&#x5C5E;&#x6027;&#x7684;&#x5355;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x4E0E;&#x819C;&#x6807;&#x5FD7;&#x548C;&#x6781;&#x5730;&#x793A;&#x8E2A;&#x5242;&#x5B8C;&#x597D;&#x6746;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x7684;&#x6807;&#x7B7E;&#x663E;&#x793A; intradiskal &#x548C;&#x80DE;&#x5916;&#x7A7A;&#x95F4;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x901A;&#x4FE1;&#x3002;&#x5185;&#x90E8;&#x5316;&#x793A;&#x8E2A;&#x5242;&#x6CBF;&#x6746;&#x5916;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x957F;&#x5EA6;&#x79FB;&#x52A8;&#x6307;&#x793A;&#x4EE5;&#x53CA;&#x78C1;&#x76D8;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x901A;&#x4FE1;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x901A;&#x4FE1;&#x6D89;&#x53CA;&#x4EA4;&#x6362;&#x819C;&#x548C;&#x6C34;&#x76F8;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E14;&#x7EA6;&#x5206;&#x949F;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x5E38;&#x6570;&#x3002;&#x901A;&#x4FE1;&#x8DEF;&#x5F84;&#x4F7F;&#x7528;&#x5927;&#x7EA6; 2%&#x7684;&#x53EF;&#x7528;&#x819C;&#x7684;&#x78C1;&#x76D8;&#x533A;&#x57DF;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E14;&#x4E0D;&#x5141;&#x8BB8;&#x901A;&#x8FC7;&#x5206;&#x5B50;&#x5927;&#x4E8E; 10 kDa&#x3002;&#x5B83;&#x662F;&#x53EF;&#x80FD;&#x8981;&#x52A0;&#x8F7D; intradiskal &#x7A7A;&#x95F4;&#x8367;&#x5149;&#x7ECF;&#x548C; ph &#x503C;&#x67D3;&#x6599;&#xFF0C;&#x62A5;&#x9053; intradiskal &#x7ECF;&#x6D53;&#x5EA6;&#x7EA6; 1 microM &#x548C;&#x9178;&#x6027; ph &#x503C; 6.5&#xFF0C;&#x4E24;&#x4EBA;&#x6BD4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7ECF;&#x6D53;&#x5EA6;&#x53CA; ph &#x503C;&#x663E;&#x8457;&#x4E0D;&#x540C;&#x3002;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x6746;&#x611F;&#x5149;&#x5668;&#x78C1;&#x76D8;&#x4E0D;&#x662F;&#x79BB;&#x6563;&#x7684;&#x3001; &#x88AB;&#x52A8;&#x7684;&#x56CA;&#x4F46;&#x800C;&#x662F;&#x7EC4;&#x6210;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6D3B;&#x8DC3;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5668;&#x3002;&#x78C1;&#x76D8;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x901A;&#x4FE1;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x819C;&#x91CD;&#x5851;&#x4EE5;&#x53CA;&#x63D0;&#x4F9B;&#x5BF9;&#x6574;&#x4E2A;&#x5916;&#x90E8;&#x5206;&#x7684; intradiskal &#x7A7A;&#x95F4;&#x7684;&#x8BBF;&#x95EE;&#x3002;

&#x6746;&#x611F;&#x5149;&#x5668;&#x78C1;&#x76D8;&#x7684;&#x52A8;&#x6001;&#x884C;&#x4E3A;&#x3002;

Eukaryotic cells use membrane organelles, like the endoplasmic reticulum or the Golgi, to carry out different functions. Vertebrate rod photoreceptors use hundreds of membrane sacs (the disks) for the detection of light. We have used fluorescent tracers and single cell imaging to study the properties of rod photoreceptor disks. Labeling of intact rod photoreceptors with membrane markers and polar tracers revealed communication between intradiskal and extracellular space. Internalized tracers moved along the length of the rod outer segment, indicating communication between the disks as well. This communication involved the exchange of both membrane and aqueous phase and had a time constant in the order of minutes. The communication pathway uses approximately 2% of the available membrane disk area and does not allow the passage of molecules larger than 10 kDa. It was possible to load the intradiskal space with fluorescent Ca(2+) and pH dyes, which reported an intradiskal Ca(2+) concentration in the order of 1 microM and an acidic pH 6.5, both of them significantly different than intracellular and extracellular Ca(2+) concentrations and pH. The results suggest that the rod photoreceptor disks are not discrete, passive sacs but rather comprise an active cellular organelle. The communication between disks may be important for membrane remodeling as well as for providing access to the intradiskal space of the whole outer segment.

Dynamic behavior of rod photoreceptor disks.

Les cellules eucaryotes utiliser organites membranaires, comme le r&#xE9;ticulum endoplasmique ou l&#x26;#39;appareil de Golgi, &#xE0; exercer des fonctions diff&#xE9;rentes. Photor&#xE9;cepteurs tige vert&#xE9;br&#xE9;s utiliser des centaines de sacs membrane (les disques) pour la d&#xE9;tection de la lumi&#xE8;re. Nous avons utilis&#xE9; des traceurs fluorescents et l&#x26;#39;imagerie cellulaire unique pour &#xE9;tudier les propri&#xE9;t&#xE9;s des disques photor&#xE9;cepteurs tige. &#xC9;tiquetage des photor&#xE9;cepteurs tige intacts avec des marqueurs membranaires et des traceurs polaires a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; la communication entre l&#x26;#39;espace et intradiskal extracellulaire. Traceurs int&#xE9;rioris&#xE9;s d&#xE9;plac&#xE9; le long de la longueur du segment de tige ext&#xE9;rieure, indiquant une communication entre les disques ainsi. Cette communication impliqu&#xE9;e &#xE0; la fois l&#x26;#39;&#xE9;change de la membrane et la phase aqueuse et a eu une constante de temps de l&#x26;#39;ordre de quelques minutes. Le passage de communication utilise environ 2% de la surface du disque membranaire disponible et ne permet pas le passage de mol&#xE9;cules de plus de 10 kDa. Il &#xE9;tait possible de charger l&#x26;#39;espace intradiskal avec fluorescente Ca (2 +) et les colorants de pH, qui fait &#xE9;tat d&#x26;#39;une Ca intradiskal (2 +) la concentration de l&#x26;#39;ordre de 1 microM et un pH acide de 6,5, tous les deux sensiblement diff&#xE9;rente de celle intracellulaire et extracellulaire Ca (2 +) des concentrations et de pH. Les r&#xE9;sultats sugg&#xE8;rent que les disques ne sont pas de tige photor&#xE9;ceptrices discrets, sacs passifs, mais plut&#xF4;t comprendre un actif organite cellulaire. La communication entre les disques peut &#xEA;tre important pour remodelage des membranes ainsi que pour fournir l&#x26;#39;acc&#xE8;s &#xE0; l&#x26;#39;espace intradiskal de l&#x26;#39;ensemble du segment externe.

Comportement dynamique des disques photor&#xE9;cepteurs Rod

Dynamisches Verhalten der Stange Photorezeptor Festplatten.

Cellule eucariotiche utilizzano organelli membrana, come il reticolo endoplasmatico o Golgi, per svolgere funzioni diverse. Fotorecettori dei vertebrati asta utilizzano centinaia di sacche di membrana (dischi) per la rilevazione della luce. Abbiamo usato traccianti fluorescenti e singola cella imaging per studiare le propriet&agrave; dei dischi fotorecettore rod. Etichettatura dei fotorecettori asta intatta con marcatori di membrana e palpatori polar ha rivelato la comunicazione tra intradiskal e spazio extracellulare. Traccianti interiorizzati spostato lungo la lunghezza del segmento esterno asta, indicando la comunicazione tra i dischi pure. La presente comunicazione coinvolti lo scambio di membrana e la fase acquosa e aveva una costante di tempo dell&#39;ordine di minuti. Il percorso di comunicazione utilizza circa il 2% dell&#39;area disco membrana disponibile e non permettono il passaggio di molecole pi&ugrave; grandi di 10 kDa. &Egrave; stato possibile caricare lo spazio intradiskal con coloranti Ca(2+) e pH fluorescenti, che riportava una concentrazione di Ca(2+) di intradiskal nell&#39;ordine di 1 microM e un pH acido 6.5, entrambi significativamente diverso da quello intracellulare ed extracellulare Ca(2+) concentrazioni e pH. I risultati suggeriscono che i dischi di fotorecettori asta non sono sacs discreto, passivo, ma piuttosto comprende un organello cellulare attivo. La comunicazione tra i dischi possa essere importante per membrana rimodellamento cos&igrave; come per fornire l&#39;accesso allo spazio intradiskal del segmento intero esterno.

Comportamento dinamico dei dischi fotorecettore rod.

&#x771F;&#x6838;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x9042;&#x884C;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x5C0F;&#x80DE;&#x4F53;&#x3084;&#x30B4;&#x30EB;&#x30B8;&#x4F53;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x819C;&#x5C0F;&#x5668;&#x5B98;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x687F;&#x4F53;&#x306F;&#x5149;&#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x819C;&#x56A2;&#x306E;&#x4F55;&#x767E;&#x3082;&#x306E;&#xFF08;&#x30C7;&#x30A3;&#x30B9;&#x30AF;&#xFF09;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x687F;&#x4F53;&#x30C7;&#x30A3;&#x30B9;&#x30AF;&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x86CD;&#x5149;&#x30C8;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B5;&#x30FC;&#x3068;&#x5358;&#x4E00;&#x7D30;&#x80DE;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x819C;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6975;&#x6027;&#x30C8;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B5;&#x30FC;&#x3068;&#x7121;&#x50B7;&#x306E;&#x687F;&#x4F53;&#x306E;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EB;&#x306F;intradiskal&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x7A7A;&#x9593;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x901A;&#x4FE1;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5185;&#x5728;&#x30C8;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B5;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3001;&#x30C7;&#x30A3;&#x30B9;&#x30AF;&#x9593;&#x306E;&#x901A;&#x4FE1;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3001;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x9577;&#x3055;&#x306B;&#x6CBF;&#x3063;&#x3066;&#x79FB;&#x52D5;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x901A;&#x4FE1;&#x306F;&#x3001;&#x819C;&#x3068;&#x6C34;&#x76F8;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x4EA4;&#x63DB;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3001;&#x5206;&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C0;&#x30FC;&#x306E;&#x6642;&#x5B9A;&#x6570;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x901A;&#x4FE1;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306F;&#x3001;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x819C;&#x306E;&#x30C7;&#x30A3;&#x30B9;&#x30AF;&#x9818;&#x57DF;&#x306E;&#x7D04;2&#xFF05;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;10 kDa&#x306E;&#x3088;&#x308A;&#x5927;&#x304D;&#x3044;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x901A;&#x904E;&#x3092;&#x8A31;&#x53EF;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306F;intradiskal Ca&#x306E;&#x5831;&#x544A;&#x86CD;&#x5149;&#x706F;&#x306E;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x3068;pH&#x67D3;&#x6599;&#x3001;&#x3068;intradiskal&#x30B9;&#x30DA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3092;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#xFF08;2 +&#xFF09;1&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C0;&#x30FC;&#x306E;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3068;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x4E21;&#x8005;&#x306E;&#x9178;&#x6027;pH 6.5&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x306E;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3068;pH&#x3002;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x687F;&#x4F53;&#x30C7;&#x30A3;&#x30B9;&#x30AF;&#x306F;&#x96E2;&#x6563;&#x3001;&#x30D1;&#x30C3;&#x30B7;&#x30D6;&#x56A2;&#x3067;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x5C0F;&#x5668;&#x5B98;&#x3092;&#x69CB;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30C7;&#x30A3;&#x30B9;&#x30AF;&#x9593;&#x306E;&#x901A;&#x4FE1;&#x306F;&#x3001;&#x819C;&#x306E;&#x30EA;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;intradiskal&#x7A7A;&#x9593;&#x3078;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;

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&#xC9C4; &#xD575; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9; organelles endoplasmic &#xADF8;&#xBB3C; &#xB610;&#xB294; Golgi, &#xAC19;&#xC740; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB2E4;&#xB978; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC218;&#xD589;. &#xCC99;&#xCD94; &#xB85C;&#xB4DC; &#xB300;&#xB1CC; &#xBE5B;&#xC758; &#xAC80;&#xCD9C;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC218;&#xBC31; &#xAC1C;&#xC758; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; sac (&#xB514;&#xC2A4;&#xD06C;)&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD615;&#xAD11; &#xCD94;&#xC801;&#xAE30;&#xC640; &#xB2E8;&#xC77C; &#xC140; &#xB85C;&#xB4DC; &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; &#xB514;&#xC2A4;&#xD06C;&#xC758; &#xC18D;&#xC131;&#xC744; &#xACF5;&#xBD80;&#xB97C; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xC0AC;&#xC6A9;. &#xB9C9; &#xB9C8;&#xCEE4;&#xC640; &#xD3F4;&#xB77C; &#xCD94;&#xC801;&#xAE30;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xADF8;&#xB300;&#xB85C; &#xB85C;&#xB4DC; &#xB300;&#xB1CC;&#xC758; &#xB77C;&#xBCA8; intradiskal&#xC640; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xACF5;&#xAC04; &#xAC04;&#xC758; &#xD1B5;&#xC2E0;&#xC774; &#xBC1D;&#xD614;&#xB2E4;. &#xB0B4; &#xBA74;&#xB41C; &#xCD94;&#xC801;&#xAE30; &#xB610;&#xD55C; &#xB514;&#xC2A4;&#xD06C; &#xAC04;&#xC758; &#xD1B5;&#xC2E0;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xB9C9;&#xB300; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xC758; &#xAE38;&#xC774; &#xB530;&#xB77C; &#xC774;&#xB3D9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xD1B5;&#xC2E0; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xBC0F; &#xC218;&#xC131; &#xB2E8;&#xACC4; &#xAD50;&#xD658; &#xAD00;&#xB828; &#xACE0; &#xBD84; &#xC21C; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC0C1;&#xC218;&#xB97C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD1B5;&#xC2E0; &#xACBD;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xB514;&#xC2A4;&#xD06C; &#xC601;&#xC5ED;&#xC758; &#xC57D; 2%&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xACE0; &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xD1B5;&#xACFC; 10 kDa &#xBCF4;&#xB2E4; &#xD070; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. 1 MicroM &#xBC0F; &#xC0B0; &#xC131; pH 6.5, &#xB458; &#xB2E4; &#xD06C;&#xAC8C; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; Ca(2+) &#xB18D;&#xB3C4; pH &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB2E4;&#xB978; &#xC21C;&#xC11C;&#xB85C; intradiskal Ca(2+) &#xB18D;&#xB3C4; &#xBCF4;&#xACE0; &#xD615;&#xAD11; Ca(2+) &#xBC0F; pH &#xC5FC;&#xB8CC; intradiskal &#xACF5;&#xAC04;&#xC744; &#xB85C;&#xB4DC;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xACFC; &#xC81C;&#xC548; &#xB85C;&#xB4DC; &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; &#xB514;&#xC2A4;&#xD06C; &#xAC1C;&#xBCC4;, &#xC218;&#xB3D9; sac &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC624;&#xD788;&#xB824; &#xD65C;&#xC131; &#xC138;&#xD3EC; &#xD2B8;&#xB294; &#xAD6C;&#xC131;. &#xB514;&#xC2A4;&#xD06C; &#xAC04;&#xC758; &#xD1B5;&#xC2E0; &#xB9C9; &#xC804;&#xCCB4; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xC758; intradiskal &#xACF5;&#xAC04;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC561;&#xC138;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558; &#xACE0; &#xC11C;&#xB3C4; &#xB9AC; &#xBAA8;&#xB378;&#xB9C1;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB85C;&#xB4DC; &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; &#xB514;&#xC2A4;&#xD06C;&#xC758; &#xB3D9;&#xC801; &#xB3D9;&#xC791;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Las c&#xE9;lulas eucariotas utilizan org&#xE1;nulos de membrana, como el ret&#xED;culo endoplasm&#xE1;tico o el aparato de Golgi, para llevar a cabo diferentes funciones. Vertebrados fotorreceptores de los bastones utilizar cientos de sacos de membrana (los discos) para la detecci&#xF3;n de la luz. Hemos utilizado trazadores fluorescentes y las im&#xE1;genes de c&#xE9;lula &#xFA;nica para estudiar las propiedades de las barras de los discos de los fotorreceptores. Etiquetado de los fotorreceptores de los bastones intactas con marcadores de membrana y de rescate polares revel&#xF3; la comunicaci&#xF3;n entre el espacio intradiscal y extracelular. Trazadores internalizados movido a lo largo de la longitud del segmento de v&#xE1;stago exterior, lo que indica la comunicaci&#xF3;n entre los discos tambi&#xE9;n. Esta comunicaci&#xF3;n implicado el intercambio tanto de la membrana y la fase acuosa y ten&#xED;a una constante de tiempo del orden de minutos. La v&#xED;a de comunicaci&#xF3;n utiliza aproximadamente 2% del &#xE1;rea de membrana disponible en el disco y no permite el paso de mol&#xE9;culas mayores de 10 kDa. Fue posible cargar el espacio intradiscal con fluorescente de Ca (2 +) y colorantes de pH, que inform&#xF3; de un Ca intradiscal (2 +) concentraci&#xF3;n del orden de 1 microM y un pH &#xE1;cido 6,5, ambos significativamente diferente de intracelular y extracelular Ca (2 +) las concentraciones y pH. Los resultados sugieren que los discos de varilla fotorreceptoras no son sacos discretas, sino m&#xE1;s bien pasivos comprenden una sesi&#xF3;n organelo celular. La comunicaci&#xF3;n entre los discos puede ser importante para la remodelaci&#xF3;n de membrana, as&#xED; como para proporcionar acceso al espacio intradiscal del segmento externo conjunto.

Comportamiento din&#xE1;mico de los discos de Rod fotorreceptoras

&#x8996;&#x899A;&#x7684;&#x306A;&#x5149;&#x4F1D;&#x9054;&#x3001;&#x96FB;&#x6C17;&#x4FE1;&#x53F7;&#x200B;&#x200B;&#x3078;&#x306E;&#x5165;&#x5C04;&#x5149;&#x306E;&#x5909;&#x63DB;&#x306F;&#x3001;&#x687F;&#x4F53;&#x3068;&#x9310;&#x4F53;&#x8996;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3067;&#x884C;&#x308F;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5149;&#x306F;&#x6697;&#x95C7;&#x306E;&#x4E2D;&#x3067;&#x3001;&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x30AA;&#x30FC;&#x30D7;&#x30F3;&#x30AB;&#x30C1;&#x30AA;&#x30F3;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3092;&#x4FDD;&#x6301;&#x3057;&#x3001;cGMP&#x306E;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3092;&#x6E1B;&#x3089;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;+&#x5909;&#x8ABF;cGMP&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;cGMP&#x306E;&#x5408;&#x6210;&#x3068;&#x5206;&#x89E3;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5149;&#x60C5;&#x5831;&#x4F1D;&#x9054;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;+&#x304C;&#x80CC;&#x666F;&#x306E;&#x7167;&#x660E;&#x306E;&#x5149;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x9069;&#x5FDC;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x8CA0;&#x306E;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30C9;&#x30D0;&#x30C3;&#x30AF;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#x306E;&#x5149;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x4E0A;&#x3067;&#x306E;Ca2 +&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x304C;&#x7279;&#x5FB4;&#x3068;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x306A;&#x80CC;&#x666F;&#x306E;&#x7167;&#x660E;&#x306B;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5B9A;&#x5E38;&#x72B6;&#x614B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x8003;&#x616E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x306E;&#x4F1D;&#x64AD;&#x304C;+&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x5468;&#x56F2;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30C9;&#x30D0;&#x30C3;&#x30AF;&#x4FE1;&#x53F7;15&#x306E;&#x5024;&#x3092;&#x6301;&#x3064;Ca2 +&#x306E;&#x62E1;&#x6563;&#x4FC2;&#x6570;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3001;+ /  -  1 microm2 S&#xFF08;-1&#xFF09;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x5024;&#x306F;&#x3001;&#x534A;&#x5F84;&#x65B9;&#x5411;&#x306E;Ca2 +&#x306E;&#x62E1;&#x6563;&#x304C;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30C9;&#x30D0;&#x30C3;&#x30AF;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306E;&#x4F1D;&#x642C;&#x306B;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x969C;&#x58C1;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x9045;&#x304F;&#x306A;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;Ca2 +&#x306E;&#x62E1;&#x6563;&#x4FC2;&#x6570;&#x306F;cGMP&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x306F;&#x308B;&#x304B;&#x306B;&#x5C0F;&#x3055;&#x3044;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x9577;&#x624B;&#x65B9;&#x5411;&#x306E;Ca2 +&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306F;&#x3001;cGMP&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x52B1;&#x8D77;&#x306E;&#x4F1D;&#x64AD;&#x9045;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x3068;&#x5149;&#x60C5;&#x5831;&#x4F1D;&#x9054;

Visual phototransduction, &#xBCC0;&#xD658;&#xC758; &#xC804;&#xAE30; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xBE5B;&#xC774; &#xB4E4;&#xC5B4;&#xC624;&#xB294; &#xB9C9;&#xB300; &#xBC0F; &#xC6D0;&#xBFD4; &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xB8E8;&#xC5B4;&#xC9C4;&#xB2E4;. &#xBE5B; &#xC5B4;&#xB460; &#xC18D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACC4;&#xC18D; &#xC5F4;&#xB824; &#xC591;&#xC774;&#xC628; &#xCC44;&#xB110; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xC758; &#xC6D0;&#xD615;&#xC9C8; &#xB9C9;&#xC5D0; &#xC874;&#xC7AC; &#xD558;&#xB294; Cgmp&#xC758; &#xB18D;&#xB3C4; &#xAC10;&#xC18C; &#xC2DC;&#xD0A8;&#xB2E4;. Ca2 + &#xCC44;&#xB110; cGMP &#xBB38;&#xC774;&#xC73C;&#xB85C; cGMP &#xD569;&#xC131;&#xACFC; &#xBD84;&#xD574;&#xB97C; &#xBCC0;&#xC870; &#xD558; &#xC5EC; phototransduction&#xC5D0;&#xC11C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;. Ca2 + &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; &#xC801;&#xC751; &#xBC30;&#xACBD; &#xC870;&#xBA85;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xD53C;&#xB4DC;&#xBC31;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC5EC; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xB85C;&#xB4DC; phototransduction&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xC5D0;&#xC11C; Ca2 +&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC591;&#xC801; &#xBC30;&#xACBD; &#xC870;&#xBA85; &#xB9C9;&#xB300; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC815;&#xC0C1; &#xC0C1;&#xD0DC; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xACC4;&#xC815; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xC758; &#xC911;&#xC2EC;&#xC744; &#xD5A5;&#xD574; &#xC8FC;&#xBCC0;&#xC5D0;&#xC11C; Ca2 + &#xD53C;&#xB4DC;&#xBC31; &#xC2E0;&#xD638; &#xC804;&#xD30C; Ca2 + &#xD655;&#xC0B0; &#xACC4;&#xC218;, 1 microm2 s(-1) + 15&#xC758; &#xAC12;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xAC12;&#xC744; &#xB808;&#xC774;&#xB514;&#xC5BC; &#xBC29;&#xD5A5;&#xC73C;&#xB85C; Ca2 +&#xC758; &#xBCF4;&#xAE09;&#xC740; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xB290;&#xB9B0; &#xD53C;&#xB4DC;&#xBC31; &#xC2E0;&#xD638; &#xC804;&#xD30C;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBC29; &#xBCBD;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, Ca2 +&#xC758; &#xD655;&#xC0B0; &#xACC4;&#xC218; Cgmp&#xC758; &#xADF8;&#xAC83; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xD6E8;&#xC52C; &#xB354; &#xC791;&#xAE30; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC885; &#xBC29;&#xD5A5;&#xC73C;&#xB85C; Ca2 +&#xC758; &#xC1E0;&#xD1F4;&#xC758; Cgmp&#xC758; &#xAC10;&#xC18C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC5EC;&#xAE30; &#xC804;&#xD30C; &#xB4A4;&#xC5D0; lags.

&#xCE7C;&#xC298;&#xACFC; phototransduction&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#x89C6;&#x89C9; phototransduction&#x3001; &#x8F6C;&#x6362;&#x8F6C;&#x6362;&#x4E3A;&#x7535;&#x4FE1;&#x53F7;&#xFF0C;&#x5165;&#x5C04;&#x5149;&#x53D1;&#x751F;&#x5728;&#x6746;&#x548C;&#x9525;&#x4F53;&#x7684;&#x5149;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x6BB5;&#x3002;&#x5149;&#x964D;&#x4F4E; cGMP&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5728;&#x9ED1;&#x6697;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x4E00;&#x76F4;&#x5B58;&#x5728;&#x4E8E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#x5916;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x9633;&#x79BB;&#x5B50;&#x660E;&#x6E20;&#x7684;&#x6D53;&#x5EA6;&#x3002;Ca2 + phototransduction &#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x8C03;&#x8282; cGMP &#x5C01;&#x95ED;&#x7684;&#x6E20;&#x9053;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA; cGMP &#x5408;&#x6210;&#x548C;&#x5206;&#x89E3;&#x3002;Ca2 + &#x53C2;&#x4E0E;&#x7684;&#x8D1F;&#x9762;&#x53CD;&#x9988;&#xFF0C;&#x662F;&#x611F;&#x5149;&#x5668;&#x9002;&#x5E94;&#x80CC;&#x666F;&#x7167;&#x660E;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;&#x5BF9;&#x6746; phototransduction &#x7684;&#x4E0D;&#x540C;&#x7EC4;&#x6210;&#x90E8;&#x5206;&#x7684; Ca2 + &#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x662F;&#xFF0C;&#x548C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5BF9;&#x7684;&#x7A33;&#x6001;&#x54CD;&#x5E94;&#x6746;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x80CC;&#x666F;&#x7167;&#x660E;&#x3002;&#x4ECE;&#x5916;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x5411;&#x8FB9;&#x7F18; Ca2 + &#x53CD;&#x9988;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x4F20;&#x64AD;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E; Ca2 + &#x6269;&#x6563;&#x7CFB;&#x6570;&#xFF0C;&#x503C;&#x4E3A; + /-1 microm2 s(-1) 15&#x3002;&#x6B64;&#x503C;&#x663E;&#x793A;&#x5728;&#x5F84;&#x5411;&#x65B9;&#x5411;&#x7684; Ca2 + &#x6269;&#x6563;&#x662F;&#x76F8;&#x5F53;&#x7F13;&#x6162;&#x7684;&#x63D0;&#x4F9B;&#x53CD;&#x9988;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x4F20;&#x64AD;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x91CD;&#x5927;&#x969C;&#x788D;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;Ca2 + &#x7684;&#x6269;&#x6563;&#x7CFB;&#x6570;&#x662F;&#x6BD4; cGMP &#x7684;&#x8981;&#x5C0F;&#x5F97;&#x591A;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x7EB5;&#x5411;&#x65B9;&#x5411;&#x7684; Ca2 + &#x4E0B;&#x964D;&#x843D;&#x540E;&#x7684; cGMP &#x51CF;&#x5C11;&#x6240;&#x6FC0;&#x53D1;&#x7684;&#x4F20;&#x64AD;&#x3002;

&#x9499;&#x548C; phototransduction&#x3002;

Visual phototransduction, the conversion of incoming light to an electrical signal, takes place in the outer segments of the rod and cone photoreceptor cells. Light reduces the concentration of cGMP, which, in darkness, keeps open cationic channels present in the plasma membrane of the outer segment. Ca2+ plays an important role in phototransduction by modulating the cGMP-gated channels as well as cGMP synthesis and breakdown. Ca2+ is involved in a negative feedback that is essential for photoreceptor adaptation to background illumination. The effects of Ca2+ on the different components of rod phototransduction have been characterized and can quantitatively account for the steady state responses of the rod cell to background illumination. The propagation of the Ca2+ feedback signal from the periphery toward the center of the outer segment depends on the Ca2+ diffusion coefficient, which has a value of 15 +/- 1 microm2 s(-1). This value shows that diffusion of Ca2+ in the radial direction is quite slow providing a significant barrier in the propagation of the feedback signal. Also, because the diffusion coefficient of Ca2+ is much smaller than that of cGMP, the decline of Ca2+ in the longitudinal direction lags behind the propagation of excitation by the decline of cGMP.

Calcium and phototransduction.

Phototransduction visuelle, la conversion de la lumi&#xE8;re entrant &#xE0; un signal &#xE9;lectrique, a lieu dans les segments ext&#xE9;rieurs de la tige et les cellules photor&#xE9;ceptrices c&#xF4;ne. La lumi&#xE8;re diminue la concentration de GMPc, qui, dans l&#x26;#39;obscurit&#xE9;, maintient ouvertes canaux cationiques pr&#xE9;sents dans la membrane plasmique du segment externe. Ca2 + joue un r&#xF4;le important dans la phototransduction en modulant les canaux GMPc-d&#xE9;pendants ainsi que la synth&#xE8;se de cGMP et la ventilation. Ca2 + est impliqu&#xE9; dans une r&#xE9;troaction n&#xE9;gative qui est essentiel pour l&#x26;#39;adaptation des photor&#xE9;cepteurs &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;clairage de fond. Les effets de Ca 2 + sur les diff&#xE9;rentes composantes de la phototransduction tige ont &#xE9;t&#xE9; caract&#xE9;ris&#xE9;s et peut quantitativement compte des r&#xE9;ponses &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;quilibre de la cellule de crayon &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;clairage de fond. La propagation de la Ca 2 + signal de r&#xE9;troaction de la p&#xE9;riph&#xE9;rie vers le centre du segment ext&#xE9;rieur d&#xE9;pend du coefficient de diffusion de Ca 2 +, qui a une valeur de 15 + / - 1 microm2 s (-1). Cette valeur indique que la diffusion de Ca2 + dans la direction radiale est assez lent en offrant une barri&#xE8;re significative &#xE0; la propagation du signal de retour. Aussi, parce que le coefficient de diffusion de Ca2 + est beaucoup plus petite que celle de la GMPc, la baisse de Ca2 + dans le sens longitudinal est &#xE0; la tra&#xEE;ne de la propagation de l&#x26;#39;excitation par la baisse de la GMPc.

Le calcium et la phototransduction

Calcium und Phototransduktion.

Phototransduction visivo, la conversione della luce in ingresso in un segnale elettrico, si svolge nei segmenti esterni delle cellule fotorecettrici rod e cono. Luce riduce la concentrazione di cGMP, che, nel buio, mantiene aperti canali cationici presenti nella membrana del plasma del segmento esterno. Ca2 + gioca un ruolo importante nel phototransduction modulando i canali cGMP-gated come sintesi di cGMP e ripartizione. Ca2 + &egrave; coinvolto in un feedback negativo che &egrave; essenziale per l&#39;adattamento di fotorecettori per illuminazione di sfondo. Gli effetti del Ca2 + sui diversi componenti di rod phototransduction sono stati caratterizzati e possono spiegare quantitativamente le risposte di stato stazionario della cella asta per illuminazione di sfondo. La propagazione del Ca2 + feedback segnale dalla periferia verso il centro del segmento esterno dipende il Ca2 + coefficiente di diffusione, che ha un valore di 15 + /-1 microm2 s(-1). Questo valore mostra che la diffusione di Ca2 + in direzione radiale &egrave; piuttosto lenta fornendo una barriera significativa nella propagazione del segnale di feedback. Inoltre, poich&eacute; il coefficiente di diffusione di Ca2 + &egrave; molto pi&ugrave; piccolo di quello di cGMP, il declino del Ca2 + in senso longitudinale ritarda dietro la propagazione dell&#39;eccitazione dal declino di cGMP.

Calcio e phototransduction.

Fototransducci&#xF3;n visual, la conversi&#xF3;n de la luz entrante en una se&#xF1;al el&#xE9;ctrica, se lleva a cabo en los segmentos externos de la varilla y las c&#xE9;lulas fotorreceptoras de cono. Luz reduce la concentraci&#xF3;n de cGMP, que, en la oscuridad, mantiene abiertos canales cati&#xF3;nicos presentes en la membrana plasm&#xE1;tica del segmento externo. Ca2 + juega un papel importante en la fototransducci&#xF3;n por la modulaci&#xF3;n de los canales de cGMP-dependientes, as&#xED; como la s&#xED;ntesis de GMPc y la descomposici&#xF3;n. Ca2 + est&#xE1; involucrado en una retroalimentaci&#xF3;n negativa que es esencial para la adaptaci&#xF3;n de fotorreceptores de la iluminaci&#xF3;n de fondo. Los efectos de Ca2 + en los diferentes componentes de fototransducci&#xF3;n varilla se han caracterizado y cuantitativamente puede dar cuenta de las respuestas de estado estable de la c&#xE9;lula de la barra a la iluminaci&#xF3;n de fondo. La propagaci&#xF3;n de la Ca2 + se&#xF1;al de realimentaci&#xF3;n desde la periferia hacia el centro del segmento externo depende del coeficiente de difusi&#xF3;n de Ca2 +, que tiene un valor de 15 + / - 1 microm2 s (-1). Este valor muestra que la difusi&#xF3;n de Ca2 + en la direcci&#xF3;n radial es bastante lento proporcionar una barrera significativa a la propagaci&#xF3;n de la se&#xF1;al de realimentaci&#xF3;n. Adem&#xE1;s, debido a que el coeficiente de difusi&#xF3;n de Ca2 + es mucho menor que la de la cGMP, la disminuci&#xF3;n de Ca2 + en la direcci&#xF3;n longitudinal est&#xE1; por detr&#xE1;s de la propagaci&#xF3;n de la excitaci&#xF3;n por la disminuci&#xF3;n de cGMP.

El calcio y el Fototransducci&#xF3;n

&#x919B;&#x8131;&#x6C22;&#x9176; 3A1 &#xFF08;ALDH3A1&#xFF09; &#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5728;&#x54FA;&#x4E73;&#x7C7B;&#x52A8;&#x7269;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x51E0;&#x4E2A;&#x5047;&#x8BBE;&#x7684;&#x4FDD;&#x62A4;&#x89D2;&#x8272;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC; peroxidic &#x919B;&#x3001; &#x89E3;&#x6BD2;&#x7684;&#x89D2;&#x819C;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x53D1;&#x73B0;&#x7684;&#x6700;&#x4E30;&#x5BCC;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6E05;&#x9664;&#x81EA;&#x7531;&#x57FA;&#x548C;&#x7D2B;&#x5916;&#x7EBF; (UV) &#x76F4;&#x63A5;&#x5438;&#x6536;&#x3002;&#x5728;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;ALDH3A1 &#x7684;&#x4FDD;&#x62A4;&#x4F5C;&#x7528;&#x5BF9;&#x7D2B;&#x5916;&#x7EBF;-&#x548C; 4-&#x7F9F;&#x57FA;-2-&#x58EC;&#x70EF;-(4-HNE-) &#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x6C27;&#x5316;&#x635F;&#x4F24;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;&#x4E3A;&#x6B64;&#x76EE;&#x7684;&#xFF0C;&#x4EBA;&#x7C7B; ALDH3A1 &#x662F;&#x7A33;&#x5B9A;&#x8F6C;&#x67D3;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x9176;&#x884C;&#x89D2;&#x819C;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE; (HCE) &#x4E2D;&#x3002;ALDH3A1 &#x8F6C;&#x67D3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6709;&#x66F4;&#x597D;&#x7684;&#x62B5;&#x6297;&#x7D2B;&#x5916;&#x7EBF;&#x548C; 4-HNE-&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027;&#x6BD4;&#x6A21;&#x62DF;&#x8F6C;&#x67D3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;DNA &#x788E;&#x7247;&#x5316;&#x9A8C;&#x663E;&#x793A;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x6CBB;&#x7597;&#x65B9;&#x6CD5;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x51CB;&#x4EA1;&#x6A21;&#x62DF;&#x8F6C;&#x67D3;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x5728; ALDH3A1 &#x8868;&#x793A;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x901A;&#x8FC7;&#x534A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-3 &#x6D3B;&#x5316;&#x4E0E;&#x5288;&#x88C2;&#x6CE2;&#x5170;&#x968F;&#x540E;&#x53D1;&#x751F;&#x3002;&#x7C73;&#x6C0F;&#x5E38;&#x6570; (K(m)) &#x4E3A; 4 HNE &#x662F; 54 microM ALDH3A1 &#x8F6C;&#x67D3;&#x7EC6;&#x80DE; &#xFF1B;100 microM 4-HNE &#x589E;&#x52A0;&#x589E;&#x52A0;&#x4E86; 50%&#x4EE5;&#x4E0A;&#x7684;&#x6A21;&#x62DF;&#x8F6C;&#x67D3;&#x7EC6;&#x80DE; NAD (P) H &#x6C34;&#x5E73;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x53D1;&#x73B0; ALDH3A1 &#x8868;&#x8FBE;&#x963B;&#x6B62; 4-HNE &#x8BF1;&#x5BFC;&#x86CB;&#x767D;&#x52A0;&#x5408;&#x7269;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;&#x4E24;&#x8005;&#x5408;&#x8BA1;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E; ALDH3A1 &#x662F;&#x4FDD;&#x62A4;&#x62B5;&#x6297;&#x7D2B;&#x5916;&#x7EBF;&#x548C; 4-HNE-&#x8BF1;&#x5BFC;&#x6C27;&#x5316;&#x635F;&#x4F24;&#x7684;&#x89D2;&#x819C;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9632;&#x5FA1;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x8C03;&#x8282;&#x5143;&#x4EF6;&#x3002;

Aldh3a1 &#x4FDD;&#x62A4;&#x514D;&#x53D7;&#x7D2B;&#x5916;&#x7EBF;&#x548C; 4-&#x7F9F;&#x57FA;-2-&#x58EC;&#x70EF;-&#x8BF1;&#x5BFC;&#x6C27;&#x5316;&#x635F;&#x4F24;&#x7684;&#x89D2;&#x819C;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;

Aldehyde dehydrogenase 3A1 (ALDH3A1) is one of the most abundant proteins found in corneal epithelial cells of mammalian species, with several postulated protective roles that include detoxification of peroxidic aldehydes, scavenging of free radicals, and direct absorption of ultraviolet (UV) radiation. In the present study, the protective role of ALDH3A1 against UV- and 4-hydroxy-2-nonenal- (4-HNE-) induced oxidative damage was studied. For this purpose, human ALDH3A1 was stably transfected in a human corneal epithelial cell line (HCE) lacking endogenous enzyme. Cells transfected with ALDH3A1 were more resistant to UV- and 4-HNE-induced cytotoxicity than mock-transfected cells. DNA fragmentation assays revealed that both treatments induced apoptosis in mock-transfected cells, but not in ALDH3A1-expressing cells. Apoptosis appeared to occur via caspase-3 activation and subsequent PARP cleavage. The Michaelis-Menten constant (K(m)) for 4-HNE was 54 microM in ALDH3A1-transfected cells; the addition of 100 microM 4-HNE increased NAD(P)H levels by 50% above that in mock-transfected cells. We also found that ALDH3A1 expression prevented 4-HNE-induced protein adduct formation. Taken together, these data suggest that ALDH3A1 is a regulatory element of the cellular defense system that protects corneal epithelium against UV- and 4-HNE-induced oxidative damage.

Aldh3a1 protects human corneal epithelial cells from ultraviolet- and 4-hydroxy-2-nonenal-induced oxidative damage.

Ald&#xE9;hyde d&#xE9;shydrog&#xE9;nase 3A1 (ALDH3A1) est l&#x26;#39;une des prot&#xE9;ines les plus abondants dans les cellules &#xE9;pith&#xE9;liales de corn&#xE9;e des esp&#xE8;ces de mammif&#xE8;res, avec plusieurs r&#xF4;les protecteurs postul&#xE9;es qui comprennent la d&#xE9;sintoxication des ald&#xE9;hydes peroxydiques, balayage des radicaux libres, et l&#x26;#39;absorption directe du rayonnement ultraviolet (UV). Dans la pr&#xE9;sente &#xE9;tude, le r&#xF4;le protecteur de ALDH3A1 contre les UV et 4-hydroxy-2-non&#xE9;nal-(4-HNE-) induite par les dommages oxydatifs a &#xE9;t&#xE9; &#xE9;tudi&#xE9;e. A cet effet, l&#x26;#39;homme a &#xE9;t&#xE9; transfect&#xE9;es de fa&#xE7;on stable ALDH3A1 dans une lign&#xE9;e cellulaire humaine &#xE9;pith&#xE9;lium corn&#xE9;en (HCE) manque enzyme endog&#xE8;ne. Les cellules transfect&#xE9;es avec ALDH3A1 &#xE9;taient plus r&#xE9;sistantes &#xE0; la cytotoxicit&#xE9; UV et 4-HNE-induite que simili-cellules transfect&#xE9;es. Dosages fragmentation de l&#x26;#39;ADN a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; que les deux traitements induit l&#x26;#39;apoptose dans les cellules transfect&#xE9;es maquette, mais pas dans les cellules exprimant ALDH3A1. L&#x26;#39;apoptose semble se produire par l&#x26;#39;interm&#xE9;diaire de caspase-3 et l&#x26;#39;activation subs&#xE9;quente clivage de la PARP. La constante de Michaelis-Menten (K (m)) pour 4-HNE &#xE9;tait de 54 microM dans ALDH3A1 cellules transfect&#xE9;es, l&#x26;#39;ajout de 100 microM 4-HNE augment&#xE9; NAD (P) H niveaux de 50% au-dessus que dans la maquette des cellules transfect&#xE9;es. Nous avons &#xE9;galement constat&#xE9; que l&#x26;#39;expression ALDH3A1 emp&#xEA;ch&#xE9; 4-HNE-induite formation d&#x26;#39;adduits prot&#xE9;ine. Pris ensemble, ces donn&#xE9;es sugg&#xE8;rent que ALDH3A1 est un &#xE9;l&#xE9;ment de r&#xE9;gulation du syst&#xE8;me de d&#xE9;fense cellulaire qui prot&#xE8;ge l&#x26;#39;&#xE9;pith&#xE9;lium corn&#xE9;en contre les dommages oxydatifs et UV-4-HNE-induite.

Aldh3a1 Prot&#xE8;ge la corn&#xE9;e humaine cellules &#xE9;pith&#xE9;liales de l&#x26;#39;ultraviolet et de 4-hydroxy-2-non&#xE9;nal induite par des dommages d&#x26;#39;oxydation

ALDH3A1 Schutz der menschlichen Hornhaut-Epithelzellen von Ultraviolett-und 4-Hydroxy-2-Nonenal-induzierten oxidativen Sch&#xE4;den.

Aldeide deidrogenasi 3A1 (ALDH3A1) &egrave; una delle proteine pi&ugrave; abbondanti nelle cellule epiteliali corneali di specie di mammiferi, con diversi ruoli protettivi postulati che includono detossificazione delle aldeidi perossidica, lo scavenging dei radicali liberi e assorbimento diretto della radiazione ultravioletta (UV). Nel presente studio, il ruolo protettivo delle ALDH3A1 contro UV - e 4-idrossi-2-nonenale-(4 - HNE-) &egrave; stato studiato il danno ossidativo indotto. Per questo scopo, ALDH3A1 umana era stabile transfected in una linea di cellule epiteliali umane corneale (HCE) manca l&#39;enzima endogeno. Celle transfected con ALDH3A1 erano pi&ugrave; resistenti alla citotossicit&agrave; UV e 4-HNE-indotta che le celle transfected mock. Analisi di frammentazione del DNA ha rivelato che entrambi trattamenti induce apoptosi nelle cellule transfected derisione, ma non in cellule che esprimono ALDH3A1. Apoptosis sembrava verificarsi tramite attivazione di caspase-3 e successiva scissione PARP. La costante di Michaelis-Menten (K(m)) per 4-HNE &egrave; stato 54 microM in celle transfected ALDH3A1; l&#39;aggiunta di 100 microM 4-HNE ha aumentato i livelli di NAD (P) H del 50% superiore a quello nelle celle transfected mock. Abbiamo anche trovato che ALDH3A1 espressione impedito proteina indotta da 4-HNE formazione di addotti. Presi insieme, questi dati suggeriscono che il ALDH3A1 &egrave; un elemento di regolamentazione del sistema di difesa cellulare che protegge l&#39;epitelio corneale contro il danno ossidativo UV e 4-HNE-indotta.

Aldh3a1 protegge le cellule epiteliali corneale umane dal danno ossidativo ultravioletto e 4-idrossi-2-nonenale-indotta.

&#x30A2;&#x30EB;&#x30C7;&#x30D2;&#x30C9;&#x8131;&#x6C34;&#x7D20;&#x9175;&#x7D20;3A1&#xFF08;ALDH3A1&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x30D5;&#x30EA;&#x30FC;&#x30E9;&#x30B8;&#x30AB;&#x30EB;&#x306E;&#x6D88;&#x53BB;&#x3001;&#x904E;&#x9178;&#x5316;&#x30A2;&#x30EB;&#x30C7;&#x30D2;&#x30C9;&#x306E;&#x89E3;&#x6BD2;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x4EEE;&#x5B9A;&#x306E;&#x4FDD;&#x8B77;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x3001;&#x54FA;&#x4E73;&#x52D5;&#x7269;&#x7A2E;&#x306E;&#x89D2;&#x819C;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x898B;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x6700;&#x3082;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x4E00;&#x3064;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x7D2B;&#x5916;&#x7DDA;&#xFF08;UV&#xFF09;&#x653E;&#x5C04;&#x7DDA;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x5438;&#x53CE;&#x3002;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;ALDH3A1&#x306E;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x4FDD;&#x8B77;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;UV-&#x304A;&#x3088;&#x3073;4  - &#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x30AD;&#x30B7;-2  - &#x30CE;&#x30CD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30EB;&#xFF08;4-HNE-&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x9178;&#x5316;&#x640D;&#x50B7;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x76EE;&#x7684;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;ALDH3A1&#x3092;&#x5B89;&#x5B9A;&#x7684;&#x306B;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x9175;&#x7D20;&#x3092;&#x6B20;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#xFF08;HCE&#xFF09;&#x30D2;&#x30C8;&#x89D2;&#x819C;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x306B;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30C8;&#x3057;&#x305F;&#x3002; ALDH3A1&#x3067;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30C8;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30E2;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30C8;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x3088;&#x308A;&#x3082;UV-A&#x53CA;&#x3073;4-HNE&#x8A98;&#x767A;&#x7D30;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x3088;&#x308A;&#x8010;&#x6027;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002; DNA&#x65AD;&#x7247;&#x5316;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x6CD5;&#x306F;&#x3001;&#x30E2;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30C8;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;ALDH3A1&#x767A;&#x73FE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x30AB;&#x30B9;&#x30D1;&#x30FC;&#x30BC;-3&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x306E;PARP&#x5207;&#x65AD;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x884C;&#x308F;&#x308C;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x898B;&#x3048;&#x305F;&#x3002; 4-HNE&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#xFF08;K&#xFF08;m&#xFF09;&#xFF09;&#x306F;&#x30DF;&#x30AB;&#x30A8;&#x30EA;&#x30B9; - &#x30E1;&#x30F3;&#x30C6;&#x30F3;&#x5B9A;&#x6570;&#x306F;ALDH3A1-&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30C8;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x306F;54&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3001;100&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;4-HNE&#x306E;&#x6DFB;&#x52A0;&#x306F;&#x3001;&#x30E2;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30C8;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x3001;&#x4E0A;&#x8A18;50&#xFF05;NAD&#xFF08;P&#xFF09;H&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;ALDH3A1&#x767A;&#x73FE;&#x306F;4-HNE&#x8A98;&#x5C0E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x4ED8;&#x52A0;&#x4F53;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x9632;&#x6B62;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;ALDH3A1&#x306F;&#x3001;UV-A&#x53CA;&#x3073;4-HNE&#x8A98;&#x767A;&#x6027;&#x9178;&#x5316;&#x7684;&#x640D;&#x50B7;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x89D2;&#x819C;&#x4E0A;&#x76AE;&#x3092;&#x4FDD;&#x8B77;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x9632;&#x5FA1;&#x7CFB;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x8981;&#x7D20;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

Aldh3a1&#x306F;&#x3001;&#x7D2B;&#x5916;&#x304A;&#x3088;&#x3073;4  - &#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x30AD;&#x30B7;-2  - &#x30CE;&#x30CD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30EB;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x9178;&#x5316;&#x30C0;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x304B;&#x3089;&#x30D2;&#x30C8;&#x89D2;&#x819C;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x4FDD;&#x8B77;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC54C;&#xB370;&#xD558;&#xC774;&#xB4DC; dehydrogenase 3A1 (ALDH3A1) peroxidic &#xC54C;&#xB370;&#xD558;&#xC774;&#xB4DC;&#xC758; &#xD574;&#xB3C5;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xC5EC;&#xB7EC; postulated &#xBCF4;&#xD638; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xAC00;&#xC9C4; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC885;&#xC758; &#xAC01; &#xB9C9; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD558;&#xB294; &#xAC00;&#xC7A5; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC790;&#xC720; &#xB798; &#xB514; &#xCE7C;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC790;&#xC678;&#xC120; (UV) &#xBC29;&#xC0AC;&#xC120;&#xC758; &#xC9C1;&#xC811; &#xD761;&#xC218;&#xC758; &#xCCAD;&#xC18C;. &#xD604;&#xC7AC; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294;, aldh3a1&#xC758; &#xBCF4;&#xD638; &#xC5ED;&#xD560;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; UV-&#xBC0F; 4-&#xD788; &#xB4DC; &#xB85D; &#xC2DC;-2-nonenal-(4-HNE-) &#xC720;&#xBC1C;&#xB41C; &#xC0B0;&#xD654; &#xC190;&#xC0C1; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBAA9;&#xC801;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xC778;&#xAC04; aldh3a1&#xB294; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xAC01; &#xB9C9; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778; (HCE) &#xC0DD; &#xD6A8;&#xC18C; &#xBD80;&#xC871;&#xC5D0; &#xD398;. Aldh3a1&#xC640; &#xD398; &#xC140; &#xBAA8;&#xC758; transfected &#xC138;&#xD3EC; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB354; &#xB9CE;&#xC740; &#xC790;&#xC678;&#xC120; &#xBC0F; 4-HNE-&#xC720;&#xB3C4; &#xC138;&#xD3EC; &#xB3C5;&#xC131;&#xC744; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD588;&#xB2E4;. DNA &#xBD84;&#xC5F4; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xACF5;&#xAC1C; &#xB450; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC140; aldh3a1&#xC744; &#xD45C;&#xD604;&#xC5D0; &#xBAA8;&#xC758; transfected &#xC138;&#xD3EC; apoptosis &#xC720;&#xB3C4;. Apoptosis caspase 3 &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBC0F; &#xD6C4;&#xC18D; PARP &#xBD84;&#xC5F4;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xB2E4;. Michaelis Menten &#xC0C1;&#xC218; (4 HNE&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; k(m))&#xB294; ALDH3A1 &#xD398; &#xC140;; 54 microM 100 microM 4 HNE&#xC758; &#xCD94;&#xAC00; NAD (P) H &#xB808;&#xBCA8; &#xBAA8;&#xC758; transfected &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xADF8; &#xC774;&#xC0C1;&#xC758; 50% &#xC99D;&#xAC00;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; ALDH3A1 &#xC2DD; &#xBC29;&#xC9C0; 4 HNE &#xC720;&#xBC1C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC1C;&#xACAC; adduct &#xD615;&#xC131;. &#xD568;&#xAED8; &#xCC0D;&#xC740;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; ALDH3A1 UV-&#xBC0F; 4-HNE-&#xC0B0;&#xD654; &#xC190;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC01; &#xB9C9; &#xC0C1;&#xD53C; &#xBCF4;&#xD638; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC29;&#xC5B4; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xADDC;&#xC81C; &#xC694;&#xC18C;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Aldh3a1 &#xC790;&#xC678;&#xC120; &#xBC0F; 4-&#xD788; &#xB4DC; &#xB85D; &#xC2DC;-2-nonenal-&#xC720;&#xBC1C; &#xC0B0;&#xD654; &#xC190;&#xC0C1; &#xC73C;&#xB85C;&#xBD80;&#xD130; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xAC01; &#xB9C9; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xBCF4;&#xD638;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Aldeh&#xED;do deshidrogenasa 3A1 (ALDH3A1) es una de las prote&#xED;nas m&#xE1;s abundantes encontradas en las c&#xE9;lulas epiteliales corneales de las especies de mam&#xED;feros, con varios postulados funciones protectoras que incluyen la desintoxicaci&#xF3;n de aldeh&#xED;dos perox&#xED;dicos, la compactaci&#xF3;n de los radicales libres, y la absorci&#xF3;n directa de la luz ultravioleta (UV). En el presente estudio, el papel protector de la radiaci&#xF3;n UV-ALDH3A1 y 4-hidroxi-2-nonenal-(4-HNE) el da&#xF1;o oxidativo inducido se ha estudiado. Para este prop&#xF3;sito, humano ALDH3A1 se transfectadas de forma estable en un humano l&#xED;nea celular epitelial corneal (HCE) que carecen de la enzima end&#xF3;gena. Las c&#xE9;lulas transfectadas con ALDH3A1 eran m&#xE1;s resistentes a la citotoxicidad de UV y 4-HNE inducida de c&#xE9;lulas transfectadas maqueta. Ensayos de fragmentaci&#xF3;n del ADN revel&#xF3; que ambos tratamientos apoptosis inducida en c&#xE9;lulas transfectadas maqueta, pero no en las c&#xE9;lulas que expresan ALDH3A1. La apoptosis parece ocurrir a trav&#xE9;s de la activaci&#xF3;n de la caspasa-3 y PARP divisi&#xF3;n posterior. La constante de Michaelis-Menten (K (m)) de 4-HNE fue de 54 micras en ALDH3A1 c&#xE9;lulas transfectadas; la adici&#xF3;n de 100 microM 4-HNE aumentado NAD (P) H niveles por encima de 50% que en maqueta c&#xE9;lulas transfectadas. Tambi&#xE9;n se encontr&#xF3; que la expresi&#xF3;n ALDH3A1 impedido 4-HNE inducida por la formaci&#xF3;n de aductos de prote&#xED;nas. Tomados en conjunto, estos datos sugieren que ALDH3A1 es un elemento regulador del sistema de defensa celular que protege epitelio corneal contra el da&#xF1;o oxidativo y UV-4-HNE inducida.

Aldh3a1 Protege las C&#xE9;lulas epiteliales de ultravioleta-y 4-hidroxi-2-nonenal el da&#xF1;o oxidativo inducido

&#x9541;&#x79BB;&#x5B50; (Mg2 +) &#x751F;&#x5316;&#x51FD;&#x6570;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5728;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x5149;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x5916;&#x90E8;&#x5206;&#xFF0C;&#x8BB8;&#x591A;&#x53CD;&#x5E94;&#x5229;&#x7528; MgGTP &#x548C; MgATP&#xFF0C;&#x548C; Mg2 + &#x8FD8;&#x89C4;&#x5B9A;&#x4E86;&#x51E0;&#x4E2A; phototransduction &#x7684;&#x9176;&#x3002;Mg2 + &#x53EF;&#x4EE5;&#x901A;&#x8FC7;&#x5728;&#x67D0;&#x4E9B;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x7684;&#x5149;&#x654F;&#x611F;&#x901A;&#x9053;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x6CA1;&#x6709;&#x660E;&#x786E;&#x6324;&#x51FA;&#x673A;&#x5236;&#x5DF2;&#x53D1;&#x73B0;&#x548C;&#x5220;&#x9664;&#x80DE;&#x5916; Mg2 + &#x5DF2;&#x5BF9;&#x5149;&#x7684;&#x654F;&#x611F;&#x5EA6;&#x6216;&#x7D2B;&#x5916;&#x5149;&#x54CD;&#x5E94;&#x7684;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x6CA1;&#x6709;&#x663E;&#x8457;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E86; Mg2 + &#x67D3;&#x6599; Furaptra &#x76F4;&#x63A5;&#x6D4B;&#x91CF;&#x548C;&#x76D1;&#x6D4B;&#x6E38;&#x79BB; Mg2 + &#x6D53;&#x5EA6;&#x611F;&#x5149;&#x5668;&#x5916;&#x5404;&#x9636;&#x5C42;&#x4E2D;&#x7684;&#xFF0C;&#x770B;&#x770B;&#x662F;&#x5426;&#x514D;&#x8D39;&#x7684; Mg2 + &#x6D53;&#x5EA6;&#x53D8;&#x5316;&#x5728;&#x751F;&#x7406;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x7684;&#x8367;&#x5149;&#x3002;&#x6D53;&#x5EA6;&#x5728;&#x9759;&#x606F;&#x514D;&#x8D39; Mg2 + &#x6F02;&#x767D;&#x877E;&#x8788;&#x6746;&#x548C;&#x9525;&#x5F62;&#x5149;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x6BB5;&#xFF0C;&#x5206;&#x522B;&#x4E3A; + /-0.06 &#x548C; + /-0.09 m m&#xFF0C;0.81 0.86&#x3002;&#x5916;&#x90E8;&#x5206;&#x6E38;&#x79BB; Mg2 + &#x6D53;&#x5EA6;&#x4E0D;&#x663E;&#x8457;&#x53D7; Ca2 + &#x548C; Na +&#xFF0C;Mg2 + &#x7A33;&#x6001;&#x8C03;&#x8282;&#x5404;&#x81EA;&#x6362;&#x70ED;&#x5668;&#x6392;&#x9664;&#x91CD;&#x5927;&#x4F5C;&#x7528;&#x5728;&#x80DE;&#x5916; ph &#x503C;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x4F11;&#x606F;&#x514D;&#x8D39; Mg2 + &#x6D53;&#x5EA6;&#x8FD8;&#x4E0D;&#x663E;&#x8457;&#x53D7;&#x5230;&#x66DD;&#x5149;&#x4E3A; 0 Mg2 + &#x6697;&#x793A;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x57FA;&#x5E95; Mg2 + &#x6D41;&#x91CF;&#x3002;&#x5F00;&#x653E;&#x7684; cGMP &#x5C01;&#x95ED;&#x901A;&#x9053;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7684; Mg2 + &#x6D53;&#x5EA6;&#x5728;&#x6CA1;&#x6709; Na + &#x548C; Ca2 + &#x4E2D;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x5728;&#x5176;&#x5B58;&#x5728;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x8BE5;&#x53BB;&#x6781;&#x5316;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5927;&#x91CF;&#x6D8C;&#x5165; Mg2 + &#x4EC5;&#x5728;&#x6CA1;&#x6709;&#x5176;&#x4ED6; permeant &#x79BB;&#x5B50;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x5728;&#x751F;&#x7406;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x7684;&#x5927;&#x91CF;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x5149;&#x523A;&#x6FC0;&#x4E0D;&#x53D8;&#x6697;&#x7684;&#x611F;&#x5149;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x6BB5;&#x4E2D;&#x7684; Mg2 + &#x6D53;&#x5EA6;&#x3002;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x6709;&#x6CA1;&#x6709;&#x53EF;&#x4EE5;&#x663E;&#x8457;&#x5F71;&#x54CD;&#x751F;&#x7406;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x7684;&#x5916;&#x90E8;&#x7F51;&#x6BB5;&#x4E2D;&#x7684; Mg2 + &#x6D53;&#x5EA6;&#x7684;&#x5927;&#x91CF;&#x6D8C;&#x5165;&#x548C;&#x5916;&#x6392;&#x7684;&#x9014;&#x5F84;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x5B83;&#x662F; phototransduction &#x7684;&#x4E0D;&#x53EF;&#x80FD;&#x7684; Mg2 + &#x8D77;&#x7740;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x52A8;&#x6001;&#x8C03;&#x8282;&#x3002;

&#x877E;&#x8788;&#x611F;&#x5149;&#x5668;&#x5916;&#x6BB5;&#x514D;&#x8D39;&#x9541;&#x6D53;&#x5EA6;&#x3002;

Magnesium ions (Mg2+) play an important role in biochemical functions. In vertebrate photoreceptor outer segments, numerous reactions utilize MgGTP and MgATP, and Mg2+ also regulates several of the phototransduction enzymes. Although Mg2+ can pass through light-sensitive channels under certain conditions, no clear extrusion mechanism has been identified and removing extracellular Mg2+ has no significant effect on the light sensitivity or the kinetics of the photoresponse. We have used the fluorescent Mg2+ dye Furaptra to directly measure and monitor the free Mg2+ concentration in photoreceptor outer segments and examine whether the free Mg2+ concentration changes under physiological conditions. Resting free Mg2+ concentrations in bleached salamander rod and cone photoreceptor cell outer segments were 0.86 +/- 0.06 and 0.81 +/- 0.09 mM, respectively. The outer segment free Mg2+ concentration was not significantly affected by changes in extracellular pH, Ca2+ and Na+, excluding a significant role for the respective exchangers in the regulation of Mg2+ homeostasis. The resting free Mg2+ concentration was also not significantly affected by exposure to 0 Mg2+, suggesting the lack of significant basal Mg2+ flux. Opening the cGMP-gated channels led to a significant increase in the Mg2+ concentration in the absence of Na+ and Ca2+, but not in their presence, indicating that depolarization can cause a significant Mg2+ influx only in the absence of other permeant ions, but not under physiological conditions. Finally, light stimulation did not change the Mg2+ concentration in the outer segments of dark-adapted photoreceptors. The results suggest that there are no influx and efflux pathways that can significantly affect the Mg2+ concentration in the outer segment under physiological conditions. Therefore, it is unlikely that Mg2+ plays a significant role in the dynamic modulation of phototransduction.

Free magnesium concentration in salamander photoreceptor outer segments.

Des ions magn&#xE9;sium (Mg 2 +) jouent un r&#xF4;le important dans les fonctions biochimiques. Dans les segments ext&#xE9;rieurs des photor&#xE9;cepteurs vert&#xE9;br&#xE9;s, de nombreuses r&#xE9;actions d&#x26;#39;utiliser MgGTP et MgATP, et Mg 2 + r&#xE9;glemente &#xE9;galement plusieurs des enzymes phototransduction. Bien que Mg 2 + peut passer &#xE0; travers les canaux sensibles &#xE0; la lumi&#xE8;re sous certaines conditions, aucun m&#xE9;canisme d&#x26;#39;extrusion a &#xE9;t&#xE9; clairement identifi&#xE9; et en supprimant Mg2 + extracellulaire n&#x26;#39;a pas d&#x26;#39;effet significatif sur la sensibilit&#xE9; &#xE0; la lumi&#xE8;re ou la cin&#xE9;tique de la photor&#xE9;ponse. Nous avons utilis&#xE9; le Mg2 + colorant fluorescent Furaptra de mesurer directement et de surveiller le Mg2 + libre concentration dans les segments externes des photor&#xE9;cepteurs et d&#x26;#39;examiner si le Mg2 + libre changements de concentration dans des conditions physiologiques. De repos, sans Mg2 + concentrations dans blanchi salamandre tige et des segments externes des photor&#xE9;cepteurs &#xE0; c&#xF4;nes de cellules &#xE9;taient de 0,86 + / - 0,06 et 0,81 + / - 0,09 mm, respectivement. Le segment externe libre Mg2 + concentration n&#x26;#39;a pas &#xE9;t&#xE9; significativement affect&#xE9;s par les changements de pH extracellulaire, Ca2 + et Na +, l&#x26;#39;exclusion d&#x26;#39;un r&#xF4;le important pour les &#xE9;changeurs respectifs dans la r&#xE9;gulation de l&#x26;#39;hom&#xE9;ostasie Mg2 +. Le Mg2 + libre de repos de concentration n&#x26;#39;a pas non plus significativement affect&#xE9;e par l&#x26;#39;exposition &#xE0; 0 Mg 2 +, ce qui sugg&#xE8;re l&#x26;#39;absence de Mg2 + base importante de flux. Ouverture des canaux GMPc-d&#xE9;pendants ont conduit &#xE0; une augmentation significative dans le Mg 2 + concentration en l&#x26;#39;absence de Na + et Ca2 +, mais pas en leur pr&#xE9;sence, indiquant que la d&#xE9;polarisation peut provoquer une Mg2 significatif + afflux seulement en l&#x26;#39;absence d&#x26;#39;autres ions perm&#xE9;ant, mais pas sous les conditions physiologiques. Enfin, la stimulation lumineuse ne change pas la concentration Mg2 + dans les segments externes des photor&#xE9;cepteurs adapt&#xE9;s &#xE0; l&#x26;#39;obscurit&#xE9;. Les r&#xE9;sultats sugg&#xE8;rent qu&#x26;#39;il n&#x26;#39;ya pas de flux et les voies d&#x26;#39;efflux qui peuvent affecter de mani&#xE8;re significative la concentration en Mg 2 + dans le segment externe dans des conditions physiologiques. Par cons&#xE9;quent, il est peu probable que Mg2 + joue un r&#xF4;le important dans la modulation dynamique de la phototransduction.

La concentration de magn&#xE9;sium libre dans les segments Photor&#xE9;cepteur Salamandre Outer

Kostenloser Magnesium-Konzentration im Salamander Photorezeptor &#xE4;u&#xDF;eren Segmente.

Gli ioni magnesio (Mg2 +) giocano un ruolo importante nelle funzioni biochimiche. Nei segmenti esterni fotorecettore vertebrati, numerose reazioni utilizzano MgGTP e MgATP, e Mg2 + regola anche molti degli enzimi phototransduction. Sebbene Mg2 + pu&ograve; passare attraverso canali sensibili alla luce, a determinate condizioni, non &egrave; stato identificato alcun meccanismo di estrusione chiaro e rimozione extracellular Mg2 + non ha alcun effetto significativo sulla sensibilit&agrave; alla luce o la cinetica della fotorisposta. Abbiamo usato il fluorescente Mg2 + tintura Furaptra per direttamente misurare e monitorare il libera Mg2 + concentrazione nei segmenti esterni fotorecettore ed esaminare se la concentrazione di Mg2 + libera cambia in condizioni fisiologiche. Riposo libero Mg2 + concentrazioni in sbiancato Salamandra rod e cono fotorecettore cellula esterni segmenti erano 0,86 + 0,06 e 0,81 &plusmn; 0,09 mM, rispettivamente. Segmento esterno gratuita Mg2 + concentrazione non &egrave; stata significativamente influenzata da variazioni del pH extracellulare, Ca2 + e Na +, escluso un ruolo significativo per i rispettivi scambiatori nella regolazione dell&#39;omeostasi del Mg2 +. Il riposa libera Mg2 + concentrazione era anche non significativamente influenzata dall&#39;esposizione a 0 Mg2 +, suggerendo l&#39;assenza di significativo flusso basale Mg2 +. Apertura dei canali cGMP-gated ha portato ad un significativo aumento della concentrazione Mg2 + in assenza di Na + e Ca2 +, ma non in loro presenza, che indica tale depolarizzazione pu&ograve; causare un notevole afflusso di Mg2 + solo in assenza di altri ioni permeant, ma non in condizioni fisiologiche. Infine, la stimolazione luminosa non cambia la concentrazione di Mg2 + nei segmenti esterni dei fotorecettori dark-adapted. I risultati suggeriscono che non ci sono nessun afflusso ed efflusso percorsi che possono influenzare significativamente la concentrazione di Mg2 + nel segmento esterno in condizioni fisiologiche. Pertanto, &egrave; improbabile che Mg2 + gioca un ruolo significativo nella modulazione dinamica del phototransduction.

Concentrazione di magnesio libero in segmenti esterni Salamandra fotorecettore.

&#x30DE;&#x30B0;&#x30CD;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#xFF08;Mg2 +&#x306E;&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x5149;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x6570;&#x306E;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306F;MgGTP&#x3068;MgATP&#x3092;&#x6D3B;&#x7528;&#x3057;&#x3001;Mg2 +&#x306E;&#x3082;&#x3001;&#x5149;&#x4F1D;&#x9054;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; Mg2 +&#x3068;&#x306F;&#x3001;&#x4E00;&#x5B9A;&#x306E;&#x6761;&#x4EF6;&#x306E;&#x4E0B;&#x3067;&#x5149;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3092;&#x901A;&#x904E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x660E;&#x78BA;&#x306A;&#x62BC;&#x3057;&#x51FA;&#x3057;&#x6A5F;&#x69CB;&#x304C;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;MG2&#x3092;&#x524A;&#x9664;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;+&#x5149;&#x611F;&#x5EA6;&#x3084;&#x5149;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x52D5;&#x614B;&#x306B;&#x6709;&#x610F;&#x306A;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x86CD;&#x5149;&#x706F;&#x306E;Mg2 +&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x67D3;&#x6599;Furaptra&#x306F;&#x76F4;&#x63A5;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x3001;&#x904A;&#x96E2;Mg2 +&#x6FC3;&#x5EA6;&#x5149;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x5916;&#x5074;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x3092;&#x76E3;&#x8996;&#x3057;&#x3001;&#x691C;&#x8A3C;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3092;&#x81EA;&#x7531;&#x306B;Mg2 +&#x3092;&#x751F;&#x7406;&#x7684;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x3067;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x304C;&#x5909;&#x5316;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; 0.06&#x3068;0.81 +  -  /  -  0.09 mM&#x306E;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x6F02;&#x767D;&#x30B5;&#x30F3;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30A6;&#x30AA;&#x3001;&#x687F;&#x4F53;&#x3068;&#x9310;&#x4F53;&#x8996;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x7BC0;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5B89;&#x9759;&#x6642;&#x306E;&#x30D5;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;Mg2 +&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306F;&#x3001;+ / 0.86&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x7A7A;&#x304D;Mg2 +&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306F;&#x6709;&#x610F;&#x306B;Mg2 +&#x306E;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30B9;&#x30BF;&#x30B7;&#x30B9;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x306E;&#x4EA4;&#x63DB;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x9664;&#x304F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;pH&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306F;&#x3001;Ca2 +&#x304A;&#x3088;&#x3073;Na +&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5B89;&#x9759;&#x6642;&#x306E;&#x81EA;&#x7531;&#x306A;Mg2 +&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3082;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x57FA;&#x790E;Mg2 +&#x306E;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x6B20;&#x5982;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;0&#x306E;Mg2 +&#x3078;&#x306E;&#x66DD;&#x9732;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002; Na&#x306E;&#x975E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x306E;Mg2 +&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x5927;&#x5E45;&#x306A;&#x5897;&#x52A0;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x3063;&#x305F;cGMP&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3092;&#x958B;&#x3044;&#x3066;+&#x3068;Ca2 +&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x8131;&#x5206;&#x6975;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;Mg2 +&#x306E;&#x4ED6;&#x306E;&#x552F;&#x4E00;&#x306E;&#x900F;&#x904E;&#x6027;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x306E;&#x975E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x306E;&#x6D41;&#x5165;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x4E0B;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x751F;&#x7406;&#x7684;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x5149;&#x523A;&#x6FC0;&#x306F;&#x3001;&#x6697;&#x9806;&#x5FDC;&#x5149;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306B;Mg2 +&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;MG2&#x3092;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;+&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3092;&#x751F;&#x7406;&#x7684;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x6D41;&#x5165;&#x3068;&#x6D41;&#x51FA;&#x306E;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x304C;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;Mg2 +&#x304C;&#x5149;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30C3;&#x30AF;&#xB7;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;

&#x30B5;&#x30E9;&#x30DE;&#x30F3;&#x30C0;&#x30FC;&#x611F;&#x5149;&#x4F53;&#x5916;&#x7BC0;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x904A;&#x96E2;&#x30DE;&#x30B0;&#x30CD;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x6FC3;&#x5EA6;

&#xB9C8;&#xADF8;&#xB124;&#xC298; &#xC774;&#xC628; (Mg2 +) &#xC0DD; &#xD654; &#xD655; &#xC801;&#xC778; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xCC99;&#xCD94; &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC218;&#xB9CE;&#xC740; &#xBC18;&#xC751;&#xC744; &#xD65C;&#xC6A9; Mggtp&#xC640; MgATP, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; Mg2 + &#xB610;&#xD55C; &#xC870;&#xC808; phototransduction &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC;. Mg2 +, &#xD2B9;&#xC815; &#xC870;&#xAC74; &#xD558;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBE5B;&#xC5D0; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xCC44;&#xB110;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC804;&#xB2EC;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xBD84;&#xBA85; &#xC555;&#xCD9C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC774; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD558; &#xACE0; &#xC81C;&#xAC70; &#xD574;&#xB3C4; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; Mg2 +&#xB294; &#xBE5B; &#xAC10;&#xB3C4; photoresponse&#xC758; &#xC18D;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xD070; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC8FC;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD615;&#xAD11; Mg2 +&#xB97C; &#xC9C1;&#xC811; &#xCE21;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; &#xD558;&#xB294; &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xC790;&#xC720; Mg2 + &#xB18D;&#xB3C4; Furaptra &#xC5FC;&#xC0C9; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xC870;&#xAC74; &#xD558;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC790;&#xC720; Mg2 + &#xB18D;&#xB3C4; &#xBCC0;&#xACBD; &#xC5EC;&#xBD80; &#xAC80;&#xC0AC; &#xC0AC;&#xC6A9;. &#xD734;&#xC2DD; &#xC790;&#xC720; Mg2 + &#xB18D;&#xB3C4; + /-0.06 0.09 m m, &plusmn; 0.81 0.86 &#xAC01;&#xAC01; &#xB3C4;&#xB871;&#xB1FD; &#xB9C9;&#xB300; &#xBC0F; &#xC6D0;&#xBFD4; &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8; &#xD45C;&#xBC31;. &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8; &#xC790;&#xC720; Mg2 + &#xB18D;&#xB3C4; Ca2 +&#xC640; Na +, Mg2 + &#xD56D;&#xC0C1;&#xC131; &#xC870;&#xC808;&#xC5D0; &#xAC01;&#xAC01; &#xAD50;&#xD658;&#xAE30;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC81C;&#xC678; &#xD558; &#xACE0; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xC0B0;&#xB3C4;&#xC758; &#xBCC0;&#xD654;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD06C;&#xAC8C; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1B;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD734;&#xC2DD; &#xC790;&#xC720; Mg2 + &#xB18D;&#xB3C4; &#xB178;&#xCD9C; 0 Mg2 +&#xB97C; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xC911;&#xB300; &#xD55C; &#xAE30;&#xC800; Mg2 + &#xD50C;&#xB7ED;&#xC2A4;&#xC758; &#xBD80;&#xC871;&#xC758; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xD06C;&#xAC8C; &#xD558;&#xC9C0;&#xB3C4;. CGMP &#xBB38;&#xC774; &#xCC44;&#xB110; &#xC5F4;&#xAE30; Mg2 + &#xB18D;&#xB3C4; Na +&#xACFC; Ca2 +&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xADF8; depolarization &#xB2E4;&#xB978; permeant &#xC774;&#xC628;&#xC758; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xC870;&#xAC74; &#xD558;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC548;&#xC774; &#xC5C6;&#xC744; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0;&#xB9CC; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; Mg2 + &#xC720;&#xC785; &#xD558;&#xBA74; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xC99D;&#xAC00;&#xB97C; &#xC774;&#xB04C;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xAC00;&#xBCBC;&#xC6B4; &#xC790;&#xADF9; Mg2 + &#xB18D;&#xB3C4; dark-adapted &#xB300;&#xB1CC;&#xC758; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCC0;&#xACBD; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xACFC; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xC870;&#xAC74; &#xD558;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xC5D0; Mg2 + &#xB18D;&#xB3C4; &#xD06C;&#xAC8C; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE60; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xC720;&#xC785; &#xBC0F; &#xACBD;&#xACFC; &#xACBD;&#xB85C; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xADF8; Mg2 +&#xB294; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4; phototransduction&#xC758; &#xB3D9;&#xC801; &#xBCC0;&#xC870; &#xC5D0;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB3C4;&#xB871;&#xB1FD; &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC790;&#xC720;&#xB85C;&#xC6B4; &#xB9C8;&#xADF8;&#xB124;&#xC298; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Los iones de magnesio (Mg 2 +) juegan un papel importante en las funciones bioqu&#xED;micas. En vertebrados segmentos externos de los fotorreceptores, las reacciones de numerosos utilizan MgGTP y MgATP y Mg 2 + tambi&#xE9;n regula varias de las enzimas fototransducci&#xF3;n. Aunque Mg2 + puede pasar a trav&#xE9;s de canales sensibles a la luz bajo ciertas condiciones, ning&#xFA;n mecanismo de extrusi&#xF3;n claro ha sido identificado y la eliminaci&#xF3;n de Mg2 + extracelular no tiene ning&#xFA;n efecto significativo sobre la sensibilidad a la luz o la cin&#xE9;tica de la fotorrespuesta. Hemos utilizado el colorante fluorescente de Mg 2 + Furaptra para medir directamente y supervisar el Mg 2 + libre de concentraci&#xF3;n en los segmentos externos de los fotorreceptores y comprobar&#xE1; si el Mg 2 + sin cambios de concentraci&#xF3;n en condiciones fisiol&#xF3;gicas. En reposo libres Mg2 + en concentraciones blanqueada barra de salamandra y cono segmentos externos de los fotorreceptores de c&#xE9;lulas fueron 0,86 + / - 0,06 y 0,81 + / - 0,09 mm, respectivamente. El segmento externo libre de Mg 2 + concentraci&#xF3;n no se vio afectada significativamente por los cambios en el pH extracelular, Ca2 + y Na +, con exclusi&#xF3;n de un papel significativo para los intercambiadores respectivos en la regulaci&#xF3;n de la homeostasis del Mg 2 +. El Mg 2 + libre en reposo la concentraci&#xF3;n no fue significativamente afectada por la exposici&#xF3;n a 0 Mg 2 +, lo que sugiere la ausencia de Mg 2 + flujo basal significativa. La apertura de los canales GMPc-bloqueados condujeron a un aumento significativo en el Mg2 + concentraci&#xF3;n en ausencia de Na + y Ca2 +, pero no en su presencia, lo que indica que la despolarizaci&#xF3;n puede causar un Mg2 significativo + afluencia s&#xF3;lo en ausencia de otros iones permeables, pero no bajo condiciones fisiol&#xF3;gicas. Por &#xFA;ltimo, la estimulaci&#xF3;n de la luz no cambia la concentraci&#xF3;n de Mg 2 + en los segmentos externos de fotorreceptores adaptados a la oscuridad. Los resultados sugieren que no hay flujo y las v&#xED;as de flujo de salida que puede afectar significativamente la concentraci&#xF3;n de Mg 2 + en el segmento externo en condiciones fisiol&#xF3;gicas. Por lo tanto, es poco probable que Mg2 + juega un papel significativo en la modulaci&#xF3;n din&#xE1;mica de fototransducci&#xF3;n.

La concentraci&#xF3;n de magnesio libre en Salamander segmentos externos de los fotorreceptores

&#x89C6;&#x89C9;&#x5468;&#x671F;&#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#xFF1A; &#x89C6;&#x9EC4;&#x9187;&#x8131;&#x6C22;&#x9176;&#x548C;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x4E2D;&#x7684;&#x89C6;&#x9EC4;&#x9187;&#x8367;&#x5149;&#x6D4B;&#x91CF;&#x3002;

Regulation of the visual cycle: retinol dehydrogenase and retinol fluorescence measurements in vertebrate retina.

R&#xE9;gulation du cycle visuel: r&#xE9;tinol d&#xE9;shydrog&#xE9;nase et r&#xE9;tinol mesures de fluorescence dans la r&#xE9;tine des vert&#xE9;br&#xE9;s

Verordnung des visuellen Zyklus: Retinol-Dehydrogenase und Retinol Fluoreszenzmessungen in der Wirbeltier-Netzhaut.

Regolazione del ciclo visivo: Retinolo deidrogenasi e le misure di fluorescenza di retinolo in vertebrato retina.

&#x8996;&#x899A;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#xFF1A;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x7DB2;&#x819C;&#x306B;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x8131;&#x6C34;&#x7D20;&#x9175;&#x7D20;&#x3068;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x86CD;&#x5149;&#x6E2C;&#x5B9A;

&#xC2DC;&#xAC01;&#xC801; &#xC0AC;&#xC774;&#xD074;&#xC758; &#xADDC;&#xC81C;: retinol &#xD6A8;&#xC18C; &#xBC0F; &#xCC99;&#xCD94; &#xB9DD;&#xB9C9;&#xC5D0; retinol &#xD615;&#xAD11; &#xCE21;&#xC815;.

Regulaci&#xF3;n del ciclo visual: retinol deshidrogenasa y el retinol medidas de fluorescencia en la retina de los vertebrados

&#x89C6;&#x89C9;&#x7684;&#x5468;&#x671F;&#x5305;&#x62EC;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5E8F;&#x5217;&#x7684;&#x518D;&#x751F;&#x671F;&#x95F4;&#x6697;&#x9002;&#x5E94;&#xFF0C;&#x5F00;&#x59CB;&#x8C03;&#x4F4E;&#x5176;&#x95F4;&#x9699;&#x4E0E;&#x5168;&#x53CD;&#x5F0F;&#x89C6;&#x9EC4;&#x9187;&#x4ECE;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x7684;&#x5168;&#x53CD;&#x5F0F;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x7684;&#x611F;&#x5149;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x89C6;&#x8272;&#x7D20;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5173;&#x6CE8;&#x51CF;&#x5C11;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x548C;&#x6F02;&#x767D;&#x5916;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x7EA2;&#x68D2;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x6D4B;&#x91CF;&#x5176;&#x56FA;&#x6709;&#x8367;&#x5149;&#x5206;&#x79BB;&#x877E;&#x8788;&#x7684;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x5185;&#x7684;&#x89C6;&#x9EC4;&#x9187;&#x7684;&#x95F4;&#x9699;&#x3002;&#x4E4B;&#x540E;&#x66B4;&#x9732;&#x5728;&#x4EAE;&#x5149; &#xFF08;&#x6F02;&#x767D;&#x6C34;&#xFF09;&#x3001; &#x589E;&#x52A0;&#x8367;&#x5149;&#x5F3A;&#x5EA6;&#x66FE;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x6CBF;&#x5916;&#x6BB5;&#x4ECE;&#x8FD1;&#x7AEF;&#x533A;&#x57DF;&#x6BD7;&#x90BB;&#x671D;&#x8FDC;&#x7AEF;&#x7684;&#x5185;&#x5728;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x65B9;&#x5411;&#x4F20;&#x64AD;&#x3002;&#x5927;&#x7EA6; 30 &#x5206;&#x949F;&#x540E;&#x53D6;&#x5F97;&#x4E86;&#x5CF0;&#x503C;&#x89C6;&#x9EC4;&#x9187;&#x8367;&#x5149;&#x4E4B;&#x540E;, &#x4E0B;&#x964D;&#x5F97;&#x5F88;&#x6162;&#x3002;&#x89C6;&#x9EC4;&#x9187;&#x8367;&#x5149;&#x7684;&#x95F4;&#x9699;&#x5927;&#x5927;&#x52A0;&#x901F;&#x4E86;&#x5916;&#x6E90;&#x8102;&#x6EB6;&#x6027;&#x7269;&#x8D28; IRBP (interphotoreceptor &#x7EF4;&#x7532;&#x9178;&#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;) &#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x548C;&#x8840;&#x6E05;&#x767D;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7528;&#x8367;&#x5149;&#x548C;&#x7535;&#x751F;&#x7406;&#x7684;&#x540C;&#x65F6;&#x6D4B;&#x91CF;&#x4E2D;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x548C;&#x6CA1;&#x6709; IRBP &#x7684;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#x7684;&#x6BD4;&#x8F83;&#x5168;&#x53CD;&#x5F0F;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x5BF9;&#x5168;&#x53CD;&#x5F0F;&#x89C6;&#x9EC4;&#x9187;&#x7684;&#x95EA;&#x5B58;&#x54CD;&#x5E94;&#x632F;&#x5E45;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x6062;&#x590D;&#x7387;&#x7684;&#x51CF;&#x5C11;&#x7387;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x627E;&#x5230;&#x95EA;&#x5B58;&#x54CD;&#x5E94;&#x6062;&#x590D;&#x68D2;&#x4E2D;&#x7684;&#x5C0F;&#x5E45;&#x52A0;&#x901F;&#x4E0B;&#x80DE;&#x5916;&#x7684; IRBP&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x8FD9;&#x79CD;&#x7269;&#x8D28;&#x53EF;&#x80FD;&#x53C2;&#x4E0E;&#x7684;&#x7EF4;&#x7532;&#x9178;&#x7C7B;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x4ECE;&#x6746;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#xFF0C;&#x6E05;&#x62C6;&#x548C;&#x6B64;&#x95F4;&#x9699;&#xFF0C;&#x81F3;&#x5C11;&#x5728;&#x6746;&#x3001; &#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x65B9;&#x4FBF;&#x6697;&#x9002;&#x5E94;&#x901A;&#x8FC7;&#x52A0;&#x5FEB;&#x6E05;&#x7406;&#x7684;&#x5149;&#x5316;&#x6F02;&#x767D;&#x3002;

&#x51CF;&#x5C11;&#x548C;&#x6E05;&#x9664;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x4E2D;&#x6F02;&#x767D;&#x7684;&#x6746;&#x611F;&#x5149;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x7406;&#x548C; microfluorometric &#x7814;&#x7A76;&#x3002;

The visual cycle comprises a sequence of reactions that regenerate the visual pigment in photoreceptors during dark adaptation, starting with the reduction of all-trans retinal to all-trans retinol and its clearance from photoreceptors. We have followed the reduction of retinal and clearance of retinol within bleached outer segments of red rods isolated from salamander retina by measuring its intrinsic fluorescence. Following exposure to a bright light (bleach), increasing fluorescence intensity was observed to propagate along the outer segments in a direction from the proximal region adjacent to the inner segment toward the distal tip. Peak retinol fluorescence was achieved after approximately 30 min, after which it declined very slowly. Clearance of retinol fluorescence is considerably accelerated by the presence of the exogenous lipophilic substances IRBP (interphotoreceptor retinoid binding protein) and serum albumin. We have used simultaneous fluorometric and electrophysiological measurements to compare the rate of reduction of all-trans retinal to all-trans retinol to the rate of recovery of flash response amplitude in these cells in the presence and absence of IRBP. We find that flash response recovery in rods is modestly accelerated in the presence of extracellular IRBP. These results suggest such substances may participate in the clearance of retinoids from rod photoreceptors, and that this clearance, at least in rods, may facilitate dark adaptation by accelerating the clearance of photoproducts of bleaching.

Physiological and microfluorometric studies of reduction and clearance of retinal in bleached rod photoreceptors.

Le cycle visuel comprend une s&#xE9;quence de r&#xE9;actions qui r&#xE9;g&#xE9;n&#xE8;rent le pigment visuel dans les photor&#xE9;cepteurs au cours adaptation &#xE0; l&#x26;#39;obscurit&#xE9;, &#xE0; commencer par la r&#xE9;duction des tout-trans r&#xE9;tinal en r&#xE9;tinol tout-trans et sa clairance de photor&#xE9;cepteurs. Nous avons suivi la diminution de la clairance de la r&#xE9;tine et de r&#xE9;tinol dans les segments ext&#xE9;rieurs blanchis de tiges rouges isol&#xE9;s &#xE0; partir de la r&#xE9;tine de salamandre en mesurant sa fluorescence intrins&#xE8;que. Apr&#xE8;s une exposition &#xE0; une lumi&#xE8;re vive (eau de Javel), l&#x26;#39;augmentation de l&#x26;#39;intensit&#xE9; de fluorescence a &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;e &#xE0; se propager le long des segments externes dans une direction de la zone proximale adjacente au segment int&#xE9;rieur vers l&#x26;#39;extr&#xE9;mit&#xE9; distale. Pic r&#xE9;tinol fluorescence a &#xE9;t&#xE9; atteint apr&#xE8;s environ 30 min, apr&#xE8;s quoi elle a diminu&#xE9; tr&#xE8;s lentement. Clairance de r&#xE9;tinol de fluorescence est consid&#xE9;rablement acc&#xE9;l&#xE9;r&#xE9;e par la pr&#xE9;sence de l&#x26;#39;exog&#xE8;ne IRBP lipophile de substances (interphotoreceptor r&#xE9;tino&#xEF;de prot&#xE9;ine de liaison) et l&#x26;#39;albumine de s&#xE9;rum. Nous avons utilis&#xE9; des mesures simultan&#xE9;es de fluorom&#xE9;triques et &#xE9;lectrophysiologiques de comparer le taux de r&#xE9;duction de r&#xE9;tinol tout-trans r&#xE9;tinal en tout-trans par rapport au taux de r&#xE9;cup&#xE9;ration de l&#x26;#39;amplitude de r&#xE9;ponse &#xE9;clair dans ces cellules en pr&#xE9;sence et en absence de IRBP. Nous trouvons que la reprise de r&#xE9;ponse flash tiges est l&#xE9;g&#xE8;rement acc&#xE9;l&#xE9;r&#xE9; en pr&#xE9;sence d&#x26;#39;IRBP extracellulaire. Ces r&#xE9;sultats sugg&#xE8;rent ces substances peuvent participer &#xE0; l&#x26;#39;apurement des r&#xE9;tino&#xEF;des de photor&#xE9;cepteurs tige, et que cette autorisation, au moins en tiges, peut faciliter l&#x26;#39;adaptation sombre en acc&#xE9;l&#xE9;rant la clairance de photoproduits de blanchiment.

Des &#xE9;tudes physiologiques et Microfluorometric de la r&#xE9;duction de la r&#xE9;tine et le d&#xE9;douanement des photor&#xE9;cepteurs dans Rod blanchis

Physiologische und mikrofluorometrischen Studien der Reduktion und Beseitigung von Retinal in gebleichten St&#xE4;bchen-Photorezeptoren.

Il ciclo visivo comprende una sequenza di reazioni che rigenerano il pigmento visivo in fotorecettori durante l&#39;adattamento dark, iniziando con la riduzione di tutto-trans retinale tutto-trans retinolo e sua liquidazione da fotorecettori. Abbiamo seguito la riduzione della retina e la clearance di retinolo all&#39;interno di segmenti esterni sbiancati di canne rossi isolati dalla retina Salamandra misurando la fluorescenza intrinseca. A seguito di esposizione a una luce brillante (candeggina), aumentando la fluorescenza intensit&agrave; &egrave; stata osservata per propagare lungo i segmenti esterni in direzione della regione prossimale adiacente al segmento interno verso la punta distale. Fluorescenza retinolo picco &egrave; stato raggiunto dopo circa 30 min, dopo di che si &egrave; rifiutato molto lentamente. Liquidazione di fluorescenza di retinolo &egrave; notevolmente accelerata dalla presenza delle sostanze lipofile esogene IRBP (retinoide interphotoreceptor binding protein) e albumina del siero. Abbiamo utilizzato misure elettrofisiologiche e fluorometriche simultanee per confrontare il tasso di riduzione di tutto-trans retinale in tutto-trans retinolo per il tasso di recupero dell&#39;ampiezza di risposta flash in queste cellule in presenza e in assenza di IRBP. Troviamo che risposta flash recupero in verghe modestamente &egrave; accelerata in presenza di IRBP extracellulare. Questi risultati suggeriscono tali sostanze possono partecipare alla liquidazione dei retinoidi da fotorecettori asta, e che questo giuoco, almeno in verghe, pu&ograve; facilitare dark adattamento di accelerare la liquidazione dei photoproducts di sbiancamento.

Fisiologica e microfluorometric studi di riduzione e la clearance di retinale in fotorecettori rod sbiancato.

&#x8996;&#x899A;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x5168; - &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;&#x5149;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x304B;&#x3089;&#x305D;&#x306E;&#x9699;&#x9593;&#x306B;&#x7DB2;&#x819C;&#x306E;&#x5168;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x524A;&#x6E1B;&#x3092;&#x76AE;&#x5207;&#x308A;&#x306B;&#x3001;&#x6697;&#x9806;&#x5FDC;&#x6642;&#x306E;&#x5149;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x8996;&#x899A;&#x8272;&#x7D20;&#x3092;&#x518D;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x4E00;&#x9023;&#x306E;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x30B5;&#x30F3;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30A6;&#x30AA;&#x306E;&#x7DB2;&#x819C;&#x304B;&#x3089;&#x5358;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x8D64;&#x8272;&#x306E;&#x68D2;&#x306E;&#x6F02;&#x767D;&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x5185;&#x306E;&#x7DB2;&#x819C;&#x3068;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x30AF;&#x30EA;&#x30A2;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3092;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x660E;&#x308B;&#x3044;&#x5149;&#xFF08;&#x6F02;&#x767D;&#x5264;&#xFF09;&#x3078;&#x306E;&#x66DD;&#x9732;&#x5F8C;&#x3001;&#x86CD;&#x5149;&#x5F37;&#x5EA6;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306F;&#x3001;&#x9060;&#x4F4D;&#x7AEF;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x5185;&#x5074;&#x306E;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306B;&#x96A3;&#x63A5;&#x3059;&#x308B;&#x8FD1;&#x4F4D;&#x304B;&#x3089;&#x65B9;&#x5411;&#x5916;&#x5074;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306B;&#x6CBF;&#x3063;&#x3066;&#x4F1D;&#x642C;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x30D4;&#x30FC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x86CD;&#x5149;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x3086;&#x3063;&#x304F;&#x308A;&#x3068;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F;&#x5F8C;&#x7D04;30&#x5206;&#x5F8C;&#x306B;&#x9054;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x86CD;&#x5149;&#x306E;&#x30AF;&#x30EA;&#x30A2;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x304C;&#x304B;&#x306A;&#x308A;&#x5916;&#x56E0;&#x6027;&#x306E;&#x89AA;&#x6CB9;&#x6027;&#x7269;&#x8CEA;IRBP&#xFF08;&#x9593;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30A4;&#x30C9;&#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF09;&#x3068;&#x8840;&#x6E05;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D6;&#x30DF;&#x30F3;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4FC3;&#x9032;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;IRBP&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x975E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x5FDC;&#x7B54;&#x632F;&#x5E45;&#x306E;&#x56DE;&#x53CE;&#x7387;&#x306B;&#x5168;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CA;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x5168;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x9084;&#x5143;&#x7387;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x540C;&#x6642;&#x86CD;&#x5149;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x96FB;&#x6C17;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x5024;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x68D2;&#x306E;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x56DE;&#x5FA9;&#x304C;&#x7DE9;&#x3084;&#x304B;&#x306B;&#x5916;IRBP&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x52A0;&#x901F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x7269;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x687F;&#x4F53;&#x304B;&#x3089;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30A4;&#x30C9;&#x306E;&#x30AF;&#x30EA;&#x30A2;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x306B;&#x53C2;&#x52A0;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30AF;&#x30EA;&#x30A2;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x6F02;&#x767D;&#x306E;&#x5149;&#x751F;&#x6210;&#x7269;&#x306E;&#x30AF;&#x30EA;&#x30A2;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x52A0;&#x901F;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x6697;&#x9806;&#x5FDC;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;

&#x6F02;&#x767D;&#x687F;&#x4F53;&#x7DB2;&#x819C;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3068;&#x30AF;&#x30EA;&#x30A2;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;Microfluorometric&#x7814;&#x7A76;

&#xC2DC;&#xAC01;&#xC801; &#xC0AC;&#xC774;&#xD074; &#xB2E4;&#xD06C; &#xC801;&#xC751;, &#xB300;&#xB1CC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD6A1;&#xB2E8; retinol&#xC758; &#xD074;&#xB9AC;&#xC5B4;&#xB7F0;&#xC2A4;&#xB97C; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD2B8;&#xB79C;&#xC2A4; &#xB9DD;&#xB9C9;&#xC758; &#xAC10;&#xC18C;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC2DC;&#xC791; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xB300;&#xB1CC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DC;&#xAC01; &#xC0C9;&#xC18C;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB97C; &#xAD6C;&#xC131; &#xB418;&#xC5B4;&#xC788;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB9DD;&#xB9C9;&#xC758; &#xAC10;&#xC18C;&#xC640; &#xBE68;&#xAC04; &#xBD09; &#xB3C4;&#xB871;&#xB1FD; &#xB9DD;&#xB9C9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xBCF8;&#xC9C8;&#xC801;&#xC778; &#xD615;&#xAD11;&#xC744; &#xCE21;&#xC815; &#xD558; &#xC5EC; &#xC808;&#xC5F0;&#xC758; &#xD45C;&#xBC31;&#xB41C; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; retinol&#xC758; &#xB530;&#xB77C;. &#xD615;&#xAD11; &#xC99D;&#xAC00; (&#xD45C; &#xBC31;&#xC81C;), &#xBC1D;&#xC740; &#xBE5B;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xAC15;&#xB3C4; &#xC6D0;&#xC2EC; &#xD301;&#xC73C;&#xB85C; &#xB0B4;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xC778;&#xC811; &#xD55C; &#xC778;&#xC811; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC29;&#xD5A5;&#xC73C;&#xB85C; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xB97C; &#xB530;&#xB77C; &#xC804;&#xD30C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xD53C;&#xD06C; retinol &#xD615;&#xAD11; &#xC57D; 30 &#xBD84; &#xD6C4; &#xD6C4; &#xC544;&#xC8FC; &#xCC9C;&#xCC9C;&#xD788; &#xAC10;&#xC18C; &#xB2EC;&#xC131; &#xD588;&#xB2E4;. Retinol &#xD615;&#xAD11;&#xC758; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD788; exogenous &#xBE14;&#xB808;&#xBBF8;&#xC26C; &#xBB3C;&#xC9C8; IRBP (interphotoreceptor retinoid &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;)&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAC00;&#xC18D; &#xBC0F; &#xD608; &#xCCAD; &#xC54C; &#xBD80; &#xBBFC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC874;&#xC7AC;&#xC640; IRBP&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC;&#xC5D0;&#xC774; &#xC140;&#xC5D0; &#xD50C;&#xB798;&#xC2DC; &#xC751;&#xB2F5; &#xC9C4;&#xD3ED;&#xC758; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xC18D;&#xB3C4;&#xB97C; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD6A1;&#xB2E8; retinol&#xC5D0; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD2B8;&#xB79C;&#xC2A4; &#xB9DD;&#xB9C9;&#xC758; &#xAC10;&#xC18C;&#xC758; &#xC18D;&#xB3C4; &#xBE44;&#xAD50; &#xD558; &#xB3D9;&#xC2DC; fluorometric &#xBC0F; electrophysiological &#xCE21;&#xC815;&#xC744; &#xC774;&#xC6A9; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBD09;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD50C;&#xB798;&#xC2DC; &#xC751;&#xB2F5; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; IRBP &#xC874;&#xC7AC; &#xAC00;&#xC18D; &#xACB8;&#xC190; &#xD558; &#xAC8C; &#xCC3E;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xACB0;&#xACFC; &#xAC19;&#xC740; &#xBB3C;&#xC9C8; retinoids &#xB9C9;&#xB300; &#xB300;&#xB1CC;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xD074;&#xB9AC;&#xC5B4;&#xB7F0;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC5EC;&#xD560; &#xC218;&#xB294;&#xC774; &#xD074;&#xB9AC;&#xC5B4;&#xB7F0;&#xC2A4; &#xC801;&#xC5B4;&#xB3C4; &#xBD09;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xCD09;&#xC9C4; &#xB2E4;&#xD06C; &#xC801;&#xC751; &#xD45C;&#xBC31;&#xC758; photoproducts&#xC758; &#xD074;&#xB9AC;&#xC5B4;&#xB7F0;&#xC2A4;&#xB97C; &#xAC00;&#xC18D; &#xD558; &#xC5EC; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xAC10;&#xC18C; &#xBC0F; &#xD45C;&#xBC31;&#xB41C; &#xB9C9;&#xB300; &#xB300;&#xB1CC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9DD;&#xB9C9;&#xC758; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xBC0F; microfluorometric &#xC5F0;&#xAD6C;.

El ciclo visual comprende una secuencia de reacciones que regeneran el pigmento visual en fotorreceptores durante adaptaci&#xF3;n a la oscuridad, a partir de la reducci&#xF3;n de todo-trans retinal a todo-trans retinol y su aclaramiento de fotorreceptores. Hemos seguido la reducci&#xF3;n del aclaramiento de la retina y el retinol en blanqueados segmentos externos de las barras rojas aisladas de la retina salamandra midiendo su fluorescencia intr&#xED;nseca. Tras la exposici&#xF3;n a una luz brillante (lej&#xED;a), aumentando la intensidad de fluorescencia se observ&#xF3; que se propagan a lo largo de los segmentos externos en una direcci&#xF3;n desde la regi&#xF3;n proximal adyacente al segmento interno hacia la punta distal. Pico retinol fluorescencia se consigue despu&#xE9;s de aproximadamente 30 minutos, despu&#xE9;s de lo cual se redujo muy lentamente. Separaci&#xF3;n de retinol fluorescencia es considerablemente acelerada por la presencia de la ex&#xF3;geno IRBP sustancias lipof&#xED;licas (interfotorreceptora prote&#xED;na de uni&#xF3;n retinoide) y alb&#xFA;mina de suero. Hemos utilizado simult&#xE1;neas mediciones fluorom&#xE9;tricos y electrofisiol&#xF3;gicas para comparar la tasa de reducci&#xF3;n de todo-trans retinol retinal a todo-trans a la tasa de recuperaci&#xF3;n de amplitud de la respuesta de flash en estas c&#xE9;lulas en presencia y ausencia de IRBP. Encontramos que la recuperaci&#xF3;n de flash en respuesta varillas se modestamente acelerado en presencia de IRBP extracelular. Estos resultados sugieren tales sustancias pueden participar en el juego de los retinoides de fotorreceptores de los bastones, y que esta separaci&#xF3;n, al menos en las barras, puede facilitar la adaptaci&#xF3;n a la oscuridad mediante la aceleraci&#xF3;n de la liquidaci&#xF3;n de fotoproductos de blanqueo.

Estudios fisiol&#xF3;gicos y microfluorom&#xE9;tricos de Reducci&#xF3;n y Liquidaci&#xF3;n de la retina en fotorreceptores de los bastones blanqueados

&#x89C6;&#x89C9;&#x7684;&#x5468;&#x671F;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x91CD;&#x65B0;&#x751F;&#x6210;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x89C6;&#x8272;&#x7D20;&#x89C6;&#x7D2B;&#x7EA2;&#x8D28;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x4E00;&#x7CFB;&#x5217;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B65;&#x662F;&#x5BF9;&#x5168;&#x53CD;&#x5F0F;&#x89C6;&#x9EC4;&#x9187;&#xFF0C;&#x9700;&#x8981; NADPH &#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#x5168;&#x53CD;&#x5F0F;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x7684;&#x51CF;&#x5C11;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7528;&#x5168;&#x53CD;&#x5F0F;&#x89C6;&#x9EC4;&#x9187;&#x7684;&#x8367;&#x5149;&#x5149;&#x8C31;&#x6765;&#x7814;&#x7A76;&#x8FD9;&#x79CD;&#x5728;&#x751F;&#x6D3B;&#x4E2D;&#x7684;&#x51CF;&#x5C11;&#x6746;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x3002;&#x540E;&#x7684;&#x89C6;&#x7D2B;&#x7EA2;&#x8D28;&#xFF0C;&#x8367;&#x5149;&#x6F02;&#x767D; &#xFF08;&#x6FC0;&#x52B1;&#x3001; 360 nm &#xFF1B; &#x6392;&#x653E;&#xFF0C;457 &#x6216; 540 nm&#xFF09; &#x5C06;&#x51FA;&#x73B0;&#x5728;&#x9752;&#x86D9;&#x548C;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x9F20;&#x6807;&#x6746;&#x5916;&#x6BB5;&#x8FBE;&#x5230;&#x6700;&#x5927;&#x7684;&#x5BA4;&#x5185;&#x6E29;&#x5EA6;&#x5728; 30-60 &#x5206;&#x949F;&#x3002;&#x4E0E;&#x8FD9;&#x79CD;&#x52B1;&#x78C1;&#x548C;&#x6392;&#x653E;&#xFF0C;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x4E30;&#x5BCC;&#x692D;&#x7403;&#x533A;&#x57DF;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x663E;&#x793A;&#x4EE5;&#x53CA;&#x5F3A;&#x8367;&#x5149;&#x3002;&#x5728;&#x4E0D;&#x540C;&#x53D1;&#x5C04;&#x6CE2;&#x957F;&#x7684;&#x8367;&#x5149;&#x6D4B;&#x91CF;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x5916;&#x6BB5;&#x548C;&#x692D;&#x7403;&#x4FE1;&#x53F7;&#x6765;&#x81EA;&#x5168;&#x53CD;&#x5F0F;&#x89C6;&#x9EC4;&#x9187;&#x53CA;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x5421;&#x5576;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#xFF0C;&#x5206;&#x522B;&#x3002;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5168;&#x53CD;&#x5F0F;&#x89C6;&#x9EC4;&#x9187;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x63AA;&#x65BD;&#x4F7F;&#x7528;&#x5916;&#x90E8;&#x5206;&#x8367;&#x5149;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x5728;&#x9752;&#x86D9;&#x6746;&#x611F;&#x53D7;&#x5668; NADPH &#x53EF;&#x4EE5;&#x7531;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x548C;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x4EE3;&#x8C22;&#x9014;&#x5F84;&#x63D0;&#x4F9B;&#x5FC5;&#x8981;&#x7684;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x5168;&#x53CD;&#x5F0F;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x3002;&#x8FD8;&#x539F;&#x53CD;&#x5E94;&#xFF0C;&#x89C6;&#x9EC4;&#x9178;&#x6216;&#x901A;&#x8FC7;&#x6291;&#x5236;&#x4EE3;&#x8C22;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x964D;&#x4F4E;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x89C6;&#x9EC4;&#x9187;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x5728; Rpe65(-/-) &#x5C0F;&#x9F20;&#xFF0C;&#x5B83;&#x4EEC;&#x7F3A;&#x4E4F; 11 &#x72EC;&#x8054;&#x4F53;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x6746;&#x5916;&#x6BB5;&#x6F02;&#x767D;&#x540E;&#x6CA1;&#x6709;&#x4EFB;&#x4F55;&#x91CD;&#x5927;&#x7684;&#x8367;&#x5149;&#x66F4;&#x6539;&#x3002;

&#x5168;&#x53CD;&#x5F0F;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x5BF9;&#x5168;&#x53CD;&#x5F0F;&#x89C6;&#x9EC4;&#x9187;&#x7684;&#x9752;&#x86D9;&#x548C;&#x9F20;&#x6807;&#x6746;&#x611F;&#x5149;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x6BB5;&#x4E2D;&#x7684;&#x51CF;&#x5C11;&#x3002;

The first step in the Visual Cycle, the series of reactions that regenerate the vertebrate visual pigment rhodopsin, is the reduction of all-trans retinal to all-trans retinol, a reaction that requires NADPH. We have used the fluorescence of all-trans retinol to study this reduction in living rod photoreceptors. After the bleaching of rhodopsin, fluorescence (excitation, 360 nm; emission, 457 or 540 nm) appears in frog and wild-type mouse rod outer segments reaching a maximum in 30-60 min at room temperature. With this excitation and emission, the mitochondrial-rich ellipsoid region of the cells shows strong fluorescence as well. Fluorescence measurements at different emission wavelengths establish that the outer segment and ellipsoid signals originate from all-trans retinol and reduced pyridine nucleotides, respectively. Using outer segment fluorescence as a measure of all-trans retinol formation, we find that in frog rod photoreceptors the NADPH necessary for the reduction of all-trans retinal can be supplied by both cytoplasmic and mitochondrial metabolic pathways. Inhibition of the reduction reaction, either by retinoic acid or through suppression of metabolic activity, reduced the formation of retinol. Finally, there are no significant fluorescence changes after bleaching in the rod outer segments of Rpe65(-/-) mice, which lack 11-cis retinal.

Reduction of all-trans retinal to all-trans retinol in the outer segments of frog and mouse rod photoreceptors.

La premi&#xE8;re &#xE9;tape dans le cycle visuel, la s&#xE9;rie de r&#xE9;actions qui r&#xE9;g&#xE9;n&#xE8;rent le vert&#xE9;br&#xE9; visuelle pigment rhodopsine, est la r&#xE9;duction des tout-trans r&#xE9;tinal en r&#xE9;tinol tout-trans, une r&#xE9;action qui n&#xE9;cessite du NADPH. Nous avons utilis&#xE9; la fluorescence de r&#xE9;tinol tout-trans d&#x26;#39;&#xE9;tudier cette r&#xE9;duction dans les photor&#xE9;cepteurs de tige vivant. Apr&#xE8;s le blanchiment de la rhodopsine, la fluorescence (excitation, 360 nm; &#xE9;mission, 457 ou 540 nm). Appara&#xEE;t chez la grenouille et de type sauvage segments de tige de souris externes atteignant un maximum en 30-60 min &#xE0; temp&#xE9;rature ambiante Avec cette excitation et d&#x26;#39;&#xE9;mission, la r&#xE9;gion riche en mitochondries ellipso&#xEF;de des cellules montre une forte fluorescence ainsi. Des mesures de fluorescence &#xE0; des longueurs d&#x26;#39;onde d&#x26;#39;&#xE9;mission diff&#xE9;rentes &#xE9;tablir que le segment externe et des signaux ellipso&#xEF;des proviennent r&#xE9;tinol tout-trans et pyridine nucl&#xE9;otides r&#xE9;duits, respectivement. Utilisation de la fluorescence du segment externe comme une mesure de tout-trans r&#xE9;tinol formation, nous constatons que dans les photor&#xE9;cepteurs de tige de grenouille de la NADPH n&#xE9;cessaire &#xE0; la r&#xE9;duction des tout-trans r&#xE9;tinal peut &#xEA;tre fourni par les deux cytoplasmiques et mitochondriales voies m&#xE9;taboliques. Inhibition de la r&#xE9;action de r&#xE9;duction, soit par l&#x26;#39;acide r&#xE9;tino&#xEF;que ou par suppression de l&#x26;#39;activit&#xE9; m&#xE9;tabolique, r&#xE9;duit la formation de r&#xE9;tinol. Enfin, il n&#x26;#39;ya pas de changements significatifs de fluorescence apr&#xE8;s blanchiment dans les segments de tige ext&#xE9;rieures de RPE65 (- / -) des souris, qui n&#x26;#39;ont pas 11-cis r&#xE9;tinal.

R&#xE9;duction des tout-trans r&#xE9;tinal &#xE0; r&#xE9;tinol tout-trans dans les segments externes des photor&#xE9;cepteurs Rod grenouille et la souris

Reduzierung der all-trans-Retinal zu all-trans-Retinol in den &#xE4;u&#xDF;eren Segmenten der Frosch und Maus-St&#xE4;bchen-Photorezeptoren.

Il primo passo nel ciclo visivo, la serie di reazioni che rigenerano la rodopsina pigmento visivo vertebrati, &egrave; la riduzione di tutto-trans retinale in tutto-trans retinolo, una reazione che richiede NADPH. Abbiamo usato la fluorescenza di tutto-trans retinolo per studiare questa riduzione nei viventi fotorecettori rod. Dopo lo sbiancamento della rodopsina, fluorescenza (eccitazione, 360 nm, emissione, 457 o 540 nm) appare nella rana e selvaggio-tipo mouse asta esterna segmenti raggiungendo un massimo di 30-60 min a temperatura ambiente. Con questa eccitazione e di emissione, la regione elissoide mitocondriale-ricco delle cellule Mostra forte fluorescenza pure. Le misure di fluorescenza a lunghezze d&#39;onda differenti emissioni stabiliscono che il segmento esterno ed elissoide segnali provengono da tutto-trans retinolo e ridotto la piridina nucleotidi, rispettivamente. Mediante fluorescenza del segmento esterno come una misura della formazione di retinolo tutto-trans, troviamo che fotorecettori di rod rana il NADPH necessario per la riduzione di tutto-trans retinale pu&ograve; essere fornita da vie metaboliche citoplasmatiche e mitocondriale. Inibizione della reazione di riduzione, l&#39;acido retinoico o attraverso la soppressione dell&#39;attivit&agrave; metabolica, riduce la formazione di retinolo. Infine, non ci sono cambiamenti significativi fluorescenza dopo lo sbiancamento nei segmenti esterni asta di Rpe65(-/-) topi che mancano di 11-cis retinale.

Riduzione di tutto-trans retinale in tutto-trans retinolo nei segmenti esterni dei fotorecettori rod rana e mouse.

&#x8996;&#x899A;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x306F;&#x3001;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x8996;&#x899A;&#x8272;&#x7D20;&#x30ED;&#x30C9;&#x30D7;&#x30B7;&#x30F3;&#x3092;&#x518D;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x4E00;&#x9023;&#x306E;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306F;&#x3001;&#x5168; - &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x3001;NADPH&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306B;&#x7DB2;&#x819C;&#x306E;&#x5168;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x751F;&#x304D;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x687F;&#x4F53;&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3092;&#x52C9;&#x5F37;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30ED;&#x30C9;&#x30D7;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x6F02;&#x767D;&#x3057;&#x305F;&#x5F8C;&#x3001;&#x86CD;&#x5149;&#xFF08;&#x52B1;&#x8D77;360 nm&#x3067;&#x3001;&#x6392;&#x51FA;&#x3001;457&#x307E;&#x305F;&#x306F;540 nm&#xFF09;&#x306F;&#x5BA4;&#x6E29;&#x3067;30-60&#x5206;&#x3067;&#x6700;&#x5927;&#x306B;&#x9054;&#x3057;&#x305F;&#x30AB;&#x30A8;&#x30EB;&#x3068;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306B;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x52B1;&#x8D77;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x767A;&#x5149;&#x3067;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x304C;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A;&#x6955;&#x5186;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x5F37;&#x3044;&#x86CD;&#x5149;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x767A;&#x5149;&#x6CE2;&#x9577;&#x3067;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x306F;&#x3001;&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3068;&#x6955;&#x5186;&#x306E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306F;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3001;&#x5168; - &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;&#x9084;&#x5143;&#x30D4;&#x30EA;&#x30B8;&#x30F3;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x306B;&#x7531;&#x6765;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x898F;&#x5B9A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5168; - &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x5C3A;&#x5EA6;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x30AB;&#x30A8;&#x30EB;&#x687F;&#x4F53;&#x306E;&#x5168;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CA;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x9084;&#x5143;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;NADPH&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3067;&#x4F9B;&#x7D66;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30A4;&#x30F3;&#x9178;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x9084;&#x5143;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x306F;&#x3001;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002; 11  - &#x30B7;&#x30B9;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CA;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x6B20;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#xFF08; -  /  - &#xFF09;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;RPE65&#x306E;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3067;&#x6F02;&#x767D;&#x3057;&#x305F;&#x5F8C;&#x306B;&#x306F;&#x6709;&#x610F;&#x306A;&#x86CD;&#x5149;&#x5909;&#x5316;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;

&#x30AB;&#x30A8;&#x30EB;&#x3068;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x687F;&#x4F53;&#x306E;&#x5916;&#x7BC0;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5168;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x5168;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CA;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x524A;&#x6E1B;

&#xC2DC;&#xAC01;&#xC801; &#xC0AC;&#xC774;&#xD074; &#xCC99;&#xCD94; &#xC2DC;&#xAC01;&#xC801; &#xC548;&#xB8CC; rhodopsin &#xB2E4;&#xC2DC; &#xC0DD;&#xC131; &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xC2DC;&#xB9AC;&#xC988;&#xC758;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB294; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD6A1;&#xB2E8; retinol, &#xBC18;&#xC751;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; NADPH&#xB97C; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD2B8;&#xB79C;&#xC2A4; &#xB9DD;&#xB9C9;&#xC758; &#xAC10;&#xC18C;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC720;&#xD559; &#xC0DD;&#xD65C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC774; &#xAC10;&#xC18C; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD6A1;&#xB2E8; retinol&#xC758; &#xD615;&#xAD11; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB85C;&#xB4DC; &#xB300;&#xB1CC;. Rhodopsin, &#xD615;&#xAD11; &#xD45C;&#xBC31; &#xD6C4; (&#xC5EC;&#xAE30;, 360 nm; &#xBC29;&#xCD9C;, 457 &#xB610;&#xB294; 540 nm) &#xAC1C;&#xAD6C;&#xB9AC;&#xC640; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xB9C9;&#xB300; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8; &#xC2E4; &#xC628;&#xC5D0;&#xC11C; 30-60 &#xBD84;&#xC5D0; &#xCD5C;&#xB300;&#xC5D0; &#xB3C4;&#xB2EC;&#xC5D0; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0A9;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xBC0F; &#xBC29;&#xCD9C;&#xC774; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xB465;&#xAE00;&#xC9C0; &#xC9C0;&#xC5ED; &#xAC15;&#xD55C; &#xD615;&#xAD11; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xB978; &#xBC29;&#xCD9C; &#xD30C;&#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD615;&#xAD11; &#xCE21;&#xC815;&#xC740; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8; &#xBC0F; &#xB465;&#xAE00;&#xC9C0; &#xC2E0;&#xD638; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD6A1;&#xB2E8; retinol &#xAC10;&#xC18C; pyridine &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC01;&#xAC01; &#xC124;&#xC815; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8; &#xD615;&#xAD11;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD6A1;&#xB2E8; retinol &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xC218;&#xB2E8;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xADF8; &#xAC1C;&#xAD6C;&#xB9AC; &#xB9C9;&#xB300; &#xB300;&#xB1CC;&#xB294; NADPH&#xC5D0;&#xC11C; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD2B8;&#xB79C;&#xC2A4; &#xB9DD;&#xB9C9;&#xC758; &#xAC10;&#xC18C;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC81C;&#xACF5;&#xD560; &#xC218; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xBC0F; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xB300;&#xC0AC; &#xACBD;&#xB85C; &#xC758;&#xD574; &#xCC3E;&#xC73C;&#xC2ED;&#xC2DC;&#xC624;. Retinoic &#xC0B0; &#xC131; &#xB610;&#xB294; &#xC2E0;&#xC9C4; &#xB300;&#xC0AC; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xAC10;&#xC18C; &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C; &#xAC10;&#xC18C; retinol&#xC758; &#xD615;&#xC131;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, 11-cis &#xB9DD;&#xB9C9; &#xBD80;&#xC871; Rpe65(-/-) &#xC950; &#xB9C9;&#xB300; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xD45C;&#xBC31; &#xD6C4; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xD615;&#xAD11; &#xBCC0;&#xD654;&#xAC00; &#xC788;&#xB2E4;.

&#xAC1C;&#xAD6C;&#xB9AC;&#xC640; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xB85C;&#xB4DC; &#xB300;&#xB1CC;&#xC758; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD6A1;&#xB2E8; retinol&#xC5D0; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD2B8;&#xB79C;&#xC2A4; &#xB9DD;&#xB9C9;&#xC758; &#xAC10;&#xC18C;.

El primer paso en el ciclo visual, la serie de reacciones que regeneran el vertebrado visual pigmento rodopsina, es la reducci&#xF3;n de todo-trans retinal a todo-trans retinol, una reacci&#xF3;n que requiere NADPH. Hemos utilizado la fluorescencia de todo-trans retinol para estudiar esta reducci&#xF3;n de fotorreceptores de varilla vivos. Despu&#xE9;s de que el blanqueamiento de la rodopsina, la fluorescencia (excitaci&#xF3;n, 360 nm, emisi&#xF3;n, 457 o 540 nm). Aparece en la rana y de tipo salvaje segmentos de barras de rat&#xF3;n externos que llegan a un m&#xE1;ximo de 30-60 minutos a temperatura ambiente Con esta excitaci&#xF3;n y emisi&#xF3;n, la regi&#xF3;n rica en elipsoide mitocondrial de las c&#xE9;lulas muestra fuerte fluorescencia tambi&#xE9;n. Las medidas de fluorescencia en longitudes de onda de emisi&#xF3;n de diferentes establecer que el segmento externo y las se&#xF1;ales del elipsoide se originan en todo-trans retinol y la reducci&#xF3;n de los nucle&#xF3;tidos de piridina, respectivamente. Utilizando fluorescencia segmento externo como una medida de todo-trans formaci&#xF3;n de retinol, nos encontramos con que en fotorreceptores de varilla de rana el NADPH necesario para la reducci&#xF3;n de todo-trans retina puede ser suministrada por ambas v&#xED;as metab&#xF3;licas citopl&#xE1;smicas y mitocondrial. La inhibici&#xF3;n de la reacci&#xF3;n de reducci&#xF3;n, ya sea por el &#xE1;cido retinoico o mediante la supresi&#xF3;n de la actividad metab&#xF3;lica, reduce la formaci&#xF3;n de retinol. Finalmente, no hay cambios significativos de fluorescencia despu&#xE9;s de blanqueo en los segmentos de barras exteriores de RPE65 (- / -) ratones, que carecen de 11-cis retinal.

La reducci&#xF3;n de todo-trans retinal a todo-trans retinol en los segmentos externos de fotorreceptores de los bastones de la rana y el rat&#xF3;n

&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x6746;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x662F;&#x6700;&#x7EC8;&#x7684;&#x5149;&#x4F20;&#x611F;&#x5668;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x53EF;&#x4EE5;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x5355;&#x4E2A;&#x7684;&#x5149;&#x5B50;&#x3002;&#x5728;&#x9ED1;&#x6697;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6746;&#x4FDD;&#x6301;&#x9AD8;&#x6D53;&#x5EA6;&#x80DE;&#x5185;&#x4FE1;&#x4F7F;&#x73AF;&#x9E1F;&#x82F7;&#x9178; (cGMP)&#xFF0C;&#x5C06;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x5E76;&#x4FDD;&#x6301;&#x6253;&#x5F00;&#x7684;&#x9633;&#x79BB;&#x5B50;&#x901A;&#x9053;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#x5916;&#x90E8;&#x5206;&#x3002;&#x5438;&#x6536;&#x7684;&#x5149;&#x5B50;&#x7684;&#x89C6;&#x89C9;&#x8272;&#x7D20;&#x7684;&#x6746;&#xFF0C;&#x89C6;&#x7D2B;&#x7EA2;&#x8D28;&#xFF0C;&#x542F;&#x52A8;&#x751F;&#x5316;&#x653E;&#x5927;&#x7EA7;&#x8054;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7684; cGMP &#x548C;&#x5C01;&#x95ED;&#x7684;&#x6E20;&#x9053;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x5C06;&#x4F20;&#x5165;&#x7684;&#x5149;&#x8F6C;&#x6362;&#x4E3A;&#x7535;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x6D53;&#x5EA6;&#x51CF;&#x5C11;&#x3002;&#x56E0;&#x4E3A;&#x5438;&#x6536;&#x5149;&#x5B50;&#x548C;&#x968F;&#x540E;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#x662F;&#x5C40;&#x90E8;&#x7684;&#x4E8B;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x5355;&#x5149;&#x5B50;&#x7684;&#x6746;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x4E25;&#x91CD;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x8513;&#x5EF6;&#x7684;&#x6CBF;&#x5916;&#x7684;&#x7EBF;&#x6BB5;&#x7684;&#x957F;&#x5EA6;&#x7684; cGMP &#x6D53;&#x5EA6;&#x7684;&#x51CF;&#x5C11;&#x3002;&#x7EB5;&#x5411;&#x6269;&#x6563;&#x7684; cGMP &#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x6746;&#x5916;&#x90E8;&#x5206;&#xFF0C;&#x5177;&#x4F53;&#x9762;&#x79EF;&#x548C;&#x4F53;&#x79EF;&#x53EF;&#x7528;&#x4E8E;&#x6269;&#x6563;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x53C2;&#x6570;&#x3002;&#x5B9A;&#x6027;&#x6746;&#x5916;&#x90E8;&#x5206;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6784;&#x7B51;&#x5BF9;&#x6269;&#x6563;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6709;&#x5149; (&#x8131;&#x8272;) &#x6F02;&#x767D;&#x540E;&#x4F7F;&#x7528;&#x8367;&#x5149;&#x6062;&#x590D;&#x548C;&#x5BA1;&#x67E5;&#x8367;&#x5149;&#x6781;&#x5730;&#x793A;&#x8E2A;&#x5242;&#xFF0C;&#x9499;&#x9EC4;&#x7EFF;&#x7D20;&#x6746;&#x5916;&#x9636;&#x5C42;&#x4ECE;&#x4E09;&#x79CD;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x5916;&#x90E8;&#x90E8;&#x5206;&#x7ED3;&#x6784;&#x4E2D;&#x7684;&#x6D41;&#x52A8;&#x6027;&#xFF1A; &#x86D9; (Rana &#x868A;&#xFF09;&#x3001; &#x9F20;&#x6807; &#xFF08;&#x6BDB;&#x91CC;&#x6C42;&#x65AF;&#x808C; domesticus) &#x548C;&#x58C1;&#x864E; (&#x58C1;&#x864E;&#x58C1;&#x864E;&#xFF09;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x6269;&#x6563;&#x7CFB;&#x6570;&#x662F;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x6240;&#x6709;&#x4E09;&#x4E2A;&#x7269;&#x79CD;&#xFF0C;&#x7EA6; 8-17 microm(2) s(-1)&#xFF0C;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x534F;&#x8BAE;&#xFF0C;&#x7531; Holcman &#x548C; Korenbrot (Biophys &#x9884;&#x6D4B;.J.2004:86 &#xFF1B; 2566&#x5E74; 2582&#x5E74;) &#x57FA;&#x4E8E;&#x5DF2;&#x77E5;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6784;&#x7B51;&#x7684;&#x6746;&#x5916;&#x6BB5;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x7ED3;&#x679C;&#x4E5F;&#x652F;&#x6301;&#x5176;&#x7EB5;&#x5411;&#x4F20;&#x64AD;&#x7684;&#x5149;&#x6FC0;&#x52B1;&#x68D2;&#x4E2D;&#x8DE8;&#x7269;&#x79CD;&#xFF0C;&#x662F;&#x6709;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x9884;&#x6D4B;&#x3002;

&#x7EB5;&#x5411;&#x6269;&#x6563;&#x7684;&#x6781;&#x5730;&#x793A;&#x8E2A;&#x5242;&#x5728;&#x5916;&#x6BB5;&#x6746;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x7269;&#x79CD;&#x3002;

Vertebrate rod photoreceptors are the ultimate light sensors, as they can detect a single photon. In darkness, rods maintain a high concentration of the intracellular messenger cyclic guanosine monophosphate (cGMP), which binds to and keeps open cationic channels on the plasma membrane of the outer segment. Absorption of a photon by the visual pigment of the rod, rhodopsin, initiates a biochemical amplification cascade that leads to a reduction in the concentration of cGMP and closure of the channels, thereby converting the incoming light to an electrical signal. Because the absorption of a photon and the ensuing reactions are localized events, the magnitude of the response of the rod to a single photon depends on the spread of the decrease in the cGMP concentration along the length of the outer segment. The longitudinal diffusion of cGMP depends on the structural parameters of the rod outer segment, specifically the area and the volume available for diffusion. To characterize the effect of rod outer segment cytoarchitecture on diffusion, we have used fluorescence recovery after photobleaching (FRAP) and examined the mobility of a fluorescent polar tracer, calcein, in the rod outer segments from three species with different outer segment structures: frog (Rana pipiens), mouse (Mus musculus domesticus) and gecko (Gekko gekko). We found that the diffusion coefficient is similar for all three species, in the order of 8-17 microm(2) s(-1), in broad agreement with the predictions by Holcman and Korenbrot (Biophys. J. 2004:86;2566-2582) based on the known cytoarchitecture of rod outer segments. Consequently, the results also support their prediction that the longitudinal spread of light excitation in rods is similar across species.

Longitudinal diffusion of a polar tracer in the outer segments of rod photoreceptors from different species.

Vert&#xE9;br&#xE9;s photor&#xE9;cepteurs de la tige sont les capteurs de lumi&#xE8;re ultimes, car ils peuvent d&#xE9;tecter un seul photon. Dans l&#x26;#39;obscurit&#xE9;, des tiges de maintenir une concentration &#xE9;lev&#xE9;e de la guanosine monophosphate cyclique intracellulaire messager (cGMP), qui se lie &#xE0; et maintient ouverts les canaux cationiques sur la membrane plasmique du segment externe. L&#x26;#39;absorption d&#x26;#39;un photon par le pigment visuelle de la tige, la rhodopsine, d&#xE9;clenche une cascade d&#x26;#39;amplification biochimique qui conduit &#xE0; une r&#xE9;duction de la concentration de cGMP et de fermeture des canaux, en convertissant ainsi la lumi&#xE8;re entrant &#xE0; un signal &#xE9;lectrique. Parce que l&#x26;#39;absorption d&#x26;#39;un photon et les r&#xE9;actions suivantes sont localis&#xE9;es les &#xE9;v&#xE9;nements, l&#x26;#39;amplitude de la r&#xE9;ponse de la tige &#xE0; un seul photon est fonction de la propagation de la diminution de la concentration de GMPc long de la longueur du segment ext&#xE9;rieur. La diffusion longitudinale de la GMPc d&#xE9;pend des param&#xE8;tres structurels du segment de tige ext&#xE9;rieure, en particulier la r&#xE9;gion et le volume disponible pour la diffusion. Pour caract&#xE9;riser l&#x26;#39;effet de cytoarchitecture tige segment externe sur la diffusion, nous avons utilis&#xE9; de recouvrement de fluorescence apr&#xE8;s photoblanchiment (FRAP) et a examin&#xE9; la mobilit&#xE9; d&#x26;#39;un traceur fluorescent polaire, calc&#xE9;ine, dans les segments de tige de trois esp&#xE8;ces ext&#xE9;rieures avec diff&#xE9;rentes structures du segment externe: la grenouille ( Rana pipiens), la souris (Mus musculus domesticus) et gecko (Gekko gekko). Nous avons constat&#xE9; que le coefficient de diffusion est similaire pour les trois esp&#xE8;ces, de l&#x26;#39;ordre de 8-17 microm (2) s (-1), globalement en accord avec les pr&#xE9;dictions par Holcman et Korenbrot (Biophys. J. 2004:86; 2566 -2582) sur la base de la cytoarchitecture connue de segments barreau ext&#xE9;rieures. Par cons&#xE9;quent, les r&#xE9;sultats confirment aussi leur pr&#xE9;vision que la propagation longitudinale de l&#x26;#39;excitation de la lumi&#xE8;re dans tiges est similaire &#xE0; travers les esp&#xE8;ces.

Diffusion longitudinale d&#x26;#39;un traceur polaire dans les segments externes des photor&#xE9;cepteurs Rod provenant de diff&#xE9;rentes esp&#xE8;ces

Vertebrate Stab Photorezeptoren sind die ultimativen Lichtsensoren, wie sie ein einzelnes Photon erkennen k&ouml;nnen. In der Dunkelheit pflegen die St&auml;be eine hohe Konzentration an die intrazellul&auml;re Messenger cyclisches Guanosinmonophosphat (cGMP), die bindet an und h&auml;lt offene kationische Kan&auml;le auf der Plasmamembran im &auml;u&szlig;eren Segment. Absorption eines Photons durch das Sehpigment des Stabes, Rhodopsin, initiiert eine biochemische Verst&auml;rkung-Kaskade, das f&uuml;hrt zu einer Verringerung der Konzentration von cGMP und Schlie&szlig;ung der Kan&auml;le, damit das einfallende Licht in elektrische Signale umwandeln. Da die Absorption eines Photons und die darauf folgenden Reaktionen sind lokalisierte Ereignisse, h&auml;ngt das Ausma&szlig; der Reaktion des Stabes auf ein einzelnes Photon die Ausbreitung der R&uuml;ckgang der cGMP-Konzentration entlang der L&auml;nge des &auml;u&szlig;eren Segment. Die longitudinale Diffusion von cGMP, h&auml;ngt von der Strukturparameter von &auml;u&szlig;eren Segment der Stab, speziell die Fl&auml;chen- und die Verbreitung zur Verf&uuml;gung. Um die Wirkung der Stab &auml;u&szlig;ere Segment Cytoarchitecture Diffusion zu charakterisieren, haben wir Fluoreszenz-Wiederherstellung nach Photobleaching (FRAP) verwendet und die Mobilit&auml;t von einem fluoreszierenden polar Tracer, Calcein, in die &auml;u&szlig;eren Stab-Segmente aus drei Arten mit verschiedenen &auml;u&szlig;eren Segment Strukturen untersucht: Frosch (Rana Pipiens), Maus (Mus Musculus Domesticus) und Gecko (Gekko Gekko). Wir festgestellt, dass der Diffusionskoeffizient f&uuml;r alle drei Arten, in der Gr&ouml;&szlig;enordnung von 8-17-microm(2)-s(-1), &auml;hnlich in breite &Uuml;bereinstimmung mit den Vorhersagen von Holcman und Korenbrot (Biophys. J. 2004:86; 2566-2582) basierend auf den bekannten Cytoarchitecture Stab &auml;u&szlig;eren Segmente. Daher unterst&uuml;tzen die Ergebnisse auch ihre Vorhersage, dass die L&auml;nge Ausbreitung von Licht Erregung in Stangen Arten &auml;hnlich ist.

Longitudinale Diffusion ein polar Tracer in die &auml;u&szlig;eren Segmente der Stab Photorezeptoren von verschiedenen Arten.

Fotorecettori rod vertebrati sono i sensori di luce finale, come si pu&ograve; rilevare un singolo fotone. Nel buio, barre di mantengono un&#39;alta concentrazione del Messaggero intracellulare guanosina monofosfato ciclico (cGMP), che si lega a e tiene aperti canali cationici il plasma della membrana del segmento esterno. Assorbimento di un fotone di pigmento visivo dell&#39;asta, rodopsina, avvia una cascata biochimica amplificazione che porta ad una riduzione della concentrazione di cGMP e chiusura dei canali, quindi converte la luce in ingresso in un segnale elettrico. Poich&eacute; l&#39;assorbimento di un fotone e le reazioni che ne derivano sono eventi localizzati, la grandezza della risposta dell&#39;asta di un singolo fotone dipende la diffusione della diminuzione della concentrazione di cGMP lungo la lunghezza del segmento esterno. La diffusione longitudinale del cGMP dipende dai parametri strutturali del segmento esterno rod, in particolare l&#39;area e il volume disponibile per la diffusione. Per caratterizzare l&#39;effetto della canna esterna segmento cytoarchitecture sulla diffusione, abbiamo usato recupero fluorescenza dopo photobleaching (FRAP) ed esaminate la mobilit&agrave; di un tracciante fluorescente polar, calceina, nei segmenti di asta esterna da tre specie con strutture di diverso segmento esterno: rana (Rana pipiens), topo (Mus musculus domesticus) e gecko (Gekko gekko). Abbiamo trovato che il coefficiente di diffusione &egrave; simile per tutte le tre specie, nell&#39;ordine di 8-17 microm(2) s(-1), nel vasto accordo con le previsioni di Holcman e Korenbrot (Biophys. J. 2004:86; 2566-2582) basato sul noto cytoarchitecture di segmenti di canna esterna. Di conseguenza, i risultati supportano anche la previsione che la diffusione della luce di eccitazione in barre longitudinale &egrave; simile tra specie.

Diffusione longitudinale di un tracciante polar nei segmenti esterni dei fotorecettori asta da specie diverse.

&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x5358;&#x4E00;&#x5149;&#x5B50;&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x687F;&#x4F53;&#x306F;&#x7A76;&#x6975;&#x306E;&#x5149;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B5;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x3002;&#x6697;&#x95C7;&#x306E;&#x4E2D;&#x3067;&#x3001;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x3001;&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x539F;&#x5F62;&#x8CEA;&#x819C;&#x4E0A;&#x3067;&#x958B;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30AB;&#x30C1;&#x30AA;&#x30F3;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3092;&#x4FDD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30E1;&#x30C3;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B8;&#x30E3;&#x30FC;&#x74B0;&#x72B6;&#x30B0;&#x30A2;&#x30CE;&#x30B7;&#x30F3;&#x4E00;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#xFF08;cGMP&#xFF09;&#x306E;&#x9AD8;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#x3001;&#x30ED;&#x30C9;&#x30D7;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x8996;&#x899A;&#x8272;&#x7D20;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5149;&#x5B50;&#x306E;&#x5438;&#x53CE;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x96FB;&#x6C17;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306B;&#x5165;&#x3063;&#x3066;&#x304F;&#x308B;&#x5149;&#x3092;&#x5909;&#x63DB;&#x3057;&#x3001;cGMP&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x9589;&#x9396;&#x306E;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x751F;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x5897;&#x5E45;&#x30AB;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30C9;&#x3092;&#x958B;&#x59CB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5149;&#x5B50;&#x306E;&#x5438;&#x53CE;&#x3068;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x7D9A;&#x304F;&#x53CD;&#x5FDC;&#x304C;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x5358;&#x4E00;&#x5149;&#x5B50;&#x306E;&#x68D2;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x5927;&#x304D;&#x3055;&#x306F;&#x3001;&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x9577;&#x3055;&#x306B;&#x6CBF;&#x3063;&#x3066;cGMP&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x306E;&#x5E83;&#x304C;&#x308A;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; cGMP&#x306E;&#x9577;&#x624B;&#x65B9;&#x5411;&#x306E;&#x62E1;&#x6563;&#x306F;&#x3001;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x5730;&#x57DF;&#x3068;&#x62E1;&#x6563;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5229;&#x7528;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30DC;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; &#xFF08;&#x30AB;&#x30A8;&#x30EB;&#xFF1A;&#x62E1;&#x6563;&#x306B;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x69CB;&#x7BC9;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#xFF08;FRAP&#xFF09;&#x5149;&#x9000;&#x8272;&#x5F8C;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x56DE;&#x5FA9;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x5225;&#x306E;&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x69CB;&#x9020;&#x3092;&#x6301;&#x3064;3&#x3064;&#x306E;&#x7A2E;&#x304B;&#x3089;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3067;&#x3001;&#x86CD;&#x5149;&#x706F;&#x306E;&#x6975;&#x6027;&#x30C8;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B5;&#x30FC;&#x3001;&#x30AB;&#x30EB;&#x30BB;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x79FB;&#x52D5;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x30D2;&#x30E7;&#x30A6;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#xFF09;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#xFF08;&#x30CF;&#x30C4;&#x30AB;&#x30CD;&#x30BA;&#x30DF;&#x30C9;&#x30E1;&#x30B9;&#xFF09;&#x3068;Gecko&#xFF08;&#x30B2;&#x30C3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30B3;&#x30FC;&#xFF09;&#x3002; 2566&#x5E74;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x62E1;&#x6563;&#x4FC2;&#x6570;&#x304C;Holcman&#x3068;Korenbrot&#xFF08;Biophys. J. 2004:86&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3068;&#x5E83;&#x7BC4;&#x306A;&#x5408;&#x610F;&#x3067;&#x306F;&#x3001;8&#x304B;&#x3089;17&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#xFF08;2&#xFF09;&#x306E;&#xFF08;-1&#xFF09;&#x306E;&#x9806;&#x3067;&#x3001;3&#x3064;&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x7A2E;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x3082;&#x540C;&#x69D8;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x65E2;&#x77E5;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x69CB;&#x7BC9;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3001;-2582&#xFF09;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#x306E;&#x5149;&#x52B1;&#x8D77;&#x306E;&#x7E26;&#x65B9;&#x5411;&#x306E;&#x5E83;&#x304C;&#x308A;&#x304C;&#x7A2E;&#x9593;&#x3067;&#x985E;&#x4F3C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x7A2E;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x687F;&#x4F53;&#x306E;&#x5916;&#x7BC0;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6975;&#x6027;&#x30C8;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B5;&#x30FC;&#x306E;&#x9577;&#x624B;&#x65B9;&#x5411;&#x306E;&#x62E1;&#x6563;

&#xCC99;&#xCD94; &#xB85C;&#xB4DC; &#xB300;&#xB1CC;&#xB294; &#xAD81;&#xADF9;&#xC801;&#xC778; &#xAD11; &#xC13C;&#xC11C; &#xB2E8;&#xC77C; &#xAD11;&#xC790;&#xB97C; &#xAC80;&#xC0C9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5B4;&#xB460; &#xC18D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD09;&#xC740; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xBA54;&#xC2E0;&#xC800; &#xC8FC;&#xAE30;&#xC801; guanosine monophosphate (cGMP)&#xC744; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xACE0; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xC758; &#xC6D0;&#xD615;&#xC9C8; &#xB9C9;&#xC5D0; &#xAC1C;&#xBC29; &#xC591;&#xC774;&#xC628; &#xCC44;&#xB110;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294;&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xB18D;&#xB3C4; &#xC720;&#xC9C0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD761;&#xC218; &#xB9C9;&#xB300;&#xC758; &#xC2DC;&#xAC01;&#xC801; &#xC548;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAD11;&#xC790;&#xC758; rhodopsin, cGMP &#xBC0F; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xB4E4;&#xC5B4;&#xC624;&#xB294; &#xBE5B; &#xC804;&#xAE30; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xBCC0;&#xD658; &#xD558;&#xB294; &#xCC44;&#xB110;&#xC758; &#xD3D0;&#xC1C4;&#xC758; &#xB18D;&#xB3C4; &#xAC10;&#xC18C;&#xC5D0; &#xC774;&#xB974;&#xAC8C; &#xD558;&#xB294; &#xC0DD; &#xD654; &#xD655; &#xC801;&#xC778; &#xC99D;&#xD3ED; &#xCE90;&#xC2A4;&#xCF00;&#xC774;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC2DC;&#xC791; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD761;&#xC218;&#xB294; &#xAD11;&#xC790;&#xC640; &#xB4A4;&#xC774;&#xC5B4; &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xB41C; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xB2E8;&#xC77C; &#xAD11;&#xC790;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB9C9;&#xB300;&#xC758; &#xC751;&#xB2F5;&#xC758; &#xD06C;&#xAE30;&#xB294; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xC758; &#xAE38;&#xC774; &#xB530;&#xB77C; cGMP &#xB18D;&#xB3C4; &#xAC10;&#xC18C;&#xC758; &#xD655;&#xC0B0;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;. Cgmp&#xC758; &#xC885; &#xD1B5; &#xC7AC; &#xBCF4;&#xAE09; &#xB9C9;&#xB300; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xD2B9;&#xD788; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xACFC; &#xBCF4;&#xAE09;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xBCFC;&#xB968;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBCF4;&#xAE09;&#xC5D0; &#xB9C9;&#xB300; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8; cytoarchitecture&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xC6B0;&#xB9AC; photobleaching (FRAP) &#xD6C4; &#xD615;&#xAD11; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xACE0; &#xD615;&#xAD11; &#xADF9;&#xC88C;&#xD45C; &#xCD94;&#xC801; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;, calcein, &#xB2E4;&#xB978; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8; &#xAD6C;&#xC870; 3 &#xC885;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9C9;&#xB300; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC774;&#xB3D9;&#xC131; &#xAC80;&#xC0AC;: &#xAC1C;&#xAD6C;&#xB9AC; (Rana pipiens), &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; (&#xBA38; &#xC2A4; &#xC0DD;&#xC950; domesticus)&#xC640; &#xAC8C; &#xCF54; (Gekko gekko). &#xD655;&#xC0B0; &#xACC4;&#xC218;&#xB294; Holcman &#xBC0F; Korenbrot (Biophys&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC608;&#xCE21; &#xB41C; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xACC4;&#xC57D;&#xC5D0;&#xC11C; 8-17 microm(2) s(-1) &#xC21C;&#xC11C; &#xBAA8;&#xB4E0; 3 &#xC885;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC720;&#xC0AC;&#xB97C; &#xCC3E;&#xC558;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. J. 2004:86, 2566-2582) &#xB9C9;&#xB300; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xC758; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4;&#xB41C; cytoarchitecture&#xC744; &#xAE30;&#xBC18;&#xC73C;&#xB85C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xACB0;&#xACFC; &#xB610;&#xD55C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC608;&#xCE21;&#xC758; &#xBD09;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD11; &#xC5EC;&#xAE30; &#xACBD;&#xB3C4; &#xD655;&#xC0B0;&#xC740; &#xC885;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xC9C0;&#xC6D0;.

&#xC885;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD09; &#xB300;&#xB1CC;&#xC758; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF9;&#xC88C;&#xD45C; &#xCD94;&#xC801; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC758; &#xC885; &#xD1B5; &#xC7AC; &#xD655;&#xC0B0;.

Vertebrados fotorreceptores de los bastones son los sensores de luz en &#xFA;ltima instancia, ya que puede detectar un &#xFA;nico fot&#xF3;n. En la oscuridad, las barras de mantener una alta concentraci&#xF3;n del monofosfato de guanosina mensajero intracelular c&#xED;clico (cGMP), que se une y mantiene abiertos canales cati&#xF3;nicos en la membrana plasm&#xE1;tica del segmento externo. La absorci&#xF3;n de un fot&#xF3;n por el pigmento visual de la varilla, rodopsina, inicia una cascada de multiplicaci&#xF3;n bioqu&#xED;mica que conduce a una reducci&#xF3;n en la concentraci&#xF3;n de cGMP y cierre de los canales, convirtiendo as&#xED; la luz entrante en una se&#xF1;al el&#xE9;ctrica. Debido a que la absorci&#xF3;n de un fot&#xF3;n y las reacciones subsiguientes son eventos localizados, la magnitud de la respuesta de la varilla a un solo fot&#xF3;n depende de la propagaci&#xF3;n de la disminuci&#xF3;n en la concentraci&#xF3;n de cGMP a lo largo de la longitud del segmento exterior. La difusi&#xF3;n longitudinal de GMPc depende de los par&#xE1;metros estructurales del segmento varilla exterior, espec&#xED;ficamente el &#xE1;rea y el volumen disponible para la difusi&#xF3;n. Para caracterizar el efecto de la citoarquitectura barra de los segmentos externos de la difusi&#xF3;n, hemos utilizado la recuperaci&#xF3;n despu&#xE9;s de fluorescencia photobleaching (FRAP) y se examina la movilidad de un trazador fluorescente polar, calce&#xED;na, en los segmentos de barras exteriores de las tres especies con diferentes estructuras del segmento exteriores: rana ( Rana pipiens), rat&#xF3;n (Mus musculus domesticus) y Gecko (Gekko Gekko). Se encontr&#xF3; que el coeficiente de difusi&#xF3;n es similar para las tres especies, del orden de 17.8 micras (2) s (-1), en general de acuerdo con las predicciones de Holcman y Korenbrot (Biophys. J. 2004:86; 2566 -2582) basado en la citoarquitectura conocido de segmentos de varilla exteriores. En consecuencia, los resultados tambi&#xE9;n apoyan la predicci&#xF3;n de que la propagaci&#xF3;n longitudinal de luz de excitaci&#xF3;n en las barras es similar entre las especies.

Difusi&#xF3;n longitudinal de un trazador Polar en los segmentos externos de fotorreceptores de los bastones de diferentes especies

&#x89C6;&#x89C9;&#x8272;&#x7D20;&#x86CB;&#x767D;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x6746;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x7684;&#x89C6;&#x7D2B;&#x7EA2;&#x8D28;&#xFF0C;&#x5305;&#x542B;&#x5BF9;&#x5149;&#x5438;&#x6536;&#x540E;&#x5168;&#x53CD;&#x5F0F;&#x5F02;&#x6784;&#x7684; 11-&#x987A;&#x89C6;&#x9EC4;&#x57FA;&#x7ED3;&#x6784;&#x3002;&#x968F;&#x540E;&#xFF0C;&#x5168;&#x53CD;&#x5F0F;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x662F;&#x4ECE;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x91CA;&#x653E;&#x4E0E;&#x51CF;&#x81F3;&#x5168;&#x53CD;&#x5F0F;&#x89C6;&#x9EC4;&#x9187;&#xFF0C;&#x89C6;&#x7D2B;&#x7EA2;&#x8D28;&#x7684;&#x53D1;&#x8272;&#x56E2;&#x7EC4;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E00;&#x7CFB;&#x5217;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#x6784;&#x6210;&#x4E86;&#x89C6;&#x89C9;&#x7684;&#x5468;&#x671F;&#x5FAA;&#x73AF;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B65;&#x3002;&#x5168;&#x53CD;&#x5F0F;&#x89C6;&#x9EC4;&#x9187;&#x611F;&#x5149;&#x5668;&#x5916;&#x5404;&#x9636;&#x5C42;&#x4E2D;&#x7684;&#x6D53;&#x5EA6;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4ECE;&#x5176;&#x8367;&#x5149;&#x76D1;&#x6D4B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E86;&#x53CC;&#x5149;&#x5B50;&#x6FC0;&#x53D1; (720 nm&#xFF09; &#x7684;&#x89C6;&#x9EC4;&#x9187;&#x8367;&#x5149;&#x548C;&#x8367;&#x5149;&#x6062;&#x590D;&#x540E;&#x5149;&#x6F02;&#x767D;&#x7279;&#x70B9;&#x5168;&#x53CD;&#x5F0F;&#x89C6;&#x9EC4;&#x9187;&#x9752;&#x86D9;&#x5149;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x5916;&#x9636;&#x5C42;&#x4E2D;&#x7684;&#x6D41;&#x52A8;&#x6027;&#x3002;&#x89C6;&#x9EC4;&#x9187;&#x4EA7;&#x751F;&#x89C6;&#x7D2B;&#x7EA2;&#x8D28;&#x6F02;&#x767D;&#x6A2A;&#x5411;&#x79FB;&#x52A8;&#x78C1;&#x76D8;&#x819C;&#x53CC;&#x5C42; 2.5 + /-0.3 &#x5FAE; m(2) s(-1) &#x8868;&#x89C2;&#x6269;&#x6563;&#x7CFB;&#x6570;&#x5728;&#x540E;&#x3002;&#x5916;&#x90E8;&#x6DFB;&#x52A0;&#x89C6;&#x9EC4;&#x9187;&#x7684;&#x6269;&#x6563;&#x7CFB;&#x6570;&#x662F; + /-0.5 &#x5FAE; m(2) s(-1) 3.2&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6269;&#x6563;&#x7CFB;&#x6570;&#x662F;&#x5BC6;&#x5207;&#x534F;&#x8BAE;&#x4E2D;&#x4E0E;&#x8840;&#x8102;&#x3001; &#x6697;&#x793A;&#x7684;&#x89C6;&#x9EC4;&#x9187;&#x4E0D;&#x7D27;&#x7D27;&#x5730;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x5C06;&#x819C;&#x7684;&#x5E73;&#x9762;&#x4E2D;&#x66F4;&#x52A0;&#x7F13;&#x6162;&#x6269;&#x6563;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7AD9;&#x70B9;&#x7684;&#x62A5;&#x544A;&#x3002;&#x6309;&#x7167;&#x8FD9;&#x4E00;&#x89E3;&#x91CA;&#xFF0C;&#x8367;&#x5149;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684; C 16 &#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x4E0E;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x6269;&#x6563;&#x7CFB;&#x6570;&#xFF0C;+ /-0.2 &#x5FAE; m(2) s(-1) 2.2 &#x6A2A;&#x5411;&#x6269;&#x6563;&#x3002;&#x89C6;&#x9EC4;&#x9187;&#x8FD8;&#x6CBF;&#x7740; 0.07 + /-0.01 &#x5FAE; m(2) s(-1)&#xFF0C;&#x518D;&#x6B21;&#x8868;&#x660E;&#x5B83;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x7D27;&#x7D27;&#x5730;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x4F1A;&#x5C06;&#x5B83;&#x5C40;&#x9650;&#x4E8E;&#x78C1;&#x76D8;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8868;&#x89C2;&#x6269;&#x6563;&#x7CFB;&#x6570;&#x4E0E;&#x6746;&#x5916;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x957F;&#x5EA6;&#x3002;&#x5916;&#x90E8;&#x6DFB;&#x52A0;&#x89C6;&#x9EC4;&#x9187;&#x7684;&#x8F74;&#x5411;&#x6269;&#x6563;&#x7CFB;&#x6570;&#x662F; + /-0.01 &#x5FAE; m(2) s(-1) 0.05&#x3002;&#x4E0E;&#x88AB;&#x52A8;&#x6269;&#x6563;&#xFF0C;&#x8F74;&#x5411;&#x8FD0;&#x52A8;&#x7684;&#x901F;&#x7387;&#x662F;&#x957F;&#x5EA6;&#x7684;&#x6746;&#x5916;&#x6BB5;&#x7684;&#x5E73;&#x65B9;&#x6210;&#x53CD;&#x6BD4;&#x3002;&#x56E0;&#x4E3A;&#x7B49;&#x79BB;&#x5B50;&#x819C;&#x6784;&#x6210;&#x5927;&#x7EA6; 1%&#x7684;&#x603B;&#x5916;&#x6BB5;&#x819C;&#x7684;&#x6D4B;&#x91CF;&#x503C;&#x7684;&#x8F74;&#x5411;&#x6269;&#x6563;&#x7CFB;&#x6570;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x968F;&#x65F6;&#x5360;&#x89C6;&#x9EC4;&#x9187;&#x5BF9;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#x5916;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x6269;&#x6563;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x6A2A;&#x5411;&#x4E0E;&#x8F74;&#x5411;&#x6269;&#x6563;&#x7CFB;&#x6570;&#x7684;&#x503C;&#x90FD;&#x7B26;&#x5408;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x4E2D;&#x79FB;&#x52A8;&#x7684;&#x5916;&#x6BB5;&#x5168;&#x53CD;&#x5F0F;&#x9187;&#x4E0D;&#x53D7;&#x9650;&#x5236;&#x7684;&#x548C;&#x672A;&#x88AB;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x8F7D;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x5176;&#x4ED6;&#x6B65;&#x9AA4;&#x7684;&#x89C6;&#x89C9;&#x7684;&#x5468;&#x671F;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x4E0D;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x5168;&#x53CD;&#x5F0F;&#x89C6;&#x9EC4;&#x9187;&#x6746;&#x5916;&#x6BB5;&#x5185;&#x7684;&#x4EFB;&#x4F55;&#x4E13;&#x95E8;&#x7684;&#x5904;&#x7406;&#x3002;

&#x5168;&#x53CD;&#x5F0F;&#x89C6;&#x9EC4;&#x9187;&#x4E2D;&#x6746;&#x611F;&#x5149;&#x5668;&#x5916;&#x6BB5;&#x964D;&#x538B;&#x79FB;&#x52A8;&#x901A;&#x8FC7;&#x88AB;&#x52A8;&#x6269;&#x6563;&#x3002;

The visual pigment protein of vertebrate rod photoreceptors, rhodopsin, contains an 11-cis retinyl moiety that is isomerized to all-trans upon light absorption. Subsequently, all-trans retinal is released from the protein and reduced to all-trans retinol, the first step in the recycling of rhodopsin's chromophore group through the series of reactions that constitute the visual cycle. The concentration of all-trans retinol in photoreceptor outer segments can be monitored from its fluorescence. We have used two-photon excitation (720 nm) of retinol fluorescence and fluorescence recovery after photobleaching to characterize the mobility of all-trans retinol in frog photoreceptor outer segments. Retinol produced after rhodopsin bleaching moved laterally in the disk membrane bilayer with an apparent diffusion coefficient of 2.5 +/- 0.3 micro m(2) s(-1). The diffusion coefficient of exogenously added retinol was 3.2 +/- 0.5 micro m(2) s(-1). These diffusion coefficients are in close agreement with those reported for lipids, suggesting that retinol is not tightly bound to protein sites that would be diffusing much more slowly in the plane of the membrane. In agreement with this interpretation, a fluorescent-labeled C-16 fatty acid diffused laterally with a similar diffusion coefficient, 2.2 +/- 0.2 micro m(2) s(-1). Retinol also moved along the length of the rod outer segment, with an apparent diffusion coefficient of 0.07 +/- 0.01 micro m(2) s(-1), again suggesting that it is not tightly bound to proteins that would confine it to the disks. The axial diffusion coefficient of exogenously added retinol was 0.05 +/- 0.01 micro m(2) s(-1). In agreement with passive diffusion, the rate of axial movement was inversely proportional to the square of the length of the rod outer segment. Diffusion of retinol on the plasma membrane of the outer segment can readily account for the measured value of the axial diffusion coefficient, as the plasma membrane comprises approximately 1% of the total outer-segment membrane. The values of both the lateral and axial diffusion coefficients are consistent with most of the all-trans retinol in the outer segments moving unrestricted and not being bound to carrier proteins. Therefore, and in contrast to other steps of the visual cycle, there does not appear to be any specialized processing for all-trans retinol within the rod outer segment.

All-trans retinol in rod photoreceptor outer segments moves unrestrictedly by passive diffusion.

La prot&#xE9;ine pigment visuel des photor&#xE9;cepteurs tige vert&#xE9;br&#xE9;s, la rhodopsine, contient un fragment de r&#xE9;tinol 11-cis qui est isom&#xE9;ris&#xE9; en tout-trans sur l&#x26;#39;absorption de la lumi&#xE8;re. Par la suite, tout-trans r&#xE9;tinal est lib&#xE9;r&#xE9;e de la prot&#xE9;ine et r&#xE9;duite &#xE0; r&#xE9;tinol tout-trans, la premi&#xE8;re &#xE9;tape dans le recyclage de groupe chromophore rhodopsine &#xE0; travers la s&#xE9;rie de r&#xE9;actions constituant le cycle visuel. La concentration de r&#xE9;tinol tout-trans dans les segments externes des photor&#xE9;cepteurs peuvent &#xEA;tre surveill&#xE9;s &#xE0; partir de sa fluorescence. Nous avons utilis&#xE9; excitation &#xE0; deux photons (720 nm) de fluorescence de r&#xE9;tinol et de r&#xE9;cup&#xE9;ration de fluorescence apr&#xE8;s photoblanchiment pour caract&#xE9;riser la mobilit&#xE9; des tout-trans r&#xE9;tinol dans les segments des photor&#xE9;cepteurs de grenouilles ext&#xE9;rieures. R&#xE9;tinol produit apr&#xE8;s la rhodopsine blanchiment d&#xE9;plac&#xE9; lat&#xE9;ralement dans la bicouche membranaire disque avec un coefficient de diffusion apparent de 2,5 + / - 0,3 micro m (2) s (-1). Le coefficient de diffusion de fa&#xE7;on exog&#xE8;ne ajout&#xE9; r&#xE9;tinol a &#xE9;t&#xE9; de 3,2 + / - 0,5 micro m (2) s (-1). Ces coefficients de diffusion sont en accord avec celles rapport&#xE9;es pour les lipides, ce qui sugg&#xE8;re que le r&#xE9;tinol n&#x26;#39;est pas &#xE9;troitement li&#xE9; aux sites de prot&#xE9;ines qui seraient diffusion beaucoup plus lentement dans le plan de la membrane. En accord avec cette interpr&#xE9;tation, une lampe fluorescente marqu&#xE9;e C-16 d&#x26;#39;acide gras diffus&#xE9;e lat&#xE9;ralement par un coefficient de diffusion similaire, 2,2 + / - 0,2 micro m (2) s (-1). R&#xE9;tinol &#xE9;galement d&#xE9;plac&#xE9; le long de la longueur du segment de tige ext&#xE9;rieure, avec un coefficient de diffusion apparent de 0,07 + / - 0,01 micro m (2) s (-1), sugg&#xE9;rant encore qu&#x26;#39;il n&#x26;#39;est pas fortement li&#xE9; aux prot&#xE9;ines qui le confiner &#xE0; l&#x26;#39; disques. Le coefficient de diffusion axiale de fa&#xE7;on exog&#xE8;ne ajout&#xE9; r&#xE9;tinol &#xE9;tait de 0,05 + / - 0,01 m micro (2) s (-1). En accord avec la diffusion passive, la vitesse de d&#xE9;placement axiale est inversement proportionnelle au carr&#xE9; de la longueur du segment de tige ext&#xE9;rieure. Diffusion de r&#xE9;tinol sur la membrane plasmique du segment externe peut facilement compte de la valeur mesur&#xE9;e du coefficient de diffusion axiale, que la membrane de plasma comprend environ 1% du total du segment externe de membrane. Les valeurs des deux des coefficients de diffusion lat&#xE9;rale et axiale sont compatibles avec la plupart du r&#xE9;tinol tout-trans dans les segments ext&#xE9;rieurs se d&#xE9;placent librement et de ne pas &#xEA;tre li&#xE9; &#xE0; des prot&#xE9;ines porteuses. Par cons&#xE9;quent, et contrairement &#xE0; d&#x26;#39;autres &#xE9;tapes du cycle visuel, il ne semble pas y avoir de traitement sp&#xE9;cialis&#xE9; pour les tout-trans r&#xE9;tinol dans le segment de tige ext&#xE9;rieure.

R&#xE9;tinol tout-trans dans les segments Photor&#xE9;cepteur tige ext&#xE9;rieure D&#xE9;place sans restriction par diffusion passive

Das Sehpigment Protein von vertebrate Stab Lichtrezeptoren, Rhodopsin, enth&auml;lt ein 11-Cis-Retinilpalmitat-Gruppe, die zu All-Trans nach Lichtabsorption isomerized ist. All-Trans-Retinal ist anschlie&szlig;end freigegeben vom Protein und reduzierten zu All-Trans Retinol, der erste Schritt im recycling von Rhodopsin der Chromophor-Gruppe durch die Serie von Reaktionen, die den visuellen Zyklus bilden. Die Konzentration von All-Trans Retinol in Photorezeptoren &auml;u&szlig;eren Segmente kann von ihrer Fluoreszenz &uuml;berwacht werden. Wir haben zwei-Photonen-Anregung verwendet (720 nm) Retinol Fluoreszenz und Fluoreszenz Recovery after Photobleaching, die Mobilit&auml;t von All-Trans Retinol Frosch Photorezeptor &auml;u&szlig;eren Segmente zu charakterisieren. Retinol produziert, nachdem die Festplatte Membran Bilayer mit eine scheinbare Diffusionskoeffizient 2,5 +/-0,3 Mikro m s(-1) Rhodopsin bleichen seitlich verlegt werden. Der Diffusionskoeffizient von exogen hinzugef&uuml;gt Retinol war 3.2 +/-0,5 m Mikro-s(-1). Diese Diffusionskoeffizienten sind in enger Abstimmung mit den berichteten f&uuml;r Lipide, was darauf hindeutet, dass dieses Retinol nicht eng an Protein-Standorte gebunden ist, die sehr viel langsamer in der Ebene der Membran zu einer Diffusion werden w&uuml;rde. Im Einvernehmen mit dieser Interpretation verbreitet eine Fluoreszenz-markierten C-16-Fetts&auml;ure seitlich mit einer &auml;hnlichen Diffusionskoeffizient, 2.2 +/-0,2 Mikro m s(-1). Retinol, zog auch entlang der L&auml;nge des Segments &auml;u&szlig;eren Stab mit einer scheinbaren Diffusionskoeffizienten von 0,07 +/-0.01 Mikro m s(-1), wieder darauf hindeutet, dass es nicht eng an Proteine gebunden ist, die sie sich auf den Datentr&auml;gern beschr&auml;nken w&uuml;rde. Die axiale Diffusionskoeffizient von exogen hinzugef&uuml;gt Retinol war 0,05 +/-0.01 Mikro m s(-1). Im Einvernehmen mit passive Diffusion war die Rate der axiale Bewegung umgekehrt proportional zum Quadrat der L&auml;nge des Segments &auml;u&szlig;eren Stab. Verbreitung von Retinol auf der Plasmamembran im &auml;u&szlig;eren Segment kann leicht f&uuml;r den Messwert f&uuml;r die axiale Diffusionskoeffizient ber&uuml;cksichtigen, wie die Plasmamembran etwa 1 % der gesamten &auml;u&szlig;eren-Segment-Membran umfasst. Die Werte f&uuml;r die laterale und axiale Diffusionskoeffizienten entsprechen die meisten All-Trans-Retinol in die &auml;u&szlig;eren Segmente verschieben eine uneingeschr&auml;nkte und nicht an Carrier-Proteine gebunden wird. Daher, und im Gegensatz zu anderen Schritte des visuellen Zyklus, erscheint es keine spezielle Verarbeitung f&uuml;r All-Trans Retinol im &auml;u&szlig;eren Segment Stab sein.

All-Trans Retinol im Stab Photorezeptor &auml;u&szlig;eren Segmente bewegt sich uneingeschr&auml;nkt durch passive Diffusion.

La proteina del pigmento visivo dei fotorecettori dei vertebrati rod, rodopsina, contiene un 11-cis retinolo moiety che &egrave; isomerizzato a tutto-trans all&#39;assorbimento della luce. Successivamente, tutto-trans retinale &egrave; rilasciato dalla proteina e ridotto a tutto-trans retinolo, il primo passo nel riciclaggio del gruppo di cromoforo della rodopsina attraverso la serie di reazioni che costituiscono il ciclo visivo. La concentrazione di retinolo tutto-trans in segmenti esterni fotorecettore pu&ograve; essere monitorata dalla sua fluorescenza. Abbiamo usato eccitazione del due-fotone (720 nm) di fluorescenza di retinolo e recupero della fluorescenza dopo photobleaching per caratterizzare la mobilit&agrave; di tutto-trans retinolo in segmenti esterni rana fotorecettore. Retinolo prodotta dopo sbiancamento rodopsina spostato lateralmente in doppio strato di membrana il disco con un coefficiente di diffusione apparente di 2.5 + /-0,3 micro m(2) s(-1). Il coefficiente di diffusione del retinolo esogenicamente aggiunto era 3.2 + /-0,5 micro m(2) s(-1). Questi coefficienti di diffusione sono in stretto accordo con quelli riportati per i lipidi, suggerendo che retinolo non &egrave; strettamente legata ai luoghi della proteina che potrebbe essere molto pi&ugrave; lentamente diffondendo nel piano della membrana. D&#39;accordo con questa interpretazione, acido grasso C-16 con etichetta fluorescente diffusa lateralmente con un coefficiente di diffusione simili, 2.2 + /-0,2 micro m(2) s(-1). Retinolo anche spostato lungo la lunghezza del segmento esterno stelo, con un coefficiente di diffusione apparente di 0,07 + /-0.01 s(-1) m(2) micro, suggerendo nuovamente che non &egrave; strettamente associato a proteine che esso sarebbero limitare ai dischi. Il coefficiente di diffusione assiale di retinolo esogenicamente aggiunto era 0,05 + /-0.01 m(2) micro s(-1). D&#39;accordo con diffusione passiva, il tasso di movimento assiale era inversamente proporzionale al quadrato della lunghezza del segmento esterno rod. Diffusione di retinolo il plasma della membrana del segmento esterno pu&ograve; facilmente conto per il valore misurato del coefficiente di diffusione assiale, come la membrana plasmatica &egrave; composto da circa l&#39;1% della membrana esterna-segmento totale. I valori di entrambi i coefficienti di diffusione laterale e assiale sono coerenti con la maggior parte del tutto-trans retinolo nei segmenti esterni in movimento senza restrizioni e non essendo legati a proteine carrier. Pertanto e a differenza di altre fasi del ciclo visivo, l&igrave; non sembrano essere qualsiasi elaborazione specializzata per tutto-trans retinolo all&#39;interno del segmento esterno rod.

Tutto-trans retinolo in segmenti esterni asta fotorecettore si muove illimitatamente di diffusione passiva.

&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x687F;&#x4F53;&#x306E;&#x8996;&#x899A;&#x8272;&#x7D20;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3001;&#x30ED;&#x30C9;&#x30D7;&#x30B7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x5149;&#x5438;&#x53CE;&#x6642;&#x306B;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x306B;&#x7570;&#x6027;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;11  - &#x30B7;&#x30B9; - &#x30EC;&#x30C1;&#x30CB;&#x30EB;&#x90E8;&#x5206;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x3001;&#x5168; - &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CA;&#x30FC;&#x30EB;&#x306F;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x304B;&#x3089;&#x653E;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x5168; - &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x3001;&#x8996;&#x899A;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x3092;&#x69CB;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x4E00;&#x9023;&#x306E;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3092;&#x901A;&#x3057;&#x3066;&#x30ED;&#x30C9;&#x30D7;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x767A;&#x8272;&#x56E3;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x30EA;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x306B;&#x77ED;&#x7E2E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5149;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x5916;&#x5074;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x5185;&#x306E;&#x5168;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x3092;&#x30E2;&#x30CB;&#x30BF;&#x30FC;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x3001;&#x30AB;&#x30A8;&#x30EB;&#x8996;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x7BC0;&#x3067;&#x5168;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x30E2;&#x30D3;&#x30EA;&#x30C6;&#x30A3;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x9000;&#x8272;&#x3057;&#x305F;&#x5F8C;&#x306B;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x3068;&#x86CD;&#x5149;&#x56DE;&#x5FA9;&#x306E;&#x4E8C;&#x5149;&#x5B50;&#x52B1;&#x8D77;&#xFF08;720 nm&#xFF09;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30ED;&#x30C9;&#x30D7;&#x30B7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;2.5&#x306E;&#x898B;&#x304B;&#x3051;&#x306E;&#x62E1;&#x6563;&#x4FC2;&#x6570;&#x3067;&#x30C7;&#x30A3;&#x30B9;&#x30AF;&#x819C;&#x4E8C;&#x91CD;&#x5C64;&#x306B;&#x6A2A;&#x65B9;&#x5411;&#x306B;&#x79FB;&#x52D5;&#x3057;&#x305F;&#x6F02;&#x767D;&#x5F8C;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x6210;+ /  -  0.3&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EB;&#xFF08;2&#xFF09;&#x306E;&#xFF08;-1&#xFF09;&#x3002;&#x5916;&#x56E0;&#x7684;&#x306B;&#x6DFB;&#x52A0;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x62E1;&#x6563;&#x4FC2;&#x6570;&#x306F;3.2&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;+ /  -  0.5&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EB;&#xFF08;2&#xFF09;&#x306E;&#xFF08;-1&#xFF09;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x62E1;&#x6563;&#x4FC2;&#x6570;&#x306F;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x304C;&#x3057;&#x3063;&#x304B;&#x308A;&#x3068;&#x819C;&#x306E;&#x9762;&#x3067;&#x306F;&#x308B;&#x304B;&#x306B;&#x3086;&#x3063;&#x304F;&#x308A;&#x3068;&#x62E1;&#x6563;&#x3059;&#x308B;&#x3067;&#x3042;&#x308D;&#x3046;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;&#x8102;&#x8CEA;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3082;&#x306E;&#x3068;&#x307B;&#x307C;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x89E3;&#x91C8;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x985E;&#x4F3C;&#x3057;&#x305F;&#x62E1;&#x6563;&#x4FC2;&#x6570;&#x3068;&#x6A2A;&#x65B9;&#x5411;&#x306B;&#x62E1;&#x6563;&#x3057;&#x3066;&#x86CD;&#x5149;&#x6A19;&#x8B58;C-16&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x3001;2.2 + /  -  0.2&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EB;&#xFF08;2&#xFF09;&#x306E;&#xFF08;-1&#xFF09;&#x3002;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x306F;&#x307E;&#x305F;0.07 + /&#x306E;&#x898B;&#x304B;&#x3051;&#x306E;&#x62E1;&#x6563;&#x4FC2;&#x6570;&#x3067;&#x3001;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x9577;&#x3055;&#x306B;&#x6CBF;&#x3063;&#x3066;&#x79FB;&#x52D5; -  0.01&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EB;&#xFF08;2&#xFF09;&#x306E;&#xFF08;-1&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x518D;&#x3073;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x3057;&#x3063;&#x304B;&#x308A;&#x3068;&#x305D;&#x308C;&#x3092;&#x9589;&#x3058;&#x8FBC;&#x3081;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3057;&#x3087;&#x3046;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30C7;&#x30A3;&#x30B9;&#x30AF;&#x3002;&#x5916;&#x56E0;&#x7684;&#x306B;&#x6DFB;&#x52A0;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x8EF8;&#x65B9;&#x5411;&#x306E;&#x62E1;&#x6563;&#x4FC2;&#x6570;&#x306F;0.05&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;+ /  -  0.01&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EB;&#xFF08;2&#xFF09;&#x306E;&#xFF08;-1&#xFF09;&#x3002;&#x53D7;&#x52D5;&#x62E1;&#x6563;&#x3068;&#x306E;&#x5951;&#x7D04;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x8EF8;&#x65B9;&#x5411;&#x306E;&#x79FB;&#x52D5;&#x901F;&#x5EA6;&#x306F;&#x3001;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x9577;&#x3055;&#x306E;2&#x4E57;&#x306B;&#x53CD;&#x6BD4;&#x4F8B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x306F;&#x3001;&#x7DCF;&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x819C;&#x306E;&#x7D04;1&#xFF05;&#x3092;&#x5360;&#x3081;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x539F;&#x5F62;&#x8CEA;&#x819C;&#x4E0A;&#x306E;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x62E1;&#x6563;&#x304C;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x3001;&#x8EF8;&#x65B9;&#x5411;&#x306E;&#x62E1;&#x6563;&#x4FC2;&#x6570;&#x306E;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x5024;&#x3092;&#x8003;&#x616E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6A2A;&#x65B9;&#x5411;&#x53CA;&#x3073;&#x8EF8;&#x65B9;&#x5411;&#x306E;&#x62E1;&#x6563;&#x4FC2;&#x6570;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x5024;&#x306F;&#x7121;&#x5236;&#x9650;&#x3068;&#x62C5;&#x4F53;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x79FB;&#x52D5;&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x5185;&#x306E;&#x5168; - &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x8996;&#x899A;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x306E;&#x4ED6;&#x306E;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x3068;&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x5185;&#x306E;&#x5168; - &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x4EFB;&#x610F;&#x306E;&#x7279;&#x6B8A;&#x306A;&#x51E6;&#x7406;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;

&#x687F;&#x4F53;&#x5916;&#x7BC0;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5168;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x53D7;&#x52D5;&#x62E1;&#x6563;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x81EA;&#x5728;&#x306B;&#x79FB;&#x52D5;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC2DC;&#xAC01; &#xC0C9;&#xC18C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; rhodopsin, &#xCC99;&#xCD94; &#xB85C;&#xB4DC; &#xB300;&#xB1CC;&#xC758; &#xBE5B;&#xC744; &#xD761;&#xC218; &#xB418; &#xBA74; &#xBAA8;&#xB4E0;-trans&#xB97C; isomerized 11-cis &#xC544;&#xC774;&#xB9AC;&#xC2A4; moiety&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8; &#xD6C4;, &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD2B8;&#xB79C;&#xC2A4; &#xB9DD;&#xB9C9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB85C;&#xBD80;&#xD130; &#xB098;&#xC654;&#xACE0; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD6A1;&#xB2E8; retinol, &#xC2DC;&#xAC01;&#xC801; &#xC0AC;&#xC774;&#xD074;&#xC744; &#xAD6C;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xC2DC;&#xB9AC;&#xC988;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; rhodopsin&#xC758; &#xBC1C; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC744; &#xC7AC;&#xD65C;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB97C; &#xAC10;&#xC18C;. &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD6A1;&#xB2E8; retinol&#xC758; &#xB18D;&#xB3C4; &#xD615;&#xAD11;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; 2 &#xAD11;&#xC790; &#xC5EC;&#xAE30; &#xC0AC;&#xC6A9; (720 nm) retinol &#xD615;&#xAD11; &#xBC0F; &#xAC1C;&#xAD6C;&#xB9AC; &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD6A1;&#xB2E8; retinol&#xC758; &#xC774;&#xB3D9;&#xC131;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; photobleaching &#xD6C4; &#xD615;&#xAD11; &#xBCF5;&#xAD6C;. Retinol&#xB294; &#xBA85;&#xBC31;&#xD55C; &#xD655;&#xC0B0; &#xACC4;&#xC218;&#xB294; 0.3 &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; m(2) s(-1) &plusmn; 2.5 &#xB514;&#xC2A4;&#xD06C; &#xB9C9; bilayer&#xC5D0;&#xC11C; &#xC606;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xB3D9; rhodopsin &#xD45C;&#xBC31; &#xD6C4; &#xC0DD;&#xC0B0;. Exogenously &#xCD94;&#xAC00; retinol&#xC758; &#xD655;&#xC0B0; &#xACC4;&#xC218;&#xB294; 3.2 &plusmn; 0.5 &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; m(2) s(-1). &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD655;&#xC0B0; &#xACC4;&#xC218; &#xB4E4;&#xC740; &#xC9C0;&#xC9C8;, &#xADF8; retinol &#xB9C9;&#xC758; &#xD3C9;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD6E8;&#xC52C; &#xB290;&#xB9AC;&#xAC8C; &#xD655;&#xC0B0; &#xAC83;&#xC774; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xBC00;&#xC811; &#xD558; &#xAC8C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xC81C;&#xC548;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xAC00;&#xAE4C;&#xC774;&#xC5D0; &#xB3D9;&#xC758;. &#xC774; &#xD574;&#xC11D;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xD615;&#xAD11; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; C-16 &#xC9C0;&#xBC29; &#xC0B0; &#xC131; &#xC606;&#xC73C;&#xB85C;&#xC640; &#xC720;&#xC0AC;&#xD55C; &#xD655;&#xC0B0; &#xACC4;&#xC218;, 0.2 &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; m(2) s(-1) &plusmn; 2.2 &#xD655;&#xC0B0;. Retinol &#xADF8;&#xAC83; &#xBC00;&#xC811; &#xD558; &#xAC8C; &#xB514;&#xC2A4;&#xD06C;&#xC5D0; &#xADF8;&#xAC83;&#xC744; &#xC81C;&#xD55C; &#xAC83;&#xC774; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C;&#xC740; &#xD558;&#xC9C0; &#xC81C;&#xC548; &#xB2E4;&#xC2DC; 0.01 &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; m(2) s(-1) &plusmn; 0.07&#xC758; &#xBA85;&#xBC31;&#xD55C; &#xD655;&#xC0B0; &#xACC4;&#xC218;&#xC640; &#xB85C;&#xB4DC; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xC758; &#xAE38;&#xC774; &#xB530;&#xB77C; &#xC774;&#xB3D9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Exogenously &#xCD94;&#xAC00; retinol&#xC758; &#xCD95; &#xD655;&#xC0B0; &#xACC4;&#xC218;&#xB294; 0.01 &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; m(2) s(-1) &plusmn; 0.05. &#xC218;&#xB3D9; &#xD655;&#xC0B0; &#xACC4;&#xC57D; &#xCD95; &#xC774;&#xB3D9;&#xC758; &#xC18D;&#xB3C4; &#xB9C9;&#xB300; &#xC678;&#xBD80; &#xC120;&#xBD84;&#xC758; &#xAE38;&#xC774;&#xC758; &#xC81C;&#xACF1;&#xC5D0; &#xBC18;&#xBE44;&#xB840; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xCD1D; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8; &#xC678;&#xBD80; &#xB9C9;&#xC758; &#xC57D; 1%&#xB97C; &#xAD6C;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xC6D0;&#xD615;&#xC9C8; &#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xC758; &#xC6D0;&#xD615;&#xC9C8; &#xB9C9;&#xC5D0; retinol&#xC758; &#xBCF4;&#xAE09; &#xCD95; &#xD655;&#xC0B0; &#xACC4;&#xC218; &#xCE21;&#xC815; &#xB41C; &#xAC12;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC27D;&#xAC8C; &#xC124;&#xBA85;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCE21;&#xBA74; &#xBC0F; &#xCD95; &#xD655;&#xC0B0; &#xACC4;&#xC218; &#xAC12;&#xC740; &#xC77C;&#xCE58; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84; &#xBB34;&#xC81C;&#xD55C;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xB3D9; &#xD558;&#xB294; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD6A1;&#xB2E8; retinol&#xC758; &#xCE90;&#xB9AC;&#xC5B4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC2DC;&#xAC01;&#xC801;&#xC778; &#xC8FC;&#xAE30;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC640; &#xB2EC;&#xB9AC; &#xB9C9;&#xB300; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8; &#xB0B4;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD6A1;&#xB2E8; retinol&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD2B9;&#xC218; &#xCC98;&#xB9AC; &#xB420; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAC70;&#xAE30;.

&#xB85C;&#xB4DC; &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD6A1;&#xB2E8; retinol &#xB300; &#xC218;&#xB3D9; &#xD655;&#xC0B0;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC774;&#xB3D9;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La prote&#xED;na de pigmento visual de los fotorreceptores de los bastones de vertebrados, la rodopsina, contiene un resto de 11-cis retinol que se isomeriza a todo-trans sobre la absorci&#xF3;n de la luz. Posteriormente, todo-trans retinal se libera de la prote&#xED;na y reducida a todo-trans retinol, el primer paso en el reciclaje de grupo crom&#xF3;foro rodopsina a trav&#xE9;s de la serie de reacciones que constituyen el ciclo visual. La concentraci&#xF3;n de todo-trans retinol en los segmentos externos de los fotorreceptores pueden ser monitoreados a partir de su fluorescencia. Hemos utilizado dos fotones de excitaci&#xF3;n (720 nm) de vitamina A de fluorescencia y la recuperaci&#xF3;n despu&#xE9;s de fluorescencia photobleaching para caracterizar la movilidad de todo-trans retinol en rana segmentos externos de los fotorreceptores. Retinol producido despu&#xE9;s de rodopsina blanqueamiento mueve lateralmente en la bicapa de la membrana de disco con un coeficiente de difusi&#xF3;n aparente de 2,5 + / - 0,3 micra m (2) s (-1). El coeficiente de difusi&#xF3;n de manera ex&#xF3;gena a&#xF1;adida retinol fue 3,2 + / - 0,5 micra m (2) s (-1). Estos coeficientes de difusi&#xF3;n est&#xE1;n en estrecha concordancia con los obtenidos para los l&#xED;pidos, lo que sugiere que el retinol no est&#xE1; fuertemente unido a los sitios de prote&#xED;nas que ser&#xED;an difusi&#xF3;n mucho m&#xE1;s lentamente en el plano de la membrana. De acuerdo con esta interpretaci&#xF3;n, un fluorescente marcado con C-16 &#xE1;cido graso difundido lateralmente con un coeficiente de difusi&#xF3;n similares, 2,2 + / - 0,2 micra m (2) s (-1). El retinol tambi&#xE9;n movido a lo largo de la longitud del segmento de v&#xE1;stago exterior, con un coeficiente de difusi&#xF3;n aparente de 0,07 + / - 0,01 micra m (2) s (-1), sugiriendo de nuevo que no est&#xE1; fuertemente unido a prote&#xED;nas que se limite a la discos. El coeficiente de difusi&#xF3;n axial de procedencia ex&#xF3;gena retinol fue de 0,05 + / - 0.01 micro m (2) s (-1). De acuerdo con la difusi&#xF3;n pasiva, la tasa de movimiento axial es inversamente proporcional al cuadrado de la longitud del segmento de v&#xE1;stago exterior. La difusi&#xF3;n de retinol en la membrana plasm&#xE1;tica del segmento externo f&#xE1;cilmente puede dar cuenta de que el valor medido del coeficiente de difusi&#xF3;n axial, como la membrana plasm&#xE1;tica comprende aproximadamente 1% del total del segmento exterior de la membrana. Los valores de los coeficientes de difusi&#xF3;n ambos laterales y axiales son consistentes con la mayor parte del retinol todo trans en los segmentos externos que se desplazan sin restricciones y no se une a prote&#xED;nas portadoras. Por lo tanto, y en contraste con otras etapas del ciclo visual, no parece haber ning&#xFA;n procesamiento especializado para todo-trans retinol dentro del segmento de v&#xE1;stago exterior.

Todo-trans retinol en los segmentos externos de los fotorreceptores de varilla mueve sin restricciones por difusi&#xF3;n pasiva

&#x82E5;&#x8981;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x662F;&#x5426;&#x5F62;&#x6210;&#x5168;&#x53CD;&#x5F0F;&#x89C6;&#x9EC4;&#x9187;&#x7684;&#x9650;&#x5236;&#x7684;&#x89C6;&#x89C9;&#x8272;&#x7D20;&#x7684;&#x518D;&#x751F;&#x3002;&#x5168;&#x53CD;&#x5F0F;&#x89C6;&#x9EC4;&#x9187;&#x662F;&#x89C6;&#x89C9;&#x8272;&#x7D20;&#x6F02;&#x767D;&#x901A;&#x8FC7;&#x51CF;&#x5C11;&#x5168;&#x53CD;&#x5F0F;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x4E2D;&#x6D89;&#x53CA; NADPH &#x53CD;&#x5E94;&#x540E;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x51CF;&#x5C11;&#x5F00;&#x59CB;&#x56DE;&#x6536;&#x518D;&#x751F;&#x7684;&#x89C6;&#x8272;&#x7D20;&#x7684;&#x53D1;&#x8272;&#x56E2;&#x3002;

&#x5168;&#x53CD;&#x5F0F;&#x89C6;&#x9EC4;&#x9187;&#x540E;&#x6F02;&#x5728;&#x9F20;&#x6807;&#x611F;&#x5149;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x89C6;&#x8272;&#x7D20;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;

To test whether the formation of all-trans retinol limits the regeneration of the visual pigment. all-trans retinol is formed after visual pigment bleaching through the reduction of all-trans retinal in a reaction involving NADPH. This reduction begins the recycling of the chromophore for the regeneration of the visual pigment.

Formation of all-trans retinol after visual pigment bleaching in mouse photoreceptors.

Pour tester si la formation de r&#xE9;tinol tout-trans limite la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration du pigment visuel. r&#xE9;tinol tout-trans est form&#xE9; apr&#xE8;s pigment visuel de blanchiment gr&#xE2;ce &#xE0; la r&#xE9;duction des tout-trans r&#xE9;tinal dans une r&#xE9;action impliquant NADPH. Cette r&#xE9;duction commence le recyclage du chromophore pour la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration du pigment visuelle.

Formation de r&#xE9;tinol tout-trans Apr&#xE8;s pigment visuel Blanchiment dans les photor&#xE9;cepteurs de la souris

Testen Sie, ob die Bildung von All-Trans-Retinol die Regeneration das Sehpigment begrenzt. All-Trans-Retinol wird nach dem Sehpigment bleichen durch die Verringerung von All-Trans-Retinal in einer Reaktion mit NADPH gebildet. Diese Reduktion beginnt das recycling von den Chromophor zur Regeneration von dem Sehpigment.

Bildung von All-Trans-Retinol nach Sehpigment bleichen in Maus Photorezeptoren.

Per verificare se la formazione di tutto-trans retinolo limita la rigenerazione del pigmento visivo. tutto-trans retinolo &egrave; formata dopo il pigmento visivo sbiancamento attraverso la riduzione di tutto-trans retinale in una reazione che coinvolge il NADPH. Questa riduzione inizia il riciclaggio del cromoforo per la rigenerazione del pigmento visivo.

Formazione di retinolo tutto-trans dopo il pigmento visivo sbianca in fotorecettori del mouse.

&#x5168; - &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306F;&#x3001;&#x8996;&#x899A;&#x8272;&#x7D20;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x3092;&#x5236;&#x9650;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3092;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5168; - &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;NADPH&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5168;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CA;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x9084;&#x5143;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x6F02;&#x767D;&#x8996;&#x899A;&#x8272;&#x7D20;&#x5F8C;&#x306B;&#x5F62;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306F;&#x3001;&#x8996;&#x899A;&#x8272;&#x7D20;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x767A;&#x8272;&#x56E3;&#x306E;&#x30EA;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x3092;&#x958B;&#x59CB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x8996;&#x899A;&#x8272;&#x7D20;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x5149;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3067;&#x6F02;&#x767D;&#x3057;&#x305F;&#x5F8C;&#x5168;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;

&#xC2DC;&#xAC01; &#xC0C9;&#xC18C; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC744; &#xC81C;&#xD55C; &#xD558;&#xB294; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD6A1;&#xB2E8; retinol&#xC758; &#xD615;&#xC131; &#xC5EC;&#xBD80;&#xB97C; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD6A1;&#xB2E8; retinol &#xC2DC;&#xAC01; &#xC0C9;&#xC18C; &#xBC18;&#xC751; NADPH&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD2B8;&#xB79C;&#xC2A4; &#xB9DD;&#xB9C9;&#xC758; &#xAC10;&#xC18C;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xD45C;&#xBC31; &#xD6C4; &#xD615;&#xC131; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xAC10;&#xC18C; &#xC2DC;&#xC791; &#xC2DC;&#xAC01; &#xC0C9;&#xC18C; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xBC1C;&#xC744; &#xC7AC;&#xD65C;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD45C;&#xBC31; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xB300;&#xB1CC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DC;&#xAC01; &#xC0C9;&#xC18C; &#xD6C4; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD6A1;&#xB2E8; retinol&#xC758; &#xD615;&#xC131;.

Para probar si la formaci&#xF3;n de todo-trans retinol limita la regeneraci&#xF3;n del pigmento visual. todo-trans retinol se form&#xF3; despu&#xE9;s de pigmento visual de blanqueo a trav&#xE9;s de la reducci&#xF3;n de todo-trans retinal en una reacci&#xF3;n que implica NADPH. Esta reducci&#xF3;n se inicia el reciclaje del crom&#xF3;foro para la regeneraci&#xF3;n del pigmento visual.

La formaci&#xF3;n de todo-trans retinol Despu&#xE9;s de pigmento visual de blanqueo de fotorreceptores de rat&#xF3;n

&#x82E5;&#x8981;&#x786E;&#x5B9A;&#x662F;&#x5426;&#x975E;&#x86CB;&#x767D;&#x4EB2;&#x8102;&#x6027;&#x627F;&#x8FD0;&#x4EBA;&#xFF0C;2-&#x7F9F;&#x4E19;&#x57FA;-&beta;-&#x73AF;&#x7CCA;&#x7CBE; (HP-&beta;-CD)&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4ECE;&#x6746;&#x611F;&#x5149;&#x5668;&#x5916;&#x6BB5;&#x5220;&#x9664;&#x5168;&#x53CD;&#x5F0F;&#x89C6;&#x9EC4;&#x9187;&#x3002;&#x5168;&#x53CD;&#x5F0F;&#x89C6;&#x9EC4;&#x9187;&#x4E2D;&#x6746;&#x5916;&#x6BB5;&#x5149;&#x7167;&#x5C04;&#x540E;&#x4F1A;&#x751F;&#x6210;&#x3002;&#x5B83;&#x662F;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x4E0D;&#x6EB6;&#x6027;&#xFF0C;&#x548C;&#x8DE8;&#x989D;&#x5916;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x7684;&#x6C34;&#x7A7A;&#x95F4;&#x53CA;&#x5176;&#x9AD8;&#x6548;&#x7387;&#x7684;&#x8FD0;&#x8F93;&#x9700;&#x8981;&#x4E13;&#x95E8;&#x7684;&#x8FD0;&#x8425;&#x5546;&#x3002;

2-&#x7F9F;&#x4E19;&#x57FA;-&beta;-&#x73AF;&#x7CCA;&#x7CBE;&#x6D53;&#x5EA6;&#x4F9D;&#x8D56;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x4ECE;&#x9752;&#x86D9;&#x6746;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x4E2D;&#x79FB;&#x9664;&#x5168;&#x53CD;&#x5F0F;&#x89C6;&#x9EC4;&#x9187;&#x3002;

To determine whether a nonprotein lipophilic carrier, 2-hydroxypropyl-beta-cyclodextrin (HP-beta-CD), can remove all-trans retinol from rod photoreceptor outer segments. All-trans retinol is generated in rod outer segments after light exposure. It is highly insoluble, and its efficient transport across extra- and intracellular aqueous space requires specialized carriers.

2-Hydroxypropyl-beta-cyclodextrin removes all-trans retinol from frog rod photoreceptors in a concentration-dependent manner.

Pour d&#xE9;terminer si un transporteur non prot&#xE9;ique lipophile, 2-hydroxypropyl-b&#xEA;ta-cyclodextrine (HP-b&#xEA;ta-CD), peut retirer tout-trans r&#xE9;tinol &#xE0; partir de segments photor&#xE9;cepteurs barreau ext&#xE9;rieures. R&#xE9;tinol tout-trans est g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9;e en segments de tige ext&#xE9;rieur apr&#xE8;s exposition &#xE0; la lumi&#xE8;re. Il est fortement insoluble, et son transport efficace dans l&#x26;#39;espace extra-aqueuse et intracellulaire n&#xE9;cessite des transporteurs sp&#xE9;cialis&#xE9;s.

2-hydroxypropyl-b&#xEA;ta-cyclodextrine Supprime r&#xE9;tinol tout-trans de photor&#xE9;cepteurs Rod grenouille dans une mani&#xE8;re dose-d&#xE9;pendante

Um festzustellen, ob ein Nonprotein lipophile Tr&auml;ger, k&ouml;nnen 2-Hydroxypropyl-Beta-Cyclodextrin (HP-Beta-CD), All-Trans-Retinol aus entfernen Stab Photorezeptor &auml;u&szlig;eren Segmente. All-Trans-Retinol wird im Stab &auml;u&szlig;eren Segmente nach Lichtexposition generiert. Es ist sehr schwer wasserl&ouml;slich und der effiziente Transport &uuml;ber extra- und intrazellul&auml;re w&auml;ssrigen Raum erfordert spezielle Tr&auml;ger.

2-Hydroxypropyl-Beta-Cyclodextrin entfernt Frosch Stab Photorezeptoren Konzentration-abh&auml;ngigen Weise All-Trans-Retinol.

Per determinare se un vettore lipofile nonprotein, 2-idrossipropil-beta-ciclodestrina (HP-beta-CD), pu&ograve; rimuovere tutto-trans retinolo da segmenti esterni asta fotorecettore. Tutto-trans retinolo viene generato in segmenti di canna esterna dopo esposizione alla luce. &Egrave; altamente insolubile, e relativo trasporto efficiente attraverso extra - ed intracellulare spazio acquoso richiede vettori specializzati.

2-Idrossipropil-beta-ciclodestrina rimuove tutto-trans retinolo da fotorecettori rod rana in modo concentrazione-dipendente.

&#x975E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x6027;&#x89AA;&#x6CB9;&#x6027;&#x30AD;&#x30E3;&#x30EA;&#x30A2;&#x3001;2  - &#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x30AD;&#x30B7;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D4;&#x30EB;-&#x3B2;-&#x30B7;&#x30AF;&#x30ED;&#x30C7;&#x30AD;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3;&#xFF08;HP-&#x3B2;-CD&#xFF09;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3092;&#x5224;&#x65AD;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x687F;&#x4F53;&#x5916;&#x7BC0;&#x304B;&#x3089;&#x5168;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x524A;&#x9664;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5168; - &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x9732;&#x5149;&#x5F8C;&#x306E;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#x306E;&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306B;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x4E0D;&#x6EB6;&#x6027;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x4F59;&#x5206;&#x306A;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x6C34;&#x7A7A;&#x9593;&#x3092;&#x8D8A;&#x3048;&#x3066;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x8F38;&#x9001;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x6B8A;&#x306A;&#x30AD;&#x30E3;&#x30EA;&#x30A2;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

2  - &#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x30AD;&#x30B7;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D4;&#x30EB;-&#x3B2;-&#x30B7;&#x30AF;&#x30ED;&#x30C7;&#x30AD;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3;&#x306F;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x4F9D;&#x5B58;&#x7684;&#x306B;&#x30AB;&#x30A8;&#x30EB;&#x687F;&#x200B;&#x200B;&#x4F53;&#x304B;&#x3089;&#x5168;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x524A;&#x9664;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Nonprotein &#xBE14;&#xB808;&#xBBF8;&#xC26C; &#xCE90;&#xB9AC;&#xC5B4; &#xC788;&#xB294;&#xC9C0; &#xC5EC;&#xBD80;&#xB97C; &#xD655;&#xC778; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; 2-&#xC5EC;&#xAE30;-&#xBCA0;&#xD0C0;-cyclodextrin (HP-&#xBCA0;&#xD0C0;-CD) &#xB85C;&#xB4DC; &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD6A1;&#xB2E8; retinol&#xB97C; &#xC81C;&#xAC70;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD6A1;&#xB2E8; retinol &#xBE5B; &#xB178;&#xCD9C; &#xD6C4; &#xB9C9;&#xB300; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xC0DD;&#xC131; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC131; &#xD558;&#xBA70; &#xCD94;&#xAC00; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xC218;&#xC131; &#xACF5;&#xAC04; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xC804;&#xC1A1; &#xC804;&#xBB38;&#xB41C; &#xC0AC;&#xC5C5;&#xC790;.

2 &#xC5EC;&#xAE30; &#xBCA0;&#xD0C0; cyclodextrin &#xB18D;&#xB3C4; &#xC758;&#xC874; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC1C;&#xAD6C;&#xB9AC; &#xB9C9;&#xB300; &#xB300;&#xB1CC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD6A1;&#xB2E8; retinol&#xC744; &#xC81C;&#xAC70;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Para determinar si un portador proteico lip&#xF3;filo, 2-hidroxipropil-beta-ciclodextrina (HP-beta-CD), puede eliminar todo-trans retinol a partir de barras de los segmentos externos de los fotorreceptores. Todo-trans retinol se genera en los segmentos de barras exteriores despu&#xE9;s de la exposici&#xF3;n a la luz. Es muy insoluble, y su transporte eficiente a trav&#xE9;s del espacio acuoso extra e intracelular obliga a las compa&#xF1;&#xED;as especializadas.

2-hidroxipropil-beta-ciclodextrina Elimina todo-trans retinol de fotorreceptores de los bastones de la rana en una forma dependiente de concentraci&#xF3;n

&#x5168;&#x53CD;&#x5F0F;&#x89C6;&#x9EC4;&#x9187;&#x662F;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x6746;&#x4ECE;&#x5168;&#x53CD;&#x5F0F;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x7684;&#x89C6;&#x7D2B;&#x7EA2;&#x8D28;&#x5149;&#x6D3B;&#x5316;&#x91CA;&#x653E;&#x51CF;&#x5C11;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x7684;&#x611F;&#x5149;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5916;&#x6BB5;&#x4E2D;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x3002;&#x51CF;&#x5C11;&#x9700;&#x8981; NADPH&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4EE3;&#x8C22;&#x7684;&#x8F93;&#x5165;&#x3002;&#x5728;&#x65B0;&#x9648;&#x4EE3;&#x8C22;&#x5B8C;&#x597D;&#x65E0;&#x635F;&#x7684;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#xFF0C;&#x5927;&#x63D0;&#x9AD8;&#x6746;&#x5916;&#x90E8;&#x5206;&#x8367;&#x5149;&#x3001; &#x5F52;&#x56E0;&#x4E8E;&#x5168;&#x53CD;&#x5F0F;&#x89C6;&#x9EC4;&#x9187;&#x7684;&#x8367;&#x5149;&#xFF0C;&#x9075;&#x5FAA;&#x8C03;&#x4EA1;&#x7684;&#x89C6;&#x7D2B;&#x7EA2;&#x8D28;&#x3002;&#x8367;&#x5149;&#x589E;&#x52A0;&#x662F;&#x53CC;&#x76F8;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x4E00;&#x79CD;&#x5FEB;&#x901F;&#x548C;&#x7F13;&#x6162;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7EC4;&#x6210;&#x90E8;&#x5206;&#x3002;&#x65B0;&#x9648;&#x4EE3;&#x8C22;&#x88AB;&#x7834;&#x574F;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x662F;&#x4E4B;&#x540E;&#xFF0C;&#x89C6;&#x7D2B;&#x7EA2;&#x8D28;&#x8C03;&#x4EA1;&#x7684;&#x8981;&#x5C0F;&#x5F97;&#x591A;&#x7684;&#x8367;&#x5149;&#x589E;&#x52A0;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5B83;&#x4E5F;&#x5305;&#x542B;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5FEB;&#x901F;&#x7684;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x6D4B;&#x91CF;&#x4E86;&#x5728;&#x5355;&#x4E2A;&#x6D3B;&#x9752;&#x86D9;&#x7684;&#x8367;&#x5149;&#x4FE1;&#x53F7;&#x548C;&#x9F20;&#x6807;&#x6746;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5177;&#x6709;&#x7279;&#x70B9;&#x5BF9;&#x9009;&#x5B9A;&#x7684;&#x52B1;&#x78C1;&#x548C;&#x6536;&#x96C6;&#x6392;&#x653E;&#x7684;&#x5149;&#x7684;&#x6CE2;&#x957F;&#x7684;&#x4F9D;&#x8D56;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x65B0;&#x9648;&#x4EE3;&#x8C22;&#x4FDD;&#x6301;&#x4E0D;&#x53D8;&#xFF0C;&#x6FC0;&#x53D1;&#x548C;&#x53D1;&#x5C04;&#x7684;&#x8367;&#x5149;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x5FEB;&#x901F;&#x548C;&#x6162;&#x901F;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x5C5E;&#x6027;&#x662F;&#x4E0E;&#x90A3;&#x4E9B;&#x5168;&#x53CD;&#x5F0F;&#x89C6;&#x9EC4;&#x9187;&#x8367;&#x5149;&#x5BC6;&#x5207;&#x534F;&#x8BAE;&#x4E2D;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x65B0;&#x9648;&#x4EE3;&#x8C22;&#x53D7;&#x635F;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4FE1;&#x53F7;&#x53EF;&#x80FD;&#x53EA;&#x662F;&#x90E8;&#x5206;&#x5730;&#x662F;&#x7531;&#x4E8E;&#x5168;&#x53CD;&#x5F0F;&#x89C6;&#x9EC4;&#x9187;&#xFF0C;&#x548C;&#x5927;&#x90E8;&#x5206;&#x90FD;&#x662F;&#x7B26;&#x5408;&#x5168;&#x53CD;&#x5F0F;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x3002;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x5916;&#x5404;&#x9636;&#x5C42;&#x7684;&#x751F;&#x6D3B;&#x4E2D;&#x6709;&#x7684;&#x5168;&#x53CD;&#x5F0F;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x65B0;&#x9648;&#x4EE3;&#x8C22;&#x5B8C;&#x6574;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F34;&#x968F;&#x7740;&#x5FEB;&#x901F;&#x8F6C;&#x6362;&#x4E3A;&#x5168;&#x53CD;&#x5F0F;&#x89C6;&#x9EC4;&#x9187;&#x7684;&#x5FEB;&#x901F;&#x91CA;&#x653E;&#x6746;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x3002;

&#x5168;&#x53CD;&#x5F0F;&#x89C6;&#x9EC4;&#x9187;&#x540E;&#x6F02;&#x767D;&#x9752;&#x86D9;&#x548C;&#x9F20;&#x6807;&#x6746;&#x611F;&#x5149;&#x5668;&#x5916;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x5FEB;&#x901F;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;

All-trans retinol is formed in the outer segments of vertebrate rod photoreceptors from the reduction of the all-trans retinal released by photoactivated rhodopsin. The reduction requires NADPH and is therefore dependent on metabolic input. In metabolically intact photoreceptors, a large increase in rod outer segment fluorescence, attributed to the fluorescence of all-trans retinol, follows rhodopsin photoactivation. The fluorescence increase is biphasic, including a rapid and a slow component. In metabolically compromised cells, there is a much smaller fluorescence increase following rhodopsin photoactivation, but it too contains a rapid component. We have measured the fluorescence signal in single living frog and mouse rod photoreceptors, and have characterized its dependence on the wavelengths of light selected for excitation and for collecting emission. We find that in metabolically intact cells, the excitation and emission properties of both the rapid and slow components of the fluorescence signal are in close agreement with those of all-trans retinol fluorescence. In metabolically compromised cells, however, the signal can only partially be due to all-trans retinol, and most of it is consistent with all-trans retinal. The results suggest that in the outer segments of living rod photoreceptors there is rapid release of all-trans retinal, which in metabolically intact cells is accompanied by rapid conversion to all-trans retinol.

Rapid formation of all-trans retinol after bleaching in frog and mouse rod photoreceptor outer segments.

R&#xE9;tinol tout-trans est form&#xE9; dans les segments ext&#xE9;rieurs de photor&#xE9;cepteurs tige vert&#xE9;br&#xE9;s de la r&#xE9;duction de la r&#xE9;tine tout-trans lib&#xE9;r&#xE9; par photoactiv&#xE9; rhodopsine. La r&#xE9;duction exige le NADPH et est donc d&#xE9;pendant d&#x26;#39;un apport m&#xE9;tabolique. En m&#xE9;taboliquement photor&#xE9;cepteurs intactes, une forte augmentation de la fluorescence tige segment externe, attribu&#xE9;e &#xE0; la fluorescence de r&#xE9;tinol tout-trans, suit photoactivation rhodopsine. L&#x26;#39;augmentation de fluorescence est biphasique, y compris une r&#xE9;ponse rapide et une composante lente. Dans les cellules m&#xE9;taboliquement compromis, il ya une augmentation de fluorescence beaucoup plus faible &#xE0; la suite photoactivation rhodopsine, mais il contient aussi une composante rapide. Nous avons mesur&#xE9; le signal de fluorescence en grenouille vivante unique et photor&#xE9;cepteurs tige de souris, et ont caract&#xE9;ris&#xE9; sa d&#xE9;pendance sur les longueurs d&#x26;#39;onde de la lumi&#xE8;re s&#xE9;lectionn&#xE9;s pour l&#x26;#39;excitation et d&#x26;#39;&#xE9;mission pour la collecte. Nous constatons que dans les cellules m&#xE9;taboliquement intactes, les propri&#xE9;t&#xE9;s d&#x26;#39;excitation et d&#x26;#39;&#xE9;mission de deux des composantes rapide et lente du signal de fluorescence sont en accord &#xE9;troit avec ceux de r&#xE9;tinol tout-trans fluorescence. Dans les cellules m&#xE9;taboliquement compromis, cependant, le signal ne peut que partiellement &#xEA;tre due &#xE0; r&#xE9;tinol tout-trans, et la plupart de celui-ci est compatible avec tous les trans-r&#xE9;tinienne. Les r&#xE9;sultats sugg&#xE8;rent que dans les segments externes des photor&#xE9;cepteurs tige qui y vivent est la lib&#xE9;ration rapide de tous les trans-r&#xE9;tinienne, qui, dans les cellules m&#xE9;taboliquement intactes est accompagn&#xE9; d&#x26;#39;une conversion rapide &#xE0; tous les trans-r&#xE9;tinol.

Formation rapide de r&#xE9;tinol tout-trans Apr&#xE8;s Blanchiment des grenouilles et des souris Rod photor&#xE9;cepteur segments ext&#xE9;rieurs

All-Trans-Retinol ist die &auml;u&szlig;eren Segmente des vertebrate Stab Photorezeptoren aus der Reduzierung der All-Trans-Retinal, ver&ouml;ffentlicht von Photoactivated Rhodopsin gebildet. Die Reduktion NADPH ben&ouml;tigt und ist daher abh&auml;ngig von metabolischen Eingang. In metabolisch intakten Photorezeptoren eine gro&szlig;e Zunahme der Stab &auml;u&szlig;ere Segment Fluoreszenz, zur&uuml;ckzuf&uuml;hren auf die Fluoreszenz von All-Trans-Retinol, Rhodopsin Photoaktivierung folgt. Die Fluoreszenz-Erh&ouml;hung wird biphasische, z. B. eine schnelle und eine langsame Komponente. In metabolisch befallenen Zellen, gibt es eine viel kleinere Fluoreszenz-Zuwachs nach Rhodopsin Photoaktivierung, aber es enth&auml;lt auch eine rasche Komponente. Wir haben gemessen, das Fluoreszenz-Signal im einzigen lebenden Frosch und Maus Stab Photorezeptoren und seine Abh&auml;ngigkeit von den Wellenl&auml;ngen des Lichts, die ausgew&auml;hlte f&uuml;r Erregung und zum Sammeln von Emission gepr&auml;gt haben. Wir finden, dass in metabolisch intakten Zellen, die Anregungs- und Eigenschaften der schnellen und langsamen Komponenten der das Fluoreszenz-Signal in enger Abstimmung mit denen des All-Trans Retinol Fluoreszenz. In metabolisch befallenen Zellen jedoch das Signal kann nur teilweise an den All-Trans-Retinol liegen, und das meiste davon steht im Einklang mit All-Trans-Retinal. Die Ergebnisse legen nahe, dass in die &auml;u&szlig;eren Segmente des Lebens Stab Photorezeptoren gibt es schnelle Freisetzung von All-Trans-Retinal, die in metabolisch intakte Zellen durch rasche Umstellung auf All-Trans-Retinol begleitet wird.

Schnelle Bildung von All-Trans-Retinol nach Frosch Maus Stab Photorezeptor &auml;u&szlig;eren Segmente und Bleichen.

Tutto-trans retinolo &egrave; formata nei segmenti esterni dei fotorecettori vertebrati asta dalla riduzione del tutto-trans retinale rilasciato da photoactivated rodopsina. La riduzione richiede NADPH e dipende quindi da input metabolico. In fotorecettori metabolicamente intatti, un grande aumento della fluorescenza del segmento esterno rod, attribuita a fluorescenza di tutto-trans retinolo, segue photoactivation rodopsina. L&#39;incremento di fluorescenza &egrave; bifasico, compreso un rapido e una componente lenta. Nelle cellule metabolicamente compromesse, c&#39;&egrave; un molto pi&ugrave; piccolo aumento di fluorescenza segue photoactivation rodopsina, ma contiene anche una componente rapida. Noi abbiamo misurato il segnale di fluorescenza in vita singola rana e fotorecettori asta il mouse e hanno caratterizzato la sua dipendenza dalle lunghezze d&#39;onda di luce selezionata per l&#39;eccitazione e per la raccolta delle emissioni. Troviamo che nelle cellule metabolicamente intatte, le propriet&agrave; di eccitazione e di emissione dei componenti veloce e lente del segnale di fluorescenza sono in stretto accordo con quelli di fluorescenza di retinolo tutto-trans. Nelle cellule metabolicamente compromesse, tuttavia, il segnale pu&ograve; essere solo parzialmente a causa di tutto-trans retinolo, e la maggior parte di esso &egrave; coerente con tutto-trans retinale. I risultati suggeriscono che nei segmenti esterni dei viventi fotorecettori asta c&#39;&egrave; il rilascio rapido di tutto-trans retinale, che nelle cellule metabolicamente intatte &egrave; accompagnato dalla rapida conversione a retinolo tutto-trans.

Rapida formazione di retinolo tutto-trans dopo lo sbiancamento in rana e mouse rod fotorecettore esterni segmenti.

&#x5168; - &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x5149;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30ED;&#x30C9;&#x30D7;&#x30B7;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CA;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x304B;&#x3089;&#x3001;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x687F;&#x4F53;&#x306E;&#x5916;&#x7BC0;&#x306B;&#x5F62;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306F;NADPH&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x5165;&#x529B;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x7684;&#x306B;&#x7121;&#x50B7;&#x306E;&#x5149;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#x306E;&#x5916;&#x5074;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x306E;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x5897;&#x52A0;&#x306F;&#x3001;&#x5168; - &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3057;&#x3001;&#x30ED;&#x30C9;&#x30D7;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x5149;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x6B21;&#x306E;&#x3068;&#x304A;&#x308A;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x86CD;&#x5149;&#x5897;&#x52A0;&#x304C;&#x6025;&#x901F;&#x3068;&#x4F4E;&#x901F;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3001;&#x4E8C;&#x76F8;&#x6027;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x7684;&#x306B;&#x59A5;&#x5354;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x3053;&#x306B;&#x30ED;&#x30C9;&#x30D7;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x5149;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x5F8C;&#x306B;&#x306F;&#x308B;&#x304B;&#x306B;&#x5C0F;&#x3055;&#x3044;&#x86CD;&#x5149;&#x5897;&#x52A0;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x3042;&#x307E;&#x308A;&#x306B;&#x3082;&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x751F;&#x304D;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30AB;&#x30A8;&#x30EB;&#x3084;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x687F;&#x4F53;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x3001;&#x52B1;&#x8D77;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x653E;&#x5C04;&#x3092;&#x53CE;&#x96C6;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x9078;&#x629E;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5149;&#x306E;&#x6CE2;&#x9577;&#x3078;&#x306E;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x7684;&#x306B;&#x7121;&#x50B7;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x3001;&#x86CD;&#x5149;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x306E;&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x3086;&#x3063;&#x304F;&#x308A;&#x3068;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x52B1;&#x8D77;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x767A;&#x5149;&#x7279;&#x6027;&#x304C;&#x5168;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x86CD;&#x5149;&#x306E;&#x3082;&#x306E;&#x3068;&#x307B;&#x307C;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x7684;&#x306B;&#x59A5;&#x5354;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x4FE1;&#x53F7;&#x304C;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306B;&#x3057;&#x304B;&#x5168; - &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306E;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306F;&#x30AA;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CA;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;&#x4E00;&#x8CAB;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x304D;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x687F;&#x4F53;&#x306E;&#x5916;&#x7BC0;&#x306B;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x7121;&#x50B7;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x4E2D;&#x306E;&#x5168;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x3078;&#x306E;&#x8FC5;&#x901F;&#x306A;&#x5909;&#x63DB;&#x3092;&#x4F34;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5168;&#x30C8;&#x200B;&#x200B;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CA;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x3053;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x30AB;&#x30A8;&#x30EB;&#x3068;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x687F;&#x4F53;&#x5916;&#x7BC0;&#x3067;&#x6F02;&#x767D;&#x3057;&#x305F;&#x5F8C;&#x5168;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x5F62;&#x6210;

&#xBAA8;&#xB4E0; &#xD6A1;&#xB2E8; retinol photoactivated rhodopsin &#xBC1C;&#xD45C; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD2B8;&#xB79C;&#xC2A4; &#xB9DD;&#xB9C9;&#xC758; &#xAC10;&#xC18C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCC99;&#xCD94; &#xB85C;&#xB4DC; &#xB300;&#xB1CC;&#xC758; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD615;&#xC131; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC10;&#xC18C; NADPH&#xB97C; &#xC694;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xB300;&#xC0AC; &#xC785;&#xB825;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;. Metabolically &#xADF8;&#xB300;&#xB85C; &#xB300;&#xB1CC;&#xC5D0; &#xD070; &#xC99D;&#xAC00; &#xB9C9;&#xB300; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8; &#xD615;&#xAD11;, &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD6A1;&#xB2E8; retinol&#xC758; &#xD615;&#xAD11;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC778;, rhodopsin photoactivation &#xB2E4;&#xC74C;&#xACFC; &#xAC19;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD615;&#xAD11; &#xC99D;&#xAC00; &#xBE60;&#xB978; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB290;&#xB9B0; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xB098;&#xC544;&#xC84C;&#xB2E4;. Metabolically &#xC190;&#xC0C1; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xB294; rhodopsin photoactivation&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xD6E8;&#xC52C; &#xC791;&#xC740; &#xD615;&#xAD11; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB108;&#xBB34; &#xBE60;&#xB978; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD558;&#xB098;&#xC758; &#xC0B4;&#xC544;&#xC788;&#xB294; &#xAC1C;&#xAD6C;&#xB9AC;&#xC758; &#xD615;&#xAD11; &#xC2E0;&#xD638; &#xCE21;&#xC815; &#xBC0F; &#xB9C9;&#xB300; &#xB300;&#xB1CC;, &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC5EC;&#xAE30; &#xBC0F; &#xBC29;&#xCD9C; &#xC218;&#xC9D1;&#xC744; &#xC120;&#xD0DD; &#xD558;&#xB294; &#xBE5B;&#xC758; &#xD30C;&#xC7A5;&#xC5D0;&#xC758; &#xC758;&#xC874;&#xB3C4; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; metabolically &#xADF8;&#xB300;&#xB85C; &#xC140;&#xC5D0; &#xD615;&#xAD11; &#xC2E0;&#xD638;&#xC758; &#xBE60;&#xB974;&#xACE0; &#xB290;&#xB9B0; &#xAD6C;&#xC131;&#xC758; &#xC5EC;&#xAE30; &#xBC0F; &#xBC29;&#xCD9C; &#xC18D;&#xC131; &#xADF8; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD6A1;&#xB2E8; retinol &#xD615;&#xAD11; &#xAC00;&#xAE4C;&#xC6B4; &#xACC4;&#xC57D;&#xC5D0;&#xB294; &#xCC3E;&#xC73C;&#xC2ED;&#xC2DC;&#xC624;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; metabolically &#xC190;&#xC0C1; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0;&#xD638; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD6A1;&#xB2E8; retinol, &#xBD80;&#xBD84;&#xC801; &#xC73C;&#xB85C;&#xB9CC; &#xC218;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC740; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD2B8;&#xB79C;&#xC2A4; &#xB9DD;&#xB9C9;&#xACFC; &#xC77C;&#xCE58;. &#xACB0;&#xACFC; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xC0DD;&#xD65C;&#xC758; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xB85C;&#xB4DC; &#xB300;&#xB1CC; metabolically &#xADF8;&#xB300;&#xB85C; &#xC140;&#xC5D0; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD6A1;&#xB2E8; retinol&#xC5D0; &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xAC8C; &#xBCC0;&#xD658; &#xD558; &#xC5EC; &#xD568;&#xAED8; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD2B8;&#xB79C;&#xC2A4; &#xB9DD;&#xB9C9;&#xC758; &#xC2E0;&#xC18D;&#xD55C; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xAC1C;&#xAD6C;&#xB9AC;&#xC640; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xB85C;&#xB4DC; &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xD45C;&#xBC31; &#xD6C4; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD6A1;&#xB2E8; retinol&#xC758; &#xBE60;&#xB978; &#xD615;&#xC131;.

Todo-trans retinol se form&#xF3; en los segmentos externos de fotorreceptores vertebrados a partir de la reducci&#xF3;n de la retina todo-trans liberado por fotoactivada rodopsina. La reducci&#xF3;n requiere NADPH y por lo tanto depende de una fuente metab&#xF3;lica. En los fotorreceptores metab&#xF3;licamente intactos, un gran aumento en la fluorescencia varilla segmento exterior, atribuida a la fluorescencia de todo-trans-retinol, sigue fotoactivaci&#xF3;n rodopsina. El aumento de la fluorescencia es bif&#xE1;sica, incluyendo un r&#xE1;pido y un componente lento. En c&#xE9;lulas metab&#xF3;licamente comprometidas, hay un aumento de fluorescencia mucho menor despu&#xE9;s de la fotoactivaci&#xF3;n rodopsina, pero tambi&#xE9;n contiene un componente r&#xE1;pido. Hemos medido la se&#xF1;al de fluorescencia en rana viviente y fotorreceptores de rat&#xF3;n de varilla, y se han caracterizado su dependencia de las longitudes de onda de luz seleccionadas para la excitaci&#xF3;n y emisi&#xF3;n de recogida. Encontramos que en las c&#xE9;lulas metab&#xF3;licamente intactas, las propiedades de excitaci&#xF3;n y emisi&#xF3;n de los componentes tanto r&#xE1;pidos y lentos de la se&#xF1;al de fluorescencia se encuentran en estrecha concordancia con los de todo-trans retinol fluorescencia. En c&#xE9;lulas metab&#xF3;licamente comprometidas, sin embargo, la se&#xF1;al puede ser s&#xF3;lo parcialmente debido a todo-trans retinol, y la mayor parte es coherente con todo-trans retinal. Los resultados sugieren que en los segmentos externos de fotorreceptores de varilla que viven hay una liberaci&#xF3;n r&#xE1;pida de todo-trans retinal, que en metab&#xF3;licamente las c&#xE9;lulas intactas est&#xE1; acompa&#xF1;ada por una r&#xE1;pida conversi&#xF3;n a todo-trans retinol.

Formaci&#xF3;n r&#xE1;pida de todo-trans retinol despu&#xE9;s del blanqueo de la rana y el rat&#xF3;n Rod segmentos externos de fotorreceptores

El aldeh&#xED;do reactivo todo-trans retinal se libera en los segmentos externos de los fotorreceptores de varilla por fotoactivado rodopsina y se elimina a trav&#xE9;s de la reducci&#xF3;n de todo-trans-retinol. Este estudio se realiz&#xF3; para determinar si la formaci&#xF3;n de todo-trans retinol depende de ABCA4, arrestina, rodopsina quinasa, y la palmitylation de la rodopsina, todos los cuales son factores que afectan a la liberaci&#xF3;n y el secuestro de todo-trans retinal.

Rod segmento externo Formaci&#xF3;n El retinol es independiente de ABCA4, arrestina, rodopsina quinasa, y Palmitylation rodopsina

&#xC0AC;&#xD6C4; &#xC54C;&#xB370;&#xD558;&#xC774;&#xB4DC; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD2B8;&#xB79C;&#xC2A4; &#xB9DD;&#xB9C9; photoactivated rhodopsin &#xB85C;&#xB4DC; &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xD45C; &#xD558; &#xACE0; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD6A1;&#xB2E8; retinol&#xC5D0; &#xAC10;&#xC18C;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC81C;&#xAC70;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD6A1;&#xB2E8; retinol &#xD615;&#xC131; Abca4, arrestin rhodopsin &#xB2C8; &#xD558; &#xACE0;&#xB294; &#xBAA8;&#xB450; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xBC0F; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD2B8;&#xB79C;&#xC2A4; &#xB9DD;&#xB9C9;&#xC758; &#xACA9;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC8FC;&#xB294; &#xC694;&#xC778; rhodopsin&#xC758; palmitylation&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC5EC;&#xBD80; &#xACB0;&#xC815;&#xC5D0; &#xCC29;&#xC218; &#xD588;&#xB2E4;.

&#xB9C9;&#xB300; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8; retinol &#xD615;&#xC131; arrestin rhodopsin &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; &#xBC0F; rhodopsin palmitylation abca4&#xC758; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Chunhe Chen

Storm Eye Institute

Medical University of South Carolina

Preparation of Living Isolated Vertebrate Photoreceptor Cells for Fluorescence Imaging

Chunhe Chen

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Storm Eye Institute

Medical University of South Carolina

Preparation of Living Isolated Vertebrate Photoreceptor Cells for Fluorescence Imaging

Storm Eye Institute