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Multiphoton Microscopy of Cleared Mouse Brain Expressing YFP

Multiphoton microscopy of intrinsic fluorescence and second harmonic generation (SHG) of whole mouse organs is made possible by optically clearing the ...

Yale University

Louisiana Tech University

&#x6D77;&#x9A6C; &gamma; &#x632F;&#x8361;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x79CD;&#x5F62;&#x5F0F;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7F51;&#x7EDC;&#x540C;&#x6B65;&#x88AB;&#x63A8;&#x6D4B;&#x8981;&#x4E0E;&#x5B66;&#x4E60;&#x3001; &#x8BB0;&#x5FC6;&#x548C;&#x6CE8;&#x610F;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x70DF;&#x78B1;&#x578B;&#x4E59;&#x9170;&#x80C6;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53; alpha7 &#x4E9A;&#x578B; (alpha7 nAChRs) &#x9AD8;&#x5EA6;&#x6D77;&#x9A6C;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x800C;&#x8C03;&#x8282;&#x795E;&#x7ECF;&#x529F;&#x80FD;&#x3001; &#x7A81;&#x89E6;&#x53EF;&#x5851;&#x6027;&#x53CA;&#x5B66;&#x4E60;&#x8BB0;&#x5FC6;&#x6709;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x4E86;&#x89E3;&#x751A;&#x5C11;&#x7684; alpha7 nAChRs &#x6D77;&#x9A6C; &gamma; &#x632F;&#x8361;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E86;&#x9009;&#x62E9;&#x6027; alpha7-&#x548C;&#x975E;-alpha7-nAChR &#x62EE;&#x6297;&#x5242;&#x5BF9;&#x5927;&#x9F20;&#x6D77;&#x9A6C;&#x8111;&#x7247;&#x7684;&#x7834;&#x4F24;&#x98CE;&#x4F3D;&#x739B;&#x632F;&#x8361;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x627E;&#x5230;&#x90A3;&#x4E2A;&#x77ED;&#x6682;&#x7684;&#x7834;&#x4F24;&#x98CE;&#x523A;&#x6FC0;&#x8BF1;&#x5BFC; &gamma; &#x632F;&#x8361; &#xFF08;30-80 Hz&#xFF09; &#x548C; alpha7 nAChRs &#x4F7F;&#x7528;&#x76F8;&#x5BF9;&#x9009;&#x62E9;&#x6027; alpha7 nAChR &#x62EE;&#x6297;&#x5242;&#x3001; methyllycaconitine &#xFF08;10 &#x6216; 100 nM&#xFF09; &#x6216;&#x91D1;&#x73AF;&#x86C7;&#x836F;&#x7406;&#x5C01;&#x9501; (10 nM&#xFF09;&#x3001; &#x5927;&#x5927;&#x51CF;&#x5C11;&#x9891;&#x7387;&#x9891;&#x8C31;&#x7535;&#x6E90;&#xFF0C;&#x51E0;&#x4E2A;&#x5CF0;&#x503C;&#xFF0C;&#x548C;&#x7834;&#x88C2;&#x8BF1;&#x53D1;&#x7684;&#x4F3D;&#x739B;&#x632F;&#x8361;&#x7684;&#x6301;&#x7EED;&#x65F6;&#x95F4;&#x3002;&#x7F8E;&#x52A0;&#x660E;&#x4E5F;&#x53CC;&#x6C22;-&beta;-erythroidine&#xFF0C;&#x5C5E;&#x4E8E;&#x975E; alpha7 nAChRs &#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x62EE;&#x6297;&#x5242;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E0D;&#x8868;&#x660E;&#x5BF9;&#x7834;&#x4F24;&#x98CE;&#x4F3D;&#x739B;&#x632F;&#x8361;&#x7684;&#x91CD;&#x5927;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x66B4;&#x9732;&#x5C3C;&#x53E4;&#x4E01; methyllycaconitine &#x654F;&#x611F;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x6D77;&#x9A6C; &gamma; &#x632F;&#x8361;&#x3002;&#x5B83;&#x88AB;&#x7ED3;&#x675F; alpha7 nAChRs &#x6D77;&#x9A6C;&#x8111;&#x7247;&#x8C03;&#x8282;&#x4F3D;&#x9A6C;&#x632F;&#x8361;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x89E3;&#x91CA; nAChRs &#x5B66;&#x4E60;&#x3001; &#x8BB0;&#x5FC6;&#x529B;&#x548C;&#x6CE8;&#x610F;&#x529B;&#x7B49;&#x8BA4;&#x77E5;&#x529F;&#x80FD;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x53D1;&#x6325;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Alpha7 &#x70DF;&#x78B1;&#x578B;&#x4E59;&#x9170;&#x80C6;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53;&#x5728;&#x5927;&#x9F20;&#x6D77;&#x9A6C;&#x8111;&#x7247;&#x7834;&#x4F24;&#x98CE;&#x523A;&#x6FC0;&#x8BF1;&#x5BFC; &gamma; &#x632F;&#x8361;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Hippocampal gamma oscillations, as a form of neuronal network synchronization, are speculated to be associated with learning, memory and attention. Nicotinic acetylcholine receptor alpha7 subtypes (alpha7-nAChRs) are highly expressed in hippocampal neurons and play important roles in modulating neuronal function, synaptic plasticity, learning and memory. However, little is known about the role of alpha7-nAChRs in hippocampal gamma oscillations. Here, we examined the effects of selective alpha7- and non-alpha7-nAChR antagonists on tetanic gamma oscillations in rat hippocampal slices. We found that brief tetanic stimulation-induced gamma oscillations (30-80 Hz) and pharmacological blockade of alpha7-nAChRs using the relatively selective alpha7-nAChR antagonists, methyllycaconitine (10 or 100 nM) or alpha-bungarotoxin (10 nM), significantly reduced the frequency spectrum power, the number of spikes, and burst duration of evoked gamma oscillations. Neither mecamylamine nor dihydro-beta-erythroidine, which are selective antagonists of non-alpha7-nAChRs, demonstrated significant effects on tetanic gamma oscillations. Nicotine exposure promotes hippocampal gamma oscillations in a methyllycaconitine-sensitive manner. It is concluded that alpha7-nAChRs in hippocampal slices play important roles in regulation of gamma oscillations, thus potentially helping to explain roles of nAChRs in cognitive functions such as learning, memory and attention.

Role of alpha7-nicotinic acetylcholine receptors in tetanic stimulation-induced gamma oscillations in rat hippocampal slices.

Oscillations de l&#39;hippocampe gamma, comme une forme de synchronisation de r&eacute;seau neuronal, sont &eacute;mis l&#39;hypoth&egrave;se d&#39;&ecirc;tre associ&eacute;s &agrave; l&#39;apprentissage, la m&eacute;moire et l&#39;attention. Sous-types d&#39;alpha7 r&eacute;cepteurs nicotiniques de l&#39;ac&eacute;tylcholine (alpha7-nAChR) sont fortement exprim&eacute;s dans les neurones de l&#39;hippocampe et jouent un r&ocirc;le important dans la modulation de la fonction neuronale, la plasticit&eacute; synaptique, l&#39;apprentissage et m&eacute;moire. Cependant, on conna&icirc;t le r&ocirc;le d&#39;alpha7-nAChR en oscillations hippocampe gamma. Ici, nous avons examin&eacute; les effets des antagonistes s&eacute;lectifs alpha7 - et non-alpha7-CNCDH sur les oscillations de gamma t&eacute;tanique dans des tranches d&#39;hippocampe de rat. Nous avons trouv&eacute; que br&egrave;ve oscillations t&eacute;taniques gamma induite par une stimulation (30-80 Hz) et le blocage pharmacologique d&#39;alpha7-nAChR utilisant les antagonistes de la CNCDH-alpha7 relativement s&eacute;lectif, la methyllycaconitine (10 ou 100 nM) ou l&#39;alpha-bungarotoxine (10 nM), consid&eacute;rablement r&eacute;duit la puissance du spectre de fr&eacute;quence, le nombre de pointes et &eacute;clater la dur&eacute;e des oscillations gamma &eacute;voqu&eacute;s. M&eacute;camylamine ni dihydro-b&ecirc;ta-erythroidine, qui sont des antagonistes s&eacute;lectifs des non-alpha7-nAChR, a montr&eacute; des effets significatifs sur les oscillations de gamma t&eacute;taniques. Exposition &agrave; la nicotine favorise les oscillations hippocampe gamma d&#39;une mani&egrave;re sensible methyllycaconitine. Il est conclu qu&#39;alpha7-nAChR dans des tranches d&#39;hippocampe joue un r&ocirc;le important dans la r&eacute;gulation des oscillations de gamma, donc potentiellement aider &agrave; expliquer les r&ocirc;les de nAChR dans les fonctions cognitives comme l&#39;apprentissage, la m&eacute;moire et l&#39;attention.

R&ocirc;le des r&eacute;cepteurs de l&#39;ac&eacute;tylcholine nicotinique-alpha7 en oscillations t&eacute;taniques gamma induite par une stimulation en tranches d&#39;hippocampe de rat.

Hippocampal Gamma Schwingungen, werden als eine Form der neuronalen Netzwerksynchronisation, spekuliert, lernen, Ged&auml;chtnis und Aufmerksamkeit zugeordnet werden. Nikotinische Acetylcholin-Rezeptor alpha7 Subtypen (alpha7-nAChRs) sind hoch in hippocampal Neuronen exprimiert und spielen eine wichtige Rolle in der Modulation der neuronalen Funktion, synaptische Plastizit&auml;t, lernen und Ged&auml;chtnis. Jedoch ist wenig bekannt &uuml;ber die Rolle von alpha7-nAChRs in hippocampal Gamma Schwingungen. Hier haben wir die Auswirkungen der selektiven alpha7 - und nicht-alpha7-nAChR-Antagonisten auf tetanischen Gamma Schwingungen in Ratte hippocampal Scheiben gepr&uuml;ft. Wir fanden, dass kurze tetanischen induziert durch Stimulierung Gamma Schwingungen (30-80 Hz) und pharmakologische Blockade der alpha7-nAChRs &uuml;ber die relativ selektive alpha7-nAChR-Antagonisten, Methyllycaconitine (10 oder 100 nM) oder Alpha-Bungarotoxin (10 nM), deutlich reduziert die H&auml;ufigkeit Spektrum macht, die Anzahl der Spitzen, und Dauer der evozierten Gamma Schwingungen platzen. Mecamylamin weder Dihydro-Beta-Erythroidine, die selektive Antagonisten des nicht-alpha7-nAChRs sind, zeigten signifikante Effekte auf tetanischen Gamma Schwingungen. Nikotin Exposition f&ouml;rdert hippocampal Gamma Schwingungen in gewissem Sinne Methyllycaconitine-Sensitive. Wird der Schluss gezogen, dass alpha7-nAChRs in hippocampal Scheiben bei Regulierung der Gamma-Oszillationen, potenziell damit um zu erkl&auml;ren, Rollen der nAChRs in kognitiven Funktionen wie lernen, Ged&auml;chtnis und Aufmerksamkeit eine wichtige Rolle spielen.

Rolle von alpha7-nikotinische Acetylcholin-Rezeptoren im tetanischen induziert durch Stimulierung Gamma Schwingungen in Ratte hippocampal Scheiben.

Oscillazioni di gamma dell&#39;ippocampo, come una forma di sincronizzazione di rete neuronale, sono speculate per essere associato con l&#39;apprendimento, memoria e attenzione. Sottotipi di alpha7 del recettore nicotinico dell&#39;acetilcolina (alpha7-nAChRs) sono altamente espresso nei neuroni ippocampali e giocano un ruolo importante nel modulare la funzione neuronale, plasticit&agrave; sinaptica, apprendimento e memoria. Tuttavia, poco &egrave; noto riguardo al ruolo di alpha7-nAChRs in oscillazioni hippocampal gamma. Qui, abbiamo esaminato gli effetti degli antagonisti selettivi alpha7 - e non-alpha7-nAChR sulle oscillazioni gamma tetanica in fette hippocampal di ratto. Abbiamo trovato che brevi oscillazioni gamma indotta da Stimolazione tetanica (30-80 Hz) e blocco farmacologico dei alpha7-nAChRs utilizzando gli antagonisti relativamente selettivo alpha7-nAChR, methyllycaconitine (10 o 100 nM) o alfa-bungarotoxin (10 nM), notevolmente ridotto il potere di spettro di frequenza, il numero di picchi e scoppiare la durata delle oscillazioni gamma evocati. Mecamylamine n&eacute; diidro-beta-erythroidine, che sono antagonisti selettivi di non-alpha7-nAChRs, hanno dimostrato effetti significativi sulle oscillazioni gamma tetanica. Esposizione di nicotina promuove le oscillazioni gamma ippocampale in maniera sensibile methyllycaconitine. Si &egrave; concluso che alpha7-nAChRs in fette hippocampal giocano un ruolo importante nella regolazione delle oscillazioni di gamma, potenzialmente contribuendo cos&igrave; a spiegare i ruoli di nAChRs in funzioni cognitive quali l&#39;apprendimento, memoria e attenzione.

Ruolo dei recettori alpha7-nicotinici acetilcolina nelle oscillazioni gamma indotta da Stimolazione tetanica in fette hippocampal di ratto.

&#x6D77;&#x99AC; &gamma; &#x632F;&#x52D5;&#x795E;&#x7D4C;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x540C;&#x671F;&#x306E;&#x4E00;&#x5F62;&#x614B;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5B66;&#x7FD2;&#x3001;&#x8A18;&#x61B6;&#x529B;&#x3068;&#x6CE8;&#x610F;&#x3092;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x308B;&#x3068;&#x63A8;&#x6E2C;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30CB;&#x30B3;&#x30C1;&#x30F3;&#x6027;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; alpha7 &#x30B5;&#x30D6;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7; (alpha7-nAChRs) &#x306F;&#x6D77;&#x99AC;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x8868;&#x73FE;&#x3057;&#x3001;&#x5909;&#x8ABF;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x6A5F;&#x80FD;, &#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x53EF;&#x5851;&#x6027;&#x3001;&#x5B66;&#x7FD2;&#x3068;&#x8A18;&#x61B6;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069; alpha7-nAChRs &#x6D77;&#x99AC;&#x30AC;&#x30F3;&#x30DE;&#x632F;&#x52D5;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x6D77;&#x99AC;&#x30B9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30C6;&#x30BF;&#x30CC;&#x30B9; &#x30AC;&#x30F3;&#x30DE;&#x632F;&#x52D5;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x7684; alpha7- &#x3068;&#x975E;-alpha7-nAChR &#x62EE;&#x6297;&#x85AC;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;&#x7C21;&#x5358;&#x306A;&#x30C6;&#x30BF;&#x30CC;&#x30B9;&#x523A;&#x6FC0;&#x8A98;&#x8D77;&#x30AC;&#x30F3;&#x30DE;&#x632F;&#x52D5; (30-80 Hz) &#x3068; alpha7-nAChRs methyllycaconitine &#xFF08;10 &#x307E;&#x305F;&#x306F; 100 nM&#xFF09; &#x3084; &alpha;-&#x30D6;&#x30F3;&#x30AC;&#x30ED;&#x30C8;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3;&#x6BD4;&#x8F03;&#x7684;&#x9078;&#x629E;&#x7684; alpha7 nAChR &#x62EE;&#x6297;&#x85AC;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x85AC;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x5C01;&#x9396;&#x304C;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F; (10 nM&#xFF09;&#x3001;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x5468;&#x6CE2;&#x6570;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x96FB;&#x529B;&#x30B9;&#x30D1;&#x30A4;&#x30AF;&#x306E;&#x6570;&#x3092;&#x4F4E;&#x6E1B;&#x3057;&#x3001;&#x30D0;&#x30FC;&#x30B9;&#x30C8;&#x671F;&#x9593;&#x8A98;&#x767A; &gamma; &#x632F;&#x52D5;&#x306E;&#x3002;&#x3069;&#x3061;&#x3089;&#x3082; mecamylamine &#x3082;&#x30B8;&#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;-&beta;-&#x30A8;&#x30EA;&#x30B9;&#x30ED;&#x30A4;&#x30B8;&#x30F3;&#x3001;alpha7 nAChRs &#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x30A2;&#x30F3;&#x30BF;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x30C6;&#x30BF;&#x30CC;&#x30B9; &gamma; &#x632F;&#x52D5;&#x306B;&#x91CD;&#x5927;&#x306A;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30CB;&#x30B3;&#x30C1;&#x30F3;&#x66DD;&#x9732;&#x6D77;&#x99AC; &gamma; &#x632F;&#x52D5; methyllycaconitine &#x654F;&#x611F;&#x306A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x63A8;&#x9032;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Alpha7-nAChRs &#x6D77;&#x99AC;&#x30B9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; &gamma; &#x632F;&#x52D5;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684; nAChRs &#x5B66;&#x7FD2;&#x30FB;&#x8A18;&#x61B6;&#x30FB;&#x6CE8;&#x610F;&#x306A;&#x3069;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x8A8D;&#x77E5;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x652F;&#x63F4;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x7DE0;&#x7D50;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x6D77;&#x99AC;&#x30B9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30C6;&#x30BF;&#x30CC;&#x30B9;&#x523A;&#x6FC0;&#x8A98;&#x8D77;&#x30AC;&#x30F3;&#x30DE;&#x632F;&#x52D5; alpha7 &#x30CB;&#x30B3;&#x30C1;&#x30F3;&#x6027;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3002;

Hippocampal &#xAC10;&#xB9C8; &#xC9C4;&#xB3D9; &#xC2E0;&#xACBD; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C; &#xB3D9;&#xAE30;&#xD654;&#xC758; &#xD615;&#xD0DC;&#xB85C; &#xAD00;&#xB828; &#xBA54;&#xBAA8;&#xB9AC;&#xC640; &#xAD00;&#xC2EC;, &#xD559;&#xC2B5; &#xB41C; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xCD94;&#xCE21; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Nicotinic &#xC544; &#xC138; &#xD2F8; &#xCF5C;&#xB9B0; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; alpha7 &#xD558;&#xC704; &#xC720;&#xD615; (alpha7 nAChRs) &#xB192;&#xC740; hippocampal &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xD45C;&#xD604; &#xB418; &#xACE0; &#xC2E0;&#xACBD; &#xAE30;&#xB2A5;, &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4;&#xAC00; &#xC18C;&#xC131;, &#xD559;&#xC2B5; &#xBC0F; &#xBA54;&#xBAA8;&#xB9AC; &#xBCC0;&#xC870;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC57D;&#xAC04; alpha7-nAChRs hippocampal &#xAC10;&#xB9C8; &#xC9C4;&#xB3D9;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC950; hippocampal &#xC870;&#xAC01;&#xC5D0; tetanic &#xAC10;&#xB9C8; &#xC9C4;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; alpha7-&#xBC0F; &#xBE44;-alpha7-nAChR &#xAE38; &#xD56D; &#xADFC;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC;&#xB97C; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xAC04;&#xB2E8;&#xD55C; tetanic &#xC790;&#xADF9; &#xC720;&#xBC1C; &#xAC10;&#xB9C8; &#xC9C4;&#xB3D9; (30-80 Hz) &#xBC0F; &#xC57D;&#xB9AC; &#xBD09;&#xC1C4; alpha7 nAChRs &#xBE44;&#xAD50;&#xC801; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; alpha7 nAChR &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C;, methyllycaconitine (10 &#xB610;&#xB294; 100 nM) &#xB610;&#xB294; &#xC54C;&#xD30C;-bungarotoxin&#xC758; &#xBC1C;&#xACAC; (10 nM), &#xD06C;&#xAC8C; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC; &#xC804;&#xB825;, &#xC2A4;&#xD30C;&#xC774;&#xD06C;, &#xC218; &#xC904;&#xC5B4;&#xB4E4;&#xACE0; &#xAE30;&#xAC04; &#xAC16;&#xB294; &#xAC10;&#xB9C8; &#xC9C4;&#xB3D9;&#xC758; &#xBC84;&#xC2A4;&#xD2B8;. Mecamylamine&#xB3C4; &#xBE44; alpha7 Nachrs&#xC758; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C;&#xB294; dihydro-&#xBCA0;&#xD0C0;-erythroidine tetanic &#xAC10;&#xB9C8; &#xC9C4;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB2C8;&#xCF54;&#xD2F4; &#xB178;&#xCD9C; methyllycaconitine &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; hippocampal &#xAC10;&#xB9C8; &#xC9C4;&#xB3D9; &#xCD09;&#xC9C4;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Alpha7-nAChRs hippocampal &#xBD84;&#xD560; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD559;&#xC2B5;, &#xBA54;&#xBAA8;&#xB9AC; &#xBC0F; &#xAD00;&#xC2EC; &#xB4F1; &#xC778;&#xC9C0; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; Nachrs&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xB3D5;&#xB294; &#xAC10;&#xB9C8; &#xC9C4;&#xB3D9;&#xC758; &#xADDC;&#xC81C;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC744; &#xCCB4;&#xACB0;.

&#xC950; hippocampal &#xBD84;&#xD560; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; tetanic &#xC790;&#xADF9; &#xC720;&#xBC1C; &#xAC10;&#xB9C8; &#xC9C4;&#xB3D9;&#xC5D0; alpha7 nicotinic &#xC544; &#xC138; &#xD2F8; &#xCF5C;&#xB9B0; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;.

Oscilaciones del hipocampo gamma, como una forma de sincronizaci&oacute;n de red neuronal, se especulaban que asociarse con el aprendizaje, la memoria y la atenci&oacute;n. Subtipos de alpha7 de receptores nicot&iacute;nicos de la acetilcolina (alpha7-nAChRs) altamente se expresan en neuronas del hipocampales y desempe&ntilde;an un papel importante en la modulaci&oacute;n de la funci&oacute;n neuronal, la plasticidad sin&aacute;ptica, aprendizaje y memoria. Sin embargo, poco se sabe sobre el papel de alpha7-nAChRs en oscilaciones gamma hipocampal. Aqu&iacute;, se examinaron los efectos de los antagonistas selectivos alpha7 - y no-alpha7-nAChR en oscilaciones gamma tet&aacute;nica en rebanadas de hipocampo de rata. Encontramos que breve oscilaciones gamma inducida por estimulaci&oacute;n tet&aacute;nica (30-80 Hz) y el bloqueo farmacol&oacute;gico de alpha7-nAChRs usando el relativamente selectiva alpha7-nAChR antagonistas, methyllycaconitine (10 o 100 nM) o alfa-Bungarotoxina (10 nM), significativamente reduce la potencia del espectro de frecuencia, el n&uacute;mero de espigas y estall&oacute; la duraci&oacute;n de las oscilaciones gamma evocados. Mecamilamina ni dihidro-beta-erythroidine, que son antagonistas selectivos de no-alpha7-nAChRs, demostr&oacute; efectos significativos sobre las oscilaciones gamma tet&aacute;nica. Exposici&oacute;n de nicotina promueve las oscilaciones gamma hippocampal en forma sensible a la methyllycaconitine. Se concluye que alpha7-nAChRs en rebanadas hippocampal desempe&ntilde;an papeles importantes en la regulaci&oacute;n de las oscilaciones gamma, potencialmente ayudando as&iacute; a explicar funciones de nAChRs en funciones cognitivas como aprendizaje, memoria y atenci&oacute;n.

Papel de los receptores alpha7-nicot&iacute;nicos de la acetilcolina en las oscilaciones gamma inducida por estimulaci&oacute;n tet&aacute;nica en rebanadas de hipocampo de rata.

Varias subunidades de receptores (nAChR) nicot&iacute;nicos de la acetilcolina han sido dise&ntilde;ados como fusiones de la prote&iacute;na fluorescente (FP) y explotados para iluminar caracter&iacute;sticas de nAChRs. El objetivo de este trabajo fue crear una fusi&oacute;n de FP en la subunidad de alpha7 nAChR sin comprometer la formaci&oacute;n de receptores funcionales.

Subunidades de alpha7 de receptores nicot&iacute;nicos de la acetilcolina con una inserci&oacute;n de prote&iacute;na fluorescente amarillo C2 lazo citopl&aacute;smico forman receptores funcionales.

&#x51E0;&#x79CD;&#x70DF;&#x78B1;&#x578B;&#x4E59;&#x9170;&#x80C6;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53; &#xFF08;nAChR&#xFF09; &#x4E9A;&#x57FA;&#x5DF2;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D; (FP) &#x878D;&#x5408;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x548C;&#x5265;&#x524A;&#x7167;&#x4EAE;&#x7684; nAChRs &#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x7684;&#x76EE;&#x7684;&#x662F;&#x6253;&#x9020; FP &#x878D;&#x5408; nAChR alpha7 &#x4E9A;&#x5355;&#x4F4D;&#xFF0C;&#x540C;&#x65F6;&#x53C8;&#x4E0D;&#x635F;&#x5BB3;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x6027;&#x53D7;&#x4F53;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;

&#x70DF;&#x78B1;&#x578B;&#x4E59;&#x9170;&#x80C6;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53; alpha7 &#x4E9A;&#x57FA;&#x4E0E; C2 &#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x5FAA;&#x73AF;&#x9EC4;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x63D2;&#x5165;&#x8868;&#x5355;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#x3002;

Several nicotinic acetylcholine receptor (nAChR) subunits have been engineered as fluorescent protein (FP) fusions and exploited to illuminate features of nAChRs. The aim of this work was to create a FP fusion in the nAChR alpha7 subunit without compromising formation of functional receptors.

Nicotinic acetylcholine receptor alpha7 subunits with a C2 cytoplasmic loop yellow fluorescent protein insertion form functional receptors.

Plusieurs sous-unit&eacute;s du r&eacute;cepteur (CNCDH) de l&#39;ac&eacute;tylcholine nicotinique ont &eacute;t&eacute; sous la forme de fusions de la prot&eacute;ine fluorescente (FP) et exploit&eacute;es afin d&#39;allumer les caract&eacute;ristiques de nAChR. Le but de ce travail &eacute;tait de cr&eacute;er une fusion FP dans la sous-unit&eacute; d&#39;alpha7 CNCDH sans compromettre la formation des r&eacute;cepteurs fonctionnels.

Nicotinic acetylcholine receptor alpha7 sous-unit&eacute;s avec une insertion de prot&eacute;ine fluorescente jaune boucle cytoplasmique C2 forment des r&eacute;cepteurs fonctionnels.

Mehrere nikotinische Acetylcholin-Rezeptor (nAChR)-Untereinheiten wurden UML-fluoreszierenden Proteins (FP) Fusionen und ausgenutzt, um die Features von nAChRs zu beleuchten. Ziel dieser Arbeit war eine FP-Fusion in der nAChR alpha7 Untereinheit zu erstellen, ohne Bildung von funktionalen Rezeptoren.

Nikotinische Acetylcholin-Rezeptor-alpha7-Untereinheiten mit einem C2 zytoplasmatischen Schleife gelb fluoreszierende Protein Einf&uuml;gung bilden funktionelle Rezeptoren.

Diverse subunit&agrave; di nicotinici acetilcolina recettore (nAChR) sono state progettate come fusioni di proteina fluorescente (FP) e sfruttata per illuminare caratteristiche di nAChRs. Lo scopo di questo lavoro era quello di creare una fusione di FP nella subunit&agrave; alpha7 nAChR senza compromettere la formazione dei recettori funzionali.

Subunit&agrave; di alpha7 del recettore nicotinico dell&#39;acetilcolina con un inserimento di proteina fluorescente gialla loop citoplasmatico C2 formare recettori funzionali.

&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30CB;&#x30B3;&#x30C1;&#x30F3;&#x6027;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; &#xFF08;nAChR&#xFF09; &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x304C;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; (FP) &#x878D;&#x5408;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30EA;&#x30D0;&#x30FC;&#x30B9; &#x30A8;&#x30F3;&#x30B8;&#x30CB;&#x30A2; &#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3001;nAChRs &#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x7167;&#x3089;&#x3059;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x60AA;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x4F5C;&#x696D;&#x306E;&#x76EE;&#x7684;&#x306F;&#x3001;FP &#x878D;&#x5408; nAChR alpha7 &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x640D;&#x306A;&#x3046;&#x3053;&#x3068;&#x306A;&#x304F;&#x304C;&#x4F5C;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x30CB;&#x30B3;&#x30C1;&#x30F3;&#x6027;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; alpha7 &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8; C2 &#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x9EC4;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x633F;&#x5165;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC5EC;&#xB7EC; nicotinic &#xC544; &#xC138; &#xD2F8; &#xCF5C;&#xB9B0; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (nAChR) subunits &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (FP) fusions&#xB85C; &#xC124;&#xACC4; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xACE0; Nachrs&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xBC1D;&#xD788;&#xB294; &#xB370; &#xC545;&#xC6A9;. &#xC774; &#xC791;&#xD488;&#xC758; &#xBAA9;&#xC801;&#xC740; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xC190;&#xC0C1; &#xC2DC; &#xD0A4; &#xC9C0; &#xC54A;&#xACE0; nAChR alpha7 &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704;&#xC5D0; FP &#xD4E8;&#xC804;&#xC744; &#xB9CC;&#xB4DC;&#xB294; &#xAC83; &#xC774;&#xC5C8;&#xB2E4;.

C2 &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xB8E8;&#xD504; &#xB178;&#xB780;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0BD;&#xC785; nicotinic &#xC544; &#xC138; &#xD2F8; &#xCF5C;&#xB9B0; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; alpha7 subunits &#xAE30;&#xB2A5; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB97C; &#xD615;&#xC131;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#x6211;&#x4EEC;&#x8C03;&#x67E5;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x96C6;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x70DF;&#x78B1;&#x578B;&#x4E59;&#x9170;&#x80C6;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53; (nAChRs) &#x7684; &alpha;7 &#x548C; &beta; 2 &#x4E9A;&#x57FA;&#x7EC4;&#x6210;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x6D4B;&#x91CF;&#x4E86;&#x5149;&#x548C;&#x7535;&#x751F;&#x7406;&#x5C5E;&#x6027;&#x7684;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x548C;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x4E9A;&#x57FA;&#x8868;&#x793A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x884C;&#x548C;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#x87FE;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x6FC0;&#x5149;&#x626B;&#x63CF;&#x5171;&#x7126;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x89C2;&#x5BDF;&#x8868;&#x660E;&#x9057;&#x4F20;&#x7269;&#x8D28;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684; &alpha;7 &#x548C; &beta; 2 &#x4E9A;&#x57FA; colocalize&#x3002;F&ouml;rster &#x5171;&#x632F;&#x80FD;&#x91CF;&#x8F6C;&#x79FB;&#x4E4B;&#x95F4;&#x9057;&#x4F20;&#x7269;&#x8D28;&#x6807;&#x8BB0;&#x4E9A;&#x57FA;&#x5F3A;&#x70C8;&#x5EFA;&#x8BAE; coassemble &alpha;7 &#x548C; &beta; 2 &#x4E9A;&#x57FA;&#x3002;&#x5168;&#x5185;&#x53CD;&#x5C04;&#x8367;&#x5149;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x663E;&#x793A;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x96C6;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x7684; SH EP1 &#x7EC6;&#x80DE;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4F8B;&#x8BC1;&#x7684;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x3002;&#x589E;&#x76CA;&#x7684;&#x51FD;&#x6570; &alpha;7 &#x548C; &beta; 2 &#x4E9A;&#x57FA;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4E9A;&#x57FA; coassemble &#x5185;&#x529F;&#x80FD;&#x6027;&#x53D7;&#x4F53;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&alpha;7&beta;2 nAChRs &#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x4E9A;&#x57FA;&#x6216;&#x9057;&#x4F20;&#x7269;&#x8D28;&#x6807;&#x8BB0;&#x4E9A;&#x57FA;&#x4E86;&#x836F;&#x7406;&#x6027;&#x8D28;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684; &alpha;7 nAChRs&#xFF0C;&#x867D;&#x7136; &alpha;7&beta;2 nAChR &#x4ECB;&#x5BFC;&#x3001; &#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x8BF1;&#x53D1;&#x7535;&#x6D41;&#x7684;&#x632F;&#x5E45;&#x4E00;&#x822C; ~ 2 &#x6298;&#x9875;&#x4F4E;&#x4E8E; &alpha;7 nAChRs&#x3002;&#x503C;&#x5F97;&#x4E00;&#x63D0;&#x7684;&#x662F; &alpha;7&beta;2 nAChRs &#x663E;&#x793A;&#x7075;&#x654F;&#x5EA6;&#xFF0C;&#x4F4E;&#x6D53;&#x5EA6;&#x7684;&#x62EE;&#x6297;&#x5242;&#x4E8C;&#x6C22;-&beta;-erythroidine &alpha;7 nAChRs &#x53EF;&#x6BD4;&#x6D53;&#x5EA6;&#x4E3A;&#x6CA1;&#x6709;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x534A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x53D1;&#x73B0; &alpha;7-&beta; 2 &#x4E9A;&#x57FA;&#x63A5;&#x53E3;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x4E0A;&#x5BCC;&#x6709;&#x6210;&#x6548;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x914D;&#x4F53;&#x90E8;&#x5206;&#x89E3;&#x91CA;&#x4F4E; &alpha;7&beta;2 nAChR &#x5F53;&#x524D;&#x632F;&#x5E45;&#x548C;&#x8BC6;&#x522B;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x672C;&#x673A; &alpha;7&beta;2 nAChRs &#x7684;&#x6311;&#x6218;&#x3002;&#x6839;&#x636E;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x8C03;&#x67E5;&#x7ED3;&#x679C;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x9020;&#x4E86;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6A21;&#x578B;&#x9884;&#x6D4B;&#x57FA;&#x4E8E;&#x5316;&#x5B66;&#x8BA1;&#x91CF;&#x5B66;&#x548C; &beta; 2 &#x4E9A;&#x57FA;&#x5185; &alpha;7&beta;2 nAChRs &#x4F4D;&#x7F6E;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;

&Alpha;7&beta;2 &#x70DF;&#x78B1;&#x578B;&#x4E59;&#x9170;&#x80C6;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53;&#x88C5;&#x914D;&#x3001; &#x529F;&#x80FD;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E3B;&#x8981;&#x901A;&#x8FC7;&#x5176; &alpha;7 &alpha;7 &#x63A5;&#x53E3;&#x4F1A;&#x88AB;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;

We investigated assembly and function of nicotinic acetylcholine receptors (nAChRs) composed of Î±7 and Î²2 subunits. We measured optical and electrophysiological properties of wild-type and mutant subunits expressed in cell lines and Xenopus laevis oocytes. Laser scanning confocal microscopy indicated that fluorescently tagged Î±7 and Î²2 subunits colocalize. FÃ¶rster resonance energy transfer between fluorescently tagged subunits strongly suggested that Î±7 and Î²2 subunits coassemble. Total internal reflection fluorescence microscopy revealed that assemblies localized to filopodia-like processes of SH-EP1 cells. Gain-of-function Î±7 and Î²2 subunits confirmed that these subunits coassemble within functional receptors. Moreover, Î±7Î²2 nAChRs composed of wild-type subunits or fluorescently tagged subunits had pharmacological properties similar to those of Î±7 nAChRs, although amplitudes of Î±7Î²2 nAChR-mediated, agonist-evoked currents were generally ~2-fold lower than those for Î±7 nAChRs. It is noteworthy that Î±7Î²2 nAChRs displayed sensitivity to low concentrations of the antagonist dihydro-Î²-erythroidine that was not observed for Î±7 nAChRs at comparable concentrations. In addition, cysteine mutants revealed that the Î±7-Î²2 subunit interface does not bind ligand in a functionally productive manner, partly explaining lower Î±7Î²2 nAChR current amplitudes and challenges in identifying the function of native Î±7Î²2 nAChRs. On the basis of our findings, we have constructed a model predicting receptor function that is based on stoichiometry and position of Î²2 subunits within the Î±7Î²2 nAChRs.

Î±7Î²2 nicotinic acetylcholine receptors assemble, function, and are activated primarily via their Î±7-Î±7 interfaces.

Nous avons &eacute;tudi&eacute; l&#39;Assembl&eacute;e et fonction des r&eacute;cepteurs nicotiniques de l&#39;ac&eacute;tylcholine (nAChR) compos&eacute; de sous-unit&eacute;s &alpha;7 et &beta;2. Nous avons mesur&eacute; les propri&eacute;t&eacute;s optiques et &eacute;lectrophysiologiques de type sauvage et mutantes sous-unit&eacute;s exprim&eacute;e dans les lign&eacute;es cellulaires et Xenopus laevis ovocytes. Microscopie confocale &agrave; balayage laser a indiqu&eacute; que les sous-unit&eacute;s &alpha;7 et &beta;2 fluorescent &eacute;tiquet&eacute;es sont colocalis&eacute;es. Transfert d&#39;&eacute;nergie de r&eacute;sonance F&ouml;rster entre sous-unit&eacute;s fluorescent &eacute;tiquet&eacute;s sugg&egrave;re fortement que les sous-unit&eacute;s &alpha;7 et &beta;2 coassemble. Microscopie de fluorescence de r&eacute;flexion totale interne a r&eacute;v&eacute;l&eacute; que les assemblys localis&eacute;e aux processus des filopodes-comme des cellules SH-EP1. Gain de fonction &alpha;7 et &beta;2 sous-unit&eacute;s a confirm&eacute; que ces sous-unit&eacute;s coassemble au sein des r&eacute;cepteurs fonctionnels. En outre, &alpha;7&beta;2 nAChR compos&eacute; de sous-unit&eacute;s de type sauvage ou fluorescent &eacute;tiquet&eacute;es sous-unit&eacute;s ont des propri&eacute;t&eacute;s pharmacologiques similaires &agrave; celles de nAChR &alpha;7, m&ecirc;me si l&#39;amplitude des courants de &alpha;7&beta;2 v&eacute;hicul&eacute;e par la CNCDH, induite par l&#39;agoniste &eacute;tait g&eacute;n&eacute;ralement ~ 2 fois inf&eacute;rieurs &agrave; ceux de &alpha;7 nAChR. Il convient de noter que &alpha;7&beta;2 nAChR affiche une sensibilit&eacute; &agrave; de faibles concentrations de l&#39;antagoniste dihydro-&beta;-erythroidine qui n&#39;a pas &eacute;t&eacute; observ&eacute;e pour nAChR &alpha;7 &agrave; des concentrations comparables. En outre, des mutants de cyst&eacute;ine a r&eacute;v&eacute;l&eacute; que l&#39;interface de sous-unit&eacute; &alpha;7-&beta;2 ne lie pas le ligand de mani&egrave;re productive sur le plan fonctionnel, expliquant en partie inf&eacute;rieures &alpha;7&beta;2 CNCDH amplitudes de courant et les d&eacute;fis dans l&#39;identification de la fonction de &alpha;7&beta;2 native nAChR. Sur la base de nos conclusions, nous avons construit un mod&egrave;le pr&eacute;dictif fonction des r&eacute;cepteurs qui repose sur la stoechiom&eacute;trie et position des sous-unit&eacute;s de &beta;2 dans le nAChR &alpha;7&beta;2.

&Alpha;7&beta;2 des r&eacute;cepteurs nicotiniques de l&#39;ac&eacute;tylcholine, assemblent, fonction et sont activ&eacute;es principalement par l&#39;interm&eacute;diaire de leurs interfaces &alpha;7-&alpha;7.

Wir untersuchten Montage und Funktion nikotinische Acetylcholin-Rezeptoren (nAChRs) aus &alpha;7 und &beta;2-Untereinheiten. Wir gemessen optische und elektrophysiologische Eigenschaften von Wildtyp und mutierte Untereinheiten in Zelllinien und Xenopus Laevis Oozyten exprimiert. Laser scanning konfokale Mikroskopie angedeutet, dass Leuchtstoff markierte &alpha;7 und &beta;2-Untereinheiten colocalize. F&ouml;rster-Resonanz-Energie-Transfer zwischen Leuchtstoff markierte Untereinheiten schlug stark &alpha;7 und &beta;2-Untereinheiten coassemble. Totalreflexion Fluoreszenzmikroskopie ergab, dass die Assemblys in Filopodium-artige Prozesse der SH-EP1-Zellen lokalisiert. Gain of Function &alpha;7 und &beta;2-Untereinheiten best&auml;tigt, dass diese Untereinheiten innerhalb funktionaler Rezeptoren coassemble. Dar&uuml;ber hinaus &alpha;7&beta;2 nAChRs bestehend aus Wildtyp-Untereinheiten oder Leuchtstoff markierte Untereinheiten hatte pharmakologische Eigenschaften der &alpha;7 nAChRs, &auml;hnlich, obwohl die Amplituden &alpha;7&beta;2 nAChR-vermittelte, Agonist hervorgerufen Str&ouml;mungen im allgemeinen waren ~ 2-fach niedriger als die f&uuml;r &alpha;7 nAChRs. Es ist bemerkenswert, dass &alpha;7&beta;2 nAChRs Empfindlichkeit niedriger Konzentration des Antagonisten Dihydro-&beta;-Erythroidine angezeigt, die nicht bei &alpha;7 nAChRs bei vergleichbaren Konzentrationen beobachtet wurde. Dar&uuml;ber hinaus ergab Cystein Mutanten, dass die &alpha;7-&szlig;2-Untereinheit-Schnittstelle nicht Ligand in funktional produktive Weise bindet teilweise die unteren &alpha;7&beta;2 nAChR aktuelle Amplituden und Herausforderungen bei der Ermittlung der Funktion des nativen &alpha;7&beta;2 nAChRs erkl&auml;rt. Auf der Grundlage unserer Erkenntnisse haben wir ein Modell Vorhersagen von Rezeptor-Funktion, die auf die St&ouml;chiometrie und Position der &szlig;2-Untereinheiten innerhalb der &alpha;7&beta;2-nAChRs errichtet.

&Alpha;7&beta;2 nikotinische Acetylcholin-Rezeptoren zu assemblieren, Funktion, und werden in erster Linie &uuml;ber ihre &alpha;7-&alpha;7-Schnittstellen aktiviert.

Abbiamo studiato assieme e funzione dei recettori nicotinici acetilcolina (nAChRs) composto da subunit&agrave; &alpha;7 e &beta;2. Abbiamo misurato le propriet&agrave; ottiche ed elettrofisiologica di wild-type e mutanti subunit&agrave; espressa in linee cellulari e Xenopus laevis ovociti. Microscopia confocale a scansione laser indicato che la subunit&agrave; &alpha;7 e &beta;2 fluorescente contrassegnate colocalize. Trasferimento di energia per risonanza tra le subunit&agrave; fluorescente contrassegnate fortemente suggerito che la subunit&agrave; &alpha;7 e &beta;2 coassemble. Microscopia di fluorescenza di riflessione interna totale ha rivelato che gli assembly localizzati a filopodia-come i processi delle cellule SH-EP1. Subunit&agrave; &alpha;7 e &beta;2 guadagno di funzione ha confermato che queste subunit&agrave; coassemble all&#39;interno di recettori funzionali. Inoltre, &alpha;7&beta;2 nAChRs composto da subunit&agrave; wild-type o fluorescente contrassegnate subunit&agrave; aveva propriet&agrave; farmacologiche simili a quelle dei nAChRs &alpha;7, anche se le ampiezze delle correnti nAChR-mediata, evocato da agonista &alpha;7&beta;2 erano generalmente ~ 2 volte inferiori a quelli di nAChRs &alpha;7. &Egrave; interessante nota che &alpha;7&beta;2 nAChRs visualizzato sensibilit&agrave; a basse concentrazioni dell&#39;antagonista diidro-&beta;-erythroidine che non &egrave; stata osservata per &alpha;7 nAChRs a concentrazioni paragonabili. Inoltre, mutanti cisteina rivel&ograve; che l&#39;interfaccia di subunit&agrave; &alpha;7-&beta;2 non legano ad ligando in maniera funzionale produttiva, spiegando in parte inferiore &alpha;7&beta;2 nAChR corrente ampiezze e sfide nell&#39;individuare la funzione dei nAChRs nativi &alpha;7&beta;2. In base ai nostri risultati, noi abbiamo costruito un modello di previsione di funzione del recettore che si basa sulla stechiometria e la posizione delle subunit&agrave; &beta;2 entro il nAChRs &alpha;7&beta;2.

Recettori nicotinici acetilcolina &alpha;7&beta;2 assemblare, funzione e vengono attivati principalmente tramite le interfacce &alpha;7-&alpha;7.

&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3057;&#x3001;a101 &alpha; 7 &#x3068; &beta; 2 &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x30CB;&#x30B3;&#x30C1;&#x30F3;&#x6027;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; (nAChRs) &#x306E;&#x95A2;&#x6570;&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x306E;&#x5149;&#x5B66;&#x30FB;&#x96FB;&#x6C17;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x7279;&#x6027;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x3001;&#x30BB;&#x30EB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB; &#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5171;&#x7126;&#x70B9;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B6;&#x30FC;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306F;&#x86CD;&#x5149;&#x306B;&#x30BF;&#x30B0; a101 &alpha; 7 &#x3068; &beta; 2 &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8; colocalize &#x3053;&#x3068;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x86CD;&#x5149;&#x5171;&#x9CF4;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x79FB;&#x52D5;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30B0; &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x9593; a101 &alpha; 7 &#x3068; &beta; 2 &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x304C;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5F37;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5168;&#x5185;&#x90E8;&#x53CD;&#x5C04;&#x86CD;&#x5149;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x306B; SH EP1 &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7CF8;&#x72B6;&#x4EEE;&#x8DB3;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x5185;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x7D50;&#x5408;&#x5229;&#x5F97;&#x95A2;&#x6570; a101 &alpha; 7 &#x3068; &beta; 2 &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&alpha;7&beta;2 nAChRs &#x306F;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x86CD;&#x5149;&#x306B;&#x30BF;&#x30B0; &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3044;&#x305F;&#x85AC;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x7279;&#x6027; a101 &alpha; 7 nAChRs &#x3068;&#x985E;&#x4F3C;&#x3057;&#x3066; &alpha;7&beta;2 nAChR &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x3001;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x8A98;&#x767A;&#x96FB;&#x6D41;&#x306E;&#x632F;&#x5E45;&#x304C;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306B; ~ 3 &#x3064;&#x6298;&#x308A; a101 &alpha; 7 nAChRs &#x306E;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x4F4E;&#x3044;&#x3002;&Alpha;7&beta;2 nAChRs&#x3001;&#x62EE;&#x6297;&#x85AC;&#x30B8;&#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;-&beta; - &#x306F; a101 &alpha; 7 nAChRs &#x5339;&#x6575;&#x3059;&#x308B;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x30A8;&#x30EA;&#x30B9;&#x30ED;&#x30A4;&#x30B8;&#x30F3;&#x306E;&#x4F4E;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306B;&#x611F;&#x5EA6;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x6CE8;&#x76EE;&#x3059;&#x3079;&#x304D;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x8A8D;&#x3081;&#x305F;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x4F4E;&#x3044; &alpha;7&beta;2 nAChR &#x96FB;&#x6D41;&#x632F;&#x5E45;&#x3068;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306E; &alpha;7&beta;2 nAChRs &#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x4E0A;&#x3067;&#x306E;&#x8AB2;&#x984C;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3059;&#x308B; a101 &alpha; 7 &beta; 2 &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8; &#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30A4;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306B;&#x751F;&#x7523;&#x7684;&#x306A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x306E;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x306F;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x91CF;&#x8AD6;&#x3068; &beta; 2 &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8; &alpha;7&beta;2 nAChRs &#x5185;&#x306E;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x4E88;&#x6E2C;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x69CB;&#x7BC9;&#x3057;&#x305F;.

&Alpha;7&beta;2 &#x30CB;&#x30B3;&#x30C1;&#x30F3;&#x6027;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3001;&#x95A2;&#x6570;&#x3001;&#x7D44;&#x307F;&#x7ACB;&#x3066;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E; a101 &alpha; 7 a101 &alpha; 7 &#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30A4;&#x30B9;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x4E3B;&#x306B;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC6B0;&#xB9AC; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558; &#xACE0; &alpha;7 &#xBC0F; &beta;2 subunits nicotinic &#xC544; &#xC138; &#xD2F8; &#xCF5C;&#xB9B0; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (nAChRs)&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC131;. &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785;&#xC758; &#xAD11; &#xC18D;&#xC131;&#xACFC; electrophysiological &#xCE21;&#xC815; &#xBC0F; &#xC140; &#xB77C;&#xC778;&#xACFC; Xenopus laevis oocytes &#xB2E8;&#xC704;&#xB85C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704;. &#xB808;&#xC774;&#xC800; confocal &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xB193;&#xC5EC;&#xC788;&#xB294;&#xC9C0; &#xD0DC;&#xADF8; &alpha;7 &#xBC0F; &beta;2 &#xD558;&#xC704; &#xB2E8;&#xC704; colocalize &#xD45C;&#xC2DC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC15;&#xB825; &#xD558; &#xAC8C; &#xBD99;&#xC77C; &#xD0DC;&#xADF8;&#xAC00; subunits &#xC0AC;&#xC774; F&ouml;rster &#xACF5;&#xBA85; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xC804;&#xB2EC; &alpha;7 &#xBC0F; &beta;2 &#xD558;&#xC704; &#xB2E8;&#xC704; coassemble &#xC81C;&#xC548; &#xD588;&#xB2E4;. &#xCD1D; &#xB0B4;&#xBD80; &#xBC18;&#xC0AC; &#xD615;&#xAD11; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95; &#xACF5;&#xAC1C; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC; SH EP1 &#xC138;&#xD3EC; filopodia &#xAC19;&#xC740; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xB41C;. &#xC774;&#xB4DD; &#xD568;&#xC218; &alpha;7&#xC640; &beta;2 subunits&#xC774; &#xC18C;&#xC774; &#xB2E8;&#xC704; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xB0B4;&#xC758; coassemble &#xD655;&#xC778; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &alpha;7&beta;2 nAChRs &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; subunits&#xC758; &#xAD6C;&#xC131; &#xB610;&#xB294; &alpha;7&beta;2 nAChR &#xC911;&#xC7AC;, &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C;&#xB97C; &#xAC16;&#xB294; &#xC804;&#xB958; &#xC9C4;&#xD3ED;&#xC740; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBE44;&#xB85D; &#xB193;&#xC5EC;&#xC788;&#xB294;&#xC9C0; &#xD0DC;&#xADF8; subunits &#xC57D;&#xB9AC; &#xC18D;&#xC131; &alpha;7 Nachrs&#xC758; &#xAC83;&#xACFC; &#xC720;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4; ~ 2-fold &alpha;7 nAChRs &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB0AE;&#xC740;. &Alpha;7&beta;2 nAChRs &#xAC10;&#xB3C4; &#xC801;&#xC5D0; &#xAC8C; dihydro-&beta;-erythroidine &alpha;7 nAChRs &#xBE44;&#xAD50; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB300; &#xD55C; &#xAD00;&#xCC30; &#xD558;&#xC9C0;&#xB294;&#xC758; &#xB0AE;&#xC740; &#xB18D;&#xB3C4; &#xD45C;&#xC2DC; &#xC8FC;&#xBAA9; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD14C;&#xC778; &#xBBA4;&#xD134;&#xD2B8; &#xACF5;&#xAC1C; &alpha;7 &beta;2 &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xC774;&#xC2A4; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xB294; &#xB0AE;&#xC740; &alpha;7&beta;2 nAChR &#xC804;&#xB958; &#xC9C4;&#xD3ED; &#xBC0F; &#xB124;&#xC774;&#xD2F0;&#xBE0C; &alpha;7&beta;2 Nachrs&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xB3C4;&#xC804;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xADFC;&#xAC70; &#xD558; &#xC5EC; stoichiometry &#xBC0F; &beta;2 &#xD558;&#xC704; &#xB2E8;&#xC704; &alpha;7&beta;2 nAChRs &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC704;&#xCE58;&#xB97C; &#xAE30;&#xBC18;&#xC73C;&#xB85C; &#xD558;&#xB294; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC608;&#xCE21; &#xD558;&#xB294; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC0DD;&#xC131; &#xD55C; &#xC6B0;&#xB9AC;.

&Alpha;7&beta;2 nicotinic &#xC544; &#xC138; &#xD2F8; &#xCF5C;&#xB9B0; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;, &#xAE30;&#xB2A5;, &#xC870;&#xB9BD; &#xD558; &#xACE0; &#xC8FC;&#xB85C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &alpha;7 &alpha;7 &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xC774;&#xC2A4;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Investigamos la Asamblea y funci&oacute;n de los receptores nicot&iacute;nicos de la acetilcolina (nAChRs) compuesta por subunidades &alpha;7 y &beta;2. Medimos propiedades &oacute;pticas y electrofisiol&oacute;gicos de tipo salvaje y mutantes subunidades expresan en l&iacute;neas celulares y Xenopus laevis ovocitos. Microscop&iacute;a confocal de l&aacute;ser indica que subunidades &alpha;7 y &beta;2 fluorescencia etiquetas colocalize. F&ouml;rster transferencia de energ&iacute;a de resonancia entre las subunidades fluorescencia etiquetados sugiere fuertemente que las subunidades &alpha;7 y &beta;2 coassemble. Microscop&iacute;a de fluorescencia de reflexi&oacute;n interna total revel&oacute; que asambleas localizaron en procesos como los filopodios de c&eacute;lulas SH-EP1. Subunidades de ganancia de funci&oacute;n &alpha;7 y &beta;2 confirman que estas subunidades coassemble dentro de receptores funcionales. Por otra parte, &alpha;7&beta;2 nAChRs compuesta por subunidades de tipo salvaje o fluorescencia etiquetados subunidades ten&iacute;an propiedades farmacol&oacute;gicas similares a los de &alpha;7 nAChRs, aunque las amplitudes de corrientes de &alpha;7&beta;2 mediada por nAChR, agonista-evocado eran generalmente ~ 2 menores que los de &alpha;7 nAChRs. Cabe mencionar que &alpha;7&beta;2 nAChRs muestra sensibilidad a bajas concentraciones de antagonista dihidro-&beta;-erythroidine que no se observ&oacute; para nAChRs &alpha;7 a concentraciones comparables. Adem&aacute;s, mutantes de ciste&iacute;na revelaron que la interfaz de &beta;2-&alpha;7 subunidad no ata ligando de manera funcionalmente productiva, explicando en parte inferiores &alpha;7&beta;2 nAChR amplitudes actuales y retos en la identificaci&oacute;n de la funci&oacute;n de &alpha;7&beta;2 nativo nAChRs. En base a nuestros resultados, hemos construido un modelo de predicci&oacute;n de la funci&oacute;n del receptor que se basa la estequiometr&iacute;a y la posici&oacute;n de subunidades de &beta;2 dentro la nAChRs &alpha;7&beta;2.

Los receptores nicot&iacute;nicos de la acetilcolina &alpha;7&beta;2 montan, funci&oacute;n y se activan principalmente por medio de sus interfaces de &alpha;7-&alpha;7.

&#x5FAE;&#x5149;&#x5B66;&#x63A2;&#x6D4B;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x68AF;&#x5EA6;&#x6298;&#x5C04;&#x7387; &#xFF08;&#x7B11;&#xFF09; &#x955C;&#x7247;&#x548C; microprisms&#xFF0C;&#x6269;&#x5927;&#x4E86;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x591A;&#x5149;&#x5B50;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x8FBE;&#x5230;&#x6DF1;&#x76AE;&#x8D28;&#x5C42;&#x548C;&#x5E95;&#x5C42;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6D77;&#x9A6C;&#x7B49;&#x4EE5;&#x524D;&#x65E0;&#x6CD5;&#x8FDB;&#x5165;&#x7684;&#x8111;&#x6DF1;&#x90E8;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x8303;&#x56F4;&#x3002;&#x5C1A;&#x672A;&#x4E0E;&#x68AF;&#x5EA6;&#x6298;&#x5C04;&#x7387;&#x900F;&#x955C;&#x6210;&#x50CF;&#x4ECE;&#x6839;&#x672C;&#x4E0A;&#x53D7;&#x5230;&#x5927;&#x91CF;&#x7684;&#x7403;&#x5DEE;&#x548C;&#x9700;&#x8981;&#x5EFA;&#x9020;&#x9650;&#x5236;&#x5B57;&#x6BB5;&#x7684;&#x89C6;&#x56FE;&#x7684;&#x590D;&#x5408;&#x955C;&#x7247;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA; 0.5 &#x6BEB;&#x7C73;&#x53E3;&#x5F84;&#x3001; 1.7 &#x6BEB;&#x7C73;&#x957F;&#x54A7;&#x5634;&#x4E00;&#x7B11;&#x955C;&#x5934; singlets 0.6 &#x6570;&#x503C;&#x5B54;&#x5F84;&#x4E0E;&#x76D6;&#x73BB;&#x7483;&#x548C;&#x5E38;&#x89C4;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x5BA2;&#x89C2;&#x6821;&#x6B63;&#x9886;&#x6765;&#x5E73;&#x8861;&#x7403;&#x9762;&#x50CF;&#x5DEE;&#x7279;&#x6027;&#x4E00;&#x8D77;&#x4F7F;&#x7528;&#x3002;&#x7ED3;&#x679C;&#xFF0C;&#x5B9E;&#x73B0;&#x6A2A;&#x5411;&#x5206;&#x8FA8;&#x529B;&#x7684; 618 nm &#x548C; 5.5 &mu; m&#xFF0C;&#x8F74;&#x5411;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#x76F8;&#x6BD4; &asymp; &#x6A2A;&#x5411;&#x4E0E;&#x8F74;&#x5411;&#x51B3;&#x8BAE; 1 &mu; m &#x548C; &asymp; 15 &mu; m&#xFF0C;&#x5206;&#x522B;&#x590D;&#x5408;&#x54A7;&#x5634;&#x4E00;&#x7B11;&#x7684;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x76F4;&#x5F84;&#x7684;&#x955C;&#x7247;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x54A7;&#x5634;&#x4E00;&#x7B11;&#x7684;&#x955C;&#x5934; singlets &#x663E;&#x793A;&#x8D85;&#x8FC7; 150 &mu; m&#xFF0C;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E3A;&#x6570;&#x5341;&#x5FAE;&#x7C73;&#x590D;&#x5408;&#x68AF;&#x5EA6;&#x6298;&#x5C04;&#x7387;&#x900F;&#x955C;&#x7684;&#x5B57;&#x6BB5;&#x7684;&#x89C6;&#x56FE;&#x3002;&#x8FD9;&#x91CC;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x7684;&#x54A7;&#x5634;&#x4E00;&#x7B11;&#x955C;&#x5934;/&#x76D6;&#x73BB;&#x7483;&#x7EC4;&#x5408;&#x662F;&#x4FBF;&#x4E8E;&#x7EC4;&#x88C5;&#x548C;&#x4F7F;&#x7528;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x6B21;&#x6027;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x8BBE;&#x5907;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x795E;&#x7ECF;&#x79D1;&#x5B66;&#x793E;&#x4F1A;&#x51C6;&#x5907;&#x597D;&#x901A;&#x8FC7;&#x7684;&#x4F4E;&#x4EF7;&#x3002;

&#x6DF1;&#x4F53;&#x5185;&#x591A;&#x5149;&#x5B50;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x7684;&#x5355;&#x7EBF;&#x6001;&#x68AF;&#x5EA6;&#x6298;&#x5C04;&#x7387;&#x900F;&#x955C;&#x3002;

Micro-optical probes, including gradient index (GRIN) lenses and microprisms, have expanded the range of in vivo multiphoton microscopy to reach previously inaccessible deep brain structures such as deep cortical layers and the underlying hippocampus in mice. Yet imaging with GRIN lenses has been fundamentally limited by large amounts of spherical aberration and the need to construct compound lenses that limit the field-of-view. Here, we demonstrate the use of 0.5-mm-diameter, 1.7-mm-long GRIN lens singlets with 0.6 numerical aperture in conjunction with a cover glass and a conventional microscope objective correction collar to balance spherical aberrations. The resulting system achieves a lateral resolution of 618 nm and an axial resolution of 5.5 Î¼m, compared to lateral and axial resolutions of â‰ˆ 1 Î¼m and â‰ˆ 15 Î¼m, respectively, for compound GRIN lenses of similar diameter. Furthermore, the GRIN lens singlets display fields-of-view in excess of 150 Î¼m, compared with a few tens of microns for compound GRIN lenses. The GRIN lens/cover glass combination presented here is easy to assemble and inexpensive enough for use as a disposable device, enabling ready adoption by the neuroscience community.

Singlet gradient index lens for deep in vivo multiphoton microscopy.

Sondes micro-optiques, y compris de gradient d&#39;indice (GRIN) lentilles et microprismes, ont &eacute;largi l&#39;&eacute;ventail de la microscopie multiphoton in vivo pour atteindre les structures jusque-l&agrave; inaccessibles profonde du cerveau telles que les couches profondes corticales et l&#39;hippocampe sous-jacente chez la souris. Imagerie encore avec des lentilles GRIN a &eacute;t&eacute; fondamentalement limit&eacute;e par grandes quantit&eacute;s d&#39;aberration sph&eacute;rique et la n&eacute;cessit&eacute; de construire des lentilles compos&eacute; qui limitent le champ de vision. Ici, nous d&eacute;montrons l&#39;utilisation de 0,5 mm de diam&egrave;tre, 1,7 mm-long sourire maillots de lentille avec une ouverture num&eacute;rique 0,6 en conjonction avec un couvercle en verre et un collier de correction objectif de microscope conventionnel pour &eacute;quilibrer les aberrations sph&eacute;riques. Le syst&egrave;me qui en r&eacute;sulte permet d&#39;obtenir une r&eacute;solution lat&eacute;rale de 618 nm et une r&eacute;solution axiale de 5,5 &mu;m, comparativement &agrave; des r&eacute;solutions lat&eacute;rales et axiales de &asymp; 1 &mu;m et &asymp; 15 &mu;m, respectivement, pour compos&eacute; GRIN lentilles de m&ecirc;me diam&egrave;tre. En outre, les maillots de lentille GRIN affichent champs de vision plus de 150 &mu;m, par rapport &agrave; quelques dizaines de microns pour lentilles compos&eacute;s de sourire. La combinaison de verre cabochon/GRIN pr&eacute;sent&eacute;e ici est facile &agrave; assembler et assez abordable pour une utilisation comme un dispositif jetable, permettant une adoption pr&ecirc;te de la communaut&eacute; des neurosciences.

Objectif du singulet gradient d&#39;indice pour la microscopie multiphoton profond in vivo.

Mikrooptische Sonden, einschlie&szlig;lich Gradienten-Index (GRIN) Linsen und Mikroprismen, erweitert das Spektrum der in-vivo multiphoton-Mikroskopie, zuvor unzug&auml;nglichen tiefen Gehirn Strukturen wie tief kortikalen Schichten und die zugrunde liegenden Hippocampus bei M&auml;usen zu erreichen. Mit GRIN-Linsen noch imaging wurde grundlegend begrenzt durch gro&szlig;e Mengen von sph&auml;rische Aberration und die Notwendigkeit, Compound-Objektive zu konstruieren, die das Sichtfeld einschr&auml;nken. Hier zeigen wir die Verwendung von 0,5 mm Durchmesser, 1,7 mm langen GRINSEN Objektiv Einzellinsen mit 0,6 numerische Apertur in Verbindung mit einem Deckglas und einem herk&ouml;mmlichen Mikroskop Objektive Korrektur Kragen sph&auml;rische Aberrationen auszugleichen. Das resultierende System erreicht eine laterale Aufl&ouml;sung von 618 nm und einer axialen Aufl&ouml;sung von 5,5 &mu;m, verglichen mit laterale und axiale Aufl&ouml;sung von &asymp; 1 &mu;m und &asymp; 15 &mu;m, bzw. f&uuml;r zusammengesetzte GRIN-Linsen mit &auml;hnlichen Durchmesser. Dar&uuml;ber hinaus zeigen die GRIN Linse Einzellinsen Felder-of-View von mehr als 150 &mu;m, verglichen mit ein paar Dutzend Mikrometer f&uuml;r zusammengesetzte GRIN-Linsen. Die GRIN Objektivabdeckung/Glas Kombination pr&auml;sentiert hier ist einfach zu montieren und preiswert genug f&uuml;r den Einsatz als verf&uuml;gbares Ger&auml;t bereit einarbeiten der Neurowissenschaften-Gemeinschaft.

Singulett-Gradienten-Index-Objektiv f&uuml;r multiphoton tief in-vivo-Mikroskopie.

Sonde Micro-ottica, compresi indice gradiente (GRIN) lenti e microprismi, hanno ampliato la gamma di in vivo microscopia multifotonica per raggiungere le strutture cerebrali profonde precedentemente inaccessibili come strati profondi corticali e l&#39;ippocampo sottostante nei topi. Ancora di imaging con lenti GRIN &egrave; stato fondamentalmente limitata da grandi quantit&agrave; di aberrazione sferica e la necessit&agrave; di costruire lenti composto che limitano il campo di vista. Qui, ci illustrano l&#39;utilizzo del diametro di 0,5 mm, 1.7 mm di lunghezza Camiciole di lente GRIN con apertura numerica 0,6 in congiunzione con un vetro di copertura e un collare di correzione oggettiva microscopio convenzionale per bilanciare le aberrazioni sferica. Il sistema risultante raggiunge una risoluzione laterale di 618 nm e una risoluzione assiale di 5,5 &mu;m, rispetto a risoluzioni laterale e assiale di &asymp; 1 &mu;m e &asymp; 15 &mu;m, rispettivamente, per composti GRIN lenti di diametro simile. Inoltre, i canottiere lente GRIN visualizzare campi di vista superiori a 150 &mu;m, confrontato con poche decine di micron per lenti GRIN composti. La combinazione di vetro copriobiettivo/GRIN presentata qui &egrave; facile da montare e abbastanza economico per essere utilizzato come un dispositivo monouso, consentendo la pronta adozione da parte della Comunit&agrave; di neuroscienze.

Lente di gradiente indice singoletto per microscopia multifotonica profondo in vivo.

&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x5149;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x3092;&#x30B0;&#x30E9;&#x30C7;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; &#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9; &#xFF08;&#x30CB;&#x30E4;&#x30EA;&#xFF09; &#x306A;&#x3069;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x3068; microprisms&#x3001;&#x62E1;&#x5927;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x8FD1;&#x3065;&#x304D;&#x8133;&#x6DF1;&#x90E8;&#x69CB;&#x9020;&#x76AE;&#x8CEA;&#x6DF1;&#x90E8;&#x5C64;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x57FA;&#x306B;&#x306A;&#x308B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x6D77;&#x99AC;&#x306A;&#x3069;&#x306B;&#x5230;&#x9054;&#x3059;&#x308B; in vivo &#x591A;&#x5149;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306E;&#x7BC4;&#x56F2;&#x3002;&#x307E;&#x3060;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0; GRIN &#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x3092;&#x6839;&#x672C;&#x7684;&#x306B;&#x5927;&#x91CF;&#x306E;&#x7403;&#x9762;&#x53CE;&#x5DEE;&#x3068;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC;&#x306E;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C9;&#x3092;&#x5236;&#x9650;&#x3059;&#x308B;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x3092;&#x69CB;&#x7BC9;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x6027;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5236;&#x9650;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;0.5 mm &#x306E;&#x76F4;&#x5F84;&#x3001;1.7 mm &#x9577;&#x3055;&#x306E; GRIN &#x30EC;&#x30F3;&#x30BA; &#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x30EC;&#x30C3;&#x30C8; 0.6 &#x958B;&#x53E3;&#x6570;&#x30AB;&#x30D0;&#x30FC; &#x30AC;&#x30E9;&#x30B9;&#x3068;&#x7403;&#x9762;&#x53CE;&#x5DEE;&#x3092;&#x30D0;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x5F93;&#x6765;&#x306E;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x5BA2;&#x89B3;&#x7684;&#x88DC;&#x6B63;&#x895F;&#x3068;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3068;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x3092;&#x30C7;&#x30E2;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306E;&#x7D50;&#x679C; 618 &#x306E;&#x7A7A;&#x9593;&#x5206;&#x89E3;&#x80FD;&#x3092;&#x5B9F;&#x73FE; nm &#x3068;&#x3001;&#x8EF8;&#x306E;&#x89E3;&#x50CF;&#x5EA6; 5.5 &mu; m &#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066; &asymp; &#x5074;&#x5727;&#x3068;&#x8EF8;&#x306E;&#x89E3;&#x50CF;&#x5EA6;&#x3092; 1 &mu; m &#x3068; &asymp; 15 &mu;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3001;&#x5316;&#x5408;&#x7269; GRIN &#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x3088;&#x304F;&#x4F3C;&#x305F;&#x76F4;&#x5F84;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;GRIN &#x30EC;&#x30F3;&#x30BA; &#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x30EC;&#x30C3;&#x30C8;&#x6570;&#x5341;&#x30DF;&#x30AF;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x306E; GRIN &#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x306E;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x3001;150 &mu; m &#x3092;&#x8D85;&#x3048;&#x308B;&#x306E;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC; &#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C9;&#x306E;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x306B;&#x63D0;&#x793A; GRIN &#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;/&#x30AB;&#x30D0;&#x30FC; &#x30AC;&#x30E9;&#x30B9;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x7D44;&#x307F;&#x7ACB;&#x3066;&#x3084;&#x3059;&#x3044;&#x3068;&#x5341;&#x5206;&#x306B;&#x5B89;&#x4FA1;&#x306A;&#x6E96;&#x5099;&#x306E;&#x63A1;&#x7528;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x795E;&#x7D4C;&#x79D1;&#x5B66;&#x30B3;&#x30DF;&#x30E5;&#x30CB;&#x30C6;&#x30A3;&#x3092;&#x6709;&#x52B9;&#x306B;&#x3001;&#x4F7F;&#x3044;&#x6368;&#x3066;&#x306E;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#x6DF1;&#x3044; in vivo &#x591A;&#x5149;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x4E00;&#x91CD;&#x9805;&#x30B0;&#x30E9;&#x30C7;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; &#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9; &#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x3002;

&#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; &#xAD11;&#xD559; &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C;, &#xADF8;&#xB77C;&#xB370;&#xC774;&#xC158; &#xC778;&#xB371;&#xC2A4; (&#xBBF8;&#xC18C;)&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xB80C;&#xC988; &#xBC0F; &#xC9C0;&#xB3C4;, &#xAE4A;&#xC740; &#xB300;&#xB1CC; &#xD53C; &#xC9C8;&#xC758; &#xB808;&#xC774;&#xC5B4; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC950; &#xD574; &#xB9C8; &#xB4F1;&#xC758; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC561;&#xC138;&#xC2A4;&#xD560; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xAE4A;&#xC740; &#xB1CC; &#xAD6C;&#xC870;&#xC5D0; &#xB3C4;&#xB2EC; multiphoton &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;&#xC758; &#xBC94;&#xC704;&#xB97C; &#xD655;&#xB300; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBBF8;&#xC18C; &#xB80C;&#xC988;&#xC640; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xC544;&#xC9C1; &#xB2E4;&#xB7C9;&#xC758; &#xAD6C;&#xBA74; &#xC218; &#xCC28; &#xBC0F; &#xBCF4;&#xAE30; &#xD544;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC81C;&#xD55C; &#xD558;&#xB294; &#xBCF5;&#xD569; &#xB80C;&#xC988;&#xB97C; &#xAD6C;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xD544;&#xC694;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADFC;&#xBCF8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC81C;&#xD55C; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xCEE4;&#xBC84; &#xC720;&#xB9AC; &#xBC0F; &#xAD6C;&#xBA74; aberrations &#xADE0;&#xD615;&#xC744; &#xAE30;&#xC874;&#xC758; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC1D;&#xAD00;&#xC801;&#xC778; &#xBCF4;&#xC815; &#xCE7C;&#xB77C;&#xC640; &#xD568;&#xAED8;&#xC5D0;&#xC11C; 0.6 &#xC22B;&#xC790; &#xC870;&#xB9AC;&#xAC1C;&#xC640; 0.5 m m &#xC9C1;&#xACBD;, 1.7 m m &#xAE34; &#xBBF8;&#xC18C; &#xB80C;&#xC988; singlets &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xACFC; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xB2EC;&#xC131; 618&#xC758; &#xCE21;&#xBA74; &#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; &#xBC0F; 5.5 &mu; m&#xC758; &#xCD95; &#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &asymp;&#xC758; &#xCE21;&#xBA74; &#xBC0F; &#xCD95; &#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; 1 &mu; m &#xBC0F; &asymp; 15 &mu;, &#xAC01;&#xAC01; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xC9C1;&#xACBD;&#xC758; &#xCEF4;&#xD30C;&#xC6B4;&#xB4DC; &#xBBF8;&#xC18C; &#xB80C;&#xC988;. &#xB610;&#xD55C;, &#xBBF8;&#xC18C; &#xB80C;&#xC988; singlets &#xBCF5;&#xD569; &#xBBF8;&#xC18C; &#xB80C;&#xC988; &#xBBF8;&#xD06C;&#xB860;&#xC758; &#xBA87; &#xC218;&#xB9CC; &#xBE44;&#xD574; 150 &mu; m &#xC774;&#xC0C1;&#xC758; &#xBCF4;&#xAE30;&#xC758; &#xD544;&#xB4DC;&#xB97C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC81C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xBBF8;&#xC18C; &#xB80C;&#xC988;/&#xCEE4;&#xBC84; &#xC720;&#xB9AC; &#xC870;&#xD569; &#xC870;&#xB9BD; &#xD558;&#xAE30; &#xC27D;&#xACE0; &#xCDA9;&#xBD84;&#xD788; &#xC2E0;&#xACBD; &#xACFC;&#xD559; &#xCEE4;&#xBBA4;&#xB2C8;&#xD2F0;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC900;&#xBE44; &#xB3C4;&#xC785;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xAC8C; &#xC77C;&#xD68C;&#xC6A9; &#xC7A5;&#xCE58;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC800;&#xB834; &#xD55C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB0B4;&#xC758; &#xAE4A;&#xC740; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; multiphoton &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xADF8;&#xB77C;&#xB370;&#xC774;&#xC158; &#xC778;&#xB371;&#xC2A4; &#xB80C;&#xC988;.

Sondas &oacute;pticas micro, incluyendo &iacute;ndice gradiente (GRIN) lentes y microprisms, han ampliado la gama de microscop&iacute;a multifot&oacute;n in vivo para llegar a las estructuras del cerebro profundo previamente inaccesibles como capas corticales profundas y el hipocampo subyacente en ratones. Proyecci&oacute;n de imagen a&uacute;n con lentes de sonrisa ha sido limitado fundamentalmente por grandes cantidades de aberraci&oacute;n esf&eacute;rica y la necesidad de construir lentes de compuesto que limitan el campo de visi&oacute;n. Aqu&iacute;, demostramos que el uso de camisetas de lente GRIN 0.5 mm de di&aacute;metro, 1.7 mm de longitud con 0,6 apertura num&eacute;rica junto con una cubierta de vidrio y un collar de correcci&oacute;n objetiva del microscopio convencional para equilibrar las aberraciones esf&eacute;ricas. El sistema resultante alcanza una resoluci&oacute;n lateral de 618 nm y una resoluci&oacute;n axial de 5.5 &mu;m, comparado resoluci&oacute;n lateral y axial de &asymp; 1 &micro;m y &asymp; 15 &micro;m, respectivamente, para lentes GRIN compuestas de di&aacute;metro similar. Adem&aacute;s, las camisetas de la lente GRIN Mostrar campos de vista superior a 150 &mu;m, en comparaci&oacute;n con unas pocas decenas de micras para lentes compuestas de sonrisa. La combinaci&oacute;n de vidrio de cubierta de lente/GRIN presentada aqu&iacute; es f&aacute;cil de montar y lo suficientemente barato para su uso como un dispositivo desechable, permitiendo la adopci&oacute;n preparado por la comunidad de neurociencia.

Teresa A. Murray

Department of Biomedical Engineering

Yale University

Multiphoton Microscopy of Cleared Mouse Brain Expressing YFP

Teresa A. Murray

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Department of Biomedical Engineering

Yale University

Multiphoton Microscopy of Cleared Mouse Brain Expressing YFP

Department of Biomedical Engineering