Eukaryotic Polyribosome Profile Analysis

Protein synthesis is a complex cellular process that is regulated at many levels. For example, global translation can be inhibited at the initiation phase ...

A High-throughput Cre-Lox Activated Viral Membrane Fusion Assay to Identify Inhibitors of HIV-1 Viral Membrane Fusion

This assay is designed to specifically report on HIV-1 fusion via the expression of green fluorescent protein (GFP) detectable by flow cytometry or ...

University of Medicine and Dentistry of New Jersey, Robert Wood Johnson Medical School

Icahn School of Medicine at Mount Sinai, Immunology Institute

New Jersey City University

&#x4E3B;&#x673A; RNA &#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x53D1;&#x6325;&#x591A;&#x4E2A;&#xFF0C;&#x5728;&#x6B63;&#x94FE; RNA &#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x590D;&#x5236;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6216;&#x7F3A;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x6807;&#x8BC6;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x75C5;&#x6BD2; Rna &#x7684;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x91C7;&#x53D6;&#x5168;&#x7403;&#x505A;&#x6CD5;&#x57FA;&#x4E8E;&#x9175;&#x6BCD;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x82AF;&#x7247;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x5305;&#x542B; 4080 &#x7EAF;&#x51C0;&#x7684;&#x9175;&#x6BCD;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x751F;&#x7269;&#x7D20;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684; RNA &#x63A2;&#x9488;&#x5305;&#x62EC;&#x4E24;&#x4E2A;&#x8FDC;&#x4EB2;&#x7684; RNA &#x75C5;&#x6BD2;&#xFF0C;&#x5373;&#x756A;&#x8304;&#x4E1B;&#x77EE;&#x75C5;&#x6BD2; (TBSV) &#x548C;&#x65E0;&#x8292;&#x96C0;&#x82B1;&#x53F6;&#x75C5;&#x6BD2; (&#x4E18;)&#x3002;&#x603B;&#x4E4B;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x786E;&#x5B9A;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; TBSV RNA &#x548C; &#xFF08;&#x6216;&#xFF09; &#x4E18; RNA &#x7684; 57 &#x9175;&#x6BCD;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x5341;&#x4E00;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; TBSV RNA &#x548C;&#x4E03;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x4E18; RNA &#x5177;&#x6709;&#x9AD8;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#xFF0C;&#x800C;&#x5176;&#x4F59; 39 &#x5BBF;&#x4E3B;&#x86CB;&#x767D;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684; Rna&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x51DD;&#x80F6;&#x6D41;&#x52A8;&#x8F6C;&#x79FB;&#x548C;&#x9175;&#x6BCD;&#x4E2D;&#x63D0;&#x53D6;&#x63D0;&#x7EAF;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x4E86; TBSV RNA &#x590D;&#x5236;&#x5B50;&#x548C;&#x4E94;&#x4E2A;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684;&#x4E3B;&#x673A;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x8FC7;&#x91CF;&#x8868;&#x8FBE;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x86CB;&#x767D;&#x5728;&#x9175;&#x6BCD;&#x4E2D;&#x7684;&#xFF0C;&#x6A21;&#x578B;&#x4E3A; TBSV&#xFF0C;&#x4E3B;&#x673A;&#x663E;&#x793A; 4 &#x589E;&#x5F3A; TBSV &#x590D;&#x5236;&#x7684;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4EE5;&#x53CA;&#x6291;&#x5236;&#x590D;&#x5236;&#x7684; 14 &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; TBSV RNA&#xFF0C;&#x5373;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x5EF6;&#x4F38;&#x56E0;&#x5B50; eEF1A&#xFF0C;&#x5DF2;&#x67E5;&#x660E;&#x7684;&#x9175;&#x6BCD;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4E4B;&#x4E00;&#x7684;&#x8BE6;&#x7EC6;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x663E;&#x793A;&#x76EE;&#x524D;&#x5728;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x7EAF;&#x5316;&#x7684; tombusvirus &#x590D;&#x5236;&#x9176;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4E5F;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA; eEF1A p33 &#x590D;&#x5236;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x672B;&#x5C3E; 3&#39; TBSV RNA &#x5DF2;&#x77E5;&#x7684;&#x987A;&#x5F0F;&#x5143;&#x7D20;&#x7684;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x7684; eEF1A&#xFF0C;eEF1A TBSV &#x590D;&#x5236;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x53C2;&#x4E0E;&#x5BF9;&#x63D0;&#x4F9B;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x3002;

&#x7FFB;&#x8BD1;&#x4F38;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50; 1A &#x662F;&#x590D;&#x6742;&#x7684; tombusvirus &#x590D;&#x5236;&#x9176;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7EC4;&#x6210;&#x90E8;&#x5206;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5F71;&#x54CD; p33 &#x590D;&#x5236;&#x534F;&#x56E0;&#x6570;&#x7684;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x3002;

Host RNA-binding proteins are likely to play multiple, integral roles during replication of plus-strand RNA viruses. To identify host proteins that bind to viral RNAs, we took a global approach based on the yeast proteome microarray, which contains 4080 purified yeast proteins. The biotin-labeled RNA probes included two distantly related RNA viruses, namely Tomato bushy stunt virus (TBSV) and Brome mosaic virus (BMV). Altogether, we have identified 57 yeast proteins that bound to TBSV RNA and/or BMV RNA. Among the identified host proteins, eleven bound to TBSV RNA and seven bound to BMV RNA with high selectivity, whereas the remaining 39 host proteins bound to both viral RNAs. The interaction between the TBSV replicon RNA and five of the identified host proteins was confirmed via gel-mobility shift and co-purification experiments from yeast. Over-expression of the host proteins in yeast, a model host for TBSV, revealed 4 host proteins that enhanced TBSV replication as well as 14 proteins that inhibited replication. Detailed analysis of one of the identified yeast proteins binding to TBSV RNA, namely translation elongation factor eEF1A, revealed that it is present in the highly purified tombusvirus replicase complex. We also demonstrate binding of eEF1A to the p33 replication protein and a known cis-acting element at the 3' end of TBSV RNA. Using a functional mutant of eEF1A, we provide evidence on the involvement of eEF1A in TBSV replication.

Translation elongation factor 1A is a component of the tombusvirus replicase complex and affects the stability of the p33 replication co-factor.

Prot&eacute;ines de liaison &agrave; l&#39;ARN d&#39;h&ocirc;te sont susceptibles de jouer plusieurs r&ocirc;les int&eacute;grale lors de la r&eacute;plication des virus ARN &agrave; brin plus. Pour identifier les prot&eacute;ines qui se lient &agrave; l&#39;ARN viral de l&#39;h&ocirc;te, nous avons pris une approche globale bas&eacute;e sur la levure proteome microarray, qui contient des prot&eacute;ines de levure purifi&eacute; 4080. Les sondes d&#39;ARN marqu&eacute; biotine inclus deux virus &agrave; ARN lointainement connexes, nomm&eacute;ment Tomato bushy stunt virus (TBSV) et au virus de mosa&iuml;que de Brome (BMV). Au total, nous avons identifi&eacute; des prot&eacute;ines de levure 57 li&eacute;s au RNA TBSV et/ou de l&#39;ARN BMV. Parmi les prot&eacute;ines de l&#39;h&ocirc;te identifi&eacute;, onze li&eacute;e &agrave; l&#39;ARN TBSV et sept li&eacute;e &agrave; BMV RNA &agrave; haute s&eacute;lectivit&eacute;, tandis que les autres prot&eacute;ines de le 39 h&ocirc;te li&eacute; &agrave; ces deux ARN viraux. L&#39;interaction entre le r&eacute;plicon TBSV RNA et cinq des prot&eacute;ines de l&#39;h&ocirc;te identifi&eacute; a &eacute;t&eacute; confirm&eacute;e via Maj gel-mobilit&eacute; et exp&eacute;riences de copurification de la levure. La surexpression des prot&eacute;ines de l&#39;h&ocirc;te chez la levure, et une foule de mod&egrave;le pour TBSV, a r&eacute;v&eacute;l&eacute; 4 prot&eacute;ines de l&#39;h&ocirc;te qui a am&eacute;lior&eacute; la r&eacute;plication TBSV ainsi que 14 prot&eacute;ines qui inhibent la r&eacute;plication. Analyse d&eacute;taill&eacute;e d&#39;une des prot&eacute;ines identifi&eacute;es levure liaison &agrave; l&#39;ARN TBSV, nomm&eacute;ment translation &eacute;longation facteur eEF1A, a r&eacute;v&eacute;l&eacute; qu&#39;elle est pr&eacute;sente dans la complexe de r&eacute;plicase tombusvirus hautement purifi&eacute;e. Nous d&eacute;montrons &eacute;galement la liaison de l&#39;eEF1A &agrave; la prot&eacute;ine de r&eacute;plication p33 et un &eacute;l&eacute;ment intramol&eacute;culaires connu &agrave; l&#39;extr&eacute;mit&eacute; 3&#39; de l&#39;ARN TBSV. &Agrave; l&#39;aide d&#39;un mutant fonctionnel d&#39;eEF1A, nous montrons sur l&#39;implication des eEF1A dans la r&eacute;plication de TBSV.

Translation &eacute;longation facteur 1 a est un composant de la r&eacute;plicase tombusvirus complexe et affecte la stabilit&eacute; de la cofacteur de r&eacute;plication p33.

Host-RNA-bindende Proteine sind wahrscheinlich mehrere, spielen wesentlichen Rollen w&auml;hrend der Replikation der Plus-Strang-RNA-Viren. Um Host Proteine zu identifizieren, die virale RNA binden, haben wir ein globales Konzept auf der Grundlage der Hefe Proteome Microarray, die 4080 gereinigten Hefe Proteine enth&auml;lt. Die Biotin-beschrifteten RNA-Sonden enthalten zwei weitl&auml;ufig Verwandte RNA-Viren, n&auml;mlich Tomaten buschigen Stunt Virus (TBSV) und Brome-Mosaik-Virus (BMV). Insgesamt haben wir 57 Hefeproteinen identifiziert, die an TBSV RNA bzw. BMV RNA gebunden. Unter den identifizierten Host-Proteine elf an TBSV RNA gebunden, und sieben an BMV RNA mit hoher Selektivit&auml;t, gebunden, w&auml;hrend die verbleibenden 39 Host-Proteine an beiden viralen RNAs gebunden. Die Interaktion zwischen den TBSV Replikon RNA und f&uuml;nf der identifizierten Host-Proteine wurde mittels Gel-Mobilit&auml;ts-Schicht und Co-purification Experimente aus Hefe best&auml;tigt. &Uuml;berexpression von der Host-Proteine in Hefe, einen Modell-Host f&uuml;r TBSV, ergab 4 Host-Proteine, die TBSV Replikation verbessert sowie 14 Proteine, die Replikation gehemmt. Detaillierte Analyse der eines der identifizierten Hefe Proteine binden an TBSV RNA, n&auml;mlich &Uuml;bersetzung Dehnung Faktor eEF1A, ergab, dass es in der komplexen hoch gereinigten Tombusvirus Replicase vorhanden ist. Wir zeigen auch die Bindung der eEF1A die p33-Replikation-Protein und ein bekanntes Cis wirkende Element am 3&#39;-Ende des TBSV RNA. Verwenden eine funktionale Mutante von eEF1A, bieten wir Beweise &uuml;ber die Einbeziehung der eEF1A in der TBSV-Replikation.

&Uuml;bersetzung Dehnung Faktor 1A ist Bestandteil der komplexen Tombusvirus Replicase und beeinflusst die Stabilit&auml;t der p33-Replikation-Co-factor.

Host RNA-binding proteins rischiano di giocare pi&ugrave; ruoli integrali durante la replicazione del virus RNA plus-strand. Per identificare le proteine di host che si legano al RNA virale, abbiamo preso un approccio globale basato su microarray proteome del lievito, che contiene proteine purificate lievito 4080. Le sonde del RNA marcato con biotina includevano due virus RNA lontanamente correlate, vale a dire Tomato bushy stunt virus (TBSV) e Brome mosaic virus (BMV). Complessivamente, abbiamo individuato 57 proteine di lievito che associato a TBSV RNA o RNA BMV. Tra le proteine identificate host, undici associato alla TBSV RNA e sette associato al RNA BMV con alta selettivit&agrave;, mentre le restanti proteine 39 host associato a entrambi RNAs virale. L&#39;interazione tra il replicone TBSV RNA e le proteine identificate host e cinque &egrave; stato confermato tramite gel-mobility shift e gli esperimenti di co-purification da lievito. Sovraespressione di proteine ospite in lievito, una miriade di modello per TBSV, ha rivelato 4 proteine ospiti che ne hanno migliorato la replica TBSV, nonch&eacute; 14 proteine che inibiscono la replica. Analisi dettagliata di una delle proteine identificate lievito vincolante al RNA TBSV, cio&egrave; traduzione allungamento fattore eEF1A, ha rivelato che &egrave; presente nella tombusvirus altamente purificato replicasi complessi. Dimostriamo anche associazione di eEF1A della proteina di replica p33 e un elemento cis-acting noto all&#39;estremit&agrave; 3&#39; del RNA TBSV. Utilizzando un mutante funzionale di eEF1A, forniamo prove sul coinvolgimento dei eEF1A per la replica di TBSV.

Traduzione allungamento factor 1A &egrave; un componente della tombusvirus replicasi complesse e compromette la stabilit&agrave; del cofattore replica p33.

&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E; RNA &#x7D50;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306F;&#x8907;&#x6570;&#x3001;&#x518D;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x9396; RNA &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x4E2D;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3002;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E; Rna &#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9; &#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x9175;&#x6BCD;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x306E; 4080 &#x7CBE;&#x88FD;&#x9175;&#x6BCD;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3001;&#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x4E0A;&#x306E;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30B0;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D0;&#x30EB;&#x306A;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x53D6;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x30D3;&#x30AA;&#x30C1;&#x30F3;&#x6A19;&#x8B58; RNA &#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x306F;&#x3001;2 &#x3064;&#x306E;&#x9060;&#x7E01; RNA &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3001;&#x3059;&#x306A;&#x308F;&#x3061;&#x30C8;&#x30DE;&#x30C8;&#x3075;&#x3055;&#x3075;&#x3055;&#x3057;&#x305F;&#x30B9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30C8; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; &#xFF08;TBSV&#xFF09;&#x3001;&#x30D6;&#x30ED;&#x30E0; &#x30E2;&#x30B6;&#x30A4;&#x30AF; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; (BMV) &#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x3001;TBSV RNA &#x3084; BMV RNA &#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x305F; 57 &#x306E;&#x30A4;&#x30FC;&#x30B9;&#x30C8;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8; &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x9593;&#x30A4;&#x30EC;&#x30D6;&#x30F3; TBSV RNA &#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x3001;&#x6B8B;&#x308A;&#x306E; 39 &#x30DB;&#x30B9;&#x30C8; &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x4E21;&#x65B9;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; Rna &#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3001;7 &#x9AD8;&#x9078;&#x629E;&#x5EA6;&#x3092;&#x6301;&#x3064; BMV RNA &#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;TBSV &#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B3;&#x30F3; RNA &#x3068; 5 &#x3064;&#x306E;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x9593;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x3001;&#x30B2;&#x30EB;&#x306E;&#x79FB;&#x52D5;&#x6027;&#x30B7;&#x30D5;&#x30C8;&#x3068; co-purification &#x5B9F;&#x9A13;&#x9175;&#x6BCD;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x7D4C;&#x7531;&#x3067;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x9175;&#x6BCD;&#x306E;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3001;TBSV &#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306E;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x3067;&#x306F;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x305F; 14 &#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x3001;TBSV &#x306E;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x5F37;&#x5316; 4 &#x306E;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7FFB;&#x8A33;&#x4F38;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50; eEF1A &#x3059;&#x306A;&#x308F;&#x3061; TBSV RNA &#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30A4;&#x30FC;&#x30B9;&#x30C8;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E; 1 &#x3064;&#x306E;&#x8A73;&#x7D30;&#x306A;&#x5206;&#x6790;&#x306F;&#x3001;&#x9AD8;&#x7D14;&#x5EA6; tombusvirus &#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x8907;&#x88FD;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x304C;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x305F; eEF1A p33 &#x8907;&#x88FD;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068; TBSV RNA &#x306E; 3&#39; &#x7D42;&#x308F;&#x308A;&#x3067;&#x65E2;&#x77E5;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30A8;&#x30EC;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x8981;&#x7D20;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x5909;&#x7570;&#x4F53; eEF1A &#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005; eEF1A TBSV &#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x7FFB;&#x8A33;&#x4F38;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50; 1 a &#x306F;&#x3001;&#x8907;&#x96D1;&#x306A; tombusvirus &#x306E;&#x8907;&#x88FD;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3067;&#x3001;p33 &#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; co-factor &#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; RNA &#xC758;&#xBB34;&#xC801;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC740; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC1C;&#xC758; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xD50C;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xAC00;&#xB2E5; RNA &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;. &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; RNAs &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD560; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC2DD;&#xBCC4; 4080 &#xC815;&#xD654; &#xD6A8; &#xBAA8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xD6A8; &#xBAA8; &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC634; microarray&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xAE00;&#xB85C;&#xBC8C; &#xC811;&#xADFC;&#xC744; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Biotin &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; RNA &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C; &#xD3EC;&#xD568; &#xB450; &#xBA3C; &#xAD00;&#xB828;&#xB41C; RNA &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;, &#xC989; &#xD1A0;&#xB9C8;&#xD1A0; &#xB365; &#xC218; &#xB8E9; &#xD55C; &#xC2A4;&#xD134; &#xD2B8; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (TBSV) &#xBC0F; &#xBE0C;&#xB86C; &#xBAA8;&#xC790;&#xC774;&#xD06C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (BMV). &#xBAA8;&#xB450;, &#xC6B0;&#xB9AC; TBSV RNA &#xB610;&#xB294; BMV RNA&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; 57 &#xD6A8; &#xBAA8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD655;&#xC778; &#xB41C; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC911; 11 TBSV RNA&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB418;&#xBA70; 7&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; BMV RNA &#xB192;&#xC740; &#xC120;&#xD0DD;&#xB3C4; &#xC788;&#xB294; &#xBC18;&#xBA74; &#xB098;&#xBA38;&#xC9C0; 39 &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBAA8;&#xB450; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; Rnas&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C;. TBSV replicon RNA 5 &#xD655;&#xC778; &#xB41C; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638;&#xC791;&#xC6A9;&#xC73C;&#xB85C; &#xC824; &#xC774;&#xB3D9;&#xC131; shift &#xD0A4;&#xC640; &#xB204; &#xB8E9;&#xC5D0;&#xC11C; co-purification &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xD655;&#xC778; &#xB410;&#xB2E4;. Over-expression &#xD6A8; &#xBAA8;&#xC5D0; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;, TBSV&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xBAA8;&#xB378; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC758; &#xBCF5;&#xC81C;&#xB97C; &#xC800;&#xD574; 14 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC73C;&#xB85C; &#xC11C; TBSV &#xBCF5;&#xC81C; &#xD5A5;&#xC0C1; 4 &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC0C1;&#xC138;&#xD55C; &#xBD84;&#xC11D; &#xD55C; TBSV RNA, &#xC989; &#xBC88;&#xC5ED; &#xC2E0;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; eEF1A &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD560; &#xD655;&#xC778; &#xB41C; &#xD6A8; &#xBAA8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xACE0; &#xC21C;&#xB3C4; tombusvirus replicase&#xC5D0; &#xBC1D;&#xD614;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C; p33 &#xBCF5;&#xC81C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC0F; TBSV RNA&#xC758; 3&#39; &#xB05D;&#xC5D0; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4;&#xB41C; cis &#xC5F0;&#xAE30; &#xC694;&#xC18C;&#xC5D0; Eef1a&#xC758; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. Eef1a&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC; eEF1A TBSV &#xBCF5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBC88;&#xC5ED; &#xC2E0;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; 1A &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; tombusvirus replicase&#xC758; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; &#xC774;&#xBA70; p33 &#xBCF5;&#xC81C; co-factor&#xC758; &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Prote&iacute;nas de uni&oacute;n a RNA anfitri&oacute;n suelen jugar m&uacute;ltiples, papeles integrales durante la replicaci&oacute;n de los virus de ARN de cadena m&aacute;s. Para identificar prote&iacute;nas de host que se unen al ARN viral, tomamos un enfoque global basado en el microarray de proteoma de levadura, que contiene prote&iacute;nas de levadura purificada 4080. Las sondas ARN marcados con biotina incluyen dos virus ARN muy relacionados, es decir, tomate bushy stunt virus (TBSV) y Brome mosaic virus (BMV). En conjunto, hemos identificado 57 prote&iacute;nas de la levadura que enlaza al TBSV ARN o RNA de la BMV. Entre las prote&iacute;nas identificadas anfitri&oacute;n, once limitado TBSV ARN y siete atado a la BMV RNA con alta selectividad, mientras que las restantes prote&iacute;nas 39 anfitri&oacute;n obligado a ambos ARN viral. La interacci&oacute;n entre el replic&oacute;n TBSV RNA y cinco de las prote&iacute;nas identificadas anfitri&oacute;n fue confirmada mediante cambio de gel-movilidad y experimentos de co-purification de la levadura. Sobreexpresi&oacute;n de las prote&iacute;nas de anfitri&oacute;n en la levadura, un propietario de modelo de TBSV, revel&oacute; 4 prote&iacute;nas de host que potenciar la replicaci&oacute;n TBSV as&iacute; como 14 prote&iacute;nas que inhiben la replicaci&oacute;n. An&aacute;lisis detallado de una de las prote&iacute;nas identificadas levadura vinculante TBSV ARN, es decir, traducci&oacute;n alargamiento factor eEF1A, revel&oacute; que est&aacute; presente en el tombusvirus altamente purificada replicase complejo. Tambi&eacute;n demostramos la Uni&oacute;n de eEF1A a la prote&iacute;na de replicaci&oacute;n p33 y un conocido elemento cis-actuar en el extremo 3&#39; del RNA TBSV. Usando a un mutante funcional de eEF1A, Proporcionamos evidencia sobre la participaci&oacute;n de eEF1A en replicaci&oacute;n TBSV.

Traducci&oacute;n alargamiento factor 1A es un componente de la tombusvirus replicase compleja y afecta la estabilidad del cofactor de replicaci&oacute;n p33.

&#x8425;&#x4E1A;&#x989D;&#x7684;&#x53D7;&#x635F;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x662F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5B58;&#x6D3B;&#x671F;&#x95F4;&#x7D27;&#x5F20;&#x7684;&#x6761;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x5982;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x6216;&#x6C27;&#x5316;&#x5E94;&#x6FC0;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x3002;&#x7EA0;&#x7F20;&#x5728;&#x5185;&#x8D28;&#x7F51; (ER) &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x79EF;&#x7D2F;&#x662F;&#x6709;&#x6BD2;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5FC5;&#x987B;&#x6709;&#x6548;&#x5730;&#x4ECE;&#x6025;&#x8BCA;&#x5BA4;&#x5BFC;&#x51FA;&#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x6216;&#x6CE1;&#x7684;&#x9000;&#x5316;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x5B83;&#x8868;&#x660E;&#x635F;&#x5931;&#x7684;&#x8F7D;&#x4F53;&#x5EF6;&#x4F38;&#x56E0;&#x5B50; 1B&gamma; (eEF1B&gamma;) &#x4ECE;&#x9175;&#x6BCD;&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD;&#x4E2D;&#x6297;&#x6C27;&#x5316;&#x5E94;&#x6FC0;&#x3002;&#x7F3A;&#x4E4F; eEF1B&gamma; &#x83CC;&#x682A;&#x5728;&#x6C27;&#x5316;&#x5E94;&#x6FC0;&#x7684;&#x6761;&#x4EF6;&#x5728;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5468;&#x8F6C;&#x4E2D;&#x663E;&#x793A;&#x4E25;&#x91CD;&#x7684;&#x7F3A;&#x9677;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x83CC;&#x682A;&#x79EF;&#x7D2F;&#x66F4;&#x591A;&#x7684;&#x6C27;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x4E0E;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x4F34;&#x4FA3;&#x4E2D;&#x7684;&#x66F4;&#x6539;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x83CC;&#x682A;&#x663E;&#x793A;&#x7A7A;&#x6CE1;&#x5F62;&#x6001;&#x53CA;&#x7FA7;&#x80BD;&#x9176; Y &#x4E0D;&#x662F;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x50CF;&#x9E1F;&#x560C;&#x5464;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x4EA4;&#x6D41;&#x56E0;&#x7D20;&#x590D;&#x6742; eEF1B &#x50AC;&#x5316;&#x4E9A;&#x5355;&#x4F4D;&#x7684;&#x6210;&#x719F;&#x4E0E;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x7F3A;&#x9677;&#xFF0C;&#x4E25;&#x91CD;&#x7F3A;&#x9677;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;eEF1B&gamma; co-immunoprecipitates ER &#x9AD8;&#x5C14;&#x57FA;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x7EC4;&#x6210;&#x90E8;&#x5206;&#x4E0E;&#x8FD0;&#x8F93;&#x5C0F;&#x6CE1;&#x3002;&#x4E24;&#x8005;&#x5408;&#x8BA1;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x4E3A; eEF1B&gamma; &#x652F;&#x6301;&#x66F4;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4EE3;&#x8C22;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x771F;&#x6838;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x5EF6;&#x4F38;&#x56E0;&#x5B50; 1Bgamma &#x5728;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4EE3;&#x8C22;&#x4E2D;&#x5177;&#x6709;&#x975E;&#x9E1F;&#x560C;&#x5464;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x4EA4;&#x6362;&#x56E0;&#x5B50;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

The turnover of damaged proteins is critical to cell survival during stressful conditions such as heat shock or oxidative stress. The accumulation of misfolded proteins in the endoplasmic reticulum (ER) is toxic to cells. Therefore these proteins must be efficiently exported from the ER and degraded by the proteasome or the vacuole. Previously it was shown that the loss of eukaryotic elongation factor 1BÎ³ (eEF1BÎ³) from the yeast Saccharomyces cerevisiae results in resistance to oxidative stress. Strains lacking eEF1BÎ³ show severe defects in protein turnover during conditions of oxidative stress. Furthermore, these strains accumulate a greater amount of oxidized proteins, which correlates with changes in heat shock chaperones. These strains show severe defects in vacuole morphology and defects related to the maturation of carboxypeptidase Y that is not dependent on the catalytic subunit of the eEF1B complex as a guanine nucleotide exchange factor. Finally, eEF1BÎ³ co-immunoprecipitates with an essential component of ER-Golgi transport vesicles. Taken together, these results support a broader protein metabolism role for eEF1BÎ³.

The eukaryotic translation elongation Factor 1Bgamma has a non-guanine nucleotide exchange factor role in protein metabolism.

Le chiffre d&#39;affaires des prot&eacute;ines endommag&eacute;es est essentielle &agrave; la survie des cellules durant des conditions stressantes telles que le choc thermique ou de stress oxydatif. L&#39;accumulation de prot&eacute;ines mal repli&eacute;es dans le r&eacute;ticulum endoplasmique (ER) est toxique pour les cellules. C&#39;est pourquoi ces prot&eacute;ines doivent &ecirc;tre export&eacute;s de l&#39;ER efficacement et d&eacute;grad&eacute;es par le prot&eacute;asome ou la vacuole. Auparavant, il a &eacute;t&eacute; d&eacute;montr&eacute; que la perte d&#39;&eacute;longation eucaryote facteur 1B&gamma; (eEF1B&gamma;) de r&eacute;sultats levure Saccharomyces cerevisiae en r&eacute;sistance au stress oxydatif. Souches manque eEF1B&gamma; pr&eacute;sentent des malformations graves dans le renouvellement des prot&eacute;ines dans des conditions de stress oxydatif. En outre, ces souches s&#39;accumuler une grande quantit&eacute; de prot&eacute;ines oxyd&eacute;es, qui est en corr&eacute;lation avec les changements chaperons de choc thermique. Ces souches pr&eacute;sentent de graves d&eacute;fauts dans la morphologie de la vacuole et d&eacute;fauts li&eacute;s &agrave; la maturation de la carboxypeptidase Y qui n&#39;est pas tributaire de la sous-unit&eacute; catalytique de l&#39;eEF1B complexe comme un facteur d&#39;&eacute;change de nucl&eacute;otide guanine. Enfin, eEF1B&gamma; co-immunopr&eacute;cipit&eacute;s avec une composante essentielle de l&#39;ER-Golgi transportent des v&eacute;sicules. Pris ensemble, ces r&eacute;sultats confirment un r&ocirc;le &eacute;largi du m&eacute;tabolisme prot&eacute;ique pour eEF1B&gamma;.

L&#39;&eacute;longation de la traduction eucaryote facteur 1Bgamma a un r&ocirc;le de facteur non-guanine nucleotide exchange dans le m&eacute;tabolisme des prot&eacute;ines.

Der Umsatz der besch&auml;digte Proteine ist entscheidend f&uuml;r die Zelle &uuml;berleben w&auml;hrend stressigen Bedingungen wie Hitzeschock oder oxidativen Stress. Die Anh&auml;ufung von misfolded Proteine in dem Endoplasmatischen Retikulum (ER) ist giftig f&uuml;r Zellen. Daher m&uuml;ssen diese Proteine effizient aus dem ER exportiert und abgebaut durch das Proteasom oder die Vakuole. Zuvor wurde gezeigt, dass der Verlust der eukaryotischen Dehnung Faktor 1B&gamma; (eEF1B&gamma;) von der Hefe Saccharomyces Cerevisiae Ergebnisse Widerstand gegen oxidativen Stress. St&auml;mme fehlen eEF1B&gamma; zeigen schwere M&auml;ngel in Protein-Umsatz w&auml;hrend der Bedingungen des oxidativen Stress. Dar&uuml;ber hinaus sammeln diese Sorten eine gr&ouml;&szlig;ere Menge an oxidierten Proteine, die mit &Auml;nderungen in der Hitze-Schock-Chaperone korreliert. Diese St&auml;mme zeigen schwere M&auml;ngel in Vakuole Morphologie und M&auml;ngel, die mit der Reifung der Carboxypeptidase Y, die nicht die katalytische Untereinheit der eEF1B komplex wie ein Guaninnukleotid-Austauschfaktor abh&auml;ngig ist. Schlie&szlig;lich transportieren eEF1B&gamma; co-Immunoprecipitates mit ein wesentlicher Bestandteil der ER-Golgi Vesikel. Zusammengenommen unterst&uuml;tzen diese Ergebnisse eine ausgedehntere Protein-Stoffwechsel-Rolle f&uuml;r eEF1B&gamma;.

Die eukaryotischen &Uuml;bersetzung Dehnung Faktor 1Bgamma kommt nicht-Guanin-Nukleotid Exchange Faktor in eine Protein-Stoffwechsel.

Il fatturato delle proteine danneggiate &egrave; fondamentale per la sopravvivenza delle cellule durante condizioni di stress come la scossa di calore o lo stress ossidativo. L&#39;accumulo di proteine malpiegate nel reticolo endoplasmatico (ER) &egrave; tossico per le cellule. Pertanto queste proteine devono essere efficiente esportate da ER e degradate dal proteasoma o il vacuolo. In precedenza &egrave; stato dimostrato che la perdita di 1B&gamma; di fattore di allungamento eucariotico (eEF1B&gamma;) dai risultati lievito Saccharomyces cerevisiae nella resistenza a stress ossidativo. Ceppi manca eEF1B&gamma; mostrano gravi difetti nel fatturato della proteina durante condizioni di stress ossidativo. Inoltre, questi ceppi si accumulano una maggiore quantit&agrave; di proteine ossidate, che correla con le modifiche apportate in heat shock accompagnatori. Questi ceppi mostrano gravi difetti nel vacuolo morfologia e difetti correlati alla maturazione delle carbossipeptidasi Y che non sono dipendente della subunit&agrave; catalitica della eEF1B complesso come un fattore di scambio di nucleotide della guanina. Infine, eEF1B&gamma; co-immunoprecipitates con una componente essenziale di ER-Golgi trasporto vescicole. Presi insieme, questi risultati supportano un pi&ugrave; ampio ruolo di metabolismo proteico per eEF1B&gamma;.

L&#39;allungamento della traduzione negli eucarioti fattore 1Bgamma ha un ruolo di fattore scambio di nucleotide della guanina non nel metabolismo delle proteine.

&#x7834;&#x640D;&#x3057;&#x305F;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x58F2;&#x308A;&#x4E0A;&#x3052;&#x9AD8;&#x306F;&#x71B1;&#x30B7;&#x30E7;&#x30C3;&#x30AF;&#x3084;&#x9178;&#x5316;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x306E;&#x591A;&#x3044;&#x72B6;&#x6CC1;&#x4E2D;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x5C0F;&#x80DE;&#x4F53; (ER) &#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30DF;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C9;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x6709;&#x6BD2;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x5F93;&#x3063;&#x3066;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306B; ER &#x304B;&#x3089;&#x30A8;&#x30AF;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x6DB2;&#x80DE;&#x304C;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x306F;&#x3001;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x771F;&#x6838;&#x4F38;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50; 1B&gamma; &#x306E;&#x640D;&#x5931; (eEF1B&gamma;) &#x8010;&#x9178;&#x5316;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x9175;&#x6BCD;&#x51FA;&#x82BD;&#x9175;&#x6BCD;&#x9175;&#x6BCD;&#x7D50;&#x679C;&#x304B;&#x3089;&#x3002;&#x83CC;&#x682A; eEF1B&gamma; &#x6B20;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x6DF1;&#x523B;&#x306A;&#x6B20;&#x9665;&#x306F;&#x9178;&#x5316;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x306E;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E2D;&#x306B;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x8EE2;&#x63DB;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x83CC;&#x682A;&#x306F;&#x71B1;&#x30B7;&#x30E7;&#x30C3;&#x30AF; &#x30B7;&#x30E3;&#x30DA;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x9178;&#x5316;&#x50B7;&#x5BB3;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x5927;&#x304D;&#x3044;&#x91CF;&#x3092;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7CFB;&#x7D71;&#x306E;&#x6DB2;&#x80DE;&#x5F62;&#x614B;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x3001;&#x30B0;&#x30A2;&#x30CB;&#x30F3; &#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x4EA4;&#x63DB;&#x56E0;&#x5B50;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8907;&#x96D1;&#x306A; eEF1B &#x306E;&#x89E6;&#x5A92;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x306F;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x30AB;&#x30EB;&#x30DC;&#x30AD;&#x30B7;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC; Y &#x306E;&#x6210;&#x719F;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x6B20;&#x9665;&#x6DF1;&#x523B;&#x306A;&#x6B20;&#x9665;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;eEF1B&gamma; co immunoprecipitates &#x5C0F;&#x80DE;&#x4F53;-&#x30B4;&#x30EB;&#x30B8;&#x4F53;&#x306E;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x306A;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3068;&#x5C0F;&#x80DE;&#x3092;&#x8F38;&#x9001;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x53D6;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F; eEF1B&gamma; &#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x5E45;&#x5E83;&#x3044;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x7FFB;&#x8A33;&#x4F38;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50; 1Bgamma &#x975E;&#x30B0;&#x30A2;&#x30CB;&#x30F3;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x4EA4;&#x63DB;&#x56E0;&#x5B50;&#x5F79;&#x5272;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x306B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC190;&#xC0C1; &#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD68C;&#xC804;&#xC728;&#xC740; &#xC5F4; &#xCDA9;&#xACA9; &#xB610;&#xB294; &#xC0B0;&#xD654; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xAC19;&#xC740; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xC874;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Endoplasmic &#xADF8;&#xBB3C; (&#xC751;&#xAE09;&#xC2E4;) misfolded &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xCD95;&#xC801;&#xC740; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xB3C5;&#xC131;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC751;&#xAE09;&#xC2E4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB0B4;&#xBCF4;&#xB0B8; &#xACE0;&#xB294; &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880; &#xB098;&#xB294; &#xACF5;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC800;&#xD558; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xADF8;&#xAC83;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC92C;&#xB358; &#xC9C4; &#xD575; &#xC2E0;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; 1b&gamma;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4; (eEF1B&gamma;)&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0B0;&#xD654; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC800;&#xD56D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD6A8; &#xBAA8; Saccharomyces cerevisiae &#xACB0;&#xACFC;. &#xBCC0;&#xC885; eEF1B&gamma; &#xBD80;&#xC871; &#xD55C; &#xC0B0;&#xD654; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xC758; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD68C;&#xC804;&#xC728;&#xC5D0; &#xC2EC;&#xAC01;&#xD55C; &#xACB0;&#xD568;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBCC0;&#xC885; &#xC5F4; &#xCDA9;&#xACA9; &#xBCF4;&#xD638;&#xC790;&#xC758; &#xBCC0;&#xD654;&#xC640; &#xC0C1;&#xAD00; &#xAD00;&#xACC4;&#xAC00; &#xC0B0;&#xD654; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD070; &#xC591;&#xC744; &#xCD95;&#xC801;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBCC0;&#xC885; &#xACF5;&#xD3EC; &#xD615;&#xD0DC;&#xD559; &#xBC0F; &#xACB0;&#xD568; guanine &#xC5FC;&#xAE30; &#xAD50;&#xD658; &#xC694;&#xC778;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; Eef1b&#xC758; &#xCD09;&#xB9E4; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704;&#xC5D0; &#xC885;&#xC18D; &#xB41C; carboxypeptidase Y&#xC758; &#xC131;&#xC219;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC2EC;&#xAC01;&#xD55C; &#xACB0;&#xD568;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, eEF1B&gamma; co-immunoprecipitates ER Golgi&#xC758; &#xD544;&#xC218; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC18C;&#xD3EC; &#xC218;&#xC1A1;. &#xD568;&#xAED8; &#xCC0D;&#xC740;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; Eef1b&gamma;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB300;&#xC0AC; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC9C4; &#xD575; &#xBC88;&#xC5ED; &#xC2E0;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; 1Bgamma &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBB3C;&#xC9C8; &#xB300;&#xC0AC;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xBE44; guanine &#xC5FC;&#xAE30; &#xAD50;&#xD658; &#xC694;&#xC18C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;.

El volumen de negocios de prote&iacute;nas da&ntilde;adas es fundamental para la supervivencia de la c&eacute;lula durante condiciones estresantes como shock t&eacute;rmico o el estr&eacute;s oxidativo. La acumulaci&oacute;n de prote&iacute;nas mal plegadas en el ret&iacute;culo endopl&aacute;smico (ER) es t&oacute;xica para las c&eacute;lulas. Por lo tanto estas prote&iacute;nas deben ser exportadas de la ER eficientemente y degradadas por el proteasoma o la vacuola. Previamente fue demostrado que la p&eacute;rdida de alargamiento eucariotas factor 1B&gamma; (eEF1B&gamma;) de los resultados la levadura Saccharomyces cerevisiae resistencia al estr&eacute;s oxidativo. Las cepas que carecen de eEF1B&gamma; muestran defectos severos en facturaci&oacute;n de prote&iacute;na durante condiciones de estr&eacute;s oxidativo. Adem&aacute;s, estas cepas acumular&aacute;n una mayor cantidad de prote&iacute;nas oxidadas, que se correlaciona con cambios en acompa&ntilde;antes de choque de calor. Estas cepas muestran graves defectos en la morfolog&iacute;a de la vacuola y defectos relacionados con la maduraci&oacute;n de la carboxipeptidasa Y que no es dependiente de la subunidad catal&iacute;tica de la eEF1B complejo como un factor de intercambio de guanina nucle&oacute;tido. Finalmente, eEF1B&gamma; co-immunoprecipitates con un componente esencial de ER-Golgi transporte de ves&iacute;culas. Tomados en conjunto, estos resultados apoyan un papel m&aacute;s amplio de metabolismo de la prote&iacute;na para eEF1B&gamma;.

La elongaci&oacute;n de la traducci&oacute;n en eucariotas Factor 1Bgamma tiene un papel de factor de intercambio no-guanina nucle&oacute;tido en el metabolismo de la prote&iacute;na.

&#x4E0A;&#x88AB;&#x62DB;&#x52DF;&#x75C5;&#x6BD2;&#x590D;&#x5236;&#x9176;&#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x56E0;&#x7D20;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x6B63;&#x94FE; RNA &#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x590D;&#x5236;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x771F;&#x6838;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x4F38;&#x957F;&#x56E0;&#x7D20; &#xFF08;eEF1A&#xFF09;&#xFF0C;&#x5C31;&#x662F;&#x9A7B;&#x5730;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x86CB;&#x767D;&#x5728;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x7EAF;&#x5316;&#x7684; tombusvirus &#x590D;&#x5236;&#x9176;&#x4E4B;&#x4E00;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E00;&#x4E2A;&#x968F;&#x673A;&#x7684; eEF1A &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x5E93;&#xFF0C;&#x786E;&#x5B9A;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7A81;&#x53D8;&#x53CA;&#x589E;&#x52A0;&#x756A;&#x8304;&#x4E1B;&#x77EE;&#x75C5;&#x6BD2; (TBSV) &#x590D;&#x5236;&#x9175;&#x6BCD;&#x6A21;&#x578B;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E09;&#x79CD;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x3002;&#x51C6;&#x5907;&#x4ECE;&#x9175;&#x6BCD;&#x83CC;&#x682A;&#x8868;&#x793A; eEF1A &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x7684;&#x6574;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x63D0;&#x53D6;&#x989D;&#x5916;&#x4F53;&#x5916;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x8868;&#x660E; eEF1A TBSV &#x590D;&#x5236;&#x4E2D;&#x7684;&#x51E0;&#x4E2A;&#x529F;&#x80FD;&#xFF1A; &#x4FC3;&#x8FDB;&#x62DB;&#x52DF;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2; RNA &#x6A21;&#x677F;&#x590D;&#x5236;&#x9176;&#x590D;&#x6742; &#xFF1B;&#x590D;&#x6742; &#xFF1B; &#x75C5;&#x6BD2;&#x590D;&#x5236;&#x9176;&#x7684;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x96C6;&#x548C;&#x51CF;&#x53F7;-&#x94A2;&#x7EDE;&#x7EBF;&#x5408;&#x6210;&#x901A;&#x8FC7;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x53D1;&#x8D77;&#x4E00;&#x6B65;&#x589E;&#x5F3A;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x89D2;&#x8272;&#x7528;&#x4E8E; eEF1A &#x662F;&#x5206;&#x5F00;&#x5176;&#x4E3B;&#x673A;&#x548C;&#x75C5;&#x6BD2;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x7FFB;&#x8BD1;&#xFF0C;TBSV &#x590D;&#x5236;&#x671F;&#x95F4;&#x5F3A;&#x8C03;&#x8FD9;&#x4E30;&#x5BCC;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x804C;&#x80FD;&#x89C4;&#x8303;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x7FFB;&#x8BD1;&#x4F38;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50; 1A &#x4FBF;&#x5229; tombusvirus &#x590D;&#x5236;&#x9176;&#x7684;&#x5927;&#x4F1A;&#xFF0C;&#x5E76;&#x523A;&#x6FC0;&#x51CF;&#x53F7;-&#x94A2;&#x7EDE;&#x7EBF;&#x5408;&#x6210;&#x3002;

Replication of plus-strand RNA viruses depends on host factors that are recruited into viral replicase complexes. Previous studies showed that eukaryotic translation elongation factor (eEF1A) is one of the resident host proteins in the highly purified tombusvirus replicase complex. Using a random library of eEF1A mutants, we identified one mutant that decreased and three mutants that increased Tomato bushy stunt virus (TBSV) replication in a yeast model host. Additional in vitro assays with whole cell extracts prepared from yeast strains expressing the eEF1A mutants demonstrated several functions for eEF1A in TBSV replication: facilitating the recruitment of the viral RNA template into the replicase complex; the assembly of the viral replicase complex; and enhancement of the minus-strand synthesis by promoting the initiation step. These roles for eEF1A are separate from its canonical role in host and viral protein translation, emphasizing critical functions for this abundant cellular protein during TBSV replication.

Translation elongation factor 1A facilitates the assembly of the tombusvirus replicase and stimulates minus-strand synthesis.

La r&eacute;plication des virus ARN &agrave; brin plus d&eacute;pend de facteurs de l&#39;h&ocirc;te qui sont recrut&eacute;s dans des complexes de r&eacute;plicase virale. Des &eacute;tudes ant&eacute;rieures ont montr&eacute; que ce facteur d&#39;&eacute;longation de la traduction eucaryote (eEF1A) est l&#39;une des prot&eacute;ines h&ocirc;te r&eacute;sidant dans la complexe de r&eacute;plicase tombusvirus hautement purifi&eacute;e. Utilisation d&#39;une biblioth&egrave;que au hasard des mutants d&#39;eEF1A, nous avons identifi&eacute; un mutant qui a diminu&eacute; et trois mutants qui ont augment&eacute; la r&eacute;plication du virus (TBSV) tomate de bushy stunt dans une multitude de mod&egrave;le de levure. Des essais in vitro suppl&eacute;mentaires aux germes entiers extraits pr&eacute;par&eacute;s &agrave; partir de souches de levures exprimant les mutants eEF1A d&eacute;montr&eacute; plusieurs fonctions pour eEF1A dans la r&eacute;plication de TBSV : faciliter le recrutement du descripteur d&#39;ARN viral dans la r&eacute;plicase complexe ; l&#39;Assembl&eacute;e de la r&eacute;plicase virale complexe ; et l&#39;am&eacute;lioration de la synth&egrave;se du brin moins en promouvant l&#39;&eacute;tape d&#39;initiation. Ces r&ocirc;les pour eEF1A sont s&eacute;par&eacute;s de son r&ocirc;le canonique dans l&#39;h&ocirc;te et la traduction des prot&eacute;ines virales, mettant l&#39;accent sur les fonctions essentielles pour cette prot&eacute;ine cellulaire abondante lors de la r&eacute;plication TBSV.

Traduction 1 a facteur d&#39;&eacute;longation facilite l&#39;assemblage de la r&eacute;plicase tombusvirus et stimule la synth&egrave;se du brin-moins.

Replikation von Plus-Strang-RNA-Viren h&auml;ngt von Host-Faktoren, die die virale Replicase komplexe rekrutiert werden. Fr&uuml;here Studien zeigten, dass der eukaryotischen &Uuml;bersetzung-Dehnung-Faktor (eEF1A) ist eines der ans&auml;ssigen Host-Proteine in der hoch gereinigten Tombusvirus Replicase komplexe. Mithilfe einer zuf&auml;lligen Bibliothek eEF1A Mutanten, identifizierten wir ein Mutant, der sank und drei Mutanten, die Tomaten buschigen Stunt Virus (TBSV) Replikation in einem Hefe-Modell-Host erh&ouml;ht. Zus&auml;tzliche in-vitro-Tests mit ganze Zelle Extrakten aus Hefe-St&auml;mme, die Ausdruck der eEF1A-Mutants vorbereitet zeigte mehrere Funktionen f&uuml;r eEF1A in der TBSV-Replikation: Erleichterung der Rekrutierung von der viralen RNA-Vorlage in die Replicase Komplex; die Montage der viralen Replicase Komplex; und die Verbesserung der Minus-Strang-Synthese durch die F&ouml;rderung des Einleitung Schritt. Diese Rollen f&uuml;r eEF1A ihre kanonische Rolle im Host und virale Protein &Uuml;bersetzung, Betonung wichtige Funktionen f&uuml;r diese reichlich zellularen Protein w&auml;hrend der Replikation TBSV voneinander getrennt sind.

&Uuml;bersetzung Dehnung Faktor 1A erleichtert die Montage des Tombusvirus-Replicase und Minus-Strang-Synthese stimuliert.

Replicazione del virus RNA plus-filo dipende da fattori di host che vengono reclutati in complessi replicasi virale. Studi precedenti hanno mostrato che fattore di allungamento della traduzione negli eucarioti (eEF1A) &egrave; una delle proteine ospite residente nella tombusvirus altamente purificato replicasi complessi. Utilizzando una raccolta casuale di eEF1A mutanti, abbiamo identificato un mutante che &egrave; diminuito e tre mutanti che l&#39;aumento di Tomato bushy stunt virus (TBSV) replica in un host di modello del lievito. Ulteriori saggi in vitro con gli estratti cellulari tutto preparati da ceppi di lievito che esprimono i mutanti eEF1A dimostrato diverse funzioni per eEF1A in replica TBSV: facilitare l&#39;assunzione del modello RNA virale nelle replicasi complesse; l&#39;Assemblea delle replicasi virale complesse; e miglioramento della sintesi del filamento negativo promuovendo il passo di iniziazione. Questi ruoli per eEF1A sono separati dal suo ruolo canonico in host e traduzione di proteina virale, enfatizzando le funzioni critiche per questa proteina cellulare abbondante durante la replica di TBSV.

Traduzione allungamento factor 1A facilita l&#39;assemblaggio del tombusvirus replicasi e stimola la sintesi del filamento negativo.

&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; &#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x9396; RNA &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x8907;&#x88FD;&#x9175;&#x7D20;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306B;&#x52DF;&#x96C6;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x8981;&#x56E0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x524D;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x7FFB;&#x8A33;&#x4F38;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50; (eEF1A) &#x306F;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x9AD8;&#x7D14;&#x5EA6; tombusvirus &#x306E;&#x8907;&#x88FD;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x5E38;&#x99D0;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x4E00;&#x3064;&#x3067;&#x3059;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;EEF1A &#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C0;&#x30E0;&#x306A;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F; 1 &#x3064;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3068;&#x30C8;&#x30DE;&#x30C8;&#x3075;&#x3055;&#x3075;&#x3055;&#x3057;&#x305F;&#x30B9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30C8; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; (TBSV) &#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x9175;&#x6BCD;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB; &#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x3067;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F; 3 &#x3064;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8FFD;&#x52A0;&#x306E; in vitro &#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4; eEF1A &#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x9175;&#x6BCD;&#x83CC;&#x682A;&#x304B;&#x3089;&#x4F5C;&#x88FD;&#x3057;&#x305F;&#x30BB;&#x30EB;&#x5168;&#x4F53;&#x30A8;&#x30AD;&#x30B9;&#x3067;&#x5B9F;&#x8A3C; eEF1A TBSV &#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;: &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E; RNA &#x30C6;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x52DF;&#x96C6;&#x306B;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;; &#x8907;&#x88FD;&#x9175;&#x7D20;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x8907;&#x88FD;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;;&#x958B;&#x59CB;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x306E;&#x63A8;&#x9032;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30DE;&#x30A4;&#x30CA;&#x30B9;&#x9396;&#x5408;&#x6210;&#x306E;&#x4FC3;&#x9032;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306B; eEF1A &#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x3068;&#x3053;&#x306E;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x5F37;&#x8ABF;&#x3059;&#x308B; TBSV &#x306E;&#x8907;&#x88FD;&#x4E2D;&#x306B;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x7FFB;&#x8A33;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6B63;&#x898F;&#x5F79;&#x5272;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x7FFB;&#x8A33;&#x4F38;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50; 1 a tombusvirus &#x8907;&#x88FD;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x7ACB;&#x3066;&#x3092;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x3057;&#x3001;&#x30DE;&#x30A4;&#x30CA;&#x30B9;&#x9396;&#x5408;&#x6210;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xD50C;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xAC00;&#xB2E5; RNA &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; &#xBCF5;&#xC81C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; replicase &#xBCF5;&#xD569;&#xBB3C;&#xC73C;&#xB85C; &#xBAA8;&#xC9D1; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC694;&#xC18C;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC804; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xC9C4; &#xD575; &#xBC88;&#xC5ED; &#xC2E0;&#xC7A5; &#xC694;&#xC18C; (eEF1A)&#xB294; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xACE0; &#xC21C;&#xB3C4; tombusvirus replicase&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC70;&#xC8FC; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC911; &#xD558;&#xB098; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. EEF1A &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; &#xC784;&#xC758;&#xC758; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xAC10;&#xC18C; &#xD55C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xD6A8; &#xBAA8; &#xBAA8;&#xB378; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xD1A0;&#xB9C8;&#xD1A0; &#xB365; &#xC218; &#xB8E9; &#xD55C; &#xC2A4;&#xD134; &#xD2B8; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (TBSV) &#xBCF5;&#xC81C; &#xC99D;&#xAC00; 3 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xD30C;&#xC545;. &#xC804;&#xCCB4; &#xC140; &#xCD94;&#xCD9C; &#xBB3C; eEF1A &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xD6A8; &#xBAA8; &#xC885;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC900;&#xBE44;&#xD55C; &#xCD94;&#xAC00; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC2DC;&#xC5F0; eEF1A TBSV &#xBCF5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC00;&#xC9C0; &#xAE30;&#xB2A5;: &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C;; replicase&#xB85C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; RNA &#xD15C;&#xD50C;&#xB9BF;&#xC758; &#xBAA8;&#xC9D1;&#xC744; &#xC6A9;&#xC774; &#xD558; &#xAC8C; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C;; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; replicase &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xAC1C;&#xC2DC; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB97C; &#xD64D;&#xBCF4; &#xD558; &#xC5EC; &#xB9C8;&#xC774;&#xB108;&#xC2A4; &#xAC00;&#xB2E5; &#xD569;&#xC131;&#xC758; &#xD5A5;&#xC0C1;. Eef1a&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC740; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC640; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC88;&#xC5ED;, TBSV &#xBCF5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548;&#xC774; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xAC15;&#xC870; &#xD558;&#xB294; &#xC815;&#xC2DD; &#xC5ED;&#xD560; &#xAD6C;&#xBD84; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBC88;&#xC5ED; &#xC2E0;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; 1A tombusvirus replicase &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC6A9;&#xC774; &#xD558; &#xAC8C; &#xACE0; &#xBE7C;&#xAE30; &#xAC00;&#xB2E5; &#xD569;&#xC131;&#xC744; &#xC790;&#xADF9;.

Replicaci&oacute;n de los virus de ARN de cadena m&aacute;s depende de factores de host que son reclutados en complejos replicase viral. Estudios previos demostraron que ese factor de elongaci&oacute;n de la traducci&oacute;n en eucariotas (eEF1A) es una de las prote&iacute;nas del anfitri&oacute;n residente en el tombusvirus altamente purificada replicase complejo. Usando una biblioteca al azar de mutantes eEF1A, identificamos un mutante que disminuy&oacute; y tres mutantes que aumentaron la replicaci&oacute;n del virus (TBSV) de tomate bushy stunt en un host de modelo de levadura. Adicionales ensayos in vitro con c&eacute;lulas enteras extractos preparados a partir de cepas de levadura expresando los mutantes eEF1A demostraron varias funciones para eEF1A en replicaci&oacute;n TBSV: facilitar la contrataci&oacute;n de la plantilla de RNA viral en el replicase complejo; la Asamblea de la viral replicase complejo; y mejora de la s&iacute;ntesis de la cadena menos promoviendo el paso de la iniciaci&oacute;n. Estos papeles para eEF1A est&aacute;n separados de su funci&oacute;n can&oacute;nica en la traducci&oacute;n de la prote&iacute;na viral, destacando funciones cr&iacute;ticas para esta prote&iacute;na celular abundante durante la replicaci&oacute;n TBSV y anfitri&oacute;n.

Traducci&oacute;n alargamiento factor 1A facilita el montaje de la tombusvirus replicase y estimula la s&iacute;ntesis de menos-strand.

RNA &#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x662F;&#x4E00;&#x79CD;&#x5404;&#x7C7B;&#x4F17;&#x591A;&#x7684;&#x7EC4;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x57FA;&#x56E0;&#x8C03;&#x63A7;&#x80CC;&#x540E;&#x7684;&#x9A71;&#x52A8;&#x529B;&#x7684;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E0E;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684;&#x7C7B;&#x6BD4;&#xFF0C;RNA &#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x5C06;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; mRNAs&#xFF0C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x89C4;&#x8303;&#x901A;&#x5E38;&#x5411;&#x4E0A;&#x6E38;&#x6216;&#x4E0B;&#x6E38;&#x4ECE;&#x7F16;&#x7801;&#x533A;&#x57DF;&#xFF0C;&#x5404;&#x533A;&#x57DF;&#x548C;&#x8C03;&#x5236; mRNA &#x4EE3;&#x8C22;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E94;&#x4E2A;&#x91CD;&#x8981;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E4B;&#x4E00;&#xFF1A; &#x62FC;&#x63A5;&#x3001; polyadenylation&#x3001; &#x51FA;&#x53E3;&#x3001; &#x7FFB;&#x8BD1;&#x548C;&#x8870;&#x53D8;&#x3002;&#x6700;&#x4E30;&#x5BCC;&#x7684; RNA &#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x57DF;&#x79F0;&#x4E3A; RNA &#x8BC6;&#x522B;&#x6BCD;&#x9898; &#xFF08;RRM&#xFF09; 1&#x3002;&#x5B83;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x5B89;&#x5168;&#x8BF4; RRM &#x542B;&#x86CB;&#x767D;&#x4F7F;&#x6574;&#x4E2A;&#x751F;&#x5B58;&#x5468;&#x671F;&#x7684; mRNA &#x4E0E;&#x4E00;&#x4E9B;&#x63A5;&#x89E6;&#x3002;&#x8F6C;&#x5F55;&#x5BF9;&#x5E94;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x7136;&#x800C;&#x662F; RRM &#x7ED3;&#x679C;&#x57FA;&#x4E8E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x5177;&#x4F53;&#x804C;&#x80FD;&#x7684;&#x4F17;&#x591A;&#x63A9;&#x76D6;&#x4E86;&#x666E;&#x904D;&#x6027;&#x7684;&#x6BCD;&#x9898;&#x3002;&#x6B64;&#x590D;&#x6742;&#x548C;&#x591A;&#x6837;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x7684;&#x5355;&#x4E2A;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x88AB;&#x7528;&#x4F5C;&#x57FA;&#x7840;&#x5F00;&#x53D1; RNA:protein &#x4E92;&#x52A8;&#x9AD8;&#x7EA7;&#x7814;&#x7A76;&#x751F;&#x7EA7;&#x7814;&#x8BA8;&#x4F1A;&#x8BFE;&#x7A0B;&#x3002;&#x5F53;&#x7136;&#xFF0C;&#x5229;&#x7528;&#x4EE5;&#x5B66;&#x4E60;&#x8005;&#x4E3A;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x7684;&#x6388;&#x6743;&#x6A21;&#x578B;&#xFF0C;&#x88AB;&#x4E3A;&#x4E86;&#x89E3;&#x5256;&#x5728; RNA &#x4EE3;&#x8C22;&#x542B;&#x86CB;&#x767D; RRM &#x89C6;&#x89D2;&#x7684;&#x6BCF;&#x4E00;&#x6B65;&#x3002;&#x8FD9;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6846;&#x67B6;&#xFF0C;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x5BF9;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x8FDB;&#x7A0B; RRM &#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x7684;&#x5F00;&#x53D1;&#x3002;

MRNA &#x7684; RNA &#x8BC6;&#x522B;&#x6BCD;&#x9898;&#x89C2;&#x70B9;&#x4ECE;&#x51FA;&#x751F;&#x5230;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x89C6;&#x56FE;&#x3002;

RNA binding proteins are a large and varied group of factors that are the driving force behind post-transcriptional gene regulation. By analogy with transcription factors, RNA binding proteins bind to various regions of the mRNAs that they regulate, usually upstream or downstream from the coding region, and modulate one of the five major processes in mRNA metabolism: splicing, polyadenylation, export, translation and decay. The most abundant RNA binding protein domain is called the RNA Recognition Motif (RRM)1. It is probably safe to say that an RRM-containing protein is making some contact with an mRNA throughout its existence. The transcriptional counterpart would likely be the histones, yet the multitude of specific functions that are results of RRM based interactions belies the universality of the motif. This complex and diverse application of a single protein motif was used as the basis to develop an advanced graduate level seminar course in RNA:protein interactions. The course, utilizing a learner-centered empowerment model, was developed to dissect each step in RNA metabolism from the perspective of an RRM containing protein. This provided a framework to discuss the development of specificity for the RRM for each required process.

A birth-to-death view of mRNA from the RNA recognition motif perspective.

Prot&eacute;ines de liaison ARN sont un groupe large et vari&eacute; de facteurs qui sont la force motrice derri&egrave;re la r&eacute;gulation des g&egrave;nes post-transcriptionnels. Par analogie avec les facteurs de transcription, les prot&eacute;ines de liaison ARN se lient aux diverses r&eacute;gions de l&#39;ARNm qui ils r&eacute;glementent, g&eacute;n&eacute;ralement en amont ou en aval de la r&eacute;gion codante, et moduler un des cinq processus majeurs dans le m&eacute;tabolisme de l&#39;ARNm: &eacute;pissage, polyad&eacute;nylation, exportation, traduction et d&eacute;sint&eacute;gration. Le domaine de prot&eacute;ine de liaison RNA plus abondant s&#39;appelle le Motif de reconnaissance RNA (MRR) 1. Il est probablement juste de dire qu&#39;une prot&eacute;ine contenant du RRM effectue des contacts avec un ARNm tout au long de son existence. La transcription homologue serait vraisemblablement les histones, et pourtant la multitude de fonctions sp&eacute;cifiques qui sont sur les r&eacute;sultats de MRR interactions d&eacute;ment l&#39;universalit&eacute; du motif. Cette application complexe et diverse d&#39;un motif unique de prot&eacute;ines a &eacute;t&eacute; utilis&eacute;e comme base pour d&eacute;velopper un cours avanc&eacute; s&eacute;minaire de niveau universitaire dans les interactions pr&eacute;dits. Le cours, en utilisant un mod&egrave;le d&#39;&eacute;mancipation sur l&#39;apprenant, a &eacute;t&eacute; &eacute;labor&eacute; pour diss&eacute;quer chaque &eacute;tape dans le m&eacute;tabolisme du RNA dans la perspective d&#39;un MRR contenant des prot&eacute;ines. Cela a fourni un cadre pour discuter du d&eacute;veloppement de la sp&eacute;cificit&eacute; pour le MRR pour chaque processus requis.

Une vue de la naissance &agrave; la mort d&#39;ARNm dans la perspective de motif de reconnaissance RNA.

RNA-bindende Proteine sind eine gro&szlig;e und vielf&auml;ltige Gruppe von Faktoren, die die treibende Kraft hinter Posttranskriptionale Genregulation sind. In Anlehnung an Transkriptionsfaktoren, RNA-bindende Proteine binden an verschiedenen Regionen der mRNAs, die sie, in der Regel stromaufw&auml;rts oder stromabw&auml;rts von der Kodierungregion regulieren und modulieren, einer der f&uuml;nf wichtigsten Prozesse im mRNA-Stoffwechsel: Splei&szlig;en, Polyadenylierung, Export, &Uuml;bersetzung und Verfall. Die am h&auml;ufigsten vorkommenden RNA verbindliches Protein Gebiet nennt die RNA Anerkennung Motiv (RRM) 1. Es ist wahrscheinlich sicher zu sagen, dass ein RRM-haltige Protein auch in Kontakt mit einer mRNA w&auml;hrend seiner Existenz macht. Das transkriptionelle Gegenst&uuml;ck w&auml;re wahrscheinlich die Histone, aber die Vielzahl von Funktionen, die Interaktionen der RRM ergebnisorientiertes t&auml;uscht &uuml;ber die Universalit&auml;t des Motivs. Diese komplexen und vielf&auml;ltigen Anwendung &uuml;ber ein einziges Protein-Motiv wurde als Grundlage verwendet, einen Absolvent Niveau Hauptseminar-Kurs in RNA:protein Interaktionen zu entwickeln. Der Kurs, unter Verwendung eines Modells Lernende ausgerichteten Erm&auml;chtigung wurde entwickelt, um jeden Schritt im RNA-Stoffwechsel aus der Perspektive eines RRM enth&auml;lt Protein zu sezieren. Dies bot einen Rahmen um die Entwicklung der Spezifit&auml;t f&uuml;r den KRM f&uuml;r jeden erforderlichen Prozess zu diskutieren.

Geburt-Tod-Ansicht von mRNA aus der RNA-Anerkennung-Motiv-Perspektive.

Proteine leganti RNA sono un gruppo ampio e vario di fattori che sono la forza trainante dietro regolamento genico. Per analogia con i fattori di trascrizione, proteine leganti RNA associare a varie regioni dei mRNAs che regolano, solitamente a monte o a valle della regione codificante, e uno dei cinque processi importanti nel metabolismo di mRNA modulare: splicing poliadenilazione, esportazione, traduzione e decadimento. Il dominio di proteina di legame RNA pi&ugrave; abbondante &egrave; chiamato il RNA riconoscimento Motif (RRM) 1. &Egrave; probabilmente sicuro dire che una proteina contenente RRM sta facendo qualche contatto con un mRNA in tutta la sua esistenza. La controparte transcriptional sarebbe probabilmente istoni, eppure la moltitudine di funzioni specifiche che sono risultati di RRM basato su interazioni smentisce l&#39;universalit&agrave; del motivo. Questa applicazione complessa e diversificata di un motivo di singola proteina &egrave; stata utilizzata come base per sviluppare un corso avanzato seminario livello laureato in RNA:protein interazioni. Il corso, che utilizzano un modello di empowerment learner-centered, &egrave; stato sviluppato per sezionare ogni passo nel metabolismo del RNA dalla prospettiva di un RRM proteici. Questo forn&igrave; un quadro per discutere lo sviluppo di specificit&agrave; per il RRM per ogni processo necessario.

Una vista di nascita-morte di mRNA dalla prospettiva RNA riconoscimento motif.

RNA &#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x5F8C;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306E;&#x539F;&#x52D5;&#x529B;&#x306E;&#x8981;&#x56E0;&#x306E;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x3067;&#x591A;&#x69D8;&#x306A;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30CA;&#x30ED;&#x30B8;&#x30FC;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x306B;&#x3088;&#x308B; RNA &#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x4E0A;&#x6D41;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x4E0B;&#x6D41;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x9818;&#x57DF;&#x304B;&#x3089;&#x306F;&#x3001;&#x898F;&#x5236; Mrna &#x306E;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x5730;&#x57DF;&#x3078;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3057;&#x3001;5 &#x3064;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3067; mRNA &#x306E;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;: &#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;&#x8D77;&#x3053;&#x308B;&#x3001;&#x30A8;&#x30AF;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3001;&#x5909;&#x63DB;&#x3001;&#x5D29;&#x58CA;&#x3002;&#x6700;&#x3082;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A; RNA &#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3; RNA &#x8A8D;&#x8B58;&#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5; (RRM) 1 &#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;RRM &#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;&#x306E;&#x63A5;&#x89E6;&#x3067;&#x305D;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x3092;&#x901A;&#x3057;&#x3066;&#x306E; mRNA &#x3092;&#x4F5C;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x8A00;&#x3046;&#x306F;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F;&#x5B89;&#x5168;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x8EE2;&#x5199;&#x306E;&#x76F8;&#x624B;&#x3092;&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3;&#x3060;&#x308D;&#x3046;&#x307E;&#x3060;&#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5;&#x306E;&#x666E;&#x904D;&#x6027;&#x306F; RRM &#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x591A;&#x6570;&#x3092;&#x751A;&#x3060;&#x3057;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x8907;&#x96D1;&#x3067;&#x591A;&#x69D8;&#x306A;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5;&#x306E;&#x57FA;&#x790E;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x306A;&#x5927;&#x5B66;&#x9662;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB; &#x30BB;&#x30DF;&#x30CA;&#x30FC; &#x30B3;&#x30FC;&#x30B9; RNA:protein &#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x5B66;&#x7FD2;&#x8005;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30D1;&#x30EF;&#x30FC;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8; &#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x5229;&#x7528;&#x3057;&#x305F; RNA &#x306E;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3001;RRM &#x306E;&#x89B3;&#x70B9;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x5404;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x3092;&#x89E3;&#x5256;&#x3057;&#x3066;&#x958B;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;RRM &#x5FC5;&#x8981;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3054;&#x3068;&#x306E;&#x7279;&#x7570;&#x6027;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3092;&#x8B70;&#x8AD6;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30D5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30E0;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

MRNA &#x306E;&#x8A95;&#x751F;&#x306E;&#x6B7B;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC; RNA &#x8A8D;&#x8B58;&#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5;&#x306E;&#x89B3;&#x70B9;&#x304B;&#x3089;&#x3002;

RNA &#xC758;&#xBB34;&#xC801;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC740; post-transcriptional &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC870;&#xC808;&#xC758; &#xB4A4;&#xC5D0; &#xC6D0;&#xB3D9;&#xB825;&#xC740; &#xC694;&#xC778;&#xC758; &#xD06C;&#xACE0; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xADF8;&#xB8F9; &#xC774;&#xB2E4;. &#xB179;&#xC74C; &#xBC29;&#xC1A1; &#xC694;&#xC778;&#xC73C;&#xB85C; &#xC720;&#xCD94; &#xD558; &#xC5EC; RNA &#xC758;&#xBB34;&#xC801;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; mRNAs &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294;, &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0C1;&#xB958; &#xB610;&#xB294; &#xD558;&#xB958; &#xCF54;&#xB529; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; mRNA &#xBB3C;&#xC9C8; &#xB300;&#xC0AC;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; 5 &#xAC1C;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xB97C; &#xBCC0;&#xC870;: &#xC811;&#xD569;, polyadenylation, &#xC218;&#xCD9C;, &#xBC88;&#xC5ED; &#xBC0F; &#xBD80;&#xD328;. &#xAC00;&#xC7A5; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; RNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; RNA &#xC778;&#xC2DD; &#xBAA8;&#xD2F0;&#xBE0C; (RRM) 1 &#xB77C;&#xACE0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xC544;&#xB9C8; RRM &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; Mrna&#xC640;&#xC758; &#xC5B4;&#xB5A4; &#xC811;&#xCD09; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4; &#xC774;&#xB77C;&#xACE0; &#xBD10;&#xC57C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. Transcriptional &#xB300;&#xC751; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xB420; &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4;, &#xC544;&#xC9C1; &#xD2B9;&#xC815; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xB530;&#xB77C; &#xD558;&#xB294; RRM&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xC218;&#xB9CE;&#xC740; &#xAC70;&#xC9D3;&#xB9D0;&#xC744; &#xD588; &#xC9C0; &#xBAA8;&#xD2F0;&#xBE0C;&#xC758; &#xBCF4;&#xD3B8;&#xC131;. &#xB2E8;&#xC77C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBAA8;&#xD2F0;&#xBE0C;&#xC758; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD558; &#xACE0; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC751;&#xC6A9;&#xC774; RNA:protein &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACE0;&#xAE09; &#xB300;&#xD559;&#xC6D0; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xC138;&#xBBF8;&#xB098; &#xACFC;&#xC815; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xAE30;&#xC900;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. RNA &#xB300;&#xC0AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; RRM&#xC758; &#xAD00;&#xC810;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC01; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB97C; &#xD574; &#xBD80; &#xACFC;&#xC815;, &#xD559;&#xC2B5;&#xC790; &#xC911;&#xC2EC; &#xAD8C;&#xD55C; &#xBD80;&#xC5EC; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xD65C;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xAC01; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; RRM&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD2B9;&#xC774;&#xC131;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xB17C;&#xC758; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xD504;&#xB808;&#xC784; &#xC6CC;&#xD06C;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

RNA &#xC778;&#xC2DD; &#xBAA8;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xAD00;&#xC810;&#xC5D0;&#xC11C; Mrna&#xC758; &#xCD9C;&#xC0DD; &#xC8FD;&#xC74C; &#xBCF4;&#xAE30;.

Prote&iacute;nas de uni&oacute;n del RNA son un grupo amplio y variado de factores que son la fuerza impulsora detr&aacute;s de regulaci&oacute;n g&eacute;nica post-transcripcional. Por analog&iacute;a con los factores de transcripci&oacute;n, prote&iacute;nas de uni&oacute;n del RNA se unen a varias regiones de los mRNAs que regulan, generalmente r&iacute;o arriba o r&iacute;o abajo de la regi&oacute;n codificante, y modulan uno de los cinco procesos importantes en el metabolismo del mRNA: empalme, poliadenilaci&oacute;n, exportaci&oacute;n, traducci&oacute;n y decaimiento. El dominio de la prote&iacute;na m&aacute;s abundante de RNA obligatorio se llama el RNA reconocimiento motivo (MRA) 1. Es probablemente seguro decir que una prote&iacute;na que contiene RRM est&aacute; haciendo alg&uacute;n tipo de contacto con un mRNA durante toda su existencia. La contraparte transcripcional ser&iacute;a, probablemente, las histonas, sin embargo, la multitud de funciones espec&iacute;ficas que son resultados de RRM interacciones desmiente la universalidad del motivo. Esta aplicaci&oacute;n compleja y diversa de un motivo &uacute;nica prote&iacute;na fue utilizada como la base para desarrollar un curso de Seminario avanzado de nivel graduado en interacciones RNA:protein. El curso, utilizando un modelo de capacitaci&oacute;n centrados en el alumno, se desarroll&oacute; para diseccionar cada paso en el metabolismo de RNA desde la perspectiva de un RRM que contiene prote&iacute;na. Esto proporcion&oacute; un marco para discutir el desarrollo de especificidad para el RRM para cada proceso requiere.

Anthony M. Esposito

Department of Molecular Genetics,
Microbiology,
and Immunology,
Department of Molecular Genetics, Microbiology, and Immunology

University of Medicine and Dentistry of New Jersey, Robert Wood Johnson Medical School

Eukaryotic Polyribosome Profile Analysis

A High-throughput Cre-Lox Activated Viral Membrane Fusion Assay to Identify Inhibitors of HIV-1 Viral Membrane Fusion

Anthony M. Esposito

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Department of Molecular Genetics,Microbiology,and Immunology,Department of Molecular Genetics, Microbiology, and Immunology

University of Medicine and Dentistry of New Jersey, Robert Wood Johnson Medical School

Eukaryotic Polyribosome Profile Analysis

A High-throughput Cre-Lox Activated Viral Membrane Fusion Assay to Identify Inhibitors of HIV-1 Viral Membrane Fusion

Department of Molecular Genetics,
Microbiology,
and Immunology,
Department of Molecular Genetics, Microbiology, and Immunology