Medição da pressão arterial em ratos usando Recording Volume de pressão, um método de cauda-manguito

Resumo

O CODA 8 canais de alta taxa de transferência não-invasiva da pressão arterial do sistema mede a pressão arterial em até 8 camundongos ou ratos simultaneamente. Este sistema utiliza-tail cuff Recording Volume de pressão (VPR) para medir a pressão arterial através da determinação do volume de sangue da cauda.

Resumo

O CODA 8 canais de alta taxa de transferência não-invasiva da pressão arterial do sistema mede a pressão arterial em até 8 camundongos ou ratos simultaneamente. O sistema CODA tail cuff usa Recording Volume de pressão (VPR) para medir a pressão arterial através da determinação do volume de sangue da cauda. Um transdutor de pressão especialmente concebidos diferencial e uma oclusão medida tail cuff-o volume total de sangue na cauda sem a necessidade de obter o sinal de pulso individual. Especial atenção é dada ao comprimento do manguito de oclusão, a fim de obter as leituras da pressão arterial mais precisos. VPR podem facilmente obter leituras sobre pele escura roedores, como ratos e C57BL6 MRI é compatível. O sistema CODA fornece-lhe com as medições de seis (6) os parâmetros de pressão diferentes sangue; pressão arterial sistólica e diastólica, freqüência cardíaca, pressão arterial média, o fluxo de sangue da cauda, ​​e volume de sangue da cauda. Medições podem ser feitas em qualquer ratos acordados ou anestesiados ou ratos. O sistema inclui um controlador CODA, computador portátil, software, punhos, os detentores de animais, almofadas de aquecimento infravermelho, e um termômetro infravermelho. Há sete tamanhos diferentes para ratos titular tão pequeno quanto 8 gramas de ratos do tamanho de 900 gramas.

Protocolo

1. Equipamentos de Set-up
   1. Selecionar uma área no laboratório onde a temperatura ambiente for igual ou acima de 20 ° C.
   2. Evite locais perto de saídas de ar condicionado e / ou ruído alto.
   3. Evite expor o animal a odores que podem causar irritação e / ou estresse, como perfume, colônia, produtos químicos e de limpeza.
   4. Ligue o controlador CODA.
   5. Ligue a Plataforma aquecimento e ajuste para o Nível 3. Se a temperatura ambiente está acima de 25 ° C, começa nos Níveis 1 ou 2.
   6. Controlador de Diagnóstico Teste
      1. Abra o Software CODA.
      2. Selecione o dispositivo CODA, clicando sobre ela.
      3. Clique em "Dispositivo de Teste selecionados".
      4. Selecione as algemas e canais para testar e clique em "Test".
      5. Após o teste estiver concluído, feche a janela de teste do dispositivo.
2. Software Set-up
   1. Gerenciar pessoal e Animais
      1. Gerenciar Pessoal
         1. Selecione Ferramentas> Gerenciar Pessoal.
         2. Clique em "Pesquisador 1" para mudar o nome.
         3. Clique nas linhas subseqüentes para adicionar pesquisadores adicionais.
         4. Clique em "Tab Técnicos" para modificar ou adicionar técnicos.
         5. Clique em "Tab amostras" para nomear o animal para fácil identificação e para selecionar o tipo de animal; rato ou mouse.
         6. Clique em "Tab Animals" para alterar o tipo de animal e sensibilidade.
   2. Experimente novas
      1. Selecione File> New Experiment>
      2. Começar uma nova experiência
         1. Digite o Nome Experiment.
         2. Selecione o Pesquisador chave.
         3. Selecione um Begin Date e clique em "Next".
      3. Informações básicas Sessão
         1. Insira o Nome da sessão
         2. Set "Ciclos Aclimatação" a 5. Se preferir não incluir ciclos de aclimatação, ajuste para zero. Para auxiliar na aclimatação do animal para o titular e punhos, adicione ciclos adicionais para o seu experimento e executar o experimento por 5 dias consecutivos.
         3. Conjunto de "Número de Sets" para 1.
         4. Set "Time Between Sets" de 30 segundos para vários conjuntos
         5. Set "Ciclos por Set" para 20 ciclos.
         6. Definir "tempo entre os ciclos" a 5 segundos e clique em "Next".
   3. Seleção de amostra
      1. 1. Selecionar a amostra a partir do pool de amostra e atribuí-lo ao primeiro canal disponível e clique em "Next".
      2. Parâmetros da sessão
         1. Set "pressão de oclusão máxima" para 250mmHg.
         2. Conjunto de "Time deflação" a 20 segundos para ratos, 15 segundos para ratos.
         3. Conjunto de "Volume Mínimo" para 15ul.
         4. Set "Estilo de exibição" para um canal por Graph.
         5. Adicionar Pesquisadores e Técnicos adicionais e clique em "Next".
      3. Script sessão
         1. Rever o Script sessão e clique em "Next".
         2. Não selecione Concluir até que você complete a seção Preparação Animal.
3. Preparação dos animais
   1. Animais Set-up
      1. Detentor de animais
         1. Para treinar e melhorar a aclimatação animal, adicionar ciclos adicionais para o seu experimento e executar o experimento por cinco dias consecutivos. Você também pode ajudar com a aclimatação ao colocar o animal no suporte por 15 minutos durante 3 dias consecutivos antes do estudo real.
         2. Coloque cada animal em um suporte ao pegar o animal pela cauda e gentilmente a colocação do animal na parte traseira do titular que enfrenta a extremidade aberta do cone do nariz. Nota: o tamanho do animal em relação ao tamanho do porta-selecionado. O animal deve ser capaz de entrar livremente o titular.
         3. Cuidadosamente assegurar a porta traseira para o titular, girando a tampa de rosca vermelha na porta traseira. Cuidados devem ser tomados para evitar beliscar a cauda ou qualquer outras partes do corpo ao mesmo tempo garantir a escotilha traseira.
         4. Deslize o cone do nariz em direção à porta traseira, o que limita o movimento do animal. O nariz do avião devem estar em condições de limitar o animal de se virar enquanto no interior o titular.
         5. Coloque o suporte para a plataforma do aquecimento na posição designada. Se o teste do mesmo grupo de animais ao longo de um período de tempo, certifique-se de girar a posição titular na plataforma o aquecimento para melhorar a consistência e precisão das medições de seu BP. Permitir que o animal, pelo menos, 5 minutos para se aclimatar ao titular.
         6. Não toque ou lidar com o animal, enquanto no interior o titular. O maior contato pode irritar o animal.
         7. Nunca deixe o animal na porta automática.
      2. Colocação manguito
         1. Passe a cauda através do "manguito". Coloque este cuff tão perto da base da cauda possível sem força.
         2. Garantir o "Tubing Cuff Oclusão" no entalhe na parte superior traseira do titular.
         3. Passe a cauda através do "Cuff VPR", colocando-o dentro de dois milímetros do "manguito".
         4. Garantir o "Tubing Cuff VPR" no entalhe na parte superior traseira do titular.
         5. Anexar os punhos para o controlador de CODA.
      3. Temperatura animais
         1. Permitir que o animal, pelo menos, 5 minutos para termorregulação.
         2. Registrar a temperatura do animal com freqüência com um termômetro infravermelho. A temperatura do animal deve ser de 32 a 35 ° C.
4. Experimento
   1. Experimente começar
      1. Clique em "Finish" eo experimento começará imediatamente.
   2. Experimento final
      1. Animal
         1. Remover imediatamente o animal do punhos e suporte.
         2. Devolver o animal para sua gaiola após o "Relatório de Resumo Simples Session" é exibida.
      2. Coleta de Dados
         1. Após a conclusão do último ciclo os ciclos aceitos serão automaticamente exibidos no formato de planilha dentro do aplicativo CODA, clique no botão "Exportar para Excel" botão.
         2. Selecione a pasta para colocar o arquivo dentro, o nome do arquivo e clique em "Save".
         3. Abra o aplicativo Excel e clique em "Abrir".
         4. Ver todos os tipos de arquivo para exibir o arquivo ". Csv salvo", clique no arquivo.
      3. Processamento de Dados
         1. Existem várias maneiras de processar os dados dentro do arquivo Excel. Uma prática comum é obter a média e desvio padrão.
         2. Excluir medidas se o desvio padrão é maior que 30.
         3. Além disso, ciclos rejeitado pode ser visualizado e banco de dados inteiro pode ser facilmente exportados para o Excel. Consultar o Manual do Usuário para informações adicionais.