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Aqui, uma implantação ortotópica sinténica seguida de um procedimento de amputação do osteossarcoma com metástase pulmonar espontânea que pode ser usada para investigação pré-inlinética da biologia da metástase e desenvolvimento de novas terapêuticas é descrita.
O avanço mais recente no tratamento do osteossarcoma (OS) ocorreu na década de 1980, quando a quimioterapia multi-agente mostrou melhorar a sobrevida geral em comparação apenas com a cirurgia. Para resolver esse problema, o objetivo do estudo é refinar um modelo menos conhecido de OS em ratos com uma abordagem cirúrgica histológica, de imagem, biológica, implantação e amputação abrangente que prolonga a sobrevivência. Utilizamos um imunocompetente, sprague-Dawley (SD), modelo de rato síngênico com linha celular UMR106 OS implantada (originária de um rato SD) com implantes de tumor tibial ortotópico em ratos machos e fêmeas de 3 semanas de idade para modelar o OS pediátrico. Descobrimos que os ratos desenvolvem tumores pulmonares primários e metastáticos reprodutíveis, e que as amputações de membros em 3 semanas após a implantação reduzem significativamente a incidência de metástase pulmonar e previnem mortes inesperadas. Histologicamente, as OSs primárias e metastáticas em ratos eram muito semelhantes aos humanos. Usando métodos imunohistoquímicos, o estudo mostra que os os ratos estão infiltrados com macrófagos e células T. Um levantamento de expressão proteica das células de OS revela que esses tumores expressam cineases familiares ErbB. Uma vez que essas quinases também são altamente expressas na maioria das OSs humanas, este modelo de rato poderia ser usado para testar inibidores da via ErbB para terapia.
O osteossarcoma (OS) é o tumor ósseo primário mais comum em crianças, adolescentes e adultos jovens. O avanço mais recente no tratamento da OS ocorreu na década de 1980, quando a quimioterapia multi-agente mostrou-se para melhorar a sobrevida geral em comparação apenas com a cirurgia1. O SISTEMA OPERACIONAL desenvolve-se durante o rápido crescimento ósseo, tipicamente ocorrendo em ossos tubulares longos como fêmur, tíbia e úmero. Caracterizam-se por uma aparência osteolítica, osteoblástica ou mista com notável reação peristeal2. A quimioterapia e a ressecção cirúrgica podem melhorar o resultado para pacientes com sobrevi....
Todos os procedimentos e experimentos envolvendo ratos foram realizados de acordo com protocolos aprovados pelo Comitê de Cuidados e Uso de Animais da Johns Hopkins.
1. O protocolo de cultura celular DA linha celular OS de rato SD UMR-106
2. Injeção intratibial de protocolo de células do SISTEMA
NOTA: Ratos SD gestantes com ac....
Ratos de sosseio de ORIGEM imunocompetente são usados para esses estudos de SO, que oferece um modelo animal com um sistema imunológico intacto. Usamos a linha celular UMR106 da ATCC, desenvolvida a partir de células que foram inicialmente isoladas de um SO de um rato SD. Implantamos as células em ratos SD, fornecendo assim um modelo sinténico para as células UMR106 são implantadas na tíbia de ratos SD masculinos e fêmeas de 3 semanas de idade, simulando um modelo de SO pediátrico. Além disso, a implantação .......
Ratos com implantes tibiais da OS desenvolvem tumores mensuráveis por 3 semanas após a implantação. Se os membros com tumores forem amputados 3 semanas após a implantação, a incidência de metástase pulmonar é reduzida significativamente. Os OSs são osteolíticos e osteoblásticos. Ratos sem amputação desenvolvem metástases pulmonares de tamanho múltiplo e variado, observadas por radiografia ou necropsia por 7 semanas após a implantação. EGFR, ErbB2 e ErbB4 são expressos em umr106 OS de rato, semelhante.......
Nenhuma divulgação para declarar.
Financiamento do NIH através do Instituto Nacional do Câncer, conceder # CA228582. Shun Ishiyama está recebendo uma bolsa da Toray Medical Co., Ltd.
....Name | Company | Catalog Number | Comments |
AKT | Cell Signaling TECHNOLOGY | 4685S | |
absorbable suture | Ethicon | J214H | |
β-actin | SANTA CRUZ BIOTECHNOLOGY | sc-47778 | |
β2-AR antibody | SANTA CRUZ BIOTECHNOLOGY | sc-569 | replaced by β2-AR (E-3): sc-271322 |
Bis–Tris gels | Thermo Fisher | NP0321PK2 | |
Buprenorphine SR Lab | ZooPharm | IZ-70000-201908 | |
CD3 antibody | Dako | #A0452 | |
CD68 antibody | eBioscience | #14-0688-82 | |
Chemiluminescent substrate | cytiva | RPN2232 | |
CL-Xposure film | Thermo Fisher | 34089 | |
Complete Anesthesia System | EVETEQUIP | 922120 | |
diaminobenzidine | VECTOR LABORATORIES | SK-4100 | |
Doxorubicin | Actavis | NDC 45963-733-60 | |
EGFR antibody | SANTA CRUZ BIOTECHNOLOGY | sc-03 | replaced by EGFR (A-10): sc-373746 |
ERBB2 antibody | SANTA CRUZ BIOTECHNOLOGY | sc-284 | replaced by Neu (3B5): sc-33684 |
ERBB4 antibody | SANTA CRUZ BIOTECHNOLOGY | sc-283 | replaced by ErbB4 (C-7): sc-8050 |
ERK antibody | SANTA CRUZ BIOTECHNOLOGY | sc-514302 | |
eye lubricant | PHARMADERM | NDC 0462-0211-38 | |
Hamilton syringe (100 µL) | Hamilton | Model 1710 SN SYR | |
horseradish peroxidase-linked secondary antibody | cytiva | NA934 | |
HRP polymer detection kit | VECTOR LABORATORIES | MP-7401 | |
HRP polymer detection kit | VECTOR LABORATORIES | MP-7402 | |
isoflurane | BUTLER SCHEIN | NDC 11695-6776-2 | |
isoflurane vaporizer | EVETEQUIP | 911103 | |
UMR-106 cell | ATCC | CRL-1661 | |
X-ray | Faxitron | UltraFocus | |
X-ray processor | Hope X-Ray Peoducts Inc | MicroMax X-ray Processor | Hope Processors are not available in USA anymore |
wound clips | BECTON DICKINSON | 427631 |
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