Hipervarredura de EEG domiciliar para interações sociais entre bebês e cuidadores

Resumo

Este protocolo descreve como eletroencefalografia sincronizada, eletrocardiografia e registros comportamentais foram capturados de díades bebê-cuidador em um ambiente doméstico.

Resumo

Estudos anteriores de hipervarredura que registram as atividades cerebrais de cuidadores e crianças simultaneamente foram conduzidos principalmente dentro dos limites do laboratório, limitando assim a generalização dos resultados para ambientes da vida real. Aqui, é proposto um protocolo abrangente para capturar eletroencefalografia sincronizada (EEG), eletrocardiografia (ECG) e registros comportamentais de díades bebê-cuidador durante várias tarefas interativas em casa. Este protocolo demonstra como sincronizar os diferentes fluxos de dados e relatar as taxas de retenção de dados de EEG e verificações de qualidade. Além disso, são discutidos problemas críticos e possíveis soluções com relação à configuração experimental, tarefas e coleta de dados em ambientes domésticos. O protocolo não se limita a díades bebê-cuidador, mas pode ser aplicado a várias constelações diádicas. No geral, demonstramos a flexibilidade das configurações de hipervarredura de EEG, que permitem que experimentos sejam conduzidos fora do laboratório para capturar as atividades cerebrais dos participantes em ambientes mais ecologicamente válidos. No entanto, o movimento e outros tipos de artefatos ainda restringem as tarefas experimentais que podem ser realizadas no ambiente doméstico.

Introdução

Com o registro simultâneo das atividades cerebrais de dois ou mais sujeitos interagindo, também conhecido como hipervarredura, tornou-se possível elucidar a base neural das interações sociais em sua dinâmica complexa, bidirecional e acelerada¹. Essa técnica mudou o foco do estudo de indivíduos em ambientes isolados e rigidamente controlados para examinar interações mais naturalistas, como interações entre pais e filhos durante brincadeiras livres ^2,3, resolução de quebra-cabeças⁴ e jogos de computador cooperativos ^5,6. Esses estudos demonstram que as atividades cerebrais são sincronizadas durante as interações sociais, ou seja, mostram semelhanças temporais, um fenômeno denominado sincronia neural interpessoal (INS). No entanto, a grande maioria dos estudos de hipervarredura foi confinada a ambientes de laboratório. Embora isso permita um melhor controle experimental, pode ocorrer às custas da perda de alguma validade ecológica. Os comportamentos observados no laboratório podem não ser representativos dos comportamentos interativos cotidianos típicos dos participantes devido ao ambiente desconhecido e artificial e à natureza das tarefas impostas⁷.

Avanços recentes em dispositivos móveis de neuroimagem, como eletroencefalografia (EEG) ou espectroscopia funcional de infravermelho próximo (fNIRS), aliviam esses problemas, removendo a necessidade de os participantes permanecerem fisicamente conectados ao computador de gravação. Assim, eles permitem medir as atividades cerebrais dos participantes enquanto eles interagem livremente na sala de aula ou em suas casas ^8,9. A vantagem do EEG em comparação com outras técnicas de neuroimagem, como o fNIRS, é que ele tem uma excelente resolução temporal, o que o torna particularmente adequado para investigar dinâmicas sociais aceleradas¹⁰. No entanto, vem com a ressalva de que o sinal de EEG é altamente vulnerável ao movimento e outros artefatos fisiológicos e não fisiológicos¹¹.

Apesar disso, os primeiros estudos implementaram com sucesso configurações de hipervarredura de EEG em ambientes e condições realistas. Por exemplo, Dikker et ^al.12 mediram o sinal de EEG de um grupo de alunos enquanto eles se envolviam em várias atividades em sala de aula, incluindo assistir a palestras, assistir a vídeos e participar de discussões em grupo. Este estudo, juntamente com outros estudos ^8,9, utilizou predominantemente eletrodos de EEG secos para facilitar o processo de realização de medições em ambientes não laboratoriais. Em comparação com os eletrodos úmidos, que requerem a aplicação de gel ou pasta condutora, os eletrodos secos oferecem vantagens notáveis em termos de usabilidade. Eles demonstraram exibir desempenho comparável aos eletrodos úmidos em populações adultas e condições estacionárias; no entanto, seu desempenho pode diminuir em cenários relacionados ao movimento devido ao aumento dos níveis de impedância¹³.

Aqui, apresentamos um protocolo de trabalho para capturar gravações sincronizadas de um sistema de EEG de gel líquido de sete canais de baixa densidade com um eletrocardiograma (ECG) de derivação única conectado ao mesmo amplificador sem fio (taxa de amostragem: 500 Hz) de díades bebê-cuidador em um ambiente doméstico. Enquanto os eletrodos ativos foram usados para adultos, os eletrodos passivos foram usados para bebês, uma vez que este último normalmente vem na forma de eletrodos de anel, facilitando assim o processo de aplicação do gel. Além disso, as gravações de EEG-ECG foram sincronizadas com três câmeras e microfones para capturar os comportamentos dos participantes de diferentes ângulos. No estudo, bebês de 8 a 12 meses e seus cuidadores se envolveram em uma tarefa de leitura e brincadeira enquanto seu EEG, ECG e comportamentos eram registrados. Para minimizar o impacto do movimento excessivo na qualidade do sinal de EEG, as tarefas foram conduzidas em um ambiente de mesa (por exemplo, utilizando a mesa da cozinha e uma cadeira alta infantil), exigindo que os participantes permanecessem sentados durante toda a tarefa de interação. Os cuidadores receberam três livros apropriados para a idade e brinquedos de mesa (equipados com ventosas para evitar que caíssem). Eles foram instruídos a ler para seus filhos por aproximadamente 5 minutos, seguido de uma sessão de brincadeiras de 10 minutos com os brinquedos.

Este protocolo detalha os métodos para coletar dados sincronizados de EEG-ECG, vídeo e áudio durante as tarefas de leitura e reprodução. O procedimento geral, no entanto, não é específico para este projeto de pesquisa, mas é apropriado para diferentes populações (por exemplo, díades pai-filho, díades de amigos) e tarefas experimentais. O método de sincronização de diferentes fluxos de dados será apresentado. Além disso, um pipeline básico de pré-processamento de EEG baseado em Dikker et ^al.12 será delineado, e as taxas de retenção de dados de EEG e métricas de controle de qualidade serão relatadas. Uma vez que as escolhas analíticas específicas dependem de uma variedade de fatores (como design da tarefa, questões de pesquisa, montagem de EEG), a análise de hipervarredura-EEG não será detalhada mais detalhadamente, mas, em vez disso, o leitor será encaminhado para diretrizes e caixas de ferramentas existentes (por ^exemplo,14 para diretrizes;^15,16 para caixas de ferramentas de análise de hipervarredura). Finalmente, o protocolo discute desafios e possíveis soluções para hipervarredura de EEG-ECG em casa e em outras configurações do mundo real.

Protocolo

O protocolo descrito foi aprovado pelo Conselho de Revisão Institucional (IRB) da Universidade Tecnológica de Nanyang, Cingapura. O consentimento informado foi obtido de todos os participantes adultos e dos pais em nome de seus bebês.

1. Considerações sobre equipamentos e espaço em sessões domiciliares

1. Prepare-se para diferentes condições de umidade e temperatura, dependendo do país e da estação. Para ambientes com altos níveis de temperatura e umidade, certifique-se de que haja fluxo de ar adequado e ligue o aparelho de ar condicionado em casa, se possível.
2. Mantenha distância de transmissores WiFi, equipamentos Bluetooth (por exemplo, telefones celulares, teclado, mouse, etc.) e fornos de micro-ondas, pois máquinas próximas operando na mesma banda de frequência podem causar interferência. Além disso, tente manter a configuração experimental longe de dispositivos de carregamento em casa, pois isso pode causar ruído significativo na linha de energia nos dados. Observe que ventiladores de pé próximos ou ventiladores de teto em alta velocidade podem fazer com que os cabos de EEG balancem e contribuam para artefatos mecânicos.
3. Prepare um espaço propício para o experimento a ser realizado dentro da casa do participante. Certifique-se de que a área de teste tenha espaço livre suficiente para acomodar um cuidador e um bebê em uma cadeira alta sentada ao redor de uma mesa, bem como três câmeras em tripés. Limpe todos os itens da mesa, se possível, para reduzir possíveis distrações.
4. Certifique-se de que haja brilho adequado na área de teste para que as filmadoras capturem as expressões do participante. Se as mesas estiverem perto de janelas, não posicione as câmaras de vídeo viradas para a janela para evitar o encandeamento da lente.

2. Preparativos antes da sessão

1. Informe aos participantes que, para a medição do EEG, os adultos devem lavar os cabelos no dia anterior à sessão sem aplicar produtos capilares. Pergunte se eles poderiam se abster de usar maquiagem no dia da sessão de EEG.
2. Certifique-se de que todos os equipamentos de gravação (microfones e filmadoras), laptops, amplificadores e o banco de energia usado pela caixa de gatilho sejam carregados no dia anterior à sessão. Verifique se todo o equipamento está totalmente carregado algumas horas antes da sessão. Leve carregadores ou de preferência bancos de energia portáteis para casos inesperados de baixos níveis de bateria no equipamento.
3. Embale todos os formulários e equipamentos de gravação necessários para a sessão.

3. Preparação do experimento na casa do participante

1. Preparação para gelificação de EEG
   1. Coloque um par de luvas ao manusear o gel. Encha quatro seringas com gel, duas seringas com a ponta romba para os eletrodos passivos e duas seringas com a ponta mais fina para os eletrodos ativos.
   2. Prepare dois pedaços quadrados de fita adesiva para os eletrodos de ECG infantis e adultos.
2. Preparação do equipamento de controlo
   1. Remova as luvas ao manusear equipamentos eletrônicos.
   2. Ligue todos os laptops e conecte os dongles EEG aos respectivos laptops. Certifique-se de que o software de gravação de EEG esteja em execução.
   3. Conecte o adulto e infantil amplifiers ao software de gravação EEG nos respectivos laptops por meio de uma conexão sem fio.
   4. Verifique e certifique-se de que ambos os amplificadores (adulto e infantil) têm as mesmas configurações de porta de disparo, ou seja, se o marcador de disparo é produzido na borda ascendente (alta ativa) ou descendente (baixa ativa) do pulso de entrada.
   5. Monte as três filmadoras em cada tripé. Certifique-se de que cada câmera de vídeo capture o cuidador, o bebê e o cuidador e o bebê (exibição combinada), respectivamente (consulte a Figura 1). Antes de iniciar a sessão, certifique-se de que os ângulos da filmadora possam capturar consistentemente os rostos dos participantes, considerando que o cuidador geralmente se move para o olho do bebê durante as interações.
3. Coloque a cadeira alta do bebê e a cadeira do cuidador na borda da mesa para que fiquem de frente uma para a outra em um ângulo em que as câmeras de vídeo possam capturar suas expressões faciais (consulte a Figura 1). Se não houver espaço suficiente na mesa, coloque a cadeira alta do bebê e a cadeira do cuidador uma ao lado da outra em ângulo reto.

Figura 1: Vista de cima para baixo da configuração. (1) Câmara de vídeo virada para bebés. (2) Câmara de vídeo de vista combinada. (3) Filmadora voltada para o cuidador. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

4. Aplicação de sensor de EEG e ECG para o cuidador

1. Fixando firmemente o amplifier para a tampa de EEG
   1. Para o cuidador, use o bolso traseiro da tampa de EEG para armazenar o amplificador a fim de reduzir o movimento do cabo e o ruído do EEG. Antes de aplicar a tampa no participante, certifique-se de que o amplifier foi armazenado com segurança e conectado ao conector.
   2. Certifique-se de que não haja contato com a água durante o manuseio do amplificador (ou seja, remova as luvas se estiver embebido em gel).
2. Peça ao cuidador para remover seus óculos, máscara ou brincos. Se o cabelo estiver preso, peça que retirem a faixa para soltar.
3. Usando luvas e com a permissão do cuidador, limpe a testa com compressas embebidas em álcool (álcool isopropílico 70% (IPA)).
4. Em ambos os lados da cabeça do cuidador, divida o cabelo no ponto mais alto da orelha para garantir que a orelha esteja totalmente visível, seguindo as linhas naturais de separação do cabelo.
5. Meça a circunferência da cabeça do cuidador colocando a fita métrica em torno de quatro pontos de referência na cabeça: o násio (nível da sobrancelha), sobre a crista do ínion (o ponto mais alto na parte de trás da cabeça) e entre os tragus esquerdo e direito (as pontas das orelhas).
6. Estique a touca de EEG por dentro com um gesto de mão em forma de coroa e comece a colocar a touca da testa do cuidador em direção à parte de trás da cabeça. Sem soltar a tampa, deslize as mãos para baixo para segurar as alças, puxe-as para baixo em direção ao queixo e aperte as pontas do gancho e do laço. Ajuste as alças de acordo com o conforto do participante.
   1. Certifique-se de que qualquer franja ou fio de cabelo no rosto do participante seja removido do rosto para evitar desconforto ou obstrução da visão.
   2. Alise suavemente a tampa para garantir que os eletrodos fiquem em contato próximo com o couro cabeludo. Certifique-se de que não há rugas na tampa.
7. Coloque a fita métrica sobre os eletrodos na linha média e meça a distância entre o násio e o íon. Certifique-se de que o eletrodo Cz do sistema internacional 10-20 esteja no ponto médio da medição. Use o método de amassar e soltar para mudar as posições da tampa para frente e para trás, se necessário.
8. Meça a distância entre o tragus esquerdo e direito para garantir que o eletrodo Cz corresponda ao ponto médio da medição e ajuste se necessário.
9. Aplicação de gel de EEG e ECG
   1. Comece aplicando gel nos eletrodos de referência e terra. Prossiga para gelificar os eletrodos restantes. Comece com os eletrodos na parte de trás porque pode levar mais tempo para que a impedância seja reduzida a uma faixa aceitável (normalmente < 25 kΩ), pois os adultos geralmente têm mais pelos na parte de trás.
   2. Ao aplicar o gel no cuidador, use uma seringa com uma ponta mais longa e fina. Insira a ponta da seringa na abertura do eletrodo e separe o cabelo usando a curva inferior da seringa. Esguiche pequenas quantidades de gel enquanto a seringa é retirada. Se houver um grande espaço entre o couro cabeludo e o eletrodo, pressione firmemente o eletrodo para garantir o contato.
   3. Use a luz como um guia de referência de impedância se a configuração do eletrodo ativo fornecida permitir isso. Como alternativa, consulte as leituras de impedância no software de gravação de EEG para identificar quais eletrodos requerem melhoria de contato.
      NOTA: Eletrodos com baixa impedância e boa qualidade de sinal (garantida pela verificação de artefatos antes de iniciar a sessão) serão coloridos de verde na tampa e/ou na montagem do EEG. Se a impedância de um eletrodo for alta, repita o esforço para separar o cabelo e mova bem o gel no eletrodo até o ponto de contato claro com o couro cabeludo.
   4. Observe que a tampa geralmente não se encaixa perfeitamente em cada cabeça, e áreas côncavas da cabeça podem causar uma lacuna natural entre o eletrodo e o couro cabeludo. Se a impedância permanecer alta, aplique um pequeno monte de gel para garantir uma ponte de gel entre o eletrodo e o couro cabeludo. Tenha cuidado para não mover o gel lateralmente depois disso para evitar formar pontes com eletrodos vizinhos embaixo da tampa.
   5. Esteja atento para não encher demais os poços com gel para evitar que os eletrodos adjacentes passem pela tampa também.
   6. Uma vez que todos os eletrodos de EEG tenham baixa impedância, limpe a área mole sob a clavícula esquerda do participante usando lenços umedecidos com álcool e comece a conectar o eletrodo de ECG.
      1. Prenda uma fita circular na parte inferior do eletrodo de ECG e aplique gel suficiente para cobrir o poço do eletrodo.
      2. Conecte o eletrodo à área macia sob a clavícula esquerda. Aplique fita adesiva branca na parte superior do sensor.

5. Aplicação do sensor de EEG e ECG para o bebê

1. Peça ao cuidador para ajudar o bebê a usar um colete, fornecido pelos experimentadores, com bolso traseiro, que posteriormente armazenará o amplificador.
2. Com a permissão do cuidador, limpe a testa com lenços umedecidos com álcool. Meça o perímetro cefálico do bebê colocando a fita métrica ao redor dos quatro pontos de referência.
3. Se o bebê estiver de bom humor aparente e brincando alegremente sozinho ou com um cuidador, prossiga com a colocação da touca de EEG. Consulte o cuidador quanto ao humor do bebê e à predisposição para usar chapéus. Prepare alimentos secos ou brinquedos para ocupar as mãos do bebê antes de tampar, se concordar com os pais. Além disso, coloque o bebê no colo do cuidador para que ele se sinta confortado durante o processo de gelificação.
4. Coloque a tampa na cabeça do bebê com o mesmo movimento de alongamento semelhante a uma coroa e prenda as pontas do gancho e do laço sob o queixo. Peça ao segundo experimentador ou cuidador que peça ao bebê que olhe para cima, usando um chocalho, para que seja mais fácil prender as pontas do gancho e do laço.
   1. Certifique-se de que qualquer franja ou pêlos soltos no rosto do bebê estejam bem encaixados embaixo da touca para evitar desconforto ou obstrução da visão.
   2. Alise suavemente a tampa para garantir que os eletrodos fiquem em contato próximo com o couro cabeludo. Certifique-se de que não há rugas na tampa.
5. Use a fita métrica para garantir que a tampa esteja posicionada corretamente, com o eletrodo Cz no ponto médio ou no topo da cabeça e use o método de amassar e soltar para ajustar, se necessário (consulte a etapa 4.7).
6. Prenda firmemente o amplifier à tampa. Uma vez conectado, exiba as leituras de impedância.
7. Coloque o amplificador conectado no bolso na parte de trás do colete do bebê.
8. Aplicação de gel de EEG e ECG
   1. Comece aplicando gel nos eletrodos de referência e terra. Prossiga com a gelificação dos eletrodos restantes começando pela parte de trás.
      NOTA: Os bebês podem ficar um pouco agitados com os experimentadores tocando suas cabeças ou com a sensação de resfriamento do gel. Se for esse o caso, aguarde algum tempo para que o cuidador acalme o bebê antes de continuar. O segundo experimentador pode distrair o bebê (por exemplo, soprando bolhas, usando brinquedos ou dando um pouco de comida).
   2. Preencha todas as aberturas dos eletrodos com gel e, em seguida, use as pontas de algodão para separar o cabelo em um movimento suave da esquerda para a direita se estiver usando eletrodos passivos (como aqui); consulte a montagem no software de gravação de EEG para verificar a impedância durante a gelificação.
   3. Certifique-se de que todos os eletrodos demonstrem baixa impedância no software de gravação de EEG, normalmente < 50 kΩ, uma vez que os bebês são menos tolerantes ao processo de gelificação em comparação com os adultos.
   4. Limpe a área macia sob a clavícula esquerda do bebê com lenços umedecidos e coloque o ECG abaixo da clavícula esquerda do bebê seguindo o mesmo procedimento do ECG adulto.

6. Criando uma caixa de gatilho para sincronização de dados multimodais

NOTA: Como diferentes fluxos de dados do sensor (ou seja, EEG, ECG, vídeo e áudio) começarão a gravar em diferentes momentos durante a sessão, eles precisam ser sincronizados manualmente para criar uma única linha do tempo de eventos. Assim, é necessário um evento comum que possa ser capturado tanto pela filmadora (ou seja, luz LED) quanto pelo amplificador (ou seja, sinal digital ou analógico). Para conseguir isso, é usada uma caixa de gatilho de sincronização interna, que pode ser construída usando um programa simples de unidade de microcontrolador, conforme detalhado abaixo.

1. Para construir a caixa de disparo, use uma placa de desenvolvimento de microcontrolador, LED, conector BNC, banco de potência, um dispositivo de entrada digital (ou seja, um botão de pressão) e saída de pulso/sinal elétrico (ou seja, fios de disparo) que se conectam ao ampporta de disparo do amplificador (consulte a Figura 2B).
   1. Conecte o conector BNC fêmea ao botão de pressão, que serve como entrada (por exemplo, pino de entrada: 8), e a luz LED e o sinal de pulso elétrico atuam como saída (por exemplo, pino de saída: 12; consulte a Figura 2A).
   2. Conecte o conector BNC aos dois amplificadores através dos cabos elétricos de 2.5 mm, produzindo gatilhos de um bit marcando as amostras na gravação de EEG-ECG quando lê o sinal TTL digital do botão (consulte a Figura 2C).
2. Defina as configurações da porta de disparo do adulto e do bebê amplifiers de maneira idêntica para garantir uma sincronização EEG-EEG precisa e precisa.
   1. Projete o sistema de gatilho de forma que os marcadores de gatilho sejam produzidos em ambas as gravações do amplificador quando o botão de gatilho for liberado (após ser pressionado) em vez de quando estiver sendo pressionado.
   2. Identifique o estado atual da porta de disparo nos amplificadores. Se estiver inicialmente em 0 ou LOW, defina a porta como low-active para produzir um marcador quando o botão for liberado. Como alternativa, se o estado inicial da porta for 1 ou HIGH, defina a porta como high-active para produzir um marcador quando o botão for liberado (consulte a Figura 3).

Figura 2: Construção da caixa de gatilho. (A) Diagrama de circuito do microcontrolador para caixa de gatilho; (B) Interiores da caixa de gatilho construída; (C) Caixa de disparo conectada aos amplificadores de EEG-ECG para adultos e bebês, o botão de disparo e o banco de potência. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figura 3: Configurações de porta de disparo altamente ativa e baixa ativa. Dependendo do estado inicial do pino de disparo (0 ou 1), a configuração da porta de disparo (High Active, HA ou Low Active, LA) é escolhida de forma que o marcador seja produzido no final do pulso (quando o botão de disparo é liberado). Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

7. Sincronização de fluxos de sensores

1. Para facilitar a sincronização, conecte o receptor de microfone à respectiva câmera de vídeo, sincronizando automaticamente o vídeo (filmadora) com o áudio (microfone).
   NOTA: Como os microfones estão conectados às filmadoras e os eletrodos de EEG e ECG vêm do conjunto de ramificações de eletrodos de EEG conectados ao mesmo amplificador, esses fluxos de dados são pré-sincronizados automaticamente.
2. Prenda o respectivo transmissor de microfone na gola da parte superior do cuidador e no colete do bebê.
3. Inicie as gravações da filmadora para todas as três filmadoras depois de garantir que seu posicionamento possa capturar o sinal de luz LED da caixa de gatilho na sala.
4. Inicie a gravação do EEG no laptop e no amplificador (versão com cartão SD) para o bebê e o cuidador. Para facilitar a sincronização pós-sessão, inicie as câmeras primeiro, seguidas pelos sensores de EEG em ordem adulto-bebê, pois o EEG infantil é o sensor mestre com o qual todos os outros sensores estão sincronizados (para evitar deslocamentos negativos de vídeo-EEG).
5. Conecte os dois amplificadores à configuração da caixa do gatilho usando o conector de 2.5 mm firmemente para evitar marcadores espúrios (Figura 2C).
   NOTA: Um marcador de gatilho deve ser visto no fluxo contínuo de EEG enquanto o conector é conectado ao amplificador.
6. Sincronize os fluxos de dados usando a Caixa de Acionamento.
   1. Execute pressionamentos longos de botão, pois a diferença na aparência do marcador entre as duas configurações (início vs fim do pressionamento do botão) só é perceptível quando os pressionamentos são consideravelmente longos (pelo menos 1 a 2 s de comprimento).
   2. Execute vários pressionamentos longos para produzir vários gatilhos para aumentar a precisão e a confiabilidade dos deslocamentos estimados entre os sensores e auxiliar na sincronização post-hoc em situações em que alguns gatilhos não são registrados por alguns dos sensores.
   3. Verifique todas as câmeras para verificar se o sinal de LED da caixa de disparo está visível nas gravações e verifique se há marcadores simultâneos exibidos nas gravações de EEG em andamento no laptop.
7. Remova o amplifiers da configuração da caixa de gatilho e certifique-se de que o amplifiers estão firmemente presos às respectivas tampas de EEG.
8. Execute esse procedimento de sincronização no início e no final da sessão experimental, especialmente se as câmeras da Web forem usadas para monitorar quadros de vídeo perdidos, o que faz com que a sincronização se desvie.

8. Experimento de interação pais-bebê

1. Antes de iniciar a tarefa de interação pai-bebê, remova todo o equipamento da mesa para remover possíveis distrações para os experimentos de interação cuidador-bebê.
2. Conduza as tarefas experimentais.
   NOTA: As tarefas foram escolhidas para enfatizar as interações naturalistas entre a díade com instruções mínimas ou envolvimento do experimentador (por exemplo, leia com seu bebê por 5 minutos, como você normalmente faria em casa). A duração da tarefa depende do conforto dos participantes e das limitações do equipamento, por exemplo, a vida útil da bateria do amplificador.
3. Se possível, certifique-se de que todos os experimentadores estejam escondidos da visão do bebê durante todo o experimento para evitar distrações. Um experimentador deve permanecer por perto com os laptops de gravação para poder intervir caso surja algum problema de streaming do sensor. Certifique-se de que os laptops de gravação estejam próximos aos amplificadores (< 10 m) para evitar a perda de samples devido à degradação sem fio (Wi-Fi, Bluetooth).

9. Esclarecendo no final do experimento

1. Pare as gravações nas filmadoras e o software de gravação de EEG no laptop e no amplificador. Desligue o amplificador e retire-o da tampa.
2. Removendo tampas de EEG
   1. Remova cuidadosamente as fitas e eletrodos de ECG a partir do cuidador ou peça ao cuidador para remover o ECG do bebê, se necessário. Como a pele do bebê é sensível, use lenços umedecidos ou água morna para molhar a fita para facilitar a remoção.
   2. Comece removendo as extremidades do gancho e do laço da tampa, depois retire a tampa para trás e vire-a do avesso. Use lenços umedecidos para limpar o resíduo de gel da cabeça do bebê e remova a tampa do cuidador.
   3. Aconselhe o cuidador que o excesso de gel sai facilmente no chuveiro.
3. Preparativos para o transporte
   1. Coloque a tampa de EEG junto com os eletrodos de EEG e ECG em um saco plástico. Certifique-se de que o gel na tampa não entre em contato com a caixa divisória da tampa. Mantenha os fios e a caixa divisória em uma caixa estruturada durante o transporte.
   2. Para evitar danos mecânicos durante o transporte, embale o amplifier em uma caixa acolchoada para minimizar a vibração.
4. Limpeza pós-tampa no laboratório
   1. Comece a limpar as tampas de EEG o mais rápido possível.
   2. Coloque as tampas de EEG em uma cuba de limpeza e coloque os fios com panos secos longe da fonte de água. Certifique-se de que a caixa divisória não entre em contato com a água.
   3. Despeje aproximadamente 1 L de água na banheira e adicione 10 mL de desinfetantes à base de aldeído. Deixe a tampa descansar dentro da solução por 10 min. Não mantenha a tampa na solução por muito tempo ou coloque muito desinfetante, pois isso acelerará a deterioração das tampas ao longo do tempo.
   4. Após 10 min, use uma escova de dentes para limpar o resíduo de gel dos eletrodos em água corrente. Seja particularmente cauteloso ao limpar eletrodos ativos, pois eles possuem pequenos circuitos eletrônicos embutidos em cada eletrodo.
   5. Enxágue bem a tampa com água para remover a solução desinfetante.
   6. Usando um pano seco, seque a tampa e insira um pano seco dentro da tampa para absorver a umidade restante. Feche as extremidades do gancho e laço para manter o pano seco dentro da tampa.
   7. Pendure a tampa para secar e certifique-se de que as extremidades molhadas da tampa não encontrem os conectores. Para conseguir isso, coloque a tampa em uma posição mais baixa do que a caixa divisória e os conectores enquanto estiver pendurada.
5. Economia de dados
   1. Certifique-se de que os dados dos cartões SD das filmadoras, amplificadores e gravações do laptop sejam exportados e copiados para o local de armazenamento de dados.

10. Garantia da qualidade dos dados

1. Dados de vídeo-áudio
   1. Verifique se o som está ligado, se nenhuma visão foi obstruída durante as tarefas e se os marcadores foram capturados.
2. Dados de EEG-ECG
   1. Certifique-se de que a gravação do cartão SD esteja presente e não corrompida. Verifique se os marcadores são capturados em ambas as gravações de EEG.
   2. Verifique se há falhas técnicas, ou seja, desconexão do amplificador e interferência elétrica ou mecânica no sinal EEG / ECG.

11. Processamento de dados

1. Sincronização de gravações multissensor
   1. Importe os vídeos do cuidador, do bebê e da câmera de vídeo de visualização combinada para o software de edição de vídeo.
   2. Percorra o vídeo para marcar os quadros específicos em que cada luz de gatilho de LED aparece pela primeira vez. Continue a percorrer o vídeo e adicione outro marcador no quadro específico em que a luz LED desaparece completamente para cada gatilho.
   3. Conclua estes passos para todos os três vídeos. Depois de concluído, anote os números dos quadros dos marcadores de todos os vídeos em uma planilha.
   4. Abra o marcador de EEG files do cartão SD do amplifier para o bebê e o adulto. Anote as informações da amostra do marcador em uma planilha.
   5. Como o vídeo é gravado em quadros por segundo (FPS, por exemplo, 25 FPS) e o EEG-ECG é gravado em amostras por segundo (por exemplo, 500 Hz), converta os números de quadros e amostras em uma unidade de medida comum, como milissegundos (ms), para poder criar uma única linha do tempo.
   6. Para cada sensor (vídeos e gravações de fisiologia), calcule os tempos entre os gatilhos, aqui chamados de intervalos entre disparos (ITI), subtraindo o carimbo de data/hora ms para cada par de marcadores consecutivos.
      NOTA: Embora os horários de início dos sensores de gravação sejam diferentes, os ITIs em ms para o mesmo conjunto de gatilhos nos diferentes sensores (vídeos e EEGs) ainda devem corresponder. Portanto, para validar isso, calcule a diferença em cada ITI (ITI Lag) entre cada sensor e o EEG mestre.
   7. Verifique a qualidade do vídeo-EEG ITI Lags. Como a taxa de amostragem / FPS é diferente entre os dois sensores, normalmente, o EEG tem uma taxa de amostragem muito maior do que os vídeos, permitindo um erro com tolerância ± 1 quadro de vídeo (aqui, 40 ms) para os atrasos ITI de vídeo EEG computados.
   8. Verifique a qualidade do EEG adulto - EEG infantil ITI Lags. Como eles têm a mesma taxa de amostragem, permitem uma tolerância de erro de ± 1 amostra de EEG (aqui, 2 ms).
   9. Quando essas verificações estiverem concluídas, calcule os deslocamentos entre cada sensor e a linha do tempo do sensor mestre (neste caso, EEG infantil).
   10. Subtraia o carimbo de data/hora ms de cada marcador de disparo do EEG Mestre dos respectivos marcadores de cada sensor (vídeos, EEG adulto). Isso produz N [sensor - EEG mestre] deslocamentos (N = número de gatilhos) para cada sensor.
   11. Para cada sensor, calcule a média desses deslocamentos e arredonde-os para produzir o número de deslocamento final em relação ao EEG mestre. Use esses números de deslocamento para cortar os dados de vídeo e EEG para iniciar ao mesmo tempo que o EEG mestre.
2. Codificação de vídeo simples
   1. Para identificar os diferentes estágios do experimento nos vídeos (por exemplo, início e fim das tarefas experimentais ou interrupções), anote os carimbos de data/hora específicos nos quadros usando um software de edição de vídeo.
3. Pré-processamento de EEG
   1. Corte os arquivos de EEG dos adultos e bebês no início e no final da tarefa.
   2. Identifique e remova canais defeituosos
      1. Anote todos os canais que parecem continuamente barulhentos ou não contêm sinal durante toda a gravação da tarefa.
         NOTA: Para gravações de baixa densidade, o objetivo é manter o maior número possível de canais. Assim, para canais que são ruins apenas por curtos períodos de tempo, é preferível remover o segmento de dados corrompido em um estágio posterior da análise, em vez do próprio canal.
      2. Plote e inspecione visualmente a densidade espectral de potência (PSD) para identificar canais periféricos.
   3. Para remover tendências lineares lentas (mais de 2 s), filtre os dados usando um filtro passa-alta FIR básico com uma frequência de corte de 0,5 Hz.
   4. Para remover o ruído de alta frequência de fontes miogênicas e externas, filtre os dados usando um filtro passa-baixa Basic FIR com uma frequência de corte de 35 Hz.
   5. Segmente os dados em épocas consecutivas e não sobrepostas de 1 s.
   6. Rejeite automaticamente todos os segmentos com o valor mínimo abaixo de -100 μV (para adultos) e -150 (para bebês) e/ou o valor máximo acima de +100 μV (para adultos) e +150 (para bebês).
   7. Inspecione visualmente todos os segmentos que não foram excluídos em 11.3.6. Rejeite manualmente todos os segmentos que contêm artefatos. Se apenas um único segmento de 1s for aceitável localizado entre os segmentos rejeitados, remova todo o período para que nenhum segmento de 1s seja retido.
   8. Para a análise INS/diádica, analise apenas os segmentos aceitos que são comuns para adultos e lactentes. Ao remover todos os segmentos do adulto que são rejeitados no bebê e vice-versa, certifique-se de que as séries temporais do EEG de adulto e bebê permaneçam perfeitamente alinhadas.

Resultados

Os participantes incluídos neste estudo eram bebês de 8 a 12 meses de idade, com desenvolvimento típico, e sua mãe e/ou avó que falava inglês ou inglês e uma segunda língua em casa. Os EEGs de 7 eletrodos e um ECG de derivação única de adultos e bebês, bem como gravações de vídeo e áudio de três câmeras e microfones, foram adquiridos simultaneamente durante as tarefas. As atividades neurais foram medidas em F3, F4, C3, Cz, C4, P3 e P4 de acordo com o sistema internacional 10-20. Os diferentes fluxos de ...

Discussão

Neste protocolo, realizamos medições nas casas dos participantes, onde bebês e cuidadores podem se sentir mais confortáveis e seus comportamentos podem ser mais representativos de suas interações na vida real, em oposição a um ambiente de laboratório, aumentando assim a validade ecológica⁷. Além disso, as gravações no ambiente doméstico podem aliviar a carga dos participantes, por exemplo, no que diz respeito aos tempos de viagem, e podem, assim, tornar certos grupos de participantes...

Materiais

Name	Company	Catalog Number	Comments
10 cc Luer Lock Tip syringe without Needle	Terumo Corporation
actiCAP slim 8-channel electrode set (LiveAMP8)	Brain Products GmbH
Arduino Software (IDE)	Arduino	Arduino IDE 1.8.19	The software used to write the code for the Arduino microcontroller. Alternate programming software may be used to accompany the chosen microcontroller unit.
Arduino Uno board	Arduino		Used for building the circuit of the trigger box. Alternate microcontroller boards may be used.
BNC connectors			BNC connectors to connect the various parts of the trigger box setup.
BNC Push button	Brain Products GmbH	BP-345-9000	BNC trigger push button to send triggers.
BNC to 2.5 mm jack trigger cable (80 cm)	Brain Products GmbH	BP-245-1200	BNC cables connecting the 2 LiveAmps to the trigger box.
BrainVision Analyzer Version 2.2.0.7383	Brain Products GmbH		EEG analysis software.
BrainVision Recorder License with dongle	Brain Products GmbH	S-BP-170-3000
BrainVision Recorder Version 1.23.0003	Brain Products GmbH		EEG recording software.
Custom 8Ch LiveAmp Cap passive (infant EEG caps)	Brain Products GmbH	LC-X6-SAHS-44, LC-X6-SAHS-46, LC-X6-SAHS-48	For infant head sizes 44, 46, 48 . Alternate EEG caps may be used.
Dell Latitude 3520 Laptops	Dell		Two laptops, one for adult EEG recording and one for infant EEG recording. Alternate computers may be used.
Dental Irrigation Syringes
LiveAmp 8-CH wireless amplifier	BrainProducts GmbH	BP-200-3020	Two LiveAmps, one for adult EEG and one for infant EEG. Alternate amplifier may be used.
Manfrotto MT190X3 Tripod with 128RC Micro Fluid Video Head	Manfrotto	MT190X3	Alternate tripods may be used.
Matlab Software	The MathWorks, Inc.	R2023a	Alternate analysis and presentation software may be used.
Power bank (10000 mAh)	Philips	DLP6715NB/69	Alternate power banks may be used.
Raw EEG caps	EASYCAP GmbH		For Adult head sizes 52, 54, 56, 58. Alternate EEG caps may be used.
Rode Wireless Go II Single Set	Røde Microphones		Alternate microphones may be used.
Sony FDR-AX700 Camcorder	Sony	FDR-AX700	Alternate camcorders or webcams may be used.
SuperVisc High-Viscosity Gel	EASYCAP GmbH	NS-7907